医学昆虫的病原真菌

昆虫病原真菌在自然环境中对害虫数量起着抑制作用,在害虫的微生物防治中也占有独特的地位。长期以来,在应用昆虫病原真菌防治人畜害虫方面研究进展较为缓慢,六十年代以来才有较大的发展。本文介绍了近十年的发展概况,并讨论了影响这个研究领域迅速发展的原因及病原真菌在生物防治中应用的潜力。认为尽管至今对这类真菌了解还较少,但通过今后加强有关方面的研究工作,其应用前景是广阔的。     

昆虫病原真菌紫外线诱变育种研究进展

昆虫病原真菌是控制害虫发生与危害的重要生物防治因子之一,优良的菌种是生物防治的关键。紫外线诱变育种是昆虫病原真菌菌种选育中最常用的方法之一,具有易操作、效果好、作用时间长等优点。本文以白僵菌、绿僵菌、玫烟色棒束孢等三种常用的昆虫病原真菌为例,从诱变育种的材料、方法和应用等方面综述了昆虫病原真菌紫外线诱变育种的研究现状,以期为昆虫病原真菌的生物防治研究提供参考。     

PFGE技术及其在昆虫病原真菌研究中的应用

染色体是真核生物遗传物质的载体,控制着生物体的遗传、变异和发育,研究染色体的组型和行为对于更好地改造、利用真核生物是至关重要的。昆虫病原真菌在自然界广为分布,作为害虫生物防除剂、中药材、经济昆虫病原真菌等被利用和研究［１～３］。然而,极大部分昆虫病原真菌属于半知菌类,缺乏有性生殖世代,核分裂时观察不到染色体凝缩,同时由于其染色体很小,又不具有足够数目的基因标记,所以难以用核染色和杂交等方法进行核型分析和遗传育种的研究,也难以用遗传学方法和细胞学方法测定其染色体数目和大小。另一方面,昆虫病原真菌Ｄ…     

峨眉山自然保护区的虫草及其它昆虫病原真菌I.

采自四川省峨眉山自然保护区的虫草及其相关昆虫病原真菌,其中除有常见的蛹虫草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｖｕｉｌｌ）,Ｆｒ粉被虫草（ＣｏｒｄｙｃｅｐｓｐｒｕｉｎｏｓａＰｅｔｃｈ）蝉拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓｃｉｃａｄａｅ（Ｍｉｑｕｅｌ）Ｓａｍｓｏｎ,球孢白僵菌Ｂｅａｕｖｅｒｉａｂａｓｓｉａｎａ（Ｂａｌｓ．）Ｖｕｉｌｌ等昆虫病原真菌外,将主要描述峨眉虫草新种（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｅｍｅｉｅ     

医学昆虫的病原真菌*

昆虫病原真菌在自然环境中对害虫数量起着抑制作用,在害虫的微生物防治中也占有独特的地位。长期以来,在应用昆虫病原真菌防治人畜害虫方面研究进展较为缓慢,六十年代以来才有较大的发展。本文介绍了近十年的发展概况,并讨论了影响这个研究领域迅速发展的原因及病原真菌在生物防治中应用的潜力。认为尽管至今对这类真菌了解还较少,但通过今后加强有关方面的研究工作,其应用前景是广阔的。     

粗放经营茶园土壤昆虫病原真菌种群多样性及时间生态位

本文系统调查了粗放经营状态下黄山毛峰茶园根际土壤昆虫病原真菌的种群多样性及其时间生态位水平.于2012年8月至2013年6月,在安徽省黄山市汤口镇选择粗放经营茶园采集土壤样品140份,经稀释平板法分离共获得昆虫病原真菌1041株.结果表明： 昆虫病原真菌种群多样性较为丰富,经鉴定分为6属13种.其中,淡紫紫孢菌、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌为优势种群,其菌株数分别为309、255和101株,占总数的29.7%、24.5%和9.7%.茶园土壤中淡紫紫孢菌的时间生态位宽度最大,球孢白僵菌最小.昆虫病原真菌之间以球孢白僵菌和布氏白僵菌的时间生态位重叠值最大,为1.965;而爪哇棒束孢和球孢白僵菌的时间生态位重叠值最小,仅为0.374.     

