巧用水浴锅为石蜡切片伸展器

巧用水浴锅为石蜡切片伸展器以往制作石蜡切片的展片用具为：石蜡切片伸展器。虽然，市场上有现成的出售，但是价钱一般都在３００元左右。对于不经常使用者来说，无疑是一种额外开支。特别是对于师范院校、中专、中学等科研经费比较少的单位来讲，也确有其购买的难处。本...     

介绍一种“贴附剂”

在光镜下观察的生物医学标本中,大多数的标本都要经过制片,在制片中应用较广泛的就是切片标本。而各种组织、器官经切片后又必须把它附在载玻片上,从贴附切片这一问题上,看来是个较小的环节,若标本贴不牢就会脱落,就不能保证实验和观察的顺利进行。实验室里常用的贴附剂有蛋白甘油(过滤后的蛋清     

HistoGel预包埋法在微小组织石蜡切片中的应用

目的：探讨微小组织HistoGel预包埋的石蜡切片制作方法和优势。方法：选择拟胚体(embryoid body, EB)为微小组织,将人 类胚胎干细胞(human Embryonic Stem Cell, hESC)切割成小块,用拟胚体培养基在低贴附培养皿中悬浮培养形成拟胚体。收集拟 胚体,4 %的多聚甲醛固定。将HistoGel 加热到60 ℃熔解,离心去除拟胚体中的固定液,把液态的HistoGel 加到拟胚体上,调整拟 胚体的相对位置使其相对集中,待胶冷却凝固,将含有拟胚体的胶块取出,进行常规的石蜡切片操作,包括脱水、透明、浸蜡、包 埋、切片和苏木素- 伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色。显微镜下观察拟胚体的形态,并用拟胚体的形态完好度来评判这种方法。结 果：HistoGel 仅在60 ℃便可熔解,室温可以冷却凝固,含有拟胚体的胶块在整个操作过程中很方便。展片过程中,石蜡和HistoGel 能够保持平整。HE 染色的结果可以看出,拟胚体内部结构完好,细胞核和细胞质清晰可辨。结论：HistoGel可以作为一种微量细 胞组织的预包埋胶制作石蜡切片,而且相比琼脂预包埋,HistoGel 因其操作更加方便和特有的物理特性显示出更多的优点。     

关于改革石蜡切片工艺的试验

众所周知,在石蜡切片的制作过程中,历来是用苯类(尤其是二甲苯)作为透明剂和石蜡的有机溶剂。组织块经酒精脱水后,必须再用二甲苯作为中间媒剂将酒精取代出来,然后才能进行透蜡。否则,虽然水分除尽,但组织内部积蓄酒精,石蜡仍难透入。同样,切片染色前和染色后,也需用二甲苯脱蜡和透明。因此,在整个制片过程中,不但要多次用到二甲苯,手续繁琐,而且组织块在二甲苯中浸渍时间较难掌握,久浸会使材料松脆,影响切片质量;时间不足又会影响透蜡效果。另外,苯类是有毒药品,且有致癌作用,对人体极为有害,国外组织学实验室     

冰冻切片与石蜡切片对乳腺肿瘤的诊断价值研究

目的:分析和比较冰冻切片与石蜡切片对乳腺肿瘤的诊断价值。方法:选取480例新鲜乳腺标本,将其制成冰冻切片以及石蜡切片,根据诊断结果进行对比分析,评价乳腺肿瘤的冰冻切片与石蜡切片的对乳腺肿瘤的诊断价值。结果:经石蜡切片诊断乳腺良性肿瘤277例,占57.71%,良性肿瘤中以乳腺纤维瘤诊断居多;经石蜡切片诊断乳腺恶性肿瘤203例,占42.29%,以乳腺浸润性导管癌居多。冰冻切片诊断乳腺良性肿瘤279例,占58.13%;恶性肿瘤195例,占40.62%;延迟诊断6例,占1.25%。以石蜡切片诊断结果为金标准,冰冻切片诊断乳腺良性肿瘤的准确率为98.56%(273/277),诊断恶性肿瘤的准确率为95.07%(193/203),假阳性率为0.72%(2/277),假阴性率为2.96%(6/203),冰冻切片与石蜡切片诊断乳腺肿瘤的结果具有显著一致性,K值为0.965(P0.05)。结论:冰冻切片与石蜡切片诊断乳腺肿瘤的符合率较高,可作为术中快速病理检测的手段,但该种切片方式存在少量延迟诊断,多与术者操作经验有关,故术中应注重制片过程,提高冰冻切片质量。     

植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法

石蜡切片法应用于生物学的研究历史已久,至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出制作石蜡切片的三种整体染色方法,使常规石蜡切片法得到了简化并且效果良好。     

