达格列净对糖尿病合并心肌缺血大鼠心肌细胞能量代谢及血液流变学的作用研究

摘要 目的：探讨达格列净对糖尿病合并心肌缺血大鼠心肌细胞能量代谢及血液流变学的作用研究。方法：2型糖尿病雌性Goto-Kakizaki大鼠根据实验要求分为三组：对照组,心肌缺血组和达格列净组。通过右颈总动脉血流动力学系统评估大鼠SBP、MAP和DBP;LabScribe 2软件操作的记录系统监测大鼠的心脏收缩舒张功能;TTC染色和组织学分别检测大鼠的心肌梗塞面积百分比和心肌损伤评分;TUNEL测定法测定大鼠心肌细胞凋亡;测定试剂盒和荧光追踪检测大鼠心肌中的ATP含量、ADP / ATP比率、线粒体膜电位MMP;蛋白印迹分析线粒体裂解融合因子线粒体蛋白2（Mitochondrial protein 2,MFN2）,视神经萎缩1（Optic nerve atrophy 1,OPA1）和动力蛋白相关的蛋白1（Dynein-related protein 1,DRP1）的蛋白表达;RT-PCR分析大鼠心肌细胞中能量代谢相关因子PGC1-α和CPT-1的转录。结果：心肌缺血组较对照组的SBP、MAP升高（P<0.05）,达格列净组较心肌缺血组降低（P<0.05）,与对照组相比,心肌缺血组和达格列净组的DBP比较无差异（P>0.05）。心肌缺血组较对照组LVEF降低（P<0.05）,LVIDs、LVPWs和LVPWd升高（P<0.05）,达格列净组较心肌缺血组的LVEF升高（P<0.05）,LVIDs、LVPWs和LVPWd降低（P<0.05）。心肌缺血组较对照组的梗塞面积占比和组织损伤评分升高（P<0.05）,达格列净组较心肌缺血组梗塞面积、组织损伤评分降低（P<0.05）。与对照组相比,心肌缺血组TUNEL阳性细胞数量增多（P<0.05）。此外,与心肌缺血组相比,达格列净组的TUNEL阳性细胞数量降低（P<0.05）。线粒体膜电位MMP。心肌缺血组较对照组的ATP含量和MMP降低（P<0.05）,ADP / ATP比率升高（P<0.05）,达格列净组较心肌缺血组ATP含量和MMP升高（P<0.05）,ADP / ATP比率降低（P<0.05）。心肌缺血组较对照组MFN2和OPA1的蛋白表达降低（P<0.05）,DRP1蛋白表达升高（P<0.05）,达格列净组较心肌缺血组MFN2和OPA1的蛋白表达升高（P<0.05）,DRP1蛋白表达降低（P<0.05）。心肌缺血组较对照组PGC1-α和CPT-1的mRNA表达降低（P<0.05）,达格列净组较心肌缺血组PGC1-α和CPT-1的mRNA表达升高（P<0.05）。结论：达格列净给药可减糖尿病合并心肌缺血大鼠的心肌梗死面积,增强心室功能和心肌细胞能量代谢,发挥心脏保护作用。     

达格列净对高血压小鼠小动脉重构的影响及机制

摘要 目的：探究钠葡萄糖共转运蛋白2抑制剂（达格列净）对高血压小鼠小动脉重构的影响及机制。方法：30只12周龄的C57BL / 6雄性小鼠纳入本研究,根据实验目的将实验小鼠分为对照组、模型组和达格列净组。检测并比较各组小鼠心脏肥大、心脏纤维化、动脉重塑、炎症因子mRNA表达、PI3K和Akt蛋白质表达以及细胞活力和细胞迁移。结果：与对照组相比,模型组收缩压和心脏/体重增加（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组收缩压和心脏/体重降低（P<0.05）。与对照组相比,模型组RV/（LV+S）和得分增加（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组RV/（LV+S）和得分降低（P<0.05）。与对照组相比,模型组显示血管壁增厚,透明质改变,脑小动脉管腔狭窄或闭塞（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组降低高血压引起的小动脉重塑（P<0.05）。与对照组相比,模型组IL-1β,IL-6和TNF-α的mRNA表达水平增加（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组IL-1β,IL-6和TNF-α的mRNA表达水平降低（P<0.05）。与对照组相比,模型组PI3K和Akt蛋白质表达水平增加（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组PI3K和Akt蛋白质表达水平降低（P<0.05）。与对照组相比,模型组VEZF1,Angpt-1和IGF1表达水平降低（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组VEZF1,Angpt-1和IGF1表达水平增加（P<0.05）。与对照组相比,模型组细胞活力和细胞迁移降低（P<0.05）。与模型组相比,达格列净组细胞活力和细胞迁移增加（P<0.05）。结论：达格列净通过抑制PI3K / Akt信号通路,降低炎症反应,增加血管生成能力,降低高血压小鼠小动脉重构。     