基因工程改良在昆虫病原真菌中的应用

昆虫病原真菌是自然界控制害虫种群的主要生物因子,其研究开发越来越受到重视。但由于存在致死速度慢、防效不稳定、对环境条件要求高等缺点,限制了昆虫病原真菌的应用。近年来,通过基因工程技术对昆虫病原真菌进行遗传改造,提高菌株的致病性和毒力,创造高效、稳定的工程菌株取得了较大进展。对昆虫病原真菌选择标记、遗传转化方法、基因工程改良及应用等方面最新研究进展进行了综述。     

红火蚁病原真菌分离鉴定及致病性研究

红火蚁Solenopsis invicta是世界上最具破坏力和威胁性的入侵检疫害虫之一,对农林业生产安全、公共设施以及人体健康都造成了巨大影响。为筛选对红火蚁有致病性的病原真菌,本研究通过组织分离法对自然罹病的红火蚁进行致病菌分离,结合病原形态学及分子生物学的方法对病原真菌进行鉴定并采用喷雾法测定了病原真菌对红火蚁的致病力。结果表明：从罹病红火蚁上分离出3株病原真菌HHYSFJ01、HHYSFJ02和HHYSFJ05,分别为红绶曲霉Aspergillus nomius、淡紫拟青霉Purpureocillium lilacinum和球孢白僵菌Beauveria bassiana。致病性测定,这3株病原菌对红火蚁均具有较强的致病性,且3株病原菌致病性间差异显著。经1.0×10^8孢子/mL孢子悬浮液喷雾处理红火蚁10 d后,球孢白僵菌菌株HHYSFJ05的致病性最强,红火蚁工蚁的校正死亡率为84.71%,LT50为4.67 d;红绶曲霉菌株HHYSFJ01和淡紫拟青霉菌株HHYSFJ02次之,红火蚁工蚁的校正死亡率分别为78.82%和73.29%,LT50分别为4.99 d和5.20 d。     

一株侵染豌豆蚜的昆虫病原真菌的分离及鉴定

【目的】从采集到的自然染菌的豌豆蚜Acyrthosiphon pisum虫尸分离纯化得到一株病原真菌,定名为TF-2。本研究旨在确定该菌株的分类地位,为豌豆蚜生物防治提供真菌资源。【方法】对自然染菌的豌豆蚜虫尸上寄生真菌TF-2进行回接试验,分离纯化出致病菌株TF-2;在显微镜下配制TF-2菌株不同浓度孢子悬浮液,采用浸渍法和离体叶片饲养法测定其对豌豆蚜成虫的毒力;利用光学显微镜观察菌株形态学特征。PCR扩增TF-2的rDNA-ITS序列并测序,构建系统发育树对TF-2菌株进行分子鉴定。【结果】毒力测定结果表明,TF-2菌株对豌豆蚜成虫表现出很强的致病力,1×10⁷孢子/mL处理6 d后豌豆蚜成虫校正死亡率达到100%。TF-2在PDA培养基上菌落呈圆形,白色或淡黄色毡状,菌落背面呈奶油色;菌株孢梗呈瓶状,在菌丝上单生或侧生2～3个,大小为(19-42)μm×(1.1-2.5)μm,基部较粗至尖端逐渐变细,分生孢子长椭圆形,大小为(4.2-11.8)μm×(1.6-2.6)μm。菌丝体产生晶体呈八面体。该菌株的rDNA-ITS序列与长孢蜡蚧菌Lecanicilli...     

