共查询到20条相似文献，搜索用时 187 毫秒
1.
《生物技术通报》1992,(10)
923585 连续培养酿酒酵母中热带假丝酵母细胞色素P45O alk基因表达的优化〔英刀Beretta,1.一了Ap- p 1 .Microbiol.Bioteehnol一1991,56(i) 一45一60〔译自DBA.2992,12(7),92一03614〕 在乙醇脱氢酶一I(ADHI)启动子U邑控下,在 His及Le。缺陷型酿酒酵母中表达了热带假丝酵母 细胞色素P450基因(P450a恢)。为长期稳定表 达,选用复制型质粒pDS509~6(由2一声m衍生而 来)及整合型质粒pIBI(二者均含有P450alk表达 盒)对酿酒酵母进行转化。在连续培养中,高稀释 率和高His浓度有利于质粒稳定性。不稳定很可能是因为pDS509一6与酵母染色体… 相似文献
2.
《生物技术通报》1992,(4)
821276大肠杆菌户葡枪普酸酶甚因作为鉴定酵母菌株的标记〔英〕/petering,J……了Am.J。Enol.Vitie一1991,42(i)一6一11〔译自DBA,1991,10(18),91一10239二 大肠杆菌介葡糖普酸酶(GUS)uidA基因(分离自质粒pKLG4的HindIH片段)经改造,即在其编码序列上连接酿酒酵母乙醇脱氢酶启动子和终止子序列,构成pAW220新质粒,用于在酵母中的表达。pAW220在转化酿酒酵母3A时,可整合至第13染色体的ILVZ基因中。筛选抗性除草剂甲基化Sulfometuron(10产g/ml)的转化株。用Southern杂交法筛选转化株中在ILVZ基因内含有GUS者(3 AM)。3 AM培养于1… 相似文献
3.
《生物技术通报》1992,(4)
921244导人架凝甚因FLOI培育酿酒醉母工业架凝菌株〔英〕/Watari,J.…子Agrie.Biol.Chem一1991,55(6)一15透7~1552〔译自DBA,1991,10(18),91一10238〕 以前的文章己介绍了FLOI在酿酒酵母中的克隆。现己证明含此基因的质粒整合在酵母第一染色体上。克隆于YCp型质粒(单拷贝的YCp HF19)的絮凝基因,其功能在MATa/MAT一2细胞中大大减弱,表明MAT对推测的FLOI基因的表达有抑制作用。将含有该片段的YRp型质粒(多拷贝的YRp GLF14)克隆到几种非絮凝工业酿酒酵母,包括底层、顶层发醉型菌株以及酿造威士忌、葡萄酒、日本烧酒等的醉母菌… 相似文献
4.
《生物技术通报》1992,(10)
923619乙型肝炎表面抗原在乳酸克会维醉母中的克隆和表达〔英〕/Martinez,E.…2 Bioteehnol.Lett一1092,14(2)。一53~56〔译自DBA,1992,11 (7),92一03754〕 为了用乳酸克鲁维酵母生产乙肝病毒表面抗原,构建了含lac4基因启动子(来自质粒BSLAC4)、表面抗原基因(来自质粒pHBI)、LAC4终止区及其后的URA3基因(来自酿酒酵母)和LAC4基因的3‘非编码区(来自质粒pJAAS12)的质粒pDLHZ。用含表达盒区的pDLHZ转化乳酸克鲁维酵母VDI,转化子于1%酵母粉、2%蛋白膝和2%葡萄糖的培界基中进行摇瓶培养(21摇瓶装40001培养基,于50℃、25orPm培养… 相似文献
5.
