鼠脑微透析液痕量氨基酸的激光诱导荧光检测

使用自制微透析探针和活动体位生化取样装置以及自行组装的毛细管电泳-增强型电荷耦合器件-激光诱导荧光系统,对鼠脑透析液中的痕量氨基酸以异硫氢酸荧光黄(FITC)进行柱前衍生后进行了分离和检测. 鼠脑海马CA₃区微透析液中游离氨基酸的浓度为10^-8～10^-6 mol/L, 并将其用于学习与记忆的研究, 为无损伤研究活体脑内神经递质和其他痕量生化物质的动态变化提供了一种新方法.     

高效毛细管电泳-聚类分析法鉴别娑罗子品种

运用高效毛细管电泳法分离娑罗子中植物蛋白等成分,系统聚类法鉴定九个娑罗子样品,实验结果与原植物鉴定一致。     

用毛细管电泳-激光诱发荧光技术检测清醒吗啡戒断大鼠导水管周围灰质微透析液中谷氨酸和精氨酸的含量

清醒动物脑微透析技术能够用于动态观察某一特定核团中生物活性物质变化及其与行为的关系,结合高效毛细管电泳-激光诱发荧光对衍生后的透析样品进行检测,使这一技术更趋完善。本实验用荧光素异硫氰酸酯(FITC)与痕量氨基酸样品进行衍生,通过适当增加衍生温度,能明显缩短衍生时间,衍生效果与传统的室温下衍生16h无明显差别;进一步确定30℃水浴反应5h是较理想的FITC与痕量氨基酸的衍生条件。在此优化衍生条件下,成功检测了清醒吗啡戒断大鼠脑导水管周围灰质(periaqueductal gray matter,PAG)微透析液中谷氨酸(glutamate,Glu)和精氨酸(arginine,Arg)含量变化。结果表明,非吗啡依赖和吗啡依赖大鼠脑PAG中L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)和L-谷氨酸(L-glutamate,L-Glu)含量无明显差别,纳洛酮催促戒断后的第一个10min内PAG中的L-Arg和L-Glu含量显著增加,分别比戒断前增加了63％和105％,10min后含量逐渐下降,这种变化趋势与同时观察的吗啡戒断评分变化相一致。     

毛细管电泳-单链构象多态分析检测胃癌中p16基因突变

目的:建立快速高效检测胃癌患者胃癌组织及癌旁正常组织中p16基因突变的方法。方法:采用PCR扩增p16基因第二外显子易发生突变片段,扩增样品纯化后经95℃变性;以毛细管电泳(CE)分析法结合单链构象多态性(SSCP)对60例胃癌患者p16基因突变情况进行分析。结果:分析结果表明只有3例低分化腺癌患者存在基因突变,测序表明p16基因第二外显子碱基序列AGAC发生碱基A丢失。结论:p16基因突变可能导致胃癌的发生,但不起主导作用;CE-SSCP分析方法具有快速、灵敏、准确的特点,可用于胃癌组织中p16基因的突变分析。     

毛细管电泳-质谱联用技术研究进展

毛细管电泳-质谱（CE-MS）联用技术兼具毛细管电泳高效分离能力与质谱高灵敏检测、高真度定性的优势,已成为物质分离分析研究的一种非常重要的工具。本文对近几年来 CE-MS 联用的关键技术及 CE-MS 在中药分析、环境检测等领域的一些应用进展进行综述,对其发展进行了展望。     

北京油鸡MSAP毛细管电泳荧光检测技术的建立

采用毛细管电泳荧光检测技术, 对北京油鸡肌肉组织基因组进行甲基化敏感扩增片段多态性(Methylation sensitive amplified polymorphism, MSAP)检测。通过对基因组DNA用量、预扩产物稀释倍数、选择性引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度和电泳内标量等6个主要参数进行分析和优化, 建立了适合北京油鸡基因组DNA甲基化分析的MSAP毛细管电泳荧光检测技术。重复实验表明, 建立的毛细管电泳荧光标记的MSAP检测技术能够自动地、高通量地分析北京油鸡基因组的DNA甲基化状态, 也适用于其他动植物基因组的DNA甲基化研究。     