Management of entomopathogenic fungi in cultures of Tenebrio molitor (Coleoptera: Tenebrionidae)

Larvae of mealworms Tenebrio molitor L. (Coleoptera: Tenebrionidae) have been used as animal feed, but fungal pathogens rapidly downsize the populations, resulting in economic losses. In this work, we established an effective management strategy for fungal pathogens. An entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana, was isolated from mealworm cadavers. The bioassay of some isolates of this species at >90% relative humidity revealed that the ERL1575 isolate had the highest virulence. At 20–30% RH, ERL1575 conidia when ingested produced 80% mortality but when sprayed topically produced only <10% mortality. Mealworms that had ingested conidia were exposed to 20, 25, 30 and 35°C and high humidity (>95%) for 5 days. This experiment produced about 90% mortality except at 35°C where mortality was <20%. When 40 fungicides were assayed against ERL1575, fluazinam (1000‐fold) and mancozeb (667‐fold) significantly inhibited conidial germination and/or hyphal growth. When fluazinam and mancozeb were added to the mealworm diet of conidia‐inoculated wheat bran, most were alive 3 days post application. However, 100% mortality resulted 3 days post application in the conidia‐inoculated wheat bran without any fungicides. In conclusion, B. bassiana isolates are pathogenic at <30°C when they are ingested by mealworms but fluazinam and mancozeb can be used for management to control the pathogen in their cultures.     

槲皮素对黄粉虫血淋巴酚氧化酶的生理效应

用酶标仪法测定了槲皮素对黄粉虫Tenebrio molitor酚氧化酶（phenoloxidase, PO）的生物活性。结果表明：在离体条件下,对黄粉虫血淋巴PO的IC₅₀为0.625 mmol/L。在活体情况下,当槲皮素-DMSO溶液或槲皮素水悬浮液（5 μL）注入虫体后,在浓度低于1.0 mmol/L时对黄粉虫血淋巴PO具有激活作用,当浓度高于2.0 mmol/L时则对PO具有明显的抑制作用;单独注射5 μL DMSO溶液对PO活性亦有一定的激活作用。试虫被注射槲皮素后,PO活性在2～4 h内迅速下降,然后缓慢上升,处理8 h左右达到最高点,其后低浓度处理PO活性保持不变,而高浓度处理则逐渐下降,提示低浓度槲皮素可以引起试虫的免疫反应。在PO测活体系中加入0.5％的BSA后对PO活性无影响,并能使槲皮素在测活体系中保持稳定。     

The Site Specificity of Two Species of Gregarina in Tenebrio molitor Larvae

The site specificity of the apicomplexans Gregarina cuneata and Gregarina sleini , in larval Tenebrio molitor was investigated. Gregarina cuneata was found to inhabit the anteriormost region of the larval midgut, while G. steini was restricted to the posterior portion of the intestine. The site specificity of the pair was conserved in single and concurrent infections. Interspecific interactions do not seem to be presently responsible for the resource partitioning by the 2 gregarine species. Key words. Gregarina, site specificity, Tenebrio molitor.     

黄粉虫幼虫对硒的生物积累

在饲料中添加含硒化合物喂养黄粉虫Tenebrio molitor L.幼虫,测定幼虫硒含量、粪便硒含量和体重的变化,计算黄粉虫幼虫特定生长率及幼虫对硒生物积累系数,分析黄粉虫有效积累硒的条件。结果表明,饲料硒含量在15~20mg/kg时,幼虫硒含量明显提高,对硒的生物积累系数高于其它试验组水平,饲料硒含量过高,幼虫硒含量降低,正常生长受到抑制。黄粉虫幼虫特定生长率、取食量、排粪量、干物质含量随着饲料硒含量的增加而降低,死亡率、粪便硒含量随着饲料硒含量的增加而增大。饲料硒含量为15～20mg/kg时黄粉虫幼虫对硒的生物积累效果最好。     

泰山虫草对黄粉虫的侵染特性研究

报道了用泰山虫草分生孢子悬浮液接种活体黄粉虫,提取被侵染的黄粉虫体液,并测定不同侵染时间虫体液中酶活性的动态变化。结果表明:泰山虫草分生孢子能成功的侵染黄粉虫并长出子座;接种第2~4 d后即可导致黄粉虫体内活性发生不同程度的变化,说明黄粉虫具有独特的防御病原微生物的侵染机制。     

