肝细胞癌及相关病变的计算机图像定量分析

为研究肝炎、肝硬变与肝细胞癌的关系,利用自动图像分析仪对６４例肝炎、肝硬变、癌旁肝硬变、肝细胞癌和正常肝组织进行了十三项参数的形态定量研究。结果：大多数参数随病变的发展而呈规律性变化,癌旁肝硬变的多数参数介于不伴肝癌的肝硬变与肝细胞癌之间。提示：（１）慢活肝、肝硬变与肝细胞癌密切相关;（２）癌旁肝硬变不同于不伴肝癌的肝硬变,与肝细胞癌的关系更密切。利用逐步判别分析选择出六项参数建立判别函数方程,回代正确率为９８．２％。     

乙型肝炎免疫指标全阴的原发性肝细胞癌患者体内HBV—DNA的检测…

本文以聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对３５例乙型肝炎免疫指标（ＨＢＶｍ）全阴性的原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）患者血清,外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）肝活检标本进行乙型肝炎病毒ＨＢＶ－ＤＮＡ检测,其检出率分别为３４．２９％,６０．００％,６８．５７％,说明一部分血清ＨＢＶｍ全阴性的ＰＨＣ患者血清并非无传染性,ＥＬＳＩＡ法具有一定局限性。ＰＢＭＣ内有相当的ＨＢＶ－ＤＮＡ存在,这对于研究ＰＨＣ患者体内ＨＢＶ的存在情况     

肝细胞生长因子刺激大鼠离体肝细胞DNA合成的剂量—与时间—效应

本工作采用３ＨＴｄＲ掺入ＤＮＡ法观察重组人肝细胞生长因子（ｒｈＨＧＦ）刺激大鼠离体肝细胞ＤＮＡ合成的剂量与时间效应。实验结果表明：ｒｈＨＧＦ是最强的促肝细胞分裂剂,在一定剂量范围内,ｒｈＨＧＦ与肝细胞ＤＮＡ合成有明显的量效关系。１ｎｇ／ｍｌｒｈＨＧＦ即可引起３ＨＴｄＲ掺入显著增加（Ｐ＜０．０１）,随剂量增加,刺激ＤＮＡ合成的效应也随之增强;１０ｎｇ／ｍｌ时３ＨＴｄＲ掺入量最大,较对照组高７倍（Ｐ＜０．００１）,剂量再增加即出现抑制效应;ｒｈＨＧＦ刺激肝细胞ＤＮＡ合成存在时间效应关系,表现为ｒｈＨＧＦ作用２４ｈ,ＤＮＡ合成量明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）,４８ｈ作用达最高（Ｐ＜０．００１）,随后开始下降,至９６ｈ下降到相当于２４ｈ的水平。     

细胞核内特征值的改变可引起DNA倍体的变化

目的通过测定不同DNA倍体细胞,研究细胞核内特征值的改变。方法用宫颈刷刷出宫颈细胞,经固定后,用涂片离心机制成二张玻片,一张行巴氏染色作TBS诊断,另一张行Feulgen染色做DNA定量测定。通过对宫颈细胞核图像内像素的统计,计算出细胞核内多种特征值,比较不同DNA倍体细胞内特征值的不同。结果 161873例妇女行宫颈细胞学检查,常规细胞学检查发现2454例低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)和523例高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL);而DNA倍体分析发现3412例有3个以上>5c细胞。84%以上的LSIL和HSIL病例均可见倍体异常细胞。与2c细胞相比,4c、5c、7c及9c细胞核面积及核半径明显增大;7c、9c细胞核内平均光学密度和紧实度均值也有明显改变,而光密度方差和灰度熵无变化。结论宫颈细胞DNA倍体改变往往伴有细胞形态和DNA核内分布等特征值的改变。     

猪肝刺激物质pHSS对离体肝细胞DNA合成的影响

应用[~3H]TdR掺入离体培养大鼠肝细胞DNA的方法,测定由本室提取的pHSS的生物活性。结果表明,pHSS可显著促进原代培养大鼠肝细胞的DNA合成,其促进率约为对照组的10倍左右。培养液中血清浓度对pHSS的生物活性表达有显著影响,不同浓度血清可以使pHSS表现出不同的量效关系,这些结果在Buffello大鼠肝细胞系的实验中得到进一步证实。在低剂量pHSS的刺激下,不同年龄大鼠肝细胞的[~3H]TdR掺入率无显著差异。但高剂量时,pHSS对幼鼠作用不明显。     