用于浮游植物探测的三维激光诱导荧光光谱系统

本文介绍一个针对浮游植物现场探测的三维激光诱导荧光（3D-LIF）光谱系统。该系统以波长可调谐激光器为光源,使用光栅光谱仪进行光谱分光,输出光谱范围380 nm ～800 nm,并选用32通道光电倍增管模组作为光电探测器。光栅光谱仪和光电倍增管模组之间的耦合选用芯径0．2 mm 的光纤束,对应光谱分辨率约为3 nm,以此采集接收的31通道发射荧光光谱,其光谱范围为410 nm ～710 nm,光谱带宽约10 nm。光电转换电路的模拟带宽约为20 MHz,数据采集频率50 MHz,分辨率14 bit。基于研发的光谱系统,采用光学参量放大器（OPO）以获得405 nm ～615 nm 可调谐激发光源,在实验室对三十余种中国海常见的浮游植物的3D-LIF 光谱进行了测量。测量结果证实了系统的稳定性和用于藻种分类和识别研究的有效性。系统中的激光器和望远镜可灵活更换,接收的光谱范围和光谱分辨率等参数可便利调节,因此,该系统可望发展成为用于现场探测的3D-LIF 光谱系统。     

毛细管电泳四色荧光检测法分析茶树SSR标记

将毛细管电泳四色荧光栓测技术应用于茶树SSR标记分析.该方法采用三引物PCR扩增SSR位点,三引物即在5'端加有M13尾巴序列(5'-CACGACGTTGTAAAACGAC-3')的特异正向引物、特异反向引物及带有荧光标记的通用型M13引物:为了运用四色荧光检测系统使通过一次毛细管电泳能同时检测3个以上的SSR位点,采用蓝、绿、黑3种不同颜色的荧光染料分别对3个M13引物进行标记. 应用该方法对42个茶树品种(系)的16个SSR位点进行遗传分析的结果表明:此法具有简便、可靠、低成本及高通量的优点;且随着所分析SSR位点数的增加,降低成本的效果更加显著.采用建立的方法,还筛选获得了11个多态性丰富的可应用于茶树遗传研究的SSR标记.     

毛细管电泳-短小串联重复序列多态性方法及对人凝血因子BSTR位点的检测

为开展高效毛细管电泳技术对STR位点的检测 ,通过建立毛细管电泳 短小串联重复序列 (STRs)多态性的检测方法 ,实现了利用毛细管电泳快速检测人凝血因子B (F13B)STR位点PCR产物的长度多态性 ,结果F13B STR基因型分型正确 ,图谱清晰 .方法的建立可简化常规多态性检测 ,实现快速、准确分离     

毛细管电泳-短小串联重复序列多态性方法及对人凝血因子ⅧB STR位点的检测

为开展高效毛细管电泳技术对STR位点的检测,通过建立毛细管电泳-短小串联重复序列(STRs)多态性的检测方法,实现了利用毛细管电泳快速检测人凝血因子B(F13B)STR位点PCR产物的长度多态性,结果F13B-STR基因型分型正确,图谱清晰.方法的建立可简化常规多态性检测,实现快速、准确分离.     

毛细管区带电泳法测定油菜蜂花粉中黄酮苷元含量

本文研究了芦丁、槲皮素、山萘酚、异鼠李素四种黄酮类化合物在毛细管区带电泳中的迁移行为,考察了缓冲溶液pH值、其离子浓度、有机添加剂、电压、温度等对分离的影响。结果发现在35mmol／L硼砂缓冲溶液,pH8．4,10％乙腈作为添加剂,20℃,25kV条件下,四种黄酮在14min内实现了基线分离。利用该方法测定青海产油菜蜂花粉中黄酮苷元含量,结果令人满意。     

苦参碱的反胶束萃取研究

本文探索AOT-异辛烷反胶束萃取苦参碱的最佳工艺和条件,以AOT-异辛烷反胶束对粗苦参碱中的苦参碱进行萃取,利用毛细管电泳对苦参碱进行定量分析,通过正交试验优化萃取工艺和条件,确定影响萃取率的主要因素为萃取水相的酸度,次要因素为水相的温度,反胶束的W0和离子强度对萃取率的影响较小,得出最优萃取条件为:pH=12,W0=30,T=35℃。     

