伪尖毛虫Oxytricha fallax的形态学研究

伪尖毛虫Oxytricha fallax系原生动物门、纤毛虫纲、腹毛目、尖毛虫科的一种常见的单细胞动物。一般认为分裂间期的伪尖毛虫具有两个长圆形大核和两个圆球形小核。虫体腹面生有八根额棘毛、五根腹棘毛及五根肛棘毛,周缘左右两侧还生有缘棘毛,背面则有五列背触毛。 伪尖毛虫是原生动物中高度进化的类型,大、小核有显著的分化,细胞表面的纤毛小器官复杂而又明显,因此它是用以进行研究的一种良好材料。对它的核器与纤毛小器官以及它们在无性分裂过程中的发生和变化进行认真的探讨,可以使我们较详细地掌握该虫的形态特征,同时也能为进一步的研究提供一些资料。     

伪尖毛虫细胞核质关系的实验研究

伪尖毛虫Oxytricha fallax是原生动物中高度进化的类型,核器有显著的分化。我们在不直接触及大核的情况下,通过特定的显微外科手术,得到了不同类型的、可遗传的畸型双体。探讨这一新的整体性状产生、维持和传代的机理是一个饶有兴味的课题,同时,既然双体系由二虫联合而成,其核质关系势必更加复杂,因此,它也是一个研究细胞核质关系的良好的新材料。本文主要从以下三个方面对伪尖毛虫进行了研究:1.人工双体伪尖毛虫的形成及其特征。2.人工背联体伪尖毛虫摘除大核的实验研究。3.人工背联体     

恐龙灭绝之谜新解

该叙述恐龙灭绝之因的一种新解释。6500万年前的白垩纪晚期和第三纪初期,当太阳系穿过宇宙间银河系庞大氢云团高氘幅射区时,大量对生命有害的氘粒子流射向地球,与氧化合生成氘氧重水混入氕氧轻水中,使自然水的含氘量急剧增加而大大超过当时地球生物所能承受的低氘量,致使长期生活在低氘水自然生态环境中的各种大中型恐龙因不能适应而严重氘中毒,以至难以生存繁衍而纷纷衰退、坏变、死亡和灭绝,以水的低氘含量为基础的当时地球自然生态环境也随之消失。而那些逐渐承受和适应水的高氘含量环境的生物,如一些小型恐龙和有亲缘关系的各种变温爬行动物和恒温哺乳动物,不仅生存了下来,而且把进化变异的机体新基因传衍下去,一起繁衍生息到水的含氘量为0．015％D／H正常值的现代。     

地里恙螨幼虫形态变异的研究

我们在研究甲乙两型地里恙螨子代的形态和两型地里恙螨的杂交实验中,发现这两者子代幼虫中有出现形态变异的现象。 1.后侧毛基的移位:从沿海某县采回的甲型地里恙螨(以下简称“C甲”)在实验室饲养繁殖的F_1标本中,出现一只左边后侧毛位置正常而右边后侧毛向上移位至感毛基的前侧(见图1)。左边A-P为27.6     

念珠伪角毛虫小核体功能初步研究

为了研究念珠伪角毛虫的小核是否具有及具有怎样的体功能,采用显微切割手术去小核并建立无小核细胞系。经蛋白银染色鉴定,无小核细胞系群体中大多数细胞的形态结构存在缺陷：口围带的部分小膜缺损或排列紊乱,大核的数目和形态也不正常。这表明,念珠伪角毛虫的小核对于保持口围带结构的完整性以及大核的数目和形态结构的稳定性起着明确的作用。     

HBsAg重组DNA转化中国地鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶阴性突变株的细胞染色体变化及致瘤性

整合了含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因和dhfr基因的CHO-dhfr~-细胞,其染色体的畸变率和畸变类型都比亲代CHO-dhfr~-细胞高。但转化前后两系细胞的重要特性都未发生变异,即两者的染色体总数无差别,都是20条。两系细胞株接种裸鼠,均未发现有致瘤性。     

