共查询到20条相似文献，搜索用时 0 毫秒
1.
《生物技术通报》1993,(1)
930026大于1 0kb的DNA片段的离体扩增[英";/Kainz,P.…,Ana|.Bioehem.-1992,202(1).一46～49C译自DBA,1992,11(13),92~07224] 从九噬菌体模板合成10.9kb DNA片段,以扩大PCR范围。采用已发表的引物序列和条件时,应用AmpIiTaq和1人J,l三的Taq DNA聚合酶进行扩增的结果不他,ifli应用TLlb DNA聚合酶根本不能扩增这一片段。因此,采用Tub酶和二步PCR扩增方法(65℃进行退火和延伸,然后在9CC变性1.5分钟),获得了可靠的结果。酶浓度降到0.4U/50芦l,延伸时间减到4～12分钟(最优为8分钟)时,目标片段可被特异地扩增。若延长到20分钟以上,… 相似文献
2.
《生物技术通报》1993,(5)
931549利用毛细管系列电泳进~DNA.]II序[英3/Huang,X.C.…,Ahal.Chem.一1992,64(8)一.2149~2154[译自DBA,1992,11(23),92—12849] 一种DNA测序方法利用了毛细管系列电泳,双色荧光检测和双染料标记。在一系列毛细管上分离Sanger DNA测序片段,再用双色激光激发的confocal荧光扫描器进行桂上检测。在单个毛细管里分离出4套DNA测序片段,然后用双编码法进行区别,其中每套片段用两个有特定比率的染料标记的引物标记。这样就有可能筛选出电泳迁移率相同的染料l关键的是甩不同染料标记的DNA片段之间不应该出现电泳迁移的差异,而且染料具… 相似文献
3.
《生物技术通报》1992,(9)
92弓180采用PCR对B型肉毒梭菌进行特异性检测〔英〕/52-abo,E.A.…了Appl.Environ.Mierobi-01一1992,58(i)一418~420仁译自DBA,1992,11(5),92一02410」 采用的二十一聚体引物(Bl一5,一GAT GGAACC ACC ATT TGC(T/A)AG一3,,BZ-5,一(T/A)AC ATC(T/A)AT ACA(T/A)AT TCC TGG一3‘)是以肉毒梭菌(Clos￡,￡“-。m bot。“:。,)B型神经毒素的己发表氨基酸序列数据为基础构建的。无论是蛋白水解型还是非蛋白水解型菌株的基因组DNA均由Bl、BZ引物扩增,均产生一条1.skb的片段。真空印迹后,与一种标记的内源三十九聚体探针(… 相似文献
4.
《生物技术通报》1993,(2)
930412WORDUPs一种发现DNA序列统计学显著性的有效算法[英]/Pesole,G.…,Nucleic Acids Res.一1992,20(11).-2871.~2875E译自DBA,1992,11(15),92-083943 设计了一种快速灵敏的方法来分离具非随机统计学特性并具生物学活性的短核苷酸序列。此法以一级Markov分析为基础,可检测具统计学意义的6--,10个核苷酸长的序列。分析了已知与功能有关的(如启动子区、内含子等)而非进化上同源的序列,结果显示DNA寡聚物的统计学图谱符合Poi—SSOn分布。用真核启动子数据库的一组521段序列测试此法,证实了该法的精确性和有效性,明确区分出了已知… 相似文献
6.
7.
《生物技术通报》1992,(8)
922793用小卫遥盆盆密码作O付几分通的数位方法〔英洲Jeffreys,A.J.…了Nature一1991,354 (6350)一204~209〔译自DBA,1。。2,11(3),92一01260〕 用聚合酶链反应(PCR)作小卫星(Ms)变型重复图是一种新的简单的DNA定型法。2种不同重复单位(a一和t一型)组的Ms等位基因可以一种从第一个重复单位起双线延伸的方式编码。总基因组DNA中可形成等位基因重叠的三元密码。人Ms MS32(DISs)的同感Zobp重复单位序列为多态位点(a一型,可被Haelll裂解)重复子和Hae111抗性(t一型)重复子。32一ATG一A和32一ATG-T是20碱基的不同重复序列。在低引… 相似文献
8.