从干预SIRT1表达探究急性应激影响糖尿病小鼠葡萄糖代谢和脂肪代谢的机制

摘要 目的：从干预组蛋白去乙酰化酶（Sirtuin1, SIRT1）表达探究急性应激影响糖尿病小鼠葡萄糖代谢和脂肪代谢的机制。方法：以30只C57BL/6小鼠为研究对象,通过高脂饮食和链脲佐菌素腹腔注射诱导的T2DM 模型小鼠,然后随机分为对照组（正常小鼠+柠檬酸盐缓冲液灌胃）、糖尿病组（糖尿病小鼠+柠檬酸盐缓冲液注射）和SIRT1干预组（糖尿病小鼠+SRT1720的载体缓冲液灌胃）。通过血糖仪和胰岛素ELISA试剂盒分别检测小鼠空腹血糖、胰岛素水平。使用血液化学自动分析仪检测小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白（LDL）-胆固醇和高密度脂蛋白（HDL）-胆固醇水平。收集小鼠白色脂肪组织冲洗并称重比较。通过RT-PCR分析脂肪生成转录因子PPARγ和SREBP-1c、脂肪酸合成因子Fas和Ap2、脂肪酸分解因子Hsl的mRNA表达。通过蛋白印迹分析AMPK-SIRT1-PGC-1通路蛋白的表达。结果：糖尿病组较对照组空腹血糖、胰岛素水平升高（P<0.05）,SIRT1干预组较糖尿病组空腹血糖、胰岛素水平降低（P<0.05）。糖尿病组较对照组血清甘油三酯、总胆固醇、HDL-胆固醇和LDL-胆固醇升高（P<0.05）。糖尿病组较对照组附睾、腹膜后、肠系膜和腹股沟脂肪的重量升高（P<0.05）,SIRT1干预组较糖尿病组的白色脂肪重量降低（P<0.05）。SIRT1干预组较糖尿病组降低（P<0.05）。糖尿病组较对照组的血糖水平在30、60和120分钟时升高（P<0.05）,SIRT1干预组较糖尿病组各时间点血糖水平降低（P<0.05）。糖尿病组较对照组PPARγ、SREBP-1c、Fas、Ap2的mRNA表达升高（P<0.05）,HslmRNA降低（P<0.05）,SIRT1干预组较糖尿病PPARγ、SREBP-1c、Fas、Ap2的mRNA表达升高,HslmRNA降低（P<0.05）。糖尿病组较对照磷酸化AMPK、SIRT1和PGC-1的表达降低（P<0.05）,SIRT1干预组较糖尿病组磷酸化AMPK、SIRT1和PGC-1的表达升高（P<0.05）。结论：调控SIRT1高表达可激活糖尿病小鼠AMPK/PGC-1α 信号通路,同时促进脂肪分解和抑制脂肪合成而表现出抗肥胖作用。     

