潞党参多糖的抗补体活性分析

以山西上党地区著名道地药材潞党参为材料,分析其多糖成分的抗补体活性。首先,通过细胞溶血实验,分析潞党参多糖(Lu Codonopsis pilosula polysaccharides,LCPP)对补体经典途径和旁路途径的影响。结果表明,LCPP具有一定抗补体活性,CH_(50)值为2.061±0.127 mg/mL,AP_(50)值为6.725±0.895 mg/mL,并表现为明显的量效关系。随后,利用人HepG2细胞,通过实时定量PCR实验,分析LCPP对补体系统重要成分C3表达的影响,发现LCPP能够显著抑制肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人HepG2细胞中C3的表达。以上结果提示,潞党参是一种潜在的补体抑制剂,在治疗补体过度激活所导致的自身免疫性疾病方面具有应用前景。     

酵母多糖对中华条颈龟非特异性免疫机能的影响

本研究旨在探讨饲料中添加不同水平的酵母多糖对中华条颈龟(Mauremys sinensis)非特异性免疫机能的影响。选取体重为134.7±19.1 g的中华条颈龟,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组,各组饲料中酵母多糖的添加量分别为每千克龟重0 mg、800 mg、1200 mg和1600mg,并在第15d、30d检测各组免疫器官指数、白细胞数目、血清中溶菌酶及补体C3、C4活性等免疫指标。结果表明,各实验组脾脏指数和肝脏指数与对照组之间差异均不显著(p>0.05);各实验组白细胞数目相比对照组显著增多(p<0.05);在第15d血清中溶菌酶和C3、C4活性均显著高于对照组(p <0.05),在添加量为1200 mg/kg时活性最高,在第30d 各实验组溶菌酶和补体C4活性与同剂量组相比显著下降,补体C4活性与对照组差异不显著(p>0.05)。由此得出,饲料中添加酵母多糖可提升中华条颈龟的非特异性免疫机能,以1200 mg/kg添加水平的效果最佳,且投喂时间不宜过长。     

酵母多糖对中华条颈龟幼体非特异性免疫机能的影响

本研究旨在探讨饲料中添加不同水平的酵母多糖对中华条颈龟(Mauremys sinensis)幼体非特异性免疫机能的影响。选取体重为(134.7±19.1)g的中华条颈龟幼体,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个组,按照龟体重各组饲料中酵母多糖的添加量分别为0 mg/kg(对照组)、800 mg/kg、1 200 mg/kg和1 600 mg/kg,并在第15天、30天检测各组的免疫器官指数、白细胞数目及血清中溶菌酶和补体C3、C4含量等免疫指标。结果表明,各实验组脾指数和肝指数与对照组之间差异均不显著(P0.05);各实验组白细胞数目比对照组显著增多(P0.05);在第15天血清中溶菌酶和C3、C4含量均显著高于对照组(P0.05),在添加量为1 200 mg/kg时活性最高;在第30天各实验组溶菌酶和补体C4含量与第15天同剂量组相比显著下降,补体C4含量与对照组差异不显著(P0.05)。由此得出,饲料中添加酵母多糖可提升中华条颈龟幼体的非特异性免疫机能,以1 200 mg/kg添加水平的效果最佳,且投喂时间不宜过长。     

孟加拉高砷低砷区儿童对口服灭活霍乱疫苗的特异免疫应答及其EPI疫苗

<正>背景:对口服灭活全菌体霍乱毒素B(CTB)亚单位霍乱疫苗Dukoral和国家免疫接种体系中的3种儿童疫苗的免疫应答,在生活于孟加拉高砷和低砷污染区的儿童中进行了比较,并对他们的血清补体因子C3和C4水平进行了评估。疫苗接种:2~5岁的儿童口服两剂Dukoral,间隔14天。受试者亦根据孟加拉扩大的免疫规划(EPI)接受了白喉、破伤风和麻疹疫苗。     

川麦冬中的新C_(27)甾体甙(英文)

