原鸡不同组织乳酸脱氢酶同工酶研究

本文对中国原鸡的血浆,心脏肌肉和肝脏等不同组织,用薄层等电聚焦电泳进行乳酸脱氢酶同工酶试验比较。结果表明,原鸡不同组织在ｐＨ３．５－９．５时,电泳图和相应的扫描图有显著差异。     

东方铃蟾不同发育阶段乳酸脱氢酶同工酶的变化

东方铃蟾乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的表达在不同发育阶段以及不同的组织有其特异性。心脏中以LDH-1占优势,骨骼肌和肝脏中以LDH-5占优势,脑中LDH-1与LDH-5的相对含量接近。从鳃盖期至成体,心、肝、骨骼肌的LDH同工酶谱型不发生转换。心脏的LDH同工酶含量无阶段间的差异;肝、骨骼肌的LDH同工酶相对含量变化发生在从尾退化期至成体这一时期。在尾退化期,脑中LDH同工酶谱型发生转换,但LDH同工酶相对含量变化的幅度较小。     

牛蛙乳酸脱氢酶同工酶的分离纯化及其性质研究

牛蛙心脏中乳酸脱氢酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示3种同工酶区带,分别命名为LDH1、LDH2、LDH3,其中LDH1的活力占绝对优势.采用HiTrap^TM Blue HP 亲和层析和DEAE-Sephadex A离子交换层析对牛蛙骨骼肌中的LDH3进行了分离纯化.纯化的LDH3比活力为295 U/mg,Km NADH=0.028,Km丙酮酸=1.242,在SDS-PAGE上显示两条带,提示该同工酶是由两种亚基组成的,亚基的分子量分别为35.3 kD和37.6 kD.     

树鼩组织乳酸脱氢酶同工酶的研究

对云南树鼩(Tupaia belangeri chinensis)心肌、肺、颌下腺、脾脏、肾脏、肾上腺、骨骼肌和大脑8种组织乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明,8种组织均呈现为LDH-M型和LDH-H型两种亚基组合而成的5种不同分子形式同工酶。采用分光光度比色定量法测得5种同工酶组分的相对酶活性。对其H亚基和M亚基百分率以及H/M亚基比率进行了统计分析。并就不同酶谱特征与基因表达状况进行了分析讨论。     

华南兔组织乳酸脱氢酶同工酶的研究

本文以聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析华南兔(Lepus sinensis sinensis)11种组织乳酸脱氢酶同工酶的分布待征。分析结果:骨骼肌和肝组织5条同工酶带俱全;脑、肺、卵巢和盲肠等组织各含有4条谱带(LDH-1,-2,-3和-4);胃和肾组织含有3条谱带(LDH-1,-2,和-3);眼晶状体和睾丸组织也含有3条谱带,但前者是LDH-3,-4和-5,后者是LDH-1,-2和-5;谱带最少的是心肌组织,只有2条(LDH-1和-2)。此外,还对各组织中的亚基活性分布及电泳图谱特征进行了分析。     

贵州北部四种两栖类乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,研究了贵州北部的四种两栖类动物:细痣疣螈、棘指角蟾、绿臭蛙和小弧斑姬蛙的心、肝、肾等组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶,发现LDH具有明显的种族特异性和组织特异性,不同种的动物和同种动物的不同组织都有各自的LDH同工酶谱型,可以用它们作为识别物种的附加指标。本文初步探讨了生化分类学与系统分类学的关系。     

一种改进的乳酸脱氢酶同工酶染色法

以N-甲基吩嗪甲基硫酸盐（PMS）为介体,使乳酸脱氢酶（LDH）同工酶催化反应产生的NADH将铁氰化钾还原为亚铁氰化钾,利用亚铁氰化钾与三氯化铁反应生成普鲁士蓝的性质,实现对乳酸脱氢酶同工酶进行染色的目的.     