低氘水对皮肤成纤维细胞及黑色素瘤细胞的影响

研究不同浓度的低氘水对正常皮肤成纤维细胞CCD-1095sk增殖和乳酸代谢的影响,及对B16黑色素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑色素生成量的影响。同时,观察低氘水对紫外损伤细胞修复的作用。用MTT法检测25、50和105 ppm三种不同浓度的低氘水对CCD-1095sk细胞增殖的影响,并测定培养液中的乳酸含量;取对数生长期小鼠B16黑素瘤细胞,分别加入不同浓度的低氘水作用72 h后,测定黑素含量和酪氨酸酶活性;体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性;用不同浓度的低氘水作用经紫外辐射的皮肤成纤维细胞,测定细胞增殖率。在细胞培养初期,50 ppm和105 ppm低氘水可促进CCD-1095sk细胞生长,同时抑制乳酸代谢。体外生化实验表明,三种不同浓度的低氘水均能不同程度地抑制酪氨酸酶活性。细胞实验表明,作用72 h后,50 ppm和105 ppm低氘水能显著抑制酪氨酸酶活性,减少B16黑色素瘤细胞黑色素的生成量,差异具有统计学意义,P<0.05。紫外损伤实验表明,50 ppm低氘水能减轻紫外辐射对细胞增殖的抑制作用,差异具有统计学意义,P<0.05。低氘水在化妆品应用方面具有潜在的价值。     

同步辐射(软X射线)辐照玉米的细胞学效应研究

利用同步辐射(软X射线)辐照玉米自交系H65和H14D种子,研究其M1代的细胞学效应,并以60Co-γ射线作对照。结果表明,软X射线辐照处理后,不仅能够诱发玉米M1代根尖细胞内核畸变和染色体畸变,而且还能够诱发染色体多种类型的变异,其变异频率随辐照剂量的增加而增大,辐照剂量与细胞总畸变率呈正相关。软X射线对玉米根尖细胞的有丝分裂具有明显地抑制作用,辐照剂量与细胞分裂指数呈负相关。软X射线辐照的细胞学效应与γ射线基本相似,但在诱发的细胞畸变率和染色体变异类型上存在一定的差异。两个供试品系对辐射的敏感性为H14D>H65。     

CO_2激光与γ射线辐照花生的效应研究

ＣＯ￣２激光对花生的诱变效应跟￣５０Ｃｏ－γ射线对花生的诱变效应相仿,能诱发花生根尖细胞染色体畸变,且畸变率随辐照剂量的增加而上升;也能使花生的一些生物学特征发生变异,其变异性状能向继代遗传。     

长江口地区五种腹毛类纤毛虫的形态学研究

利用活体观察和蛋白银染色技术,对采自长江口泥滩潮间带及河道的五种腹毛类纤毛虫进行了形态学研究。包括对两个国内新记录种仁川巴库虫Bakuella (Bakuella) incheonensis和希斯多利织毛虫Histriculus histrio提供了详细的活体特征和纤毛图式信息,对红色伪角毛虫Pseudokeronopsis rubra、黄色伪角毛虫Pseudokeronopsis flava和冠突伪尾柱虫Pseudourostyla cristata进行了形态学重描述。五种腹毛类纤毛虫的长江口种群与国内外种群均存在不同程度的形态学差异:仁川巴库虫较韩国原始种群体型大,口围带小膜和额前棘毛数较多;希斯多利织毛虫与部分国外种群存在体长差异;红色伪角毛虫与青岛种群相比形态特征基本吻合但个体大小的波动范围较大;黄色伪角毛虫与湛江种群相比额棘毛数目较多;冠突伪尾柱虫较奥地利种群体型较小,与日本种群相比大核较多。该工作丰富了中国腹毛类纤毛虫多样性的认识。     

甘肃农田四种土壤腹毛类纤毛虫（纤毛门， 旋毛纲，腹毛亚纲）的形态学研究

利用非淹没培养皿法、活体观察法和蛋白银染色法,对采自甘肃临夏县和会宁县农田土壤的4种腹毛类纤毛虫,即柠檬管膜虫(Cyrtohymena citrina)、背触毛拟腹柱虫(Gastrostylides dorsicirratus)、沙栖蠕形尖毛虫(Vermioxytricha arenicola)和半残毛虫属一种(Hemisincirra sp.)进行了研究。结果表明,柠檬管膜虫、背触毛拟腹柱虫和沙栖蠕形尖毛虫为中国纤毛虫分布新记录种。半残毛虫属一种因缺失相关分类学、细胞发生学和分子学信息,此处暂作为未定名种处理。文中对4种纤毛虫的形态学特征进行了详细描述和讨论。     