肝细胞癌患者血清外泌体microRNA表达鉴定

目的:探讨肝癌细胞外泌体中差异表达的microRNAs(miRNAs)在肝细胞癌(HCC)诊断中的应用价值。方法:通过高通量测序筛选肝癌细胞外泌体中差异表达的miRNAs。实时定量PCR验证差异表达分子;检测差异表达的miRNAs在健康人(Health)、慢性乙型肝炎患者(CHB)、肝硬化患者(LC)及乙型肝炎病毒阳性的肝细胞癌患者(HCC)血清外泌体中的表达。结果:高通量测序筛选到肝癌细胞外泌体中差异表达的miRNA共88种,其中58种表达上调,30种表达下调。选择其中8种差异表达的miRNAs进行q RT-PCR验证,结果显示,此8种miRNAs在细胞上清外泌体、细胞内、癌与癌旁组织中的表达趋势与测序结果一致。miR-221-3p和miR-224-5p在HCC组外泌体中的表达水平显著高于Health组、CHB组和LC组(P0.01),miR-124-3p和let-7a-5p在HCC组外泌体中的表达水平显著低于其他各组(P0.05)。四个组中,miR-21-5p、miR-191-5p、miR-34a-5p和miR-122-5p的表达水平不存在显著性差异(P0.05)。结论:血清外泌体中的miR-221-3p、miR-224-5p、miR-124-3p和let-7a-5p可能成为肝细胞癌的候选标志物。     

肝细胞癌的微环境研究进展

越来越多的研究表明,肿瘤细胞与其周围微环境的交互作用是肿瘤发生、上皮间质转化、肿瘤浸润和转移的关键调节因素．肝细胞癌的微环境可以分为细胞组分和非细胞组分．主要的细胞组分包含：肝星形细胞、肿瘤相关的纤维母细胞、免疫细胞和肝窦内皮细胞等．非细胞组分包含：胞外基质蛋白、酶类、各种生长因子和炎症因子等．综述了近年来肝细胞癌的微环境研究进展,分别从细胞组分和非细胞组分及其之间的相互作用角度对肝细胞癌微环境作一介绍．     

抗人铁蛋白单克隆抗体的制备及其在肝癌病人血清铁蛋…

铁蛋白是一种肿瘤相关蛋白质,我们从人肝癌组织中分离纯化了铁蛋白,并筛选到一株抗该铁蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株（６Ｄ６）,它针对铁蛋白上的构象决定簇,并对人源铁蛋白高度专一。然后我们用此单抗建立了测定铁蛋白浓度的夹心ＥＬＩＳＡ法,并对方法的灵敏度,精确度及特异性作了研究。本法用于测定不同血清标本的结果表明：肝癌病人血清中的铁蛋白浓度明显高于正常人,这可能对临床诊断会有使用价值。     

DNA甲基化对癌睾丸抗原基因表达的调控及其意义

癌睾丸抗原所具有的表达特性和免疫原性使其有可能成为肿瘤免疫治疗的靶抗原,通过DNA去甲基化提高癌睾丸抗原基因的表达,是提高癌睾丸抗原疫苗疗效的途径之一。     

人体游离循环DNA的研究进展

游离循环DNA是一种细胞外游离状态的DNA, 在动植物及人的体液中都检测到了它的存在。对游离循环DNA的检测已经应用在疾病的监控、胎儿的产前诊断及肿瘤的研究中。文章介绍了循环DNA的生物学特征, 并对近年来游离循环DNA的研究和应用进展做了简单的回顾。     

三个鲫品系DNA含量的比较研究

采用流式细胞术 (FCM)对红鲫、彭泽鲫、异育银鲫进行红血球DNA含量的检测分析比较 ,以鉴定它们的倍性。结果显示 ,红鲫红血球的DNA含量是 3 0pg ,彭泽鲫是 4 7pg ,异育银鲫是 4 8pg。显而易见 ,彭泽鲫的DNA含量是二倍体红鲫的 1 57倍 ,异育银鲫的DNA含量是红鲫的 1 6倍。采用肾细胞直接制作染色体的方法进行红鲫、彭泽鲫、异育银鲫的染色体倍性鉴定 ,结果红鲫的染色体数目是 10 0 ,为二倍体 (2n =10 0 ) ,彭泽鲫的染色体数目是 162 ,为三倍体 (3n =162 ) ,异育银鲫的染色体数目是 156— 162 ,为三倍体 (3n =156— 162 )。研究证明 :不同品系鲫的DNA含量高低与染色体的倍性有显著的正相关性     