达格列净抑制2型糖尿病小鼠心血管及肾脏并发症的研究

摘要 目的：探讨达格列净对2型糖尿病小鼠心、肾的保护作用。方法：选取24只6周龄的雄性2型糖尿病模型(C57BLKS/J-leprdb/leprdb, db/db)小鼠,随机等分成达格列净投药组和对照组,另选取同周龄雄性非糖尿病的(C57BLKS/J-leprdb/+, db/m)小鼠12只作为正常组。检测小鼠血糖后,从第7周开始对投药组小鼠进行为期10周的达格列净用药,其余小鼠给予同等计量生理盐水,期间定期监测血糖、血压、尿糖以及各项代谢相关指标。投药结束后分离心脏及肾脏组织,组织切片进行染色观察。结果：与对照组相比,投药组达格列净用药后第1周血糖值显著降低(P < 0.01),用药9周后糖耐量测试结果显示血糖值几乎接近正常小鼠组水平,但各组间血压值无明显差异,心肌间质纤维化、炎性细胞浸润、氧化应激水平明显下降,同时肾小球硬化、炎性细胞浸润和氧化应激程度明显得到改善。结论：达格列净用药不仅能显著降低2型糖尿病模型小鼠血糖,还能有效抑制糖尿病引起的心血管及肾损害。     

达格列净联合利拉鲁肽对肥胖型T2DM患者的血糖控制、胰岛素功能的影响及安全性分析

摘要 目的：探究达格列净联合利拉鲁肽对肥胖型2型糖尿病（T2DM）患者的血糖控制、胰岛素功能的影响及安全性分析。方法：将106例肥胖型T2DM患者按照治疗方法分为两组：联合组患者采用达格列净联合利拉鲁肽治疗（55例）、对照组采用利拉鲁肽治疗（51例）。记录对比两组治疗疗效、不良反应发生情况。检测两组治疗前后血脂代谢指标[脂联素(APN)、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG)]、胰岛素功能指标[稳态胰岛 β 细胞分泌功能指数（HOMA-β）、胰岛素评价指数（HOMA-IR）]、血压[收缩压（SBP）、舒张压（DBP）]以及身体质量指数（BMI）变化。结果：联合组治疗总有效率高于对照组（P＜0.05）,不良反应总发生率高于对照组（P＜0.05）。治疗后,观察组外周血TC、TG水平、HOMA-IR以及SBP、DBP低于对照组（P＜0.05）,APN浓度、HOMA-IR以及BMI高于对照组（P＜0.05）。结论：达格列净联合利拉鲁肽可有效控制肥胖型T2DM患者的血糖、血脂以及血压水平,保护胰岛功能,但也可能导致更多的不良反应。     

小鼠缺血性脑损伤模型急性期海马SIRT3与自噬相关蛋白表达水平的相关性分析

摘要 目的：观察小鼠缺血性脑损伤模型急性期海马区域沉默信息因子3(SIRT3)和自噬相关蛋白的表达,并探讨两者的相关性。方法：选择C57BL/6J小鼠,采用大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立缺血性脑损伤模型,并将小鼠随机分为假手术组(sham)和模型组(MCAO)。缺血性脑损伤急性期(6h),采用间接免疫荧光法观察小鼠海马CA1、CA3和DG区域SIRT3的表达,应用蛋白印迹法检测SIRT3、自噬相关蛋白LC3 I/II和Beclin-1的表达,而后用Spearman相关性分析明确SIRT3和LC3-II、Beclin-1表达的相关性。结果：海马各区域SIRT3阳性细胞数量在损伤后明显增多(P<0.05),且SIRT3蛋白表达也相对上调(P<0.05);损伤后自噬相关蛋白LC3-II和Beclin-1表达亦增高(P<0.05);Spearman相关性分析发现SIRT3与自噬相关蛋白LC3-II、Beclin-1表达均呈显著正相关(P<0.05)。结论：小鼠缺血性脑损伤模型急性期海马区域SIRT3和自噬相关蛋白的表达具有显著相关性,SIRT3对海马区域自噬的调节可能有重要作用。     