《生物技术通报》1993,(3)
930806 利用引物接头介导对结合在磁性同相上的DNA徽 PCR扩增进行檀物启动手的克隆和直接定序[荚]/Espelund,M.…,BioTechniques.一1992,13(1).一74～81[译自DBA,1992,儿(17),92—09541] 目标DNA是一已知序列的旁侧片段。通过引物一接头(adaptor)与一个经限制性酶切的基因f~[DNA相连,而免去逆向PCR所需的环化步骤。扩增的第一步即有专一性。用一种生物素标记的DNA引物(与已知的侧翼序列互补)进行线性PCR,可产生单链产物,用抗生蛋白链菌素包埋的磁珠可将之纯化。在第一步去除染色体组DNA后,进行两轮指数PCR,先用adaptor一引物… 相似文献
9.
《生物技术通报》1992,(4)
921221编码区蛋白的分子序列精确度及分析〔英〕/States,D.J.…1 Proe.Natl.Aead.Sei.U.SA厂1991,55(15)一5518~5522〔译自DBA,1991,10(18),91一10287〕 误差对分子序列数据的信息量的影响取决于用于有关数据的分析范例。测定了核酸序列误差对指定蛋白(含有相应蛋白序列)序列成行能力的影响。为了探索一个未翻译核酸序列中与目标肤序列类似的编码区,使用一种两步Bayesian算法。这样,通过对己知遗转密码和数据易变性的考虑,可提出某一特定氨基酸编码在某一特定位点的假设。再排出可能的序列,从而得出每个位点相对于每一个氨基酸进行编… 相似文献
10.
《生物技术通报》1992,(12)
924297降解2,4一二氯苯氧乙酸(2,4一O)的质粒pJP4的PCR和基因探针检测〔英〕/Neilson,J.W.一/Appl .Environ.Mierobiol一1992,55(4)一1271~1275[译自DBA,1992,11(11),92-06019〕 用PCR和DNA探针灵敏性检测2,4一D降解菌真养产碱菌(Azca不‘夕e,ese:t,o,hos)JMPi34(含质粒pJP4)。甩2个20一聚寡核普酸DNA引物扩增pJP 4 tfdB基因的Zosbp区,并优化扩增条件 (94℃变性1分30秒、72℃退火并延伸1分钟、72℃最后延伸7分钟,共进行25轮)。PCR和5产端标记DNA探针的杂交都是对含pJP4或其衍生质粒pRO103菌株专性的。检测灵敏性为30oocfu… 相似文献
11.
《生物技术通报》1992,(10)
923527短小芽抱杆菌HPO31的一种胞外蛋白水解酶抑制荆的鉴定及其相应基因的核普酸序列〔英〕/S五iga,Y。…了Appl.Environ.Mierobiol。一1902,55(2)。一525~551〔译自DBA,1992,11(7),92一03609〕 从短小芽抱杆菌HPD31培养上清液中分离到一种新的热稳定蛋白水解酶抑制蛋白(Bb:Pl)‘它产生于胞外,有a、b、c三种形式。经硫酸钱沉淀、凝胶过滤、阴离子交换层析、亲和层析及SDS一PAGE提纯。它能抑制丝氨酸蛋白水解酶类,如胰蛋白酶、糜蛋白酶及枯草杆菌素等。将Bbr Pl基因克隆于大肠杆菌XLI一Blue,并测定了序列。它编码一个24氨基酸的… 相似文献
12.
《生物技术通报》1992,(1)
920044班射起动共振离子光谱法在ONA测序中的潜在应用[英〕/Arlinghaus,H.F.…尹Anal.Chem。一1991,63(5)一402~407〔译自DBA,1991,10(9),91一04828〕 采用溅射起动共振离子光谱(SIRIS)来检测亚原子摩尔量,经富含同位素的铁、锡标记的DNA,分辨率极好。合成了叛酸二茂铁和(三乙基甲锡烷基)一烷基数酸,并通过5‘己胺的一个氨基连接到寡核二阵酸的末端位置上。调整SIRIS方法,用来检测50pMol连于DNA上的Fe或Sn。在SIRIS中若用高重复率激光,而其它准备步骤不是限制因素,每天可能检测1千万个碱基。在聚丙烯酞胺和尼龙膜上分析铁、锡… 相似文献
13.