《生物技术通报》1992,(3)
920836用盆组聚合酶链反应构建小砚全长血型.蛋白签因〔英〕/Gu,H.一厂B ioehe皿.Biophys.Res.Commun一1991,177(i)一202~208〔译自})BA,1991,10(15),91一08450〕 分别从贫血小鼠脾基因库(质粒pBR322)和小鼠基因库(质粒pUC18)中分出小鼠血型搪蛋自一A基因不完全cDNA克隆(质粒pGP315)和基因组克隆(质粒pGX7,含第一个外显子和转录起始位点附近的序列),并定序。由于缺乏构建小鼠全长血型糖蛋白一A基因的限制位点,用聚合酶链反应拼接这两部分序列克隆擂人的成分,获得全长的重组DNA片段(IO53bp,含小鼠血型糖蛋白A eDNA)。用5种DNA… 相似文献
6.
《生物技术通报》1992,(2)
920410可在蓝燕株系PCC7120中分析启动子的载体〔英〕/Tang,J.D.…了J.Baeteriol一1901,i了3 (s)一2729~2731〔译自DBA,1991,10(12),91一06654〕 构建了启动子探测载体pJL3,它含有一个多克隆位点、cat基因(不带启动子)以及转录终止子。经接合将其从大肠杆菌转移至Aoaba‘。a“P.PCC7iZo中。新质粒的成分来源于:质粒pRL25C (含大肠杆菌和兰藻复制子)、新霉素杭性标记、bom接合转移区、质粒pDUI(从丝态兰细菌分离到)以及pBR322的序列。描述了该载体质粒的详细构建过程。Aoaba。:a psbB基因编码光合系统n中的一种分子量47000的叶绿… 相似文献
7.
《生物技术通报》1992,(5)
921940大鼠生长激紊基因微注射到斑马鱼卵里以生产转基因斑马鱼〔英〕/Pandian,T.J.…泌Curr.Sei一1991,60一9~10〔译自DBA,1991,10(22),91一13024〕 将质粒pMGH(15ng DNA/时)(含有与大鼠生长激素基因融合的小鼠金属硫因启动子)微注射到斑马鱼尚未分裂的受精卵(1266个)里。注射一天后胚胎平均存活率为46%,但变动范围为16~72%。利用标记质粒作探针通过Slot一blot和Sou-thern印迹杂交分析了从推定转基因鱼提取出的基因组DNA。杂交图谱显示发生了基因组、染色体外、以及嵌合整合。继续存在于Fl和FZ代里的染色体外DNA浓度逐步降低。F… 相似文献
8.
《生物技术通报》1992,(8)
922949在特定杆状病毒表达系统中生产具生物学活性的跳胺化eeeropin〔英〕/Andersons,H.…2 Bioe-liem.J一1091,250,Pt.1一219~224〔译自DB-A,1992,11(3),92一01388〕 构建了表达质粒pVL941一22一ceoA,其中含有:组织血纤维蛋白溶酶原激活子(t一PA)的信号肤、从金黄色葡萄球菌蛋白一A(22)衍生的合成性抗体结合部分、编码cecropin一A天然部分的合成片段(附加C末端甘氨酸密码子)。将此融合基因转入首着银纹夜蛾核多角体病毒载体基因组,再用重组病毒感染草地贪夜蛾Sfg细胞。对从细胞培养基获取的蛋白进行SDS一PAGE和blotting检测。采… 相似文献
9.
《生物技术通报》1992,(6)
922017含诱变白喉毒素A一链编码序列质一粒的构建和农达〔英」/F isher,K.S。…了Infeet.Immun一x991,69(20)一3562~3565〔译自DBA,1991,10(23),91一13322〕 用编码白喉棒杆菌(Co,鱿,e乙acte,￡“仍‘￡-尹hth。川““)白喉毒素一A链片段(DT一A)转染可杀死细胞。构建了含3种突变DT一A编码序列(用Asp、Ser或Gln置换Glu一145)的表达载体。突变毒素的体外ADP核糖基化活性降低到1/100~1/300。在用含虫荧光素酶报道基因质粒的HeLa和293细胞进行的共转染实验中测定了这些构建物的毒性。比较了3种新的DT一A突变质粒和含野生型DT一A的… 相似文献
10.