从百合科植物川麦冬 (OphiopogonjaponicusKer_Gawl.)块根中分离得到 4个C2 7甾体甙类化合物 ,其中两个为新化合物 :ophiopojaponinA ( 1)和B ( 2 )。它们的结构通过波谱和化学方法鉴定为 :pennogenin 3_O_[2′_O_acetyl_α_L_rhamnopyranosyl ( 1→ 2 ) ]_β_D_xylopyranosyl ( 1→ 3)_β_D_glucopyranoside ( 1) ,2 6_O_β_D_glucopyranosyl_( 2 2 ξ,2 5R)_3β ,14α ,2 2 ξ ,2 6_tetrahydroxyfurost_5_ene 3_O_α_L_rhamnopyranosyl ( 1→ 2 )_β_D_glucopyranoside ( 2 ) ,diosgenin 3_O_[α_L_rhamnopyra nosyl( 1→ 2 ) ]_β_D_xylopyrano_syl ( 1→ 3)_β_D_glucopyranoside ( 3)andruscogenin 1_O_[α_L_rhamnopyranosyl( 1→ 2 ) ]_β_D_xy lopyranosyl ( 1→ 3)_β_D_fucopyranoside ( 4)。     

热灭活补体活性的血清对间充质干细胞和免疫细胞培养的优化效应

该研究目的在于评估胎牛血清热灭活对细胞培养的影响。对经56°C、30 min热灭活前后的血清配制培养基培养的人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs)和人外周血来源单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs),进行增殖速率、免疫调控蛋白表达水平、T细胞增殖速率的检测,比较血清热灭活对细胞培养的影响。结果显示,热灭活前后的两种血清对hUCMSCs的形态没有影响,但热灭活处理能够提高hUCMSCs增殖速率以及响应炎症因子的能力从而使其表达更多的免疫调控蛋白IDO(indoleamine 2,3-dioxygenase)和COX-2(cyclooxygenase 2);此外,热灭活的血清能够显著提高T细胞的体外增殖速率。补体系统活性的标志蛋白C3a在热灭活血清中显著下调。向含有未热灭活血清的培养基中加入补体活性抑制剂compstatin,同样能够提高hUCMSCs的增殖速率和免疫抑制能力。综合以上结果,该文研究表明, 56°C、30 min热灭活血清处理...     

藏药“加哇”的化学成分研究

藏药“加哇”来源于西藏棱子芹(Pleurospermum hookeri C. B. Clarke var. thomsonn C.B.Clarke》的根及根茎,从其中共分得10种化学成分,经理化常数、波谱数据和化学反应鉴定其结构为:川陈皮素(Ⅰ)、falcarindiol(Ⅱ)、异甘草素(Ⅲ)、甘草查耳酮甲(Ⅳ)、壬二酸(Ⅴ)、反式阿魏酸(Ⅵ)、豆甾-4,22-二烯-3-酮(Ⅶ)、月桂酸酐(Ⅷ)、β-谷甾醇(Ⅸ)、二十四烷(Ⅹ)。所鉴定的化合物皆为首次从加哇中分得。除了falcarindiol和β-谷甾醇以外,其余8种成分在棱子芹属植物中尚属首次发现。     

因子H结合蛋白在B群脑膜炎球菌疫苗中的应用研究进展

因子H结合蛋白(factor H-binding protein, fHBP)是脑膜炎球菌(Meningococcus)的一种关键毒力因子,其通过结合人类补体调节因子H(factor H, fH)使得细菌能够在人体血液中生存。同时,fHBP也是目前已上市的2种B群脑膜炎球菌疫苗(MenB-fHBP和MenB-4C)的主要成分。fHBP蛋白作为疫苗成分可诱导机体产生具有杀菌活性的抗体,产生的抗体与外源细菌表面fHBP结合后,可阻止外源fHBP与体内fH的结合,从而激活补体系统,起到对外源细菌的杀灭和清除作用。现就fHBP作为B群脑膜炎球菌疫苗的抗原成分在疫苗中的应用作一概述。     

