微观辨证学之研究：气血辨证与细胞化学含量的关系

在临床上为揭示肝脏病肝纤维化气虚血瘀和气滞血瘀病者,对细胞化学含量的变化,运用显微分光光度技术分析,结果发现气虚血瘀者单核细胞ＡＮＡＥ、ＡＣＰ,红细胞ＬＤＨ和嗜中性粒细胞ＡＤＰ明显降低,气滞血瘀者单核细胞ＡＮＡＥ、红细胞ＬＤＨ及嗜中性粒细胞ＡＤＰ较正常组偏低,但却较气虚血瘀组为高,单核细胞ＡＣＰ高于气虚血瘀组和正常对照组．据此,可将气虚、气滞血瘀及正常对照３组区别开来．     

蛋白酶抑制剂对小鼠胚泡着床的作用

本文采用子宫内注射和胚胎与子宫上皮细胞在体外共培养的方法,研究几种蛋白酶抑制对小鼠胚胎着床的影响。实验结果显示,蛋白酶抑制剂ＳＴＩ,ＥＡＣＡ和ＮＰＧＢ均能显著抑制胚泡在子宫内着床;ＳＴＩ和ＥＡＣＡ能有效地抑制胚泡在子宫上皮细胞单层上的扩展,而ＮＰＧＢ对胚泡在子宫上皮细胞单层上的粘附和扩展均有显著的抑制作用。     

不同应激损伤所致血管内皮细胞中vWF的变化

目的：通过检测血管内皮细胞（ＶＥＣ）中ｖＷＦ的变化,评价ＶＥＣ的损伤。方法：利用免疫组化技术对体外培养的猪肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和大鼠主动脉内皮细胞（ＡＥＣ）中ｖＷＦ进行免疫荧光标记,通过流式细胞仪对ｖＷＦ的细胞阳性率和荧光强度进行定性、定量分析,观察低氧和低温所引起的ｖＷＦ变化。结果：正常猪ＰＡＥＣ和大鼠ＡＥＣ的ｖＷＦ阳性率在８０％左右,阳性程序较高。但缺氧或冷冻损伤可使ＰＡＥＣ和ＡＥＣ的ｖ     

胃癌及癌旁组织癌胚抗原分布的免疫电镜观察

应用免疫电镜技术对１４例胃癌手术切除标本进行胃癌及癌旁组织中癌胚抗原（ＣＥＡ）超微结构水平分布的定位观察。结果表明,癌旁正常胃粘膜上皮细胞ＣＥＡ含量很少,仅在表面微绒毛见到微弱的ＣＥＡ分布;肠化上皮细胞ＣＥＡ主要分布在吸收细胞的微绒毛及杯状细胞粘液颗粒之间;而胃癌细胞ＣＥＡ除分布腔面微绒毛外,尚分布细胞侧面,基底面或整个胞膜,还见于胞浆内膜结构中。ＣＥＡ在胃癌细胞与正常胃粘膜上皮及肠化上皮分布上的差异说明表面膜成份极性的丧失是上皮性肿瘤细胞的特征之一。ＣＥＡ在胃癌细胞的分布异常可能导致恶性细胞某些生物学行为的变化。     

化学诱发大鼠肝癌的亚细胞组分中两类丝氨酸蛋白激酶的动态变化

用二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝癌,隔周测定肝脏胞液、膜性和胞核中的蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活力。发现胞液ＰＫＡ在诱癌过程中活力改变不大,胞液ＰＫＣ则逐步增高,在第１３周和２０周形成两个活力高峰。膜性ＰＫＡ和ＰＫＣ都呈双相变化,即在癌前期（１０－１４周）增加,癌形成期（１７－２０周）反而降至正常以下,胞核ＰＫＡ和ＰＫＣ也都在癌前期升至高峰,而癌形成期则低于癌前期,但仍高于正常（ＰＫＡ）或接近正常（ＰＫＣ）。因只有膜性ＰＫＣ在大鼠老化时降低,故这些变化不是鼠龄变化的结果,而是ＤＥＮ诱癌所引起,其变化机理可能与下降调节、细胞内转位或两型同工酶相反的升降变化有关。     