一种新的测定蛋白激酶活性的方法──毛细管电泳测定蛋白激酶A的活性

建立了以毛细管电泳为基础的测定蛋白激酶A活性的新方法,可作为激酶测活的通用方法．此法基于底物及其磷酸化产物很容易在毛细管电泳中分开,且酶活力可用积分值计算,同时又发展了连续进样技术,能在一次电泳中同时进行10个以上的酶活性测定,新方法操作简单,灵敏度和精确性均优于常规的同位素法．     

Sample Preparation Scale-Up for Deep N-glycomic Analysis of Human Serum by Capillary Electrophoresis and CE-ESI-MS*

1. Download : Download high-res image (84KB)
2. Download : Download full-size image

Highlights

• •Efficient sample preparation workflow for deep N-glycomics analysis from serum.
• •Temperature gradient denaturing protocol to prevent protein precipitation.
• •Decrease of free sugar content in serum enhanced PNGase F digestion efficiency.
• •Modified evaporative labeling method increased fluorophore labeling yield.

     

单链构象多态性毛细管电泳分析研究进展

基因突变的检测在临床疾病诊断中起十分重要的作用.单链构象多态性(Single Strand Conform ationPolym orphism,SSCP)分析是检测突变最流行的方法之一.SSCP分析与毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)相结合的技术更是具有灵敏度高、花费低、简单、快速的优点.目前,这项技术已应用于人类原癌基因、抑癌基因以及其它致病基因的突变检测.主要综述了各种参数对CES-SCP分析的影响以及CES-SCP分析技术将来的发展方向.     

毛细管电泳在氨基酸分析检测中的应用进展

对毛细管电泳技术的主要原理及其在氨基酸分析检测中的应用作了综述     

Measurement of Free Choline in Plant Leaves by Capillary Electrophoresis

A low pH capillary electrophoresis (CE) was used for the measurement of free choline in plant leaves. Choline in the leaf extract was first converted to the benzoyl ester and put into CE. A well-resolved peak in the electropherogram was easily obtained. Involvement of enzymes in a two-step oxidation of choline to glycine betaine was evaluated in different plant species with the same mehod developed for glycine betaine and betaine aldehyde.     

毛细管电泳在微生物分离与检测中的应用

毛细管电泳在分离与分析无机离子、有机小分子、生物大分子(如蛋白质、核酸)和微生物(细菌、病毒)等方面应用十分广泛。着重论述了毛细管电泳在微生物分离与检测方面的基本原理、早期探索、存在问题和最新进展。     

Measurements of Serotonin and Related Indoles Using Capillary Electrophoresis with Multiphoton-Induced Hyperluminescence

We report the use of multiphoton-excited photochemistry to generate highly fluorescent products from hydroxyindoles fractionated in submicron capillary electrophoresis channels. In this approach, the near-infrared (750 nm) output from a modelocked titanium:sapphire laser is focused at the outlet of a 0.6-μm i.d. capillary, producing pulse intensities of ∼10¹²W cm⁻²within a femtoliter focal volume. Hydroxyindole molecules migrating through the outlet aperture of the capillary intersect the beam focus, where absorption of three to four photons (∼1.65 eV photon⁻¹) initiates a photobleaching reaction. The resultant hydroxyindole photoproducts produce broadband visible emission (λ_max≈ 500 nm) when excited with two additional near-IR photons and appear substantially more resistant to photobleaching than the parent hydroxyindoles. This multiphoton-induced conversion of analytes to hyperluminescent derivatives thus offers a more sensitive approach than UV fluorescence for detecting extremely small quantities of material. Mixtures of the hydroxyindoles serotonin (5-hydroxytryptamine), 5-hydroxytryptophan, and 5-hydroxyindole acetic acid are reliably characterized (relative error ≈10%) in 100 s, with detection limits as low as ∼70 zmol (∼42,000 molecules). The sensitivity of this measurement strategy improves on the best previously reported results for capillary separations of indoles by more than one order of magnitude.