大熊猫乳酸脱氢酶同工酶M_4的纯化与某些性质的研究

利用8-(6-氨已基)-氨基-5’-AMP Sepharose亲和层析和DEAE-Sephadex A50离子交换层析纯化了大熊猫LDH-M_4。纯化的大熊猫LDH-M_4呈针状晶体,比活为412单位/毫克。聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为一条区带。SDS凝胶电泳测得其亚基分子量为35,900;等电聚焦电泳测得其等电点为8.05。经氨基酸组成分析,得出每个大熊猫LDH-M亚基含有5个Cys,26个Lys和10个Arg。其N-末端氨基酸残基可能为封闭的,C末端氨基酸残基经测定为Phe。大熊猫LDH-M_4的TPCK-胰蛋白酶水解物在纤维素膜指纹图谱上呈现35个肽斑,与已知序列的猪LDH-M_4的指纹图谱相比较,多数肽斑位置相同,约有10个肽斑在两者指纹图谱上有差异。     

黑斑蛙早期胚胎发育过程中乳酸脱氢酶同工酶的初步研究

本文采用聚丙烯聚酰胺凝胶电泳方法,对河南新乡地黑斑蛙（Ｒａｎａ ｎｉｇｒｏｍａｃｕｌａｔａ）早期胚胎发育过程中（受精后０－３２４ｈ）乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶进行了研究。结果表明：ＬＤＨ１自始至终存在,且活性一直占绝对优势;ＬＤＨ５于心跳期出现,该期以后其活性仅次于ＬＤＨ１;ＬＤＨ２于囊胚早期开始出现,其活性一直较弱;ＬＤＨ３和ＬＤＨ４均于开口期少量出现,以后前者为活性一直极弱,后者则呈现一定的活     

乳酸脱氢酶与酯酶同工酶同板染色法

介绍一种在同一块凝胶板上染乳酸脱氢酶(LDH)与酯酶(EST)的染色方法. 该同板染色法利用两种同工酶显色反应互不干扰和颜色不同的特点, 先染LDH, 后染EST, 可以在同一块胶板上得到两种同工酶清晰的酶带, 每一种酶的酶带与单板染色的酶带完全一样. 这种染色法, 能节省同工酶分析所需的试剂、时间和经费, 也便于样品的鉴定与比较, 是一种经济有效的方法. 此方法, 同样适用于苹果酸脱氢酶(MDH)与酯酶等同工酶的同板染色.     

东方田鼠长江亚种和指名亚种基因组DNA序列比较分析

根据东方田鼠基因组DNA序列片段(CenBank登录号：AF277394),通过PCR方法扩增东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)基因组DNA,得到-670bp左右的特异扩增片段。将PCR扩增产物克隆到pGEM-Teasy裁体,进行DNA序列分析,并用生物信息学方法比较东方田鼠长江亚种与指名亚种之间该序列的差异。结果表明：在东方田鼠两个亚种中共发现19个不同的等位基因,不同的个体在该序列存在广泛的单个核苷酸多态性(SNP),多态性位点多达25个;变换类型包括：转换(G→A、A→G、T→C、C→T)、颠换(G→T、A→T、T→A、C→A)、插入(CA)和缺失(TGTTTT)。东方田鼠长江亚种和指名亚种两个种群之间存在明显差别,尤其是在146、192、223、224、235位,但两种群间同源性仍高达98％。同时采用系统发育树(phylogenetic tree)分析方法,对两个亚种的亲缘关系进行了分析和比较,结果显示,东方田鼠长江亚种和宁夏指名亚种基因组DNA明显的分为两大组别。     

封闭繁殖的成年东方田鼠心电图分析

记录并分析24例麻醉东方田鼠体表心电图。结果表明,（1）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVF导联波形较稳定,主波向上,各波较明显;（2）aVR及部分aVL导联主波向下多见,QRS波群形态多样复杂;（3）各导联T波不对称,无明显S－T段,且不在等电位线上;（4）与大鼠相比各导联波幅值均低较,心率较快。     

