人正常腺上皮组织中MUC6基因的表达

应用免疫组织化学和原位杂交方法检测人正常腺上皮中MUC6基因的表达。揭示MUC6基因在正常人腺上皮组织中的分布异质性及其特点,结果显示：MUC6基因编码的核心蛋白及其mRNA主要分布于正常胃粘膜胃腺的基底部,上皮细胞无MUC6基因表达。呈细颗粒状,位于细胞核周,胃底,胃窦的表达无区别;十二指肠绒毛上皮内的表达呈弥漫性,均质状,杯状和柱状细胞的表达类似,杯状细胞的粘液滴内未测得MUC6基因产物;空肠,结肠组织中无MUC6基因的表达;胆囊上皮组织内有强阳性MUC6核心蛋白的表达。而宫颈上皮中表达较弱,实验提示;MUC6基因的表达存在异质性及器官特异性。     

用BC1抗体检测人正常腺上皮MUC1基因的表达

揭示ＭＵＣ１ 粘蛋白核心肽在人正常腺上皮中的表达模式。用ＢＣ１ 抗体和ＬＡＢ免疫组织化学方法检测组织中的ＭＵＣ１ 核粘蛋白的表达。ＭＵＣ１ 核粘蛋白主要分布于胃粘膜的上皮层和腺颈部细胞,基底部表达少, 呈均质状, 胃窦、胃底的表达无差异。十二指肠、空肠中的表达呈细颗粒状, 弥漫性, 位于核周; 杯状细胞和柱状细胞的表达类似,杯状细胞的粘液滴内未测得ＭＵＣ１ 基因核心肽。宫颈组织中的腺上皮核周及胆囊内存在ＭＵＣ１ 的表达。ＭＵＣ１ 核粘蛋白广泛地存在于人正常腺上皮细胞内, 但具异质性。     

黏蛋白MUC1、MUC4和MUC6在胰腺癌中的表达及预后意义

目的 探讨黏蛋白MUC1、MUC4和MUC6组合表达对胰腺癌预后的分层意义及潜在的分子机制.方法 171例患者MUC1、MUC4和MUC6的mRNA数据下载自癌症基因组图谱数据库(TCGA),临床队列数据收集自2006年至2016年在福建医科大学第一附属医院连续性并接受手术切除的168例患者,用免疫组织化学方法检测MU...     

MUC1粘蛋白在乳腺肿瘤中的表达及其生物学意义

目的　探讨MIC1粘蛋白在乳腺肿瘤组织中的表达特征及其生物学和临床意义。方法　应用免疫组织化学ABC法对 15例乳腺非典型增生 ,15例乳腺良性肿瘤 ,44例乳腺癌 (2 1例含癌旁组织 )染色 ,观察MUC1在不同类型乳腺组织中的表达特征及其与雌激素受体和孕激素受体表达的关系。结果　MUC1在所检测的乳腺组织中均表达 ,但在不同病变乳腺组织中其表达的方式和强度不同。在癌旁和非典型增生组织中只表达在近管腔或腺腔侧的胞膜上 ,胞浆未见表达。在乳腺癌组织中整个胞膜和胞浆均表达 ,且表达强度与细胞的恶性化程度成正相关 (P <0 0 1)。浸润性癌中MUC1表达明显强于原位癌 (P <0 0 0 5 ) ;乳腺癌组织中MUC1的表达强度与雌激素受体的表达成正相关 (P <0 0 5 ) ,与孕激素受体表达无关 (P >0 0 5 )。乳腺癌组织中MUC1有旁分泌现象。结论　MUC1表达水平可反映乳腺肿瘤恶性化程度 ,并可能作为乳腺癌治疗效果判断和预后评价的参考指标。     