云南孟加拉种眼镜蛇蛇毒因子在灵长类动物内应用的免疫原性研究

眼镜蛇蛇毒因子(CVF)能特异性清除机体循环中的补体C3,从而可能在防治补体介导的损伤或疾病中发挥重要的治疗作用.云南孟加拉种眼镜蛇蛇毒因子(Y-CVF)较文献报道的其他各种CVF具有更高的活性和较少的用药量.为探讨Y-CVF静脉使用是否诱导灵长类动物体内产生特异性中和抗体和异种天然抗体,给2只正常食蟹猴每两周静脉注射一次治疗剂量(0.05mg/kg)的Y-CVF,共4次,检测注射前后不同时间点血清内补体C3水平、总补体活性(CH50)、抗Y-CVF抗体和抗猪内皮细胞异种抗体的变化.结果显示,前2次注射Y-CVF后均有良好的清除补体效果,第3次注射Y-CVF后补体仪被部分灭活,第4次注射Y-CVF后则基本无效.免疫印迹和酶联免疫吸附试验均证实特异性抗Y-CVF抗体产生,且其滴度随着Y-CVF注射次数增加而递增.多次注射Y-CVF后,并没有在血清内榆测到明显的抗猪内皮细胞抗体的变化.因此,多次静脉注射Y-CVF能诱导灵长类动物产生特异性抗体,从而导致Y-CVF失效,但未发现抗α-Gal异种天然抗体明显增加.     

灵芝菌丝液体深层发酵产β-葡聚糖的培养基优化

灵芝β-葡聚糖是灵芝多糖中生物活性较高的一类多糖。通过单因素试验确定影响灵芝液体发酵β-葡聚糖的3个关键参数为:可溶性淀粉(A)40g/L,蛋白胨(B)8g/L,K2HPO4(C)1.5g/L。在此基础上,采用Box-Behnken设计及响应面分析法对各参数及其交互作用进行了研究。结果显示,3因素及AB、AC的交互作用对β-葡聚糖得率的影响均为极显著水平(P0.01)。建立的预测灵芝β-葡聚糖发酵的多项式模型为:Yβ-葡聚糖=8.68+0.22A-0.13B+0.096C+0.13AB+0.16AC+0.045BC-1.17A2-0.81B2-1.06C2。经响应面最优分析,获得3个关键因素的最佳水平为:可溶性淀粉40.47g/L,蛋白胨7.86g/L,K2HPO4 1.53g/L,在该条件下,灵芝菌体β-葡聚糖得率可达8.68mg/g。     

无花果多糖对鲫鱼非特异性免疫功能的影响

实验研究了无花果多糖对鲫鱼非特异性免疫功能的影响。将鲫鱼分成A0、A1、A2、A3和A4五个组,其中A0组投喂基础饵料,设为对照组,而A1、A2、A3和A4分别投喂添加0.1%、0.2%、0.4%、0.8%无花果多糖的基础饵料,并在试验的第0、第7、第14、第21、第28、第35天检测鲫鱼血清补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液白细胞吞噬活性。结果表明,A2组的补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液白细胞吞噬活性显著高于A0组(P3组补体C3含量、SOD活性和血液白细胞吞噬活性极显著的高于A0组(P1组、A4组(P3组补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液中白细胞吞噬活性与A2组相比差异不显著。A0组、A1组和A4组之间的补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液白细胞吞噬活性无显著差异(P>0.05)。       

蛹虫草液体发酵产多糖的条件优化

多糖是蛹虫草Cordyceps militaris产生的重要活性成分。为提高其液体发酵胞外多糖的产量,通过单因素轮换法、方差分析、正交试验对蛹虫草菌株YCC-H产胞外多糖的发酵条件进行了优化。单因素结果表明液体发酵最适初始pH为5,最适葡萄糖浓度(质量分数)为6%,最适氮源为酵母膏,最适装液量为80 mL/250 mL,最适接种量(体积分数)为12%;在不同培养条件下菌体生物量变化较大;通过方差分析及正交试验进一步优化,结果显示：装液量(A)、氮源(B)、接种量(C)对蛹虫草产胞外多糖影响程度为B>A>C,最佳条件组合为A₂B₃C₂,即装液量80 mL/250 mL、酵母膏为唯一氮源、接种量(体积分数)为12%,其余因素选择单因素中最佳水平。经验证,该菌株合成胞外多糖的质量浓度达247.06 mg/L,较未优化前胞外多糖的产量23.67 mg/L提高了9.43倍。     