^60Co-γ和Ar^＋处理对小麦的诱变效应及POD同工酶分析

用60Co-γ射线和Ar 诱变小麦的干种子。结果表明,经60Co-γ辐射的8个品种(系)M1代,生育期延迟;7个品种(系)出苗率、成苗率、单株越冬蘖、单株最高蘖、单株产量均显著降低,但成穗率显著提高;千粒重5个品种(系)显著提高,3个品种(系)显著降低。M2代4个品种(系)发生株高、穗型、熟期、抗赤霉变异。经Ar 注入的8个品种(系)M1代,3个品种(系)处理的出苗率显著低于对照,处理的单株越冬蘖、单株最高蘖、株高、穗长、小穗数、千粒重均与对照差异不显著,成穗率3个品种(系)处理显著高于对照,1个品系显著低于对照,2个品种(系)的单株产量显著低于对照;M2代1个品系发现穗型、株高均变异的植株。60Co-γ射线和Ar 可诱发部分小麦品种M1代POD同工酶的表达量和酶谱变异,M3代部分变异株POD同工酶表达量和酶谱也发生了变化。     

三种纤毛虫对土壤微生物量和有效氮磷含量的影响

采用土壤培养方法研究了 3种纤毛虫对土壤微生物量及氮磷转化的影响 ,结果表明 ,向土壤接种肾形虫 ( Colopodia sp.)、尖毛虫 ( Oxytricna sp.)和澳毛虫 ( Australothrix sp.) ,特别是澳毛虫 ,显著地降低了土壤微生物碳。说明供试的原生动物与微生物之间存在消长关系。接种澳毛虫显著地降低了土壤有效磷含量 ,而肾形虫和尖毛虫对土壤有效磷含量影响很小 ,仅在培养后期显著地降低了土壤铵态氮含量 ,3种原生动物特别是澳毛虫 ,显著地降低了土壤氮矿化量和硝态氮含量 ,但提高了土壤铵态氮含量 ,说明 3种原生动物抑制了硝化作用 ,而增强了氨化作用。     

反刍动物瘤胃中主要厌氧真核微生物尖尾内毛虫的体外培养方法

【目的】开发一种稳定可控的从反刍动物瘤胃中分离、培养真核微生物尖尾内毛虫的技术方法,为原生动物瘤胃纤毛虫内毛虫的种质资源储备和生理功能研究提供足够的实验材料。【方法】首先采用瘤胃插管法从武汉地区奶牛瘤胃中采集瘤胃液,并通过微孔滤网过滤法逐级分离富集瘤胃纤毛虫尖尾内毛虫,然后用本研究改良的SP培养基在厌氧培养瓶中对所分离富集的尖尾内毛虫进行体外培养,经过纯化培养和单种培养获得瘤胃纤毛虫尖尾内毛虫武汉分离株系的单一种培养体系。其次,结合形态观察和18S rRNA基因测序进行物种鉴定及系统发育分析。最后,采用对半转移培养法计算单种培养的尖尾内毛虫武汉分离株系的世代时间。【结果】从奶牛的瘤胃液中分离、培养得到一个尖尾内毛虫武汉分离株系的体外单种培养体系。本研究所用改良SP培养基由改良SP盐溶液、无原虫瘤胃液上清、半胱氨酸盐酸盐、抗生素、淀粉和草粉等组合而成,虫体在此培养基中由起始接种密度320个/ml经16 d培养可实现最高培养密度37 000个/ml的单种培养,而且可进行稳定生长传代增殖。基于形态观察、18S rRNA基因的同源搜索和系统发育分析表明,本研究所培养的虫体为尖尾内毛虫武汉分离株系,命名为Entodinium caudatum strain WH。尖尾内毛虫武汉分离株系的世代时间为19.0 h。【结论】本研究成功建立反刍动物瘤胃内主要真核微生物瘤胃纤毛虫的单种体外培养方法,实现尖尾内毛虫武汉分离株系的实验室稳定可控培养,为深入开展瘤胃纤毛虫种质资源的探索和尖尾内毛虫的功能研究提供足够的实验材料。     

博莱霉素对提高亚硝基乙基脲诱变效应的影响

本实验利用亚硝基乙基脲(NEU)处理及附加博莱霉素(Bleomycin,简写为BL)后处理对蚕豆幼根诱发染色体畸变进行了研究。结果指出,后处理诱发染色体畸变数量显著的高于NEU单独的处理,它们占有的百分率分别为20.4％及35.4％。这种表现被认为是基于连接酶通过BL的抑制而失活。由NEU所诱发的染色体初级断裂不能为连接酶所修复。反之,当NEU处理的浓度较高时,附加BL后处理对提高畸变率的效果则不复存在。后一现象归之于连接酶受到诱变剂的损伤。 有关BL后处理在高等植物上的遗传学效果将另行实验研究。     