利拉鲁肽联合达格列净对超重或肥胖2型糖尿病患者肾功能、氧化应激以及内脏脂肪含量的影响

摘要 目的：探讨利拉鲁肽联合达格列净对超重或肥胖2型糖尿病（T2DM）患者肾功能、氧化应激以及内脏脂肪含量的影响。方法：选取我院于2018年1月~2020年5月期间接收的108例超重或肥胖T2DM患者,按照随机数字表法分为对照组（n=54）和观察组（n=54）。对照组给予利拉鲁肽治疗,观察组给予利拉鲁肽联合达格列净治疗,均治疗12周。对比两组肾功能[血胱抑素 C（CysC）、血肌酐（Scr）、血尿酸（SUA）]、氧化应激[丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）]、体质量指数（BMI）、腰围、血糖指标[空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2hPBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）]以及体成分指标（全身脂肪百分比、内脏脂肪含量）,记录两组治疗期间不良反应情况。结果：两组治疗后BMI、腰围、2hPBG、FBG、HbA1c均下降,且观察组较对照组低（P<0.05）。两组治疗后MDA均下降,且观察组较对照组低（P<0.05）,两组治疗后SOD、GSH-PX均升高,且观察组较对照组高（P<0.05）。两组治疗后全身脂肪百分比、内脏脂肪含量均下降,且观察组较对照组低（P<0.05）。两组治疗前后CysC、Scr、SUA组内及组间对比均无统计学差异（P>0.05）。两组不良反应发生率对比无统计学差异（P>0.05）。结论：超重或肥胖T2DM患者利拉鲁肽治疗基础上联合达格列净,降糖效果确切,减轻机体氧化应激,降低内脏脂肪含量,对肾功能无显著影响,且不增加不良反应发生率。     

褪黑素通过改善神经元树突棘可塑性在瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏机制中的作用

摘要 目的：探究褪黑素通过改善神经元树突棘可塑性在瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏机制中的作用。方法：30只8~10周龄的SD大鼠（175~200 g）,根据研究目的随机分为三组：对照组（（大鼠足底进行切口手术,生理盐水处理,n=10）,模型组（大鼠足底进行切口手术,静脉滴注瑞芬太尼,n=10）,治疗组（在模型组的基础上行褪黑素处理,n=10）。通过机械诱发痛和热缩足检测不同组处理后2 h、2 d、3 d和7 d大鼠的爪缩回阈值,通过RT-qPCR分析大鼠中IL-1、TNF-α和IL-1β的mRNA表达,通过蛋白印迹检测大鼠体内AMPA和Kalirin-7的蛋白表达,通过观察组织切片比较不同组大鼠的脊柱密度和长度,通过低感光电荷耦合设备的摄像头监视器分析单个神经元的电生理。结果：在第2 h、2 d、3 d和7 d的测试中,相比于对照组,模型组痛缩足阈降低（P<0.05）,热缩足潜伏时间缩短（P<0.05）,IL-1、TNF-α、IL-1β的mRNA表达、AMPA和Kalirin-7的蛋白表达均升高（P<0.05）,脊柱密度、脊柱长度升高（P<0.05）,电流幅度升高（P<0.05）,电流间隔降低（P<0.05）。治疗组较模型组的痛缩足阈升高（P<0.05）,热缩足潜伏时间延长（P<0.05）,IL-1、TNF-α和IL-1β的mRNA表达、AMPA和Kalirin-7的蛋白表达均降低（P<0.05）,脊柱密度、脊柱长度降低（P<0.05）,电流幅度降低（P<0.05）,电流间隔升高（P<0.05）。结论：褪黑素通过抑制AMPA和Kalirin-7的蛋白表达改善神经元树突棘可塑性,从而降低瑞芬太尼诱发的大鼠痛觉过敏。     