TGF-β2在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化 的研究

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的作用。方法：无菌条件下 分离Wistar 大鼠股骨骨髓,采用全贴壁培养法纯化BMSCs。传6 代后,将细胞随机分为3 组,A组加入25 ng/mL TGF-β2在1%氧 浓度条件下培养;B 组加入25 ng/mL TGF-β2在21%氧浓度条件下培养;C 组仅加入含10%胎牛血清的DMEM-α培养液在1%氧 浓度条件下培养。3 周后,通过甲苯胺蓝染色检测细胞糖胺多糖,聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平。 结果：骨髓细胞经换液后贴壁聚集生长,形态均一,连续传代后形态无明显改变。分组培养第1 周,A、C 组生长速度低于B 组;第 2 周各组均出现不规则形态细胞,A、C 组细胞形态小于B 组;第3 周各组均可见透明样基质,以A组最明显。3 周后行甲苯胺蓝 染色,A 组细胞内外均可见丰富的蓝染颗粒,B、C 组染色较A 组略浅。A 组Ⅱ型胶原的表达相对量(1.246± 0.287) 高于B 组 (0.973± 0.365)、C组(0.802± 0.196),差异有统计学意义(P＜0.05);B、C 组比较无明显差异(P＞0.05)。A 组Aggrecan 的表达相对量 (0.833± 0.375)高于B组(0.724± 0.173)、C 组(0.602± 0.091),差异有统计学意义(P＜0.05);B、C 组比较无明显差异(P＞0.05)。结 论：TGF-β2联合低氧环境可明显促进骨髓基质干细胞分化为软骨细胞。     

肝素的抗补体作用

1929年Ecker和Gross发现了肝素的抗补体作用。当时认为,抗补体作用可能系肝素作用于补体的第三或第四成分(C_3,C_4),使其灭活。随后的报告肯定了这一发现。目前认为,肝素可作用于补体系统的经典途径、替代途径和调控机制,以发挥抗补体作用。一、阻抑经典途径的激活补体系统经典途径的激活是由于C_1活化而启动的。C_1活化通过两种方式进行:(1)抗原抗体复合物形成后,暴露了抗体上的补体结合点(即C_(1q)受体),血清中呈活性状态的     

脂多糖通过补体途径诱导小鼠产生白三烯B4

目的:研究脂多糖(LPS)对人血清中补体系统的激活及在小鼠模型中诱导产生白三烯B4(LTB4)。方法:LPS包被ELISA板,利用血清中补体C4、C3沉积实验检测补体成分被LPS活化的情况,通过尾静脉注射小鼠LPS后不同时间点ELISA定量检测LTB4,评价补体系统的活化和炎症因子的产生。结果与结论:血清系统ELISA检测发现LPS可以激活补体系统,且以凝集素途径为主;动物实验中LTB4被LPS诱导后1～3 h达到峰值,之后回落。C1INH对血清补体活化和动物模型中LTB4的产生均有显著抑制。     

琼脂糖凝胶电泳及其应用于人血清β脂蛋白的分离和分型

1.本文用自制琼脂糖进行人血清蛋白质和脂蛋白电泳及免疫电泳均获得较理想的结果。2.用酒精处理透析膜做为琼脂糖凝胶的载膜透明无色不吸附油红“O”染料,获得了较理想的载膜,便于长期保存和分析,极适宜于光密度描绘和测定各种脂蛋白组分和百分含量。3.在清蛋白的存在下以自制琼脂糖进行电泳获得了清晰透明整齐,分辨力强的电泳图谱,可将人血清脂蛋白分为五种主要的脂蛋白,乳糜微粒,β脂蛋白,前β_2脂蛋白,前β_1脂蛋白和α脂蛋白五种,以及两种不经常出现的脂蛋白,极慢速的前β_3脂蛋白和前α脂蛋白。4.根据前β脂蛋白的出现与否,泳动的速度,出现的多少,染色的深浅以及乳糜微粒存在与否可将高脂蛋白血清电泳图谱分为八种不同的类型:即Ⅰ,Ⅱ_1,Ⅱ_2,Ⅱ_3,Ⅱ_4,Ⅲ,Ⅳ,及Ⅴ八种。5.自制琼脂糖电泳重复性较好,光密度测定同一标本获得了满意的结果。     