黄粉虫抗菌肽的提取及其生化特性的研究

【目的】测定黄粉虫Tenebrio molitor Linnaeus幼虫抗菌肽提取液的浓度、抑菌活性及其部分生化特性和凝血效应。【方法】本实验用浓度为1×108 CFU/m L大肠杆菌Escherichia coli诱导5龄黄粉虫幼虫,分别在诱导12、24、36、48、60和72 h后提取其中的抗菌肽,并用考马斯亮兰法测定抗菌肽粗提液蛋白的浓度,并用滤纸片法测定其抑菌活性,同时对其热稳定性、反复冻融稳定性、蛋白酶稳定性及不同p H对其活性的影响等生化特性及凝血效应进行了探究。【结果】经大肠杆菌诱导的黄粉虫抗菌肽粗提液的蛋白浓度均显著高于未诱导的黄粉虫组(P<0.01),且在诱导48 h时产生的抗菌肽提取液蛋白的浓度最高,产生的抑菌圈直径也显著高于未诱导的黄粉虫组(P<0.05),生化特性的测定结果显示,黄粉虫抗菌肽有较好的热稳定性、酶稳定性及酸碱稳定性,反复冻溶后对其抑菌活性影响不大,并且无凝血效应。【结论】大肠杆菌可以刺激黄粉虫的免疫系统,增加抗菌肽的表达量,使其产生浓度高、活性强的抗菌肽,且生化特性较稳定。本研究对黄粉虫抗菌肽作为绿色抗生素用于畜牧养殖业的进一步开发与利用提供了科学的理论依据。     

利用黄粉甲繁育管氏肿腿蜂:不同蜂虫比对繁育效果的影响

利用黄粉甲Tenebriomolitor的蛹作为中间寄主繁育管氏肿腿蜂Sclerodermaguani,测定了不同蜂虫比对发育历期、寄生率等几项评价繁育效果的重要指标。结果显示接蜂时不同蜂虫比对雌蜂产卵量和育出的子代蜂数量有较明显的影响,当蜂虫比为2∶1时这2项重要指标较为理想。综合比较了寄生率、寄生成功率、子代蜂的发育历期、出蜂数、性比等各项指标后认为,人工扩繁时采用2∶1的蜂虫比较为适宜。     

Enantiomerization and Enantioselective Bioaccumulation of Metalaxyl in Tenebrio molitor Larvae

The enantiomerization and enantioselective bioaccumulation of metalaxyl by a single dose of exposure to Tenebrio molitor larvae under laboratory condition were studied by high‐performance liquid chromatography tandem mass spectroscopy (HPLC‐MS/MS) based on a ChiralcelOD‐3R [cellulosetris‐tris‐(3, 5‐dichlorophenyl‐carbamate)] column. Exposure of enantiopure R‐metalaxyl and S‐metalaxyl in Tenebrio molitor larvae exhibited significant enantiomerization, with formation of the R enantiomers from the S enantiomers, and vice versa, which might be attributed to the chiral pesticide catalyzed by a certain enzyme in Tenebrio molitor larvae. Enantiomerization was not observed in wheat bran during the period of 21 d. In addition, bioaccumulation of rac‐metalaxyl in Tenebrio molitor larvae was enantioselective with a preferential accumulation of S‐metalaxyl. These results showed that enantioselectivity was caused not only by actual degradation and metabolism but also by enantiomerization, which was an important process in the environmental fate and behavior of metalaxyl enantiomers. Chirality 26:88–94, 2014. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.     

黄粉虫有效物质的综合提取及提取方法的比较

比较了用石油醚和用环己烷抽提黄粉虫TenebriomolitorL .虫粉中脂肪的提取率 ,以及用碱法和用酶法提取去脂虫渣中蛋白质的提取率。并从 2种去脂、去蛋白质虫渣中和虫蜕中提取壳聚糖。用环己烷和酶法提取为最佳组合 ,可综合提取出占幼虫干重 5 0 .5 %的有效物质。同时 ,讨论了碱法和酶法提取率出现差异的原因。