大鼠肝和BERH—2肝癌5Kb BamHI DNA片段的克隆及其转录研究

本文克隆了大鼠肝和肝癌BERH-2 DNA的分子大小约为5kb的BamHI片段(Bam5族重复顺序)。从筛选出的克隆中取一个来自肝癌细胞基因组DNA的克隆片段H5 B-1和来自肝细胞基因组DNA克隆片段L5 B-4做进一步分析研究。采用RNA点杂交法对L5 B-4DNA片段的转录产物在细胞核、质间分布的研究结果表明:L5 B-4 DNA片段转录产物在肝癌细胞的总核RNA,poly A~ 核RNA和poly A~-核RNA中的相对量,比正常肝细胞的相应RNA组分低;在肝癌细胞的总胞质RNA和多聚核蛋白体RNA中的相对量,则比正常肝细胞的相应RNA组分高;其转录产物在poly A~ 核RNA中的相对含量高于其他细胞RNA组分,几乎不存在于rRNA中。当用大鼠肝和肝癌总RNA进行RNA点杂交比较时其转录产物在肝癌细胞中的相对含量则高于正常肝。结果提示,L5 B-4 DNA片段的转录产物从细胞核向细胞质内转运,肝癌细胞明显高于正常肝细胞。以H5 B-1 DNA片段代替L5 B-4 DNA片段进行RNA点杂交,得近似的杂交放射自显影图谱。     

肝细胞癌患者自噬相关基因的预后作用

构建由自噬相关基因组成的预后模型,预测肝细胞癌(HCC)患者的生存预后情况,为其个性化诊疗和临床研究提供依据.利用TCGA数据库中HCC的测序信息与人类自噬数据库联合,筛选差异表达的自噬相关基因,对其进行GO富集与KEGG通路分析;通过单因素与多因素Cox分析筛选与患者生存预后明显相关的风险基因,构建预后风险评分模型;...     

患者发生肝细胞肝癌的有效预测

香港玛丽女王医院进行的研究显示,以慢性乙肝患者的性别、年龄、乙肝病毒（HBV）DNA水平、核启动子突变和肝硬化等为基础的评分系统（GAGHCC）,可有效预测患者5年和10年的肝细胞肝癌（HCC）发生危险。     

甲状腺肿瘤细胞核DNA含量测定对病理诊断的意义

应用真彩色医学图像分析技术, 对９０ 例甲状腺肿瘤（其中甲状腺腺瘤１０ 例, 不典型腺瘤１５ 例,乳头状腺癌２５ 例, 滤泡癌１５ 例, 髓样癌１５ 例, 未分化癌１０ 例） 细胞核ＤＮＡ含量进行了分析。结果显示,甲状腺腺瘤组与各型甲状腺癌比较均有显著性差异（Ｐ＜ ００１）,甲状腺腺瘤组同不典型腺瘤组比较无统计学意义（Ｐ＞ ００５）。甲状腺癌随组织分化程度的不同, ＤＮＡ 含量明显增加, 多为高倍异倍体细胞, ＤＮＡ直方图明显右移, 峰值主要位于≥５Ｃ处; 甲状腺腺瘤组ＤＮＡ含量较低, 多为低倍整倍体细胞, ＤＮＡ 直方图峰值位于２Ｃ－ ４Ｃ处; 不典型腺瘤组ＤＮＡ含量介于上述二者之间, ＤＮＡ 直方图逐渐右移。表明ＤＮＡ倍性程度与肿瘤的增殖程度呈正相关, 高倍异倍体细胞随肿瘤恶性程度的增高而增多。作者认为ＤＮＡ原位图像定量分析可为甲状腺肿瘤的诊断、分级及早期发现癌变趋势提供一个可靠的参考指标     