编码人精子膜蛋白YWK-Ⅱ基因在人睾丸组织表达的研究

抗人精子膜蛋白的单克隆抗体YWK-Ⅱ,能引起人精子凝集和抑制体外穿卵,并发现在睾丸组织中至少有4种形式的mRNA对应于YWK-Ⅱ抗原,可能是同一基因转录而不同方式剪切的产物.从人睾丸λgt10 5’Stretch cDNA文库中筛选,得到1个4kb大小的cDNA,命名为 C211.在 C211的 5’变异区和 3’相对稳定区中选择了2段.DNA分别作为转录探针的模板,5’端为943 bP和3’端为1.5kb的片段,将以上二个片段与含SP6和T7启动子的PGEM3Z载体进行重组,采用体外转录,地高辛标记的方法,分别合成2,tRNA探针,对人睾丸组织进行原位杂交.人睾丸YWK-ⅡC211基因片段地高辛(Dig)标记的5’端和3’端Antisense cRNA探针均与支持细胞质中的mRNA杂交,证明YWK-Ⅱ抗原蛋白在Sertoli细胞中合成,并又镶嵌在生精细胞膜上,最终定位于精子头部赤道极.     

Egr-1在小鼠和人组织中的表达及其与细胞增殖的关系

目的：探讨早期生长反应基因－1（Egr-1）在小鼠和人体组织和细胞中的表达及其与细胞增殖的联系,方法：应用原位杂交和免疫组织化学法对小鼠和人的不同组织进行Egr-1检测。结果：Egr-1mRNA和Egr-1蛋白阳性信号呈棕褐色。位于细胞浆和细胞核,生长活跃和增生的细胞可见相对的Egr-1表达。结论：Egr-1mRNA和Egr-1蛋白的高表达主要在生长活跃和增生的细胞,与细胞增殖有密切的关系。     

人骨形成蛋白1-cDNA基因工程表达产物抗体的制备及鉴定

应用在大肠杆菌中表达的人骨形成蛋白(human bone morphogenetie protein,HBMP-1)的N端片段作为免疫原,免疫新西兰大白兔,成功地制备了抗人骨形成蛋白的抗血清,经免疫转移电泳证实该抗血清有较好的特异性,用ABC免疫组织化学方法在正常和恶性肿瘤骨的石腊切片上检测抗血清效价为1:100～1:1000,免疫组化染色结果表明,HBMP存在于人胎下颌骨新生的骨质和骨细胞中,颌骨骨肉瘤和软骨肉瘤的瘤细胞呈BMP强阳性反应,这一结果表明,骨的生长、形成和骨肿瘤的发生与BMP密切相关。     

WNT6基因在原发性骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一,好发于青少年,致残致死率高.因此,骨肉瘤的早期诊断、治疗及其发病原因和机制已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一.通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在原发性骨肉瘤发生发展中的可能作用机制,为以WNT6为指标对原发性骨肉瘤的诊断和以WNT6为靶点进行原发性骨肉瘤生物学治疗提供理论依据.方法:收集70例原发性骨肉瘤、28例骨样骨瘤和25例骨软骨瘤标本的存档蜡块,应用SP免疫组织化学染色法检测组织中WNT6蛋白的表达情况,并应用统计学处理数据分析其与骨肉瘤临床病理参数及预后的关系.结果:WNT6在原发性骨肉瘤、骨样骨瘤和骨软骨瘤组织中的阳性表达率分别为90.00 ％(63/70)、14.29 ％(4/28)和12.00 ％(3/25).骨样骨瘤组织WNT6阳性表达率与骨软骨瘤组织相比差异无统计学意义(P＞0.05);原发性骨肉瘤组织WNT6阳性表达率明显高于骨样骨瘤组织和骨软骨瘤组织,差异均有统计学意义(均P＜0.05).WNT6在骨肉瘤组织中的表达与Enneking分期、肺转移和预后呈正相关关系.结论:WNT6在原发性骨肉瘤中的表达明显上调,WNT6表达与骨肉瘤的Enneking分期、年龄、肺转移等相关,同时WNT6高表达患者生存率降低,对骨肉瘤的诊断和预后评估具有重要价值,并在临床可能成为一个诊断原发性骨肉瘤的检测指标,为骨肉瘤的生物学治疗提供新的靶点.     