脂肪组织石蜡切片制作方法探讨

目的探讨脂肪组织石蜡切片制作方法,改善和提高其切片质量。方法将送检的脂肪组织切开固定于中性甲醛液中;取材后将标本放入脱水机中,调整脱水机设置程序,在常规方法的基础上适当增加组织再固定及脱水、透明时间;包埋时采取挤压组织等改进方法。结果通过改进和调整后制作的脂肪组织蜡块平整无塌陷,石蜡切片优良,厚薄均匀,完整,无空洞、无挤压、镜下组织结构完整清晰,细胞无挤压、重叠等现象。细胞形态清晰,着色均匀艳丽。结论通过上述方法的改进,能尽可能多地减少脂肪组织的脂滴,增加脂肪组织的硬度,使组织和石蜡能很好的融合在一起,有利于切出完整的厚薄均匀的石蜡切片,提高制片质量。     

免疫组化染色防脱片几种方法的比较

免疫组化染色技术以其操作简单、敏感性高、特异性强,能将形态和抗原定位结合起来等优点广泛应用于肿瘤临床病理诊断和鉴别诊断[1].但是影响免疫组化的因素较多[2-5],存在经验和判断上的差异.石蜡切片在免疫组化染色中的脱片问题由来已久.切片经抗原修复和缓冲液的长时间浸泡后,往往会部分或全部从载玻片上脱落,影响染色结果的判断.不同的粘附剂和粘附剂不同的涂胶方法防脱片效果不尽相同[6-7].我们在工作中也经常遇到石蜡切片脱落问题,为此探讨了多聚赖氨酸较好的涂胶方法,又进一步对三种粘附剂即APES(氨醛三已氧基硅烷),多聚赖氨酸和白乳胶的防脱片效果和染色情况作了比较,成功地总结出多聚赖氨酸双涂胶法.现介绍如下:     

兔卵巢组织石蜡切片技术的改良

针对常规石蜡切片方法步骤繁多,耗时长,所用的二甲苯试剂对人体健康有较大毒害性的缺陷,探讨提高制作兔卵巢组织石蜡切片质量的方法。试验从脱水和透明环节进行技术改良,用正丁醇与无水乙醇混合剂取代常规的脱水剂和透明剂。该混合剂具有良好的脱水和透明作用。实验结果表明：通过该技术改良,镜下观察组织结构清晰可辨、颜色鲜艳、对比度好、层次分明,组织切片效果良好。试验改良技术的工艺简单,具有质优、省时、快捷和实用性较好等优点,有推广应用价值。     

正庚烷代替二甲苯在拟南芥花药石蜡切片中的应用

二甲苯是应用最广的一种透明剂,常用于石蜡切片中的脱蜡和透明,但由于其对人体危害大,广大科研工作者一直在探寻更加安全的二甲苯代替物。以不同时期的拟南芥花药为试材,脱蜡和透明均由正庚烷代替二甲苯完成,其余步骤与常规石蜡切片相同。结果显示,正庚烷透明力强而迅速,既能与乙醇、封藏树胶混合,又能溶解石蜡,可作为合适的透明剂和脱蜡剂;组织经正庚烷处理后物理性质良好,浸蜡充分,切片时软硬适中,容易连续切片,而且厚薄均匀,摊片时能在42℃水中自然展开,平整而无皱褶;经甲苯胺蓝染色,细胞着色好,核质分明,结构清晰,组织形态保持完好,与二甲苯作透明剂的切片效果无明显区别。因此,正庚烷可以作为一种新的、相对安全有效的二甲苯替代物,应用于植物组织切片中。     

植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法

石蜡切片法应用于生物学的研究历史已 久,至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化 学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观 察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出 制作石蜡切片的三种整体染色方法,使常规石 蜡切片法得到了简化并且效果良好。     

树轮生态学研究中微树芯石蜡切片制作的方法探讨北大核心CSCD

树轮气候学及树轮生态学研究在国内外取得了长足进展,但对树轮与气候的响应机制缺乏深入的了解,迫切需要进行以微树芯石蜡切片为基础的树轮生态学研究。形成层活动监测从生理生态学角度出发,广泛用于树轮对气候变化响应的机制探讨研究中,然而目前还没有对微树芯石蜡切片制作的方法作详细的论述和探讨。该文通过对祁连圆柏(Sabina przewalskii)等5个不同树种微树芯石蜡切片的制作实践,对已有的植物石蜡切片技术进行改进,增加组织软化的步骤,并对其他步骤作了相应的调整,详细介绍了微树芯石蜡切片制作的方法,为树轮生态学、解剖学,以及木材解剖学关于木质化材料石蜡切片的制作方法提供参考。     