《生物技术通报》1992,(5)
921624通过随机扩增多态ONA试验快速鉴定小球腔菌属的遗传变异和病变型〔英〕/G。。dwin,P.H.一,Appl.Environ.Mierobiol一1991,57(9)一2452~2456〔译自DBA,1991,10(22),91-13022〕 利用随机扩增多态DNA试验(RAPD)法鉴定T小球腔菌属Le尹亡05尹haer￡a“ac“忍a:s病变型及其遗传变异。通过随机十聚体 DNA引物进行聚合酶链反应扩增基因组DNA中的各种DNA型,鉴定出3组分离物。产生的多态现象为构建遗传图谱、进行DNA指纹鉴定提供了一便利途径。分离物1组含有毒病变型的所有分离物,2组含加拿大西部无毒病变型分离物,3组含安大略省… 相似文献
14.
《生物技术通报》1992,(3)
920836用盆组聚合酶链反应构建小砚全长血型.蛋白签因〔英〕/Gu,H.一厂B ioehe皿.Biophys.Res.Commun一1991,177(i)一202~208〔译自})BA,1991,10(15),91一08450〕 分别从贫血小鼠脾基因库(质粒pBR322)和小鼠基因库(质粒pUC18)中分出小鼠血型搪蛋自一A基因不完全cDNA克隆(质粒pGP315)和基因组克隆(质粒pGX7,含第一个外显子和转录起始位点附近的序列),并定序。由于缺乏构建小鼠全长血型糖蛋白一A基因的限制位点,用聚合酶链反应拼接这两部分序列克隆擂人的成分,获得全长的重组DNA片段(IO53bp,含小鼠血型糖蛋白A eDNA)。用5种DNA… 相似文献
15.
《生物技术通报》1993,(4)
9乙1 156利用消除了单独位点的pCR产生的形式对任何段较进行位点特异性诱变〔英万R ay,F .A。“·,BioTee五niques一xogz,13(3)一s‘2〔译自DBA,1902,11(21),。2一21692〕 使用单独位点消除作用(USE)时,目标DNA被热变性,引物指引的DNA合成与2个诱变引物有关,一个在单独位点引起突变(USE引物),第二个能引入任何所濡的突变。DNA被转入大肠杆菌muts株,以加强两个突变的共分离。用识别单独位点的限制酶消化转化体DNA,用其转化一个适合的大肠杆菌菌株。得到的产物通常有两个突变。与此相比,长引物(LP)USE是以PCR扩增开始,产生具有… 相似文献
16.
《生物技术通报》1992,(6)
922029利用超薄报胶快速定序ONA〔会,英〕/Sm川1,L .M.…了Abstr.pap.Am.Chem.Soc一1991,202 Meet.,Pt.1一ANYL 33〔译自DBA,1992,10(23),91一13304〕 研究了用毛细管电泳提高荧光DNA白动测序仪的定序速度。用毛细管电泳比用常规电泳分离和测定DNA定序反应荧光标记产物的速度快25倍。为了增加多样本平行分析的分辨逮度,发明了一种进行超薄板(50林m)凝胶电泳的装置。这种凝胶电泳的电场高达300V/cm,利用自显影法经25分钟电泳可厕定多达320碱基的序列。设计并制造了一个用于检测多个在上述超薄凝胶上荧光定序的荧光团的检测系统。… 相似文献
18.
转基因水稻T—DNA侧翼序列的扩增与分析 总被引：17，自引：2，他引：17
利用现有的转抗白叶枯病基因Xa21的水稻材料,通过TAIL－PCR技术扩增出携带Xa21基因的T－DNA的侧翼序列,对24个有效扩增片段的序列分析结果表明,其中14个侧翼序列是水稻DNA,9个含载体主干序列,1个是外源基因Xa21片段,14个T－DNA侧翼的水稻DNA序列与直接转化法外源基因整合位点的基因组序列具有不同的特点,这些T－DNA在水稻染色体上整合后其两端序列的特点类似于在转基因双子叶植物中观察到的现象,在含主干序列的侧翼序列（37．5％,9／24）,中,载体主干序列是以不同的类型出现的。 相似文献
19.
20.
《氨基酸和生物资源》1994,(1)
线型扩增法测定ＤＮＡ序列ＳｈｅｉｌａＭ．ＡｄａｌｍｓＲｏｂｅｒｔＢｌａｋｅｓｌｅｙ著／李络红译／申宗候校就象流行的Ｍ１３单链ＤＮＡ测序一样现有一种ＤＮＡ双链的双脱氧测序法。直接从质粒克隆测序节时省功,既勿需用Ｍ１３为载体制备亚克隆又不必生产噬质粒斑来... 相似文献