丁酸钠通过调节SIRT1/AMPK信号通路对慢性肾衰竭大鼠肾功能的影响

摘要 目的：探讨丁酸钠（NaB）通过调节沉默信息调节因子1（SIRT1）/单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）信号通路对慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾功能的影响。方法：选用SD大鼠72只,随机分为6组（12只/组）：control组、Model组、NaB低剂量组（100 mg/kg）、NaB中剂量组（200 mg/kg）、NaB高剂量组（400 mg/kg）、抑制剂组（400 mg/kg NaB+2 mg/kg SIRT1/AMPK通路抑制剂EX527）;采用饲喂0.5%腺嘌呤饲料以建立CRF大鼠模型,建模成功后,灌胃和腹腔注射相应药物。使用试剂盒检测大鼠24 h尿蛋白（24 h U-pro）、血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平;采用苏木精-伊红（HE）及Masson染色法观察肾脏病理改变,并计算胶原容积分数（CVF）;采用茜素红染色法与主动脉钙含量测定评估主动脉钙化情况;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠肾脏组织白细胞介素（IL）-6、IL-β、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平;采用过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）检测试剂盒检测大鼠肾脏组织中CAT、MDA、ROS水平;采用蛋白免疫印迹法（WB）检测各组大鼠SIRT1/AMPK信号通路及骨形态发生蛋白2（BMP2）、Runt相关转录因子2（Runx2）蛋白的表达。结果：与control组比较,Model组大鼠肾脏组织损伤严重、胶原纤维沉积显著、主动脉钙化严重,CAT活性、SIRT1、p-AMPK/AMPK表达水平显著降低（P<0.05）,CVF、主动脉钙含量和SCr、BUN、24 h U-pro、IL-6、IL-β、TNF-α、MDA、ROS水平及BMP2、Runx2蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;与Model组比较,NaB低、中、高剂量组大鼠肾脏组织损伤减轻、胶原纤维沉积面积明显减少、主动脉钙化程度减轻,CVF、主动脉钙含量和SCr、BUN、24 h U-pro、IL-6、IL-β、TNF-α、MDA、ROS水平及BMP2、Runx2蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,CAT活性、SIRT1、p-AMPK/AMPK表达水平显著升高（P<0.05）;SIRT1/AMPK通路抑制剂EX527可降低高剂量NaB对CRF大鼠主动脉钙化和肾功能的改善作用（P<0.05）。结论：NaB可能通过激活SIRT1/AMPK信号通路,减轻肾脏组织炎症、氧化应激损伤、主动脉钙化和肾纤维化,从而起到改善CRF大鼠肾功能的作用。     

KGF联合HIF-1α对BECN1敲除IEC-6细胞缺氧的保护作用及机制

摘要 目的：探讨KGF联合HIF-1α对BECN1敲除后的IEC-6细胞在缺氧应激状态下的保护作用及相关机制。方法：构建敲除BECN1基因的稳定细胞系IEC-6B-细胞,分为空白对照组（BC）、阴性对照组（NC）、HIF-1α组、KGF联合HIF-1α组（KH）。观察细胞形态学改变。检测细胞存活率、ATP含量、细胞周期和细胞凋亡率。检测自噬相关基因表达水平和凋亡、自噬相关蛋白的表达。结果：低氧处理24 h后,各组细胞可见梭形、星形及其它异常形态变化;NC组细胞胞质内可见大量大小不一的吞噬溶酶体泡;其他各组细胞呈现细胞早期凋亡形态变化,BC组和KH组细胞胞质中可见自噬泡。与BC组相比较,各敲除组细胞存活率均显著降低（P<0.01）,其中KH组细胞存活率高于NC组、KGF组及HIF-1α组（P<0.05）。BC组细胞内ATP含量均显著高于其他各组（P<0.05）。与BC组和KH组比较,其他三组细胞G0/G1期百分比显著增加,细胞凋亡率均显著增加（P<0.05）。与BC组相比较,其余各组细胞自噬基因BECN1、SQSTM1及LC3基因mRNA表达均显著降低（P<0.05）;Beclin 1蛋白及LC3 II/LC3 I的比值均显著降低（P<0.05）,且p62蛋白表达显著增加（P<0.05）。KH组的Bax/Bcl-2的比值、Caspase3蛋白表达低于NC组（P<0.05）。结论：KGF联合HIF-1α能促进细胞增殖、增强细胞能量代谢、减少G₀/G₁期阻滞细胞率、抑制细胞凋亡作用,对低氧应激的IEC-6B-细胞具有保护作用。     

Recent advances in the study of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus replication and pathogenesis

It has now been over twenty years since a novel herpesviral genome was identified in Kaposi's sarcoma biopsies. Since then, the cumulative research effort by molecular biologists, virologists, clinicians, and epidemiologists alike has led to the extensive characterization of this tumor virus, Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus(KSHV; also known as human herpesvirus 8(HHV-8)), and its associated diseases. Here we review the current knowledge of KSHV biology and pathogenesis, with a particular emphasis on new and exciting advances in the field of epigenetics. We also discuss the development and practicality of various cell culture and animal model systems to study KSHV replication and pathogenesis.     