人工饲养条件下东方田鼠指名亚种繁殖特性及其幼仔的生长发育

在实验室饲养条件下, 对东方田鼠指名亚种繁殖特性和幼仔生长发育进行了初步观察。该鼠全年均可繁殖, 平均每胎产仔3.8 ±1.5 只, 妊娠期20～21 d , 繁殖间隔期39.3 ±26.4 d , 雌雄比为1.48。幼鼠3 日龄耳壳完全直立, 4 日龄开始长下门齿, 5 日龄长上门齿, 7～8 日龄睁眼, 20 日龄可断奶, 55 日龄左右性成熟。3 种生长模型(Logistic 方程、Gompertz 方程和Von Bertalanffy 方程) 对体重、体长、尾和后足的生长过程的拟合优度均很高,择优选用Von Bertalanffy 方程对体重、体长和尾长进行描述, 选用Logistic 方程对后足长的生长过程进行描述。将该鼠的生长发育过程划分为4 个阶段, 乳鼠阶段: 初生至10 日龄; 幼鼠阶段: 11 日龄至20 日龄; 亚成年阶段: 21至55 日龄; 成年阶段: 56 日龄以后。对指名亚种和长江亚种生长、繁殖特性异同亦作了初步分析。     

封闭群东方田鼠的病理学特征观察

观察了东方田鼠封闭群在不同年龄阶段各种病理学变化的特征,为建立东方田鼠相关标准创造条件。采用常规病理学技术,结合电镜方法,对不同年龄的46只封闭繁育的东方田鼠进行了研究和观察。结果封闭群东方田鼠的病理变化主要集中在肺脏与肝脏;个别东方田鼠有乳腺癌和隐睾,东方田鼠乳腺癌的电镜特征与昆明小鼠有所不同;封闭繁育的东方田鼠主要病变有8种;不同年龄的东方田鼠病变的发生率亦不相同。因此,封闭群东方田鼠应加强病理监测,根据病理监测结果,有目的地分离病原生物体。     

东方田鼠室内繁殖与生长发育观察

目的　探寻室内东方田鼠的繁殖与生长发育规律。方法　以F4代鼠及其仔代(F5)为对象,分别观察其繁殖与生长发育情况。结果　室内东方田鼠一年四季均具有繁殖能力,春(3～4月)秋(10～11月)两季为繁殖高峰期;雌雄单一配对比多性比配对的母鼠繁殖率明显提高;母鼠怀孕期20～21d,窝产仔数3～11只,平均(4.8±1.5)只,初生重2.5～4.4g;幼鼠3　d龄耳壳全部竖立,6～8d龄被毛长全,7～11d龄开眼,10～11d牙齿长齐;15d龄左右具有采食能力,20d龄可完全断奶;60～70d龄可见个别雌鼠阴门开孔,75～90d龄可见多数雌鼠阴门开孔和雄鼠睾丸明显下位;3月龄后体重、身长增长不显著。结论　开放式(普通级)饲养环境下,室内东方田鼠的繁殖季节、窝产仔数及初生重与野生东方田鼠基本相似;种群密度、性比对雌鼠的繁殖率有明显影响;2～3月龄为性成熟期,3～4月龄为体成熟和初配时期。但成熟时间存在个体差异,同时受饲料营养和环境因素的影响。     

左炔诺孕酮和炔雌醚复合不育剂（EP-1）对雌性东方田鼠生殖的影响

  本文在实验室条件下通过一次性灌胃的方式研究了左炔诺孕酮-炔雌醚复合不育剂（EP-1）对雌性东方田鼠激素、生殖系统、胎仔数、受孕率的影响及药效持续时间,旨在检验其应用于野外东方田鼠不育控制的价值。结果表明,各浓度EP-1灌胃均能显著提高雌性东方田鼠的子宫系数,使子宫形态发生变化,对卵巢组织造成损伤,影响卵泡和黄体的发育,但是对雌二醇含量和子宫长度没有明显影响;60mg/kg EP-1灌胃能显著提高促卵泡刺激素含量和卵巢系数,而10mg/kg、30mg/kg EP-1灌胃对二者没有明显影响。室内繁殖实验表明,各浓度EP-1灌胃均能不同程度延迟初次怀孕时间,并降低试鼠的怀孕率和胎仔数,但抗生育作用具有可逆性且与药物浓度相关,10mg/kg、30mg/kg和60mg/kg剂量组生殖系统恢复时间分别为16 d、38 d和52 d。     

