共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal Protein A,SPA)分泌型融合表达系统 总被引:1,自引:0,他引:1
金黄色葡萄球菌蛋白A(StaphylococcalProteinA,SPA)分泌型融合表达系统李节,邱平(南京大学生物化学系医药生物技术国家重点实验室,南京210008)引言十几年前,我们制备蛋白质的方法还主要依靠从天然组织或细胞中提取,而现在人们可以通过基因工程方法,在细菌中生产大量有价值的活性蛋白和多肽。外源基因在细菌中表达的一个主要问题是基因产物如何折叠成天然构象。 相似文献
2.
用生物素标了己了花椰菜CaM。生物素标记的CaM具有与天然CaM相似的Ca2+依赖电泳特性,可激活CaM依赖性磷酸二酯酶,能够检测出50ng的磷酸二酯酶。利用它建立了检测植物CaM结合蛋白的生物素-覆盖法(Biotin-overlay)并证实酶标亲和素可与胡萝卜愈伤组织内64kD蛋白质非特异结合,因此将此法运用于植物材料时必需设置酶标亲和素处理的对照。用生物素-覆盖法检测胡萝卜愈伤组织形成过程中的CaM结合蛋白时可检出2,4-D诱导的CaM结合蛋白。 相似文献
3.
生物素标记钙调素用于植物钙调素结合蛋白的检测 总被引:4,自引:0,他引:4
用生物素标记了花椰菜CaM。生物素标记的CaM具有与天然CaM相似的Ca^2+依赖电泳特性,可激活CaM依赖性磷酸二酯酶,能够检测出50ng的磷酸二酯酶。利用它建立了检测植物CaM结合蛋白的生物素-覆盖法并证实酶标亲和素可与胡萝卜愈伤组织内64kD蛋白质非特异结合,因此将此法运用于植物材料时必要设置酶标亲和素处理的对照。用生物素-覆盖法检测胡萝卜愈伤组织形态过程中的CaM结合蛋白时可检出2,4-D 相似文献
4.
5.
6.
<正>引言 葡萄球菌蛋白A(SPA)在组织免疫学和血清学方面已经成为广泛使用的工具。大多数致病性金黄色萄萄球菌产生萄萄球菌蛋白A。线形的SPA多肽链与细胞壁共价结合,有些缺乏细胞结合SPA位点的金黄色葡萄球菌菌株变种大量产生细胞外SPA,而具有麦面SPA的菌株释放可溶性细胞外SPA: 使用ELISA类心法做为葡萄球菌肠毒 相似文献
7.
沈丽英 《微生物学免疫学进展》1988,(3)
<正> 自从1966年Ishizaka在研究过敏性疾病时开拓性地发现IgE以来,学者们对IgE的研究发生了极大的兴趣,各种研究报告相继出现。 IgE又称反应素或亲细胞性抗体。与其他几类Ig相比,IgE在正常人血浆中含量极低,为0.01~0.9mg%,仅占血清蛋白总量的0.002%。但在各种变态反应性疾病如过敏性哮喘、枯草热、荨麻疹、过敏性鼻炎、药物过敏,某些感染性疾病和肿瘤如麻疯、天疱疮、何杰金氏病、IgE骨髓瘤以及某些细胞免疫缺陷等均可见IgE升高。在蠕虫感染 相似文献
8.
本文将BAS用于固相免疫吸附试验,建立LAB-ELISA抗-HBc/IgM试验方法,并与普通ELISA法进行了比较。实验表明:本法敏感性较普通ELISA高2—4倍,检出率高出后者6.8%,且具有较好的重复性。为血清抗-HBc/IgM检测提供了一种新的、切实可行的方法。本试验采用改良过碘酸盐法制备酶标记抗生物素,以含A蛋白葡萄球菌菌体亲和吸附试验制备抗-μ抗体,在稀释液中加入凝聚正常兔IgG以克服类风湿因子的干扰、考核方法的特异性采用了含A蛋白葡萄球菌菌体吸附试验及抗HBc-抑制试验。 相似文献
9.
10.