The structure, reproduction and taxonomy of Vidalia and Osmundaria (Rhodophyta, Rhodomelaceae)

Comprises species occurring mostly in subtidal habitats in tropical, subtropical and warm-temperate areas of the world. An analysis of the type species, V. spiralis (Sonder) Lamouroux ex J. Agardh, a species from Australia, establishes basic characters for distinguishing species in the genus. These characters are (1) branching patterns of thalli, (2) flat blades that may be spiralled on their axis, (3) width of the blade, (4) primary or secondary derivation of sterile and fertile branchlets and (5) position of sterile and fertile branchlets on the thalli. Application of the latter two characters provides an important basic method for separation of species into three major groups. Osmundaria , a genus known only in southern Australia, was studied in relation to Vidalia , and its separation from the Vidalia assemblage is not accepted. Species of Vidalia therefore are transferred to the older genus name, Osmundaria. Two new species, Osmundaria papenfussii and Osmundaria oliveae are described from Natal. Confusion in the usage of the epithet, Vidalia fimbriala Brown ex Turner has been clarified, and Vidalia gregaria Falkenberg, described as an epiphyte on Osmundaria pro/ifera Lamouroux, is revealed to be young branches of the host, Osmundaria prolifera.     

New or rare chromosome counts in Artemisia L. (Asteraceae, Anthemideae) and related genera from Kazakhstan

Fifteen chromosome counts of six Artemisia taxa and one species of each of the genera Brachanthemum, Hippolytia, Kaschgaria, Lepidolopsis and Turaniphytum are reported from Kazakhstan. Three of them are new reports, two are not consistent with previous counts and the remainder are confirmations of very scarce (one to four) earlier records. All the populations studied have the same basic chromosome number, x = 9, with ploidy levels ranging from 2x to 6x. Some correlations between ploidy level, morphological characters and distribution are noted.     

肝癌中HBV和HCV基因和抗原的分布及意义

采用原位分子杂交方法检测HCV RNA及HBV X基因;采用免疫组织化学方法研究HCV核心抗原,非结构区C33c抗原及HBxAg在肝细胞肝癌中的定位及分布.结果表明(1)HCV RNA、HBV X基因在肝细胞肝癌组织检出率分别为40%(55/136)和82%(112/136).HCV RNA定位于癌细胞的胞浆内,阳性细胞呈散在、灶状及弥漫分布三种形式;HBV X基因在肝癌细胞中的分布呈胞浆型、核型及核浆型,阳性细胞也呈上述三种分布形式;(2)HCV C33c抗原、核心抗原在肝细胞肝癌中的阳性率为81%(133/164)及86%(141/164).C33c抗原定位于癌细胞及肝细胞的胞浆内;核心抗原既定位于癌细胞核中,又可定位于胞浆中.C33c抗原阳性细胞以灶状分布为主;而核心抗原阳性细     

Selection with two alleles and complete dominance

For a plant selection model with frequency-independent viabilities, fertilities and selfing rates, it is shown that apart from global fixation, for certain parameter combinations a protected polymorphism and facultative fixation (either allele may become fixed according to initial frequencies) may both occur. Facultative fixation requires different selling rates for the dominant and recessive type. Protection of the polymorphism requires resource allocation for male and female function. In this connection the problem of purely genetically caused population extinction is discussed.
For general frequency dependence and regular segregation, the chances for establishment of a completely recessive gene are compared to those of a completely dominant gene. It is proven that the process of establishment of the recessive gene, despite a fitness advantage, may be considerably endangered by drift effects if random mating prevails. The recessive gene may reach the same effectivity in establishment as a dominant gene, only if the recessive homozygote mates exclusively with its own type during the period of establishment.