前列腺素F_(2α)与促黄体素对黄体功能的调节控制——组织化学研究

本研究用组织化学方法着重探讨PGF_(2α)对孕鼠黄体中3β-OH-脱氢酶和酸性磷酸酶活性的影响,并讨论了垂体因素(LH)与黄体酶活性变化和PGF_(2α)的关系。 实验都系妊娠第9天的大鼠;分为五组:(1)PGF_(2α)处理组;(2)对照组;(3)摘除垂 体组;(4)摘除垂体后立即注射外源LH组;(5)摘除垂体后同时注射LH和PGF_(2α)组。五组均在第十二天取材,新鲜冰冻切片,组织化学方法显色。 实验证明,PGF_(2α)与黄体的3β-OH-脱氢酶和酸性磷酸酶都有密切关系,它有抑制前者和激活后者活性的能力,而LH能维持和增强3β—OH—脱氢酶的活性,根据摘除垂体同时注射LH和PGF_(2α)的实验揭示,PGF_(2α)在一定程度上与LH有拮抗作用。因此,认为PGF_(2α)的作用部位在卵巢一级而不通过垂体。实验结果还表明孕鼠经PGF_(2α)处理后,酸性磷酸酶活性比对照组酶活性有显著的增强,由于细胞解体与溶酶体膜的通透性改变和它所释放的水解酶,特别是酸性磷酸酶有密切的关系,而酸性磷酸酶活性变化又与激素有关,因此作者们认为溶酶体在激素调节黄体功能中起着重要的作用,改变或稳定溶酶体膜透性会产生不同的生理效应。因此,认为LH的维持黄体和PGF_(2α)的黄体解体作用都可能是通过对溶酶体的调节控制途径而完成的,PGF_(2α)对3β—OH—脱氢酶的影响是非     

消旋15甲基前列腺素F_(1a)甲酯的抗生育作用和黄体溶解作用

目前用于临床中期引产和早孕流产的前列腺素(简称PG),主要是PGE_2和PGF_2α及其衍化物。国外资料中虽也有PGF_(1α)对实验动物抗生育作用的报告,但未见PGF_(1α)药理活性的详细资料,也无临床用于中期引产或抗早孕的成功报道。国内试以PGF_(1α)甲酯治疗奶牛持久黄体症及用于家畜同步发情等,效果卓著。     

磷脂酶C第二信使系统参与牛小黄体细胞甾体激素生成

黄体生成素(LH)是黄体细胞孕酮合成的主要调节因子,以cAMP作为它的第二信使。LH与其受体相互作用后除激活腺苷酸环化酶(AC)系统外,还能启动cAMP合成步骤以外的一个负调节信号。由于黄体溶解因子前列腺素F_(2a)(PGF_(2a))在抑制牛小黄体细胞孕酮分泌的同时,增加细胞IP_3的水平;而且LH也能     

密度梯度离心分离大鼠卵巢卵泡膜细胞

探讨用密度梯度离心法快速、有效地分离大鼠卵泡膜细胞.选取23～25 d雌性大鼠卵巢,用Percoll密度梯度离心法将卵泡膜细胞分离纯化,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)组织化学染色用于卵泡膜细胞纯度检测.分别用0.1 U/mL和1.0 U/mL卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)及黄体生成素(luteinizing hormone,LH)处理细胞,无血清培养48 h后,酶联免疫法检测培养液中雄烯二酮和雌二醇的水平.分离所得细胞中,3β-HSD染色阳性细胞与总细胞数之比大于90％; LH组的雄烯二酮水平显著高于对照组和FSH组(P＜0.05),LH组中1.0 U/mL组的雄烯二酮水平又高于0.1 U/mL组.各组均未检测到雌二醇及孕酮.3β-HSD组织化学染色可快速有效地检验所分离的卵泡膜细胞的纯度,分离所得的卵泡膜细胞可对LH产生反应,且其中几乎没有混杂颗粒细胞.     

前列腺素E_2、F_(2a)对小鼠抗早孕过程中卵巢和子宫的形态学变化

前列腺素F_(2a)(以下简称PGF2_(2a))在多种动物中具有溶黄体效应而产生抗生育效果,因而人们期望它亦能控制人类生育。当前国内外临床虽已试用前列腺素E_2(PGE_2)或PGF_(2a)。及其类似物终止早期妊娠,但成功率较中期流产或足月催产为低。为了提高它们     

15甲基前列腺素F_(2a)对在位兔子宫收缩和电活动的影响

前列腺素及其类似物用于催产和中期引产的效果是肯定的,在同内外都已积累了不少经验。用前列腺素终止早期妊娠的初步试验也是令人鼓舞的。因前列腺素在体内迅速被代谢破坏,临床上需在短时间内反复给药,方能取得较好效果。因前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))的15甲基衍化物不被15羟基前列腺素脱氢酶灭活,所以作用强度和时间都有增加(Bundy等,1973;Bygdeman等,1972)。1974年上海市前列腺素科研协作组化学合成成功15甲基前列腺素F_(2α)(15甲基PGF_(2α))供药理和临床试验。经过初步药理试验后,临床上应用15甲基PGF_(2α)肌肉注射的方法进行中期引产已获成功,并正开展抗早孕试验。目前关于15甲基PGF_(2α)对子宫作用的药理研究报道尚不多见,既有的也多为离体实验的结果。为阐明15甲基PGF_(2α)的作用原理,本工作在整体情况下,就其对兔子宫收缩和电活动的影响进行了初步研究。     

PGF_(2α)诱导的早期反应基因参与黄体退化的研究进展

哺乳动物卵巢黄体的存留对母畜生殖活动具有重要的作用。前列腺素F2α(PGF2α)是哺乳动物