缓激肽是一含有9个氨基酸残基的多肽,其残基序列为Arg1-Pro2-Pro3-Gly4-Phe5-Ser6-Pro7-Phe8-Arg9-OH,在激肽释放酶的作用下, 从其大的前体多肽——激肽原而形成的.许多发病机理,如发炎、疼痛、哮喘等都与缓激肽有关. 它能与PC12细胞表面的受体作用,引起细胞器内的钙离子释放,在共焦显微镜下,通过观察钙指示剂Fluo-3荧光增加来监测缓激肽的生物活性.在这项研究中,利用固相肽合成方法合成了连接生物素的缓激肽,Biotin-Arg1-Pro2-Pro3-Gly4-Phe5-Ser6-Pro7-Phe8-Arg9-OH,通过对其生物活性的研究发现:a.它能保持象天然的缓激肽那样的生物活性;b.由于中性抗生物素蛋白与连接的生物素的结合引起的空间位阻阻碍它与细胞表面受体的相互作用,从而抑制了它的生物活性;c.在有自由的生物素存在的条件下,自由生物素与连接生物素与中性抗生物素蛋白的竞争结合,能够使得与中性抗生物素蛋白结合的连接生物素的缓激肽从抗生物素蛋白上脱离,因而恢复其生物活性.因此,可利用生物素和抗生物素蛋白来控制连接生物素的缓激肽的生物活性.这对于研究生物体系中生物活性的结构相关性具有重要的意义. 相似文献
11.
《生物技术通报》2016,(11)
旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,(1)成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的重组质粒p Cold I-scFv,质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中;(2)经过诱导表达后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中;(3)使用4 mol/L尿素成功地将包涵体变性溶出;(4)通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白;(5)间接ELISA鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤,最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白。 相似文献
12.
13.
14.
15.
金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A或SpA)由于能与大多数哺乳动物血清IgG发生假免疫反应(Pseudoimmune reaction),产生非特异性结合而受注目。自1958年Jensen的工作开始,SpA的研究已有近三十年的历史。作为一种免疫化学试剂SpA已广泛应用于各种免疫学检测技术,IgG及其亚类纯化技术及组织化学研究等方面;在临床方面,SpA在肿瘤治疗上的初步结果令人鼓舞。近年来,一些研究者致力于SpA的变异研究,开拓了SpA研究的新领域,为 相似文献
16.
17.
18.
吕桂荣 《微生物学免疫学进展》1980,(3)
<正> 本文叙述了定量测定白喉毒素抗体的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。用ELISA技术与单间免疫扩散测定法比较,其结果能很好地相关,而且ELISA技术更为敏感一万倍。比在家兔体内皮肤试验法也至少敏感10倍。 绪言 某些方法用于定量测定白喉毒素的抗体,它包括体内和体外测定试验。体内测定如在家兔去毛的背上作皮内中和滴定试验,有利于测定实际中和毒素的抗体。虽然,在体内进行中和抗体滴度的测定是不可缺少的,但这些方法需要精心操作,代价高而又费时,另外,如果不进行大量的动物实验, 相似文献
19.
应用生物素标记DNA探针检测伪狂犬病病毒的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用生物素标记DNA探针检测伪狂犬病病毒的研究王琴,郭万柱,阴文奇(四川农业大学动物科技学院,四川雅安,6255014)关键词伪狂犬病毒,核酸,杂交,检测核酸杂交技术已广泛用于检测畜禽疱疹病毒和其它动物病毒,已报道PRV-DNA的探针方法有RNA-D... 相似文献
20.
光敏生物素标记总DNA探针对大豆根瘤菌的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
以光敏生物素标记慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)USDA110总DNA作为探针,与快生型大豆根瘤菌杂交时,没有杂交斑点形成,而与慢生型大豆根瘤菌中的部分菌株能形成杂交斑点,表明该探针具有种和部分菌株特异性,用该探针与压碎的根瘤汁液进行DNA杂交,检测USDA110在不灭菌的盆栽土壤中的竞争结瘤能力,发现USDA110在大豆不同生育期的占瘤率为70%~90%。 相似文献