人脐静脉内皮细胞的生物学特性及细胞内信号转导机制

本实验对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）合成与释放篾这活性多肽（ＶＰｓ）及其作用机制进行了研究。结果表明：（１）无神经支配的人脐血管内皮细胞（ＶＥＣ）所含ＶＰｓ较有神经支配的肠系膜血管ＶＥＣ多;（２）这些ＶＰＳ是ＶＥＣ自身合成且能释放到胞外;（３）血管活性肠肽（ＶＩＰ）和Ｐ物质（ＳＰ）使ＨＵＶＥＣ膜上Ｃａ＾２＋通道开放概率明显增加,生长抑制（ＳＯＭ）使其明显降低,但它们均使胞浆内「Ｃａ＾２＋」和ＣＡ     

骤冷与饥饿对小鼠肝脏影响的实验研究

为探讨饥饿及饥饿与骤冷对动物肝脏的影响,本实验用健康昆明种小鼠２５只,随机分成正常组５只,饥饿组１０只,饥饿后再予冷刺激组１０只（下称骤冷组）。采用组织化学及酶组织化学方法观察糖原（ＰＡＳ反应）、ＳＤＨ（琥珀酸脱氢酶）,ＬＤＨ（乳酸脱氢酶）,ＣｈＥ（胆碱酯酶）、Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ（镁激活三磷酸腺苷酶）,ＡＣＰ（酸性磷酸酶）。结果提示：饥饿时肝脏ＰＡＳ反应,ＳＤＨ,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ、ＣｈＥ活性显著下降,而ＡＣＰ活性明显增强;饥饿后骤冷时ＰＡＳ（反应）、ＳＤＨ、ＣｈＥ更显著下降,而ＡＣＰ及Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性反而增强。     

氦氖激光穴位照射对兔子宫和卵巢酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（ALP）的作用效应

用不同功率的Ｈｅ—Ｎｅ激光照射雌兔外生殖器,照射穴位,用生化方法分别测定兔子宫和卵巢的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性。激光照射后,子宫和卵巢的ＡＣＰ酶活性保持基本恒定状态,与正常对照组比较无显著差异;相反,ＡＬＰ酶活性显著提高。分析这两种酶在激光用射后表现出来的差异,作者认为是激光作用使细胞内环境改变之故,且这两种酶对Ｈｅ—Ｎｅ激光的耐受性有所不同。     

SD大鼠血管内皮细胞的凝集素组织化学研究

为进一步了解大鼠血管内皮细胞表面糖基的分布, 本文应用５ 种生物素化凝集素（ＧＳ－Ｉ、ＲＣＡ－Ｉ、ＷＧＡ、ＣｏｎＡ和ＵＥＡ－Ｉ） 对大鼠心脏、胸主动脉、肝脏和子宫的血管内皮细胞采用ＡＢＣ法标记。结果表明,光镜下, ＧＳ－Ｉ对心脏、胸主动脉、子宫的血管内皮染色阳性; ＲＣＡ－Ｉ对所检组织内血管内皮细胞染色阳性,其中对心脏和肝的血管内皮与血管外组织细胞的染色强度有显著不同; ＣｏｎＡ对肝血窦内皮与对肝细胞的染色强度有明显不同; ＵＥＡ－Ｉ对各脏器血管内皮细胞未见阳性标记。电镜下ＧＳ－Ｉ阳性反应产物位于心肌毛细血管内皮细胞表面。提示, 血管内皮细胞表面存在的某些糖复合物含有Ｄ－半乳糖、Ｎ－乙酰氨基半乳糖、Ｎ－乙酰氨基葡萄糖、Ｄ－甘露糖。ＧＳ－Ｉ可视为心脏、胸主动脉、子宫的血管内皮细胞的特异性标记物。ＲＣＡ－Ｉ既可作为心脏的血管内皮, 亦可作为肝血窦内皮的特异性标记物, ＣｏｎＡ可作为肝血窦内皮的特异性标记物。     