琼脂糖凝胶电泳及其应用于人血清β脂蛋白的分离和分型

1.本文用自制琼脂糖进行人血清蛋白质和脂蛋白电泳及免疫电泳均获得较理想的结果。2.用酒精处理透析膜做为琼脂糖凝胶的载膜透明无色不吸附油红“O”染料,获得了较理想的载膜,便于长期保存和分析,极适宜于光密度描绘和测定各种脂蛋白组分和百分含量。3.在清蛋白的存在下以自制琼脂糖进行电泳获得了清晰透明整齐,分辨力强的电泳图谱,可将人血清脂蛋白分为五种主要的脂蛋白,乳糜微粒,β脂蛋白,前β_2脂蛋白,前β_1脂蛋白和α脂蛋白五种,以及两种不经常出现的脂蛋白,极慢速的前β_3脂蛋白和前α脂蛋白。4.根据前β脂蛋白的出现与否,泳动的速度,出现的多少,染色的深浅以及乳糜微粒存在与否可将高脂蛋白血清电泳图谱分为八种不同的类型:即Ⅰ,Ⅱ_1,Ⅱ_2,Ⅱ_3,Ⅱ_4,Ⅲ,Ⅳ,及Ⅴ八种。5.自制琼脂糖电泳重复性较好,光密度测定同一标本获得了满意的结果。     

人sCR1活性片段原核表达载体的构建与蛋白表达及生物活性鉴定

补体系统过度活化片段所介导的器官缺血再灌注损伤和机会病原菌感染等疾病的防治十分棘手。国内外的研究证实,其始动因子除了C5a之外还有C3a和C5b-9等成分的共同作用。在经典、旁路和MBL三个补体激活途径中,都以C3活化为中心,sCR1结合功能域片断SCR15-18既可灭活C3/C5转化酶,又     

嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖对斑点叉尾免疫保护作用

嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)是近年来引起斑点叉尾高致死性、传染性疾病的主要病原之一。为了研究嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖对斑点叉尾的免疫保护作用,实验选用了400尾健康斑点叉尾,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组,每组用鱼100尾,每组下设两个重复,每个重复用鱼50尾,以腹腔注射的方式分别向Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组的斑点叉尾注射嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖、无花果多糖加脂多糖、全菌灭活苗和生理盐水,在试验第0、第28天时分别进行首次免疫和加强免疫,试验期间每隔7d,对试验鱼的血液白细胞杀菌活性、补体C3含量、IgM含量和血清凝集效价滴度进行测定;试验第49天时进行活菌攻毒。结果表明,首免后,接种脂多糖、无花果多糖加脂多糖的试验鱼血清凝集效价滴度明显升高,白细胞杀菌活性、补体C3含量、IgM含量也明显增加;加强免疫后,脂多糖、无花果多糖加脂多糖的试验鱼血清凝集效价滴度峰值分别为1∶256和1∶512,白细胞杀菌活性峰值分别为0.565和0.511,补体C3含量峰值分别0.194和0.180mg/mL,IgM含量峰值分别1.415和1.464mg/mL,免疫保护率分别为70.0%和65%。嗜麦芽寡养单胞菌脂多糖和脂多糖+无花果多糖受免鱼的上述指标均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地高于生理盐水注射组,这两者的免疫保护效果优越于全细胞灭菌苗。     

灵芝多糖的抗癌构效关系及其抗癌作用机制

灵芝多糖是灵芝的主要抗癌活性成分,但灵芝多糖的抗癌构效关系和抗癌机制仍不明了。现有的研究表明,具有抗癌活性的灵芝多糖大多是β-(1→3)-D-葡聚糖。β-葡聚糖中分支度高的有较高的活性,分子量高的也较分子量小的活性大。但新近的一些研究发现,含有其它结构的灵芝多糖和某些小分子量的灵芝多糖也具有免疫调节和抗癌活性。因此,这些灵芝多糖在灵芝抗癌中的作用不可忽视。灵芝多糖的抗癌作用机制目前尚不明了。现已知通过免疫介导作用发挥抗癌作用是灵芝多糖抗癌的主要机制之一。新近的研究发现,膜Ig和TLR-4为灵芝多糖激活机体B细胞的免疫受体,TLR-4也与灵芝多糖激活机体巨噬细胞有关。此外,灵芝多糖抗癌的可能机制还包括活化促分裂原活化蛋白(MAP)激酶,以及抑制肿瘤血管新生等。