构建铜死亡相关LncRNA风险模型预测肝细胞癌的预后及分子特征

铜死亡是一种新的程序性细胞死亡途径,由铜与脂酰化三羧酸循环蛋白直接结合而启动。调节肿瘤细胞中的铜死亡是一种新的治疗方法。然而,铜死亡相关长链非编码RNA(LncRNA)在肝细胞癌(HCC)中的潜在作用和临床意义尚不明确。本研究基于TCGA-LIHC数据集对19个铜死亡相关基因进行共表达分析,共鉴定出994个铜死亡相关LncRNA。采用LASSO回归和多因素Cox回归分析筛选出4个与铜死亡相关的预后LncRNA(TMCC1-AS1、AC009974.2、AL355574.1和DDX11-AS1)构建预后风险模型,并计算所有HCC患者样本的风险评分。按1:1的比例将肝癌患者分为高风险组和低风险组。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,高风险组患者的总生存率(OS)明显低于低风险组。回归分析和ROC曲线证实了风险评分的预后价值。此外,本研究分析了风险评分与通路富集分析、免疫检查点基因、免疫细胞浸润、抗癌药物敏感性和体细胞基因突变之间的相关性。差异表达分析结果表明,TMCC1-AS1、AC009974.2、AL355574.1和DDX11-AS1在肿瘤组织中的表达均升高。最后,利用收集的8例行根治性手术肝癌患者的癌组织及癌旁肝组织进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证,以增加本模型的组织学证据。本研究构建了一个由4种铜死亡相关LncRNA组成的风险模型,该模型与患者的预后及免疫浸润环境明显相关,在预测患者免疫治疗效果及指导化疗药物选择方面具有一定的临床应用价值。     

microRNA-122与丙型肝炎病毒复制和肝细胞癌的相关研究进展

microRNA-122(miR-122)是一种肝脏特异性微小RNA,与丙型肝炎病毒(HCV)的复制和感染及肝细胞癌(HCC)的发生密切相关。近年来,科研人员关于miR-122的研究已取得了较大进展。在此,我们就miR-122与HCV复制和HCC的相关关系等方面的研究进展做简要综述。     

人肝细胞癌预后不良相关基因的生物信息学分析及其临床意义

目的:筛选肝细胞癌(HCC)预后不良相关基因,并探讨其临床意义。方法:在基因表达综合数据库(GEO)中获取符合分析条件的肝细胞癌全基因组表达谱数据并分析得到差异表达基因(DEGs),再运用生物学信息注释及可视化数据库 (DAVID) 和蛋白相互作用数据库 (String) 分别进行功能富集分析和蛋白质互作用网络的构建。利用癌症基因组图谱数据库(TCGA)和Cox比例风险回归模型对相关差异基因进行预后分析。结果:找到一个符合条件的人类HCC数据库 (GSE84402),共筛选出1141个差异表达基因(DEGs),其中上调基因720个,下调基因421个。基因功能富集分析和蛋白质互作用分析结果显示CDK1、CDC6、CCNA2、CHEK1、CENPE 、PIK3R1、RACGAP1、BIRC5、KIF11和CYP2B6为HCC预后的关键基因。TCGA数据库和Cox回归模型分析显示CDC6、PIK3R1、RACGAP1和KIF11的表达升高,CENPE的表达降低与HCC预后不良密切相关。结论:CDC6、CENPE、PIK3R1、RACGAP1和KIF11可能和HCC的预后不良相关,可作为未来HCC预后研究的参考标志物。     

角结膜缘上皮良、恶性病变细胞核DNA原位图像定量分析

应用真彩色医学图像分析技术,对５１例角结膜缘上皮良、恶性病变（其中上皮增生１９例,不典型增生６例,原位癌１４例,鳞状细胞癌１２例）进行了ＤＮＡ原位定量分析研究．结果显示：原位癌和鳞状细胞癌ＤＮＡ含量明显增加,多为高倍异倍体细胞,ＤＮＡ直方圆明显右移,峰值主要位于＞５Ｃ处,≥５Ｃ细胞分别占７８．８９％和７８．３１％;上度增生病变ＤＮＡ含量较低,多为低倍整倍体细胞,ＤＮＡ直方图峰值位于２Ｃ～４Ｃ处,２Ｃ～４Ｃ细胞占８８．５９％;上皮不典型增生病变ＤＮＡ含量介于良性病变和癌之间,ＤＮＡ直方图逐渐右移,２Ｃ～４Ｃ细胞占５８．６２％,≥５Ｃ细胞占４１．３８％。以上数据经统计学处理各组间有显著性差异。表明ＤＮＡ倍性程度与肿瘤的增殖程度呈正相关,高倍异倍体细胞随肿瘤恶性程度的增高而增多。作者认为ＤＮＡ原位图像定量分析可为角结膜缘上皮良、恶性病变的诊断、分级及早期发现癌变趋势提供一个可靠的参考指标。