(E160A)和(E160D)天花粉蛋白两种突变体晶体结构研究

培养了（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ和（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ的单晶。在ＭＡＲＲｅｓｅａｒｃｈ面探测器系统上分别收集了０．１９３ｎｍ和０．２０ｎｍ分辨率的Ｘ射线衍射数据。数据处理用ＭＡＲＳＣＡＬＥ程序系统完成。用同晶差值Ｆｏｕｒｉｅｒ法解析了突变体的晶体结构,结构修正利用Ｘ－ＰＬＯＲ程序。修正结果,晶体学Ｒ因子分别为０．１７５,０．１７９,键长和键角的ＲＭＳ偏差分别为０．００１１ｎｍ和２．４５７°,０．００１３ｎｍ和２．６７５°。在这两个突变体的结构中均未见到Ｇｌｕ１８９侧链方向的改变。通过对（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ和（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ的结构比较,说明（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ活性低于（Ｅ１６０Ａ）ＴＣＳ的原因：这可能是由于在（Ｅ１６０Ｄ）ＴＣＳ中Ｔｙｒ１１１和Ｔｙｒ７０的侧链都具有较大的运动性,使它们与腺嘌呤碱基的芳香堆垛作用减弱,从而导致活性的降低     

CYP3A基因表达与调控的分子机制

Ｐ４５０３Ａ是参与药的氧化代谢的重要酶系,在肝脏及肠道中含量丰富。人体内参与药物代谢的ＣＹＰ３Ａ亚系为ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ３Ａ５、ＣＹＰ３Ａ７。其中ＣＹＰ３Ａ７主要存在于胚胎肝脏。ＣＹＰ３Ａ的主要调控位于５端,其中某些转录调控因子结合位点与ＣＹＰ３Ａ在组织中的特异性表达有关。５端有两个特殊结构ＮＦＳＥ与ＨＦＬａＳＥ分别为ＣＹＰ３Ａ４与ＣＹＰＡ３Ａ７所独有,可能与基分别在成人及胚胎计中的特异性表达有     

氦氖激光穴位照射对兔子宫和卵巢酸性磷酸酶（ACP）,碱性磷酸酶（ALP）…

用不同功率的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射雌兔外生殖器，照射穴位，用生化方法分别测定兔子宫和卵巢的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性。激光照射后，子宫和卵巢的ＡＣＰ酶活性保持基本恒定状态，与正常对照组比较无显著差异；相反，ＡＬＰ酶活性显著提高。分析这两种酶在激光照射后表现出来的差异，作者认为是激光作用使细胞内环境改变之故，且这两种酶对Ｈｅ－Ｎｅ激光的耐受性有所不同。     

人骨髓CD34^＋造血细胞体外扩增形成HPP—CFC造血祖细胞的能力

目的和方法：高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰＣＦＣ）是表达ＣＤ３４＋ＤＲＬｉｎ－的最早期造血祖细胞之一,它在体外的增殖分化能力可反映造血干细胞的某些特征。结果：本文研究了人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞在体外扩增和形成ＨＰＰＣＦＣ的能力。利用ＣＩＭＳ１００免疫磁性分离术首先获得＞９０％的ＣＤ３４＋造血细胞以富集ＨＰＰＣＦＣ。在含有Ｅｐｏ＋ＧＭＣＳＦ＋ＩＬ３＋ＩＬ６＋ＳＣＦ（简ＥＧＩＩＳ）的无基质液培条件下,ＣＤ３４＋造血细胞在四周内可持续产生单个核细胞和ＨＰＰＣＦＣ,并使其总量最高可达１７７０倍和８倍,以第２和３周为最佳时期,但不同个体ＣＤ３４＋造血细胞的这种能力差别较大。结论：高度纯化的人骨髓ＣＤ３４＋造血细胞能够在含有最佳组合造血生长因子的无基质液培条件下持续扩增,为临床应用提供了重要依据。     