《生物技术通报》1992,(3)
921182生物降解的遗传学仁英叮B oon她,A .M.了ActaB ioteehnol一1991,11(2)一177一151〔译自DBA,1991,10(25),91一09011〕 积累适用于微生物降解的质粒和遗传系统的数据有助于设计具新降解特性的微生物。分离或构建高效降解菌株需进行以下步骤:1.突变与筛选,如构建利用2,4,6一T的假单胞菌(Pseodo”o”assp.)菌株,11.活体基因操作,如构建带质粒的假单胞菌控制脂肪族(质粒OCT)、环状(质粒CAM)和多环芳香(质粒NAH)碳水化物的降解,该菌株能利用石油、汽油和润滑油,构建降解4一氯苯甲酸的假单胞菌,111.体外基因工程,如将水杨酸经化酶基… 相似文献
11.
《生物技术通报》1992,(4)
921368由变铅资链娜菌分泌抗生蛋白链菌素〔俄〕/Bol。-tin,A.P.…1 Antibiot.Khimioter一1091,36(6)一s~12[译自DBA,i。。1,10(25),91一10410〕 构建T一种bireplieon载体质粒pVGi4o,其中含有编码dagA基因信号肤的表达单位。将质粒pAPS中的阿维T链霉菌(“,e尹￡o仍犷eesa”￡d‘-耐落、抗生蛋白链菌素基因克隆到质粒pVG140上,获得重组质粒p VG141和pVG142。用它们转化变铅青链霉菌(5.1畜公落da.‘)Tk64,以硫链丝菌肤抗性为基础,选择含有质粒的克隆。重组菌株能够分泌抗生蛋白链菌素。检测了培养基成分和碳源对该抗生素的影响。5.1… 相似文献
12.
《生物技术通报》1994,(1)
940312稳定转化的植物细胞中骨架连接区增强报道基因表达〔英〕/Allen,G.C.…/Plant Cell一1993,5(6)一603~613〔译自DBA,1993,12(17),93一09903〕 酿酒酵母自主复制片段ARS一1含有一个能离体与植物核骨架结合的骨架连接区(S AR)。为了试验对基因表达的效应,将一个位于该片段侧翼的、在CaMV 355启动子调控下的,GUS基因的构建物通过微轰击转送到烟草NT一1悬浮细胞中。在稳定转化的细胞系中,含两个侧翼SAR构建物的GUS活性比缺少SAR的对照平均高12倍。表达水平不与基因拷贝数成比例。而在某些含多基因拷贝的转化体中,该片段似乎是… 相似文献
13.
14.
《生物技术通报》1992,(1)
920009构睡能在AmyeolatoPsis mediterranei中盆御的杂交质较〔英〕/Lal,R.…/ApPI.Environ.Mierobiol一2991,57(3)一665~671[译自DBA,1991,10(9),91一94832〕 从A.仍e“‘e,,“。e‘DSM43387中分离到质粒pA387(29.6kb)。经原生质体化、澳乙咤或热处理可低频消除该质粒。该质粒属游离型,不整合到染色体中。将一个5.Ikb的pA38了片段擂人大肠杆菌载体质粒pDM10中,构建成杂交质粒pRLI。该质粒可被电激转化至A.仍。J“e,,a。。云及A。o,亏e:‘a乙妞s中。对前者,用i2.skV/em、10。6也sec条件,转化频率为22。。/拼9 DNA;对后者,用7.s… 相似文献
15.