汞胁迫对豌豆种子的毒害效应

研究了不同Hg^2-浓度溶液胁迫,刈豌豆种子萌发、胚根细胞畸变及过氧化物酶(POD)同工酶的影响。结果表明,Hg^2-能诱发豌豆胚根细胞核和染色体畸变;Hg^2-浓度较低时对豌豆的生长发育有一定的促进作用;POD的活性,随着Hg^2-浓度的升高而明显增强,但当浓度升高到100mg／L后,POD的活性则下降。     

广东大亚湾七种腹毛类纤毛虫(原生动物,纤毛门)的形态学研究

利用活体观察和蛋白银染色技术对采自广东大亚湾沿岸水体的7个南海新纪录种:紧缩全列虫Holosticha diademata(Rees,1883)Kahl,1932、缩颈半腹柱虫Hemigastrostyla enigmatica(Dragesco & Dragesco-Kernéis,1986)Song&Wilbert,1997、念珠腹棘虫Gastrocirrhus monilifer(Ozaki & Yagiu,1942)Curds & Wu,1983、四核舍太虫Certesia quadrinudeata Fabre-Domergue,1885、斯特后尾柱虫Metaurostylopsis struederkypkeae Shao et al.,2008、盐尖毛虫Oxytricha saltans(Cohn,1866)Kahl,1932、小心毛虫Caryotricha minuta(Xu et al.,2008)Miao et al.,2009等腹毛类纤毛虫进行了形态学再研究,补充了有关活体形态学、纤毛图式以及性状变异等分类学新信息.结果显示,该7种的南海种群与我国北方海域种群之间存在不同程度的形态学差异.     

HEP-2细胞染色体不稳定性与kinetochore变异

染色体非整倍性畸变是恶性肿瘤细胞的显著细胞遗传学特征,但其诱发染色体数目不稳定的机制一直尚未阐明。本研究从与染色体分离直接相关的动粒(kinetochore)角度,采用kine-tochore-NOR同步银染技术对HEP-2细胞染色体kinetochore变异进行分析,以探讨恶性肿瘤细胞染色体数目变异的形成机制。实验共分析HEP-2细胞分裂相308个,计染色体16 962条,正常对照个体外周血细胞分裂相300个,计染色体13 800条。结果表明:与正常人外周血细胞相比,HEP-2细胞染色体kinetochore缺失和kinetochore迟滞复制频率显著升高(P<0.01),而kinetochore-NOR融合频率二者没有显著差异(P>0.05),这些结果提示kinetochore缺失和kinetochore迟滞复制可能是HEP-2细胞染色体非整倍性变异起源的诱因之一。此外,我们还在某些HEP-2细胞染色体上观察到多重kinetochore现象,并认为染色体多重kinetochore可能是恶性肿瘤细胞染色体结构畸变产生的一个新的途径。     

阔口尖毛虫皮层纤毛器微管在不同生理条件下的分化

应用激光扫描共聚焦显微术,显示腹毛类纤毛虫阔口尖毛虫(Oxytricha platystoma)无性生殖过程中,新的口围带、波动膜、额腹横棘毛、左右缘棘毛微管先后分化,老纤毛器微管去分化,细胞分裂产生各含一套纤毛器微管的前、后两仔虫;生理改组过程中,口围带、波动膜、额腹横棘毛、左右缘棘毛微管发生去分化和再分化,细胞皮层微管胞器更新形成含一套纤毛器微管的新细胞。结果表明阔口尖毛虫在无性生殖和生理改组这两种不同的生理条件下,其纤毛器微管结构的形成或更新可能具有相同的细胞调控机制,形态发生中老纤毛器结构可能对新结构的发生和发育具有诱导定位和物质贡献的作用。     

低氘水对小鼠免疫调节作用的研究

探讨低氘水(deuterium-depleted water,DDW)对小鼠免疫调节的作用。实验组小鼠以低氘水作为饮用水,对照组饮自来水,饲养6周,分别测定免疫蛋白IgG,,IgM的含量,脾脏指数和胸腺指数(mg/g),脾淋巴细胞增殖能力,迟发型变态反应,NK细胞活性以及T细胞亚群CD4+和CD4+/CD8+的变化,观察低氘水对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能的影响。结果低氘水能显著提高IgM,脾脏指数的水平和CD4+,CD4+/CD8+的含量。低氘水对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能具有一定的增强作用。