CHEK2基因突变增加乳癌发病率

一项新研究发现 ,有一种突变与几种癌症有关 ,其使妇女的乳癌发病率增加一倍 ,而使男子的某些低危险率的癌症显著地增加危险率 .一种称为ＣＨＥＫ2或ＣＨＫ2的基因编码一种正常译本的蛋白质 ,该蛋白质发出信号使ＤＮＡ受损伤的细胞信止分裂 .该蛋白质似乎活化抗癌基因ＢＲＣＡ1和ｐ5 3所编码的蛋白质 .ＣＨＥＫ2基因及其蛋白质是如何作用的还远未搞清楚 .但是 ,在早些时候研究者指出 ,在一种包括乳癌、脑癌和结缔组织癌—肉瘤的综合征中有ＣＨＥＫ2突变 .ＢＲＣＡ1的突变比ＣＨＥＫ2缺损的危害性大 .许多研究证明 ,带有ＢＲＣＡ1突变的妇女…     

渗透胁迫下玉米幼叶延伸生长与生长部位质膜H~＋─ATPase的关系

－０．４ＭＰａ和－０．８ＭＰａＰＥＧ６０００对玉米幼叶延伸生长和生长部位Ｈ＋分泌有明显的抑制作用,但对生长部位ＰＭＨ＋－ＡＴＰａｓｅ则有不同程度的激活作用,正常水分条件下,Ｎａ３ＶＯ４和ＤＣＣＤ强烈抑制ＬＥＲ和Ｈ＋分泌,抑制程度ＤＣＣＤ＞Ｎａ３ＶＯ４,二者使膜透性增加的程度很相近。－０．４ＭＰａ　ＰＥＧ胁迫下,Ｎａ３ＶＯ４对ＬＥＲ和Ｈ＋分泌的抑制作用不明显,而ＤＣＣＤ仍显著抑制ＬＥＲ和Ｈ＋分泌;ＤＣＣＤ促进膜透性增加的程度远大于Ｎａ３ＶＯ４。     

大熊猫子宫钙调素的分离纯化和性质的研究

以大熊猫子宫为材料分离纯化了钙调素,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳鉴定,表现均一。分子量为１８８００道尔顿,等电点为３．６。该蛋白质分子的Ｎ－末端为封闭的。大熊猫子宫钙调素具有其它来源钙调素所特有的一些性质。对环核苷酸磷酸二酯酶有明显的激活作用,还发现对超氧化物歧化酶也有一定激活作用。电泳行为受Ｃａ＾２＋影响而出现特征性电泳改变,在含有Ｃａ＾２＋的ＳＤＳ凝胶电泳中,电泳速度比ＥＧＴＡ存     

从C57BL/6J小鼠胚胎中分离ES细胞系(英文)