《生物技术通报》1992,(8)
922825使用诬式亲和融合法从大肠杆菌中经蛋白水解得到的盆组蛋白的祖定性〔英〕/Murby,M.…,Bi-oteehnol.Appl.Bioehe。一二1991,14(3)一336~346〔译自DBA,1992,11(s),92一0122‘]一31一本技术包括:构建一些融合基因,‘已们编码一些目标蛋白,如人的原胰岛素(Pl)、大鼠蛋白-二硫化物异构酶(PDI)硫氧还蛋白同源区1等 (即蛋白A的IgG一结合蛋白(22)和蛋白G的白蛋白结合区(BB)间的融合),在IgG一Sephar-ose上纯化。对ZZPI(质粒pRIT37)和ZZPIBB (质粒pRIT38)进行SDS一PAGE和Western印迹揭示,产生的Pl在体内是稳定的。从大肠杆… 相似文献
16.
《生物技术通报》1992,(4)
921209噬菌体T7第10基因翻译增强子(TREN)的化学-酶促合成及其构件的功能〔俄〕/Gureyich,A.1.…1 Bioorg.khim一1991,17(5)一e47~652〔译自DBA,1991,10(18),91一10247〕 为了这种分析,通过化学一酶促合成法制备了TREN完整序列及其近端和远端序列。用Bam Hl和E。。Rl二种限制酶将合成序列克隆到多拷贝质粒pFPC10中。获得的新质粒用千检测TREN近端区增强翻译的能力。编码人白细胞介素一3的人工基因(克隆于pFPC10中,不含TREN的一部分)在大肠杆菌中的表达很低。引入完整的TREN序列,使人白细胞介素一3的产量大大升高。取代pTE3 … 相似文献
17.
《生物技术通报》1992,(11)
924009异源基因在牛分枝杆菌BCG中的表达:抗HIV一1Nef蛋白细饱反应的诱导〔英〕/Winter,N.…了Geue一1991,109(i)一47~54〔译自DBA,1992,11(8),92一04359〕 为了用牛分枝杆菌菌株BCG作保护性抗原载体,将编码Nef蛋白的H工V一病毒一1基因克隆于大肠杆菌一分枝杆菌穿梭载体(质粒pRR3)几中并导人BCG。质粒pRR3含一个在分枝杆菌中复制和保留必需的质粒pALSOo。片段、转座子Tn 903卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制原。n“f_基因在含白色链霉菌(St,epto哪歹ees albos)groES/groELi操纵子的启动子和合成核糖体结合位点的DNA表达框架(… 相似文献
18.
《生物技术通报》1992,(5)
921826用细菌。pd蕃因转化生防真菌绿枯.母〔会,英万/Supak,J.…了Abstr.Gen.Meet.A皿.Soe。Mierobiol一i。。i,91 Meet。一201〔译自DBA,1991,10(21),91一12211〕 向生防因子绿粘帚菌(GI￡oelad￡。二v￡,e:s)Gul中导入对硫磷水解酶。pd基因。质粒pWM513在1.3kb Pstl片段上含opd基因。将此擂入物克隆到含8碱基单链受体AGCTTGCA的质粒pHIS的Hind皿位点上。产生4种质粒,即以每种取向擂人1或2个基因拷贝。借助PEG法用这些质粒转化绿粘帚霉原生质体。利用新的质粒微制备法分析了134个推测的转化体。用SOuthern印迹杂交证实载体序… 相似文献
19.
20.
《生物技术通报》1992,(9)
92引47抗杀稻疽菌素一S的大肠杆菌TK121的杀稻瘟菌素一S一脱氨酶N末端氨基酸序列以及bsr基因的核普酸序列〔英〕/Kobayashi,K.…了Agrie.Biol.Chem一1991,55(12)。一3155~3157〔译自DBA,1992,11(5),92一02402〕 分离到抗杀稻瘟菌素一S(BS)的蜡状芽抱杆菌K55一51菌株,并分离到BS脱氢酶(BSD)。构建了含有BSD基因(bsr)的质粒pBSRs(10.5kb)。将其再克隆到枯草杆菌及大肠杆菌TK121中,已将bsr基因定位于pTK17中的一个1。5 kbEcoRI一BamHI片段上(内含一个单一的Bglll位点)。用M13链终止法测定DNA序列,在测定的Nde工一Hincn片段中… 相似文献