胃癌survivin基因mRNA和蛋白的表达与临床病理关系

目的　研究胃癌组织中survivin基因的mRNA和蛋白表达情况及其与临床病理参数的关系。方法　应用原位杂交方法和免疫组化SP法检测 5 4例胃癌 ,34例胃良性病变 ,2 0例胃正常组织标本中survivin基因mRNA及蛋白的表达。并对其与临床病理因素和二者的关系进行分析。结果　Survivin蛋白表达阳性率在胃癌、良性疾病组织和正常组织分别为 87 0 % (47/ 5 4 )、 2 3 5 % (8/ 34)和 15 % (3/ 2 0 ) ;SurvivinmRNA阳性率为 79 6 % (43/ 5 4 )、 2 3 5 % (8/ 34)和2 0 % (4/ 2 0 )。胃癌组远大于正常胃组织和良性疾病组 ,而正常胃组织与胃良性疾病组之间差异无显著性。SurvivinmRNA与蛋白在胃癌中的表达呈正相关 (rs=0 6 79,P <0 0 5 )。且其阳性率高低与性别、年龄、组织学类型无关 ;而与淋巴结转移、TNM分期、组织学分级有关。结论　SurvivinmRNA与蛋白在胃癌中表达较高 ,且与淋巴结转移、TNM分期、组织学分级有关 ,它可作为评估胃癌生物学行为和判断预后的生物学指标。     

抑癌基因PTEN在胰腺癌组织中的表达及其意义

目的研究胰腺癌组织中PTEN蛋白及PTEN mRNA的表达及其临床病理意义.方法常规石蜡包埋切片SABC免疫组化法和原位杂交技术检测26例胰腺癌、12例癌旁组织及8例正常胰腺组织中PTEN蛋白和PTEN mRNA表达情况,同时结合病人的临床病理资料进行分析.结果 26例胰腺癌、12例癌旁组织及8例正常胰腺组织中,正常胰腺组织及癌旁组织PTEN蛋白阳性16例(75%),阳性物质位于胰腺腺细胞及胰岛细胞的胞质中,胰腺癌PTEN蛋白阳性10例,PTEN蛋白表达于癌细胞胞质,阳性率(38.4%)与正常组织存在显著差异(P<0.01).淋巴结未转移病例PTEN阳性率与淋巴结转移病例的阳性表达率无显著差异(P>0.05).PTEN mRNA表达结果与PTEN蛋白基本一致,胰腺癌PTEN mRNA阳性12例,阳性率(46.2%).结论 PTEN表达与胰腺癌临床病理特征和生物学行为存在密切关系.可能与胰腺癌的发生、发展及预后有关.     

BEL-7404人肝癌细胞甲胎蛋白基因表达的原位杂交与免疫细胞化学研究

本文用地高辛标记的甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｃＤＮＡ探针原位杂交和免疫细胞化学方法观察到,几乎所有的ＢＥＬ－７４０４人肝癌细胞均能表达ＡＦＰｍＲＮＡ和相应的蛋白。     

人胎儿胸腺内bc1－2基因表达与分布

采用免疫酶组织化学与地高辛标记的单链ｃＤＮＡ探针原位杂交技术,研究了抗凋亡基因ｂｃｌ－２在人胎儿胸腺组织中的表达与分布。结果ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ及其蛋白均优势定位于髓质区。提示胸腺中ｂｃｌ－２基因表达调控发生在转录水平;ｂｃｌ－２基因介导的细胞凋亡状态可能参与Ｔ淋巴细胞的成熟过程。     