ＥＳ细胞（ＥｍｂｒｙｏｎｉｃＳｔｅｍＣｅｌｓ）是来源于小鼠早期胚胎的细胞系,它可以在体外大量培养而不失去其发育的多潜能性。ＥＳ细胞不仅可以用来制作转基因动物,而且能够作为载体进行基因打靶等多种研究。目前,国际上常用的胚胎干细胞系都是来源于１２９小鼠的胚胎。因而,有必要探讨用其它品系小鼠建立ＥＳ系。１９９１年,Ｌｅｄｅｒｍａｎｎ等人首次报道从Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠胚胎中建成了ＥＳ细胞系,但是没有对建立的细胞系进行特性分析。国内柴桂萱等人虽然做了特性分析,但是他们所建细胞系的细胞直径较大,生长速度较慢,不同于常见的ＥＳ细胞系。我们从Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ品系小鼠胚胎中共分离了四个ＥＳ细胞系,分别命名为ＣＥ１、ＣＥ２、ＣＥ３、ＣＥ４（Ｆｉｇ．１ａ＆ｂ）。这四个细胞系核型正常率均达到７０％以上。我们检查了ＣＥ２细胞的分化能力,当将ＣＥ２细胞注入同基因型小鼠的皮下后,获得的畸胎瘤（Ｆｉｇ．３）组织切片检查的结果表明：该细胞能够分化成多种组织（Ｆｉｇ．２）。我们也研究了ＥＳ细胞的嵌合能力,用ＩＣＲ小鼠胚胎作为受体胚胎,采用囊胚显微注射法构建嵌合鼠。在幸存的幼鼠中我们获得了来源于ＣＥ２细胞的嵌合鼠（Ｔａｂｌｅ１,Ｆｉｇ．４）。综     

胆固醇酯转运蛋白转基因动物的研究进展

胆固醇酯转运蛋白 (ＣＥＴＰ)是胆固醇代谢中的一种血浆酶 ,是胆固醇逆向转运系统中的关键蛋白质。ＣＥＴＰ催化血浆脂蛋白之间非极性脂质特别是胆固醇酯 (ＣＥ)的交换和平衡 ,关系到各种脂蛋白的颗粒大小和脂质组成 ,决定高密度脂蛋白 (ＨＤＬ)和低密度脂蛋白 (ＬＤＬ)质和量的变化 ,在胆固醇逆向转运中起关键作用 ,与动脉粥样硬化 (ＡＳ)的发生和发展密切相关。ＣＥＴＰ缺陷患者伴有明显的高α脂蛋白血症 (ＨＡＬＰ)的发现使人们对ＣＥＴＰ在脂代谢中的重要性有了更高认识。人ＣＥＴＰ遗传缺陷表型和ＣＥＴＰ转基因动物研究表明 ,ＣＥＴＰ…     

正常的和转化的C3H小鼠胚胎成纤维细胞neu基因结构的初步研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术并结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交从基因水平对正常和￣３Ｈ－ＴｄＲ恶性转化小鼠胚胎成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０和ＴＣ３Ｈ１０中ｎｅｕ基因进行研究。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交结果表明恶性转化的ＴＣ３Ｈ１０细胞ｎｅｕ基因出现重排和扩增,ＳＳＣＰ分析未发现ＴＣ３Ｈ１０细胞ｎｅｕ基因跨膜区突变。上述结果说明ＴＣ３Ｈ１０细胞ｎｅｕ基因结构异常可能在跨膜区外,ｎｅｕ基因异常在￣３Ｈ－ＴｄＲ诱导的细胞恶性转化过程中可能有重要的作用,ＥＧＦ可促进ｎｅｕ基因表达增高,研究发现在ＥＧＦ持续作用下,ＮＣ３Ｈ１０细胞ｎｅｕ基因甲基化水平无显著变化,说明ＥＧＦ可能是通过其它途径调控ｎｅｕ基因表达增高的,排除了ＥＧＦ通过改变ｎｅｕ基因甲基化水平而调控ｎｅｕ基因表达的可能性。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对血管壁细胞成分的作用及其机制的实验研究

以培养的猪主动脉内皮细胞（ＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为主要实验对象, 垂体腺苷酸环化酶激活肽（ＰＡＣＡＰ）对正常及高脂环境下培养的ＥＣ、ＳＭＣ形态和功能的影响,并对其作用机制进行了初步探讨。结果显示：ＰＡＣＡＰ可部分对抗高脂因素造砀ＥＣ、ＳＭＣ形态的损伤;能提高ＥＣ抗动脉粥样硬化（ＡＳ）物质的产生;抑制ＳＭＣ的增殖;并具有抗脂质氧化作用。本研究表明,ＰＡＣＡＰ对ＥＣ、ＳＭＣ具有一定程度的细