限制食粪对东方田鼠食物消化和体重生长的影响

食粪行为是植食性小型哺乳动物为满足其营养需求所采取的一种适应对策。实验室条件下,限制1月龄和12月龄东方田鼠摄食粪便,测定了限制食粪对食物消化率和体重生长的影响,旨在进一步揭示食粪行为在植食性小型哺乳动物的营养及消化对策中的作用。结果表明,限制食粪使1月龄和12月龄东方田鼠的干物质消化率分别下降27.64 %和7.89 %,粗蛋白消化率分别下降21.39 %和12.68 %;限制食粪可显著抑制东方田鼠的体重增长,且限制食粪对幼体体重的影响较成体明显。因此,研究结果充分验证了限制食粪可降低东方田鼠的食物消化率及抑制其体重生长的假设。     

东方田鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及生物学特性

目的对影响东方田鼠胚胎成纤维细胞（MfEF）分离和培养的因素进行探索,并观察其生物学特性。方法取室内繁殖饲养不同胎龄的东方田鼠胚胎分离成纤维细胞,通过原代和继代培养,分析比较不同胎龄、不同血清浓度、不同胰蛋白酶浓度等因素对MfEF分离及培养的影响,观察MfEF的生长形态及其生物学特性。结果 MfEF为贴壁型生长,细胞形态多样,呈梭形、不规则多边形;采用0.125%的胰蛋白酶室温消化12～13 d胚胎组织5 min,以DMEM培养基添加15%小牛血清分离培养MfEF的效果最佳;MfEF2～7代增殖最旺盛。结论获得了实验室分离、培养MfEF的有效方法 ,为进一步深入研究东方田鼠抗日本血吸虫机制以及开展不同动物成纤维细胞间比较研究奠定了基础。     

不同生活条件下东方田鼠内脏器官比较

脏器指数可以反映动物的生理功能 ,消化道形态的变化受食物质量和动物能量需求的影响 ,国内外不少学者探讨了野外条件下鼠类脏器指数和消化道形态的季节变化及其生态适应意义[2 ,4 ,6～ 8,14 ,15] 。Ｇｒｏｓｓ等[12 ] 在室内研究了温度和食物质量对草原田鼠 (Ｍｉｃｒｏｔｕｓｏｃｈｒｏｇａｓｔｅｒ)消化道形态的影响。东方田鼠 (Ｍ .ｆｏｒｔｉｓｃａｌａｍｏｒｕｍ )为洞庭湖湖泊河汊区优势鼠种 ,严重危害农林业生产 ;同时其具有天然抗日本血吸虫的特性[13] ,对血吸虫的研究和防治有着较为重要的意义。该鼠以湖滩苔草(Ｃａｒｅｘｓｐｐ …     

东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

目的建立东方田鼠非酒精性脂肪肝模型,并观察测定其肝指数、病理、血清生化指标的动态变化。方法选取6周龄湖南洞庭湖种群雄性东方田鼠70只,随机分为2组,模型组饲喂高脂肪料,对照组饲喂高纤维料,分别于第2、4、6、8、12周处死,称量体重及肝重,计算肝指数,采血检测东方田鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转移酶(r-GT)、胆碱酯酶(CHE)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL),并取肝脏HE染色后做病理学观察。结果与对照组相比,模型组6周时肝脏出现了典型的脂肪肝特征,肝重和肝指数都明显升高(P<0.05),血清ALT、AST、r-GT、CHE、TC、FFA、GLU和LDL都明显升高(P<0.05),HDL和TG均明显降低(P<0.05)。镜检观察到模型组田鼠肝细胞逐渐呈现弥漫性脂肪变性,6周时大范围出现脂滴,8周时肝内出现弥漫性大脂肪滴,12周后出现炎细胞的浸润。结论采用高脂饲料成功诱发东方田鼠非酒精性脂肪肝,可为研究非酒精性脂肪肝的发病机制和药物干预提供新的模型。