人AADC基因在cos-7细胞中的表达和活性检测

目的　研究人芳香族左旋氨基酸脱羧酶 (AADC)基因在多巴胺代谢过程中的作用。方法　从人胎儿黑质组织中提取总RNA ,以RT PCR法扩增AADCcDNA片段 ,克隆于 pGEM T载体中。测序正确后再构建真核表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞COS 7,原位杂交检测AADC表达 ,加入L DOPA后 ,用高效液湘色谱测定转AADC细胞的多巴胺(DA)生成量 ,以了解转基因细胞AADC基因的功能活性。结果　RT PCR扩增出 144 2bp的cDNA片段与Genbank[NM 0 0 0 790 ]登录的序列相同 ,构建真核表达载体 pBK RSV AADC ,原位杂交证实其在COS 7表达阳性率为 70 % - 80 % ,在AADC活性作用下实验组的DA生成量是对照组的 4倍以上 (P <0 0 1)。结论　所克隆的AADC基因可在真核细胞中表达并具有生物活性。可望用于帕金森病的基因治疗。     

肾上腺髓质素在正常大鼠脑中的分布一免疫组化及原位杂交分析

目的验证大鼠脑内是否存在ADM及其mRNA。方法取10只健康雄性SD大鼠,体重200-250g,应用免疫组织化学法和原位杂交组织化学法检测正常大鼠脑内ADM及其mRNA的表达情况。结果在大鼠脑内ADM及其mRNA阳性细胞主要表达在大脑皮质、海马结构、齿状回、丘脑、室旁组织、脉络丛、室管膜细胞、基底节、血管内皮细胞,其中脉络丛、室旁组织、丘脑为高表达区,其次为大脑皮质、海马。在大鼠大脑内ADMmRNA的表达与ADM阳性细胞的表达相一致。结论ADM及其mRNA在大脑内广泛表达,提示ADM在中枢神经系统内具有重要的作用。     

肾上腺髓质素在正常大鼠脑中的分布-免疫组化及原位杂交分析

目的验证大鼠脑内是否存在ADM及其mRNA。方法取10只健康雄性SD大鼠,体重200-250g,应用免疫组织化学法和原位杂交组织化学法检测正常大鼠脑内ADM及其mRNA的表达情况。结果在大鼠脑内ADM及其mRNA阳性细胞主要表达在大脑皮质、海马结构、齿状回、丘脑、室旁组织、脉络丛、室管膜细胞、基底节、血管内皮细胞,其中脉络丛、室旁组织、丘脑为高表达区,其次为大脑皮质、海马。在大鼠大脑内ADMmRNA的表达与ADM阳性细胞的表达相一致。结论ADM及其mRNA在大脑内广泛表达,提示ADM在中枢神经系统内具有重要的作用。     

P2X_3受体在感觉神经节的表达

用免疫组织化学与原位杂交研究 P2 X3受体在背根神经节、三叉神经节和结状神经节的分布。结果显示 :1.原位杂交 :在三种感觉神经节中 ,95 %左右的神经节细胞为 P2 X3m RNA阳性 ,中、小型神经节细胞的杂交信号一般要比大型的神经节细胞强一些。 2 .免疫组织化学 :免疫组织化学结果与原位杂交结果基本一致。此外 ,在各神经节内 ,均显示出许多P2 X3免疫阳性神经纤维 ,在足掌表皮也显示许多 P2 X3免疫反应阳性纤维。结果提示 :P2 X3不仅参与机体的痛觉的形成 ,还可能参与其它感觉 ,如本体感觉等的形成     

中脑星形胶质细胞表达生长抑素mRNA的离体研究

利用细胞培养技术,取胎龄１８天Ｗｉｓｔａｒ大鼠中脑腹侧组织,纯化培养星形胶质细胞,以原位杂交组织化学法检测了体外培养的不同时间的生长抑素（Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＳ）ｍＲＮＡ表达,结果表明中脑星形胶质细胞能合成生长抑素,并且其相对含量随培养时间的延长而逐渐下降。本文并对星形胶质细胞合成神经肽ＳＳ的功能意义进行了初步探讨