激光微切割与定量PCR技术分析肾脏病理切片RNA

采用激光微切割与定量PCR技术,分析使用不同提取方法从不同固定方法固定的病理切片中提取的RNA.用70%乙醇、丙酮、甲醇、4%多聚甲醛固定肾脏冰冻切片,使用激光微切割技术切取肾小球,用硫氰酸胍方法(guanidinethiocyanatemethods,GTC)和Trizol试剂方法提取RNA,使用Taqman定量PCR方法分析比较各组RNA的量;选取丙酮固定的石蜡切片,使用激光微切割技术切取肾小球,采用RNA裂解液提取RNA,使用Taqman定量PCR方法,比较石蜡切片和冰冻切片中RNA含量.结果显示:提取沉淀性固定剂如乙醇、丙酮、甲醇固定的冰冻切片的RNA时,2种提取方法和3种固定方法对RNA含量的影响都无明显差异;但在提取4%多聚甲醛固定冰冻切片时,使用Trizol提取RNA含量明显高于使用GTC方法,且其含量与沉淀性固定剂固定的切片RNA含量无明显差异.石蜡切片中经激光微切割肾小球的RNA含量与冰冻切片经激光微切割肾小球的RNA含量无明显差异.结果提示:切片的固定方法和RNA的提取方法是影响切片RNA提取量的主要原因.     

Improved method of obtaining micro-core paraffin sections in dendroecological research

树轮气候学及树轮生态学研究在国内外取得了长足进展, 但对树轮与气候的响应机制缺乏深入的了解, 迫切需要进行以微树芯石蜡切片为基础的树轮生态学研究。形成层活动监测从生理生态学角度出发, 广泛用于树轮对气候变化响应的机制探讨研究中, 然而目前还没有对微树芯石蜡切片制作的方法作详细的论述和探讨。该文通过对祁连圆柏(Sabina przewalskii)等5个不同树种微树芯石蜡切片的制作实践, 对已有的植物石蜡切片技术进行改进, 增加组织软化的步骤, 并对其他步骤作了相应的调整, 详细介绍了微树芯石蜡切片制作的方法, 为树轮生态学、解剖学, 以及木材解剖学关于木质化材料石蜡切片的制作方法提供参考。     

内热式电蜡铲的制作与使用方法

生物石蜡法制片,在切片之前须将蜡块加热后焊接在木块上,然后再固定在切片机上进行切片. 通常以金属制成小蜡铲作为焊接工具.操作时将其放在酒精灯上加热,即可将蜡块焊接     

改良的石蜡切片技术在基础生物学实验教学中的应用

石蜡切片技术是一项在生物组织学及病理学研究中常用的实验技术。设计“斑马鱼性腺组织石蜡切片”实验,并将改良的技术转化为适合本科基础生物学实验教学的内容。该实验分为组织样本的处理和切片的制备两部分,每部分2~3个学时。通过该实验,学生可以掌握石蜡切片技术的实验原理、实验方法及光学显微镜的使用,并为后续免疫组织化学以及原位杂交等一系列实验的开展奠定了基础。     

肺血管注射石蜡切片

通过卡红明胶液进行血管注射,而不经过其他染色方法,直接石蜡切片,可清楚地显示毛细血管在泡壁上的分布及其毗邻关系。卡红明胶液的配制 1.取卡红6克加入50毫升蒸馏水中,逐渐滴加氨水,直至完全溶解,过滤备用。 2.取精制明胶20克与200毫升蒸馏水混合,过夜,置水浴锅中滆水加热溶解。随即取卡红液入明胶液中,搅拌混合,逐步滴加醋酸,至     

自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧

组织芯片（tissue chip TC）技术是将数十个乃至上千个的组织样本,整齐有序地排列在同一张载玻片上,而形成的微缩组织切片;又称组织微阵列（tissue microarray TMA）技术。组织芯片的制作方式主要有石蜡切片法和冷冻切片法,目前以石蜡切片法为常用。现在还有商品化的组织芯片制作仪,如美国（Tissue Arrayer,Beecher Instrument,USA）生产的,但这套产品价格昂贵。所以,手工制作技术更经济、实用,其方法的改进层出不穷。我们采用一次性穿刺针手工制做穿刺工具,用普通石蜡包埋样本,制做组织芯片,收到了满意的效果,现将制做主要程序和技巧介绍如下。     

生物组织石蜡切片的不脱蜡染色程序

石蜡切片法是生物学中应用最广泛的一种研究技术,沿用至今已一百余年,形成了一个基本固定的操作程序,为人们所普遍采用。常规的石蜡切片的染色,必须首先用二甲苯将石蜡溶去(即脱蜡),然后经下行的梯度酒精将切片下降至水(水化),用染料的水溶液进行染色;染色后又经上行梯度酒精逐级脱水,经二甲苯透明后用树胶封藏。此染色程序不仅手续较烦琐,而且切片在染色后脱水时容易褪色以及在此过程中组织里一些孤立分散的细胞如孢子、     

超声快速石蜡病理切片免疫组织化学染色的分析讨论

超声快速石蜡病理制片方法简便快捷,切片质量好,组织染色清晰,与常规制片无明显差别,是目前国内手术中快速制片常用方法之一。手术中快速病理检查常常因为肿瘤组织较小而全部做成快速石蜡切片,在临床没有后续标本送检的情况下,使得赖以诊断的免疫组织化学就必须在快速石蜡切片上进行。因此,超声快速石蜡切片对免疫组化染色的影响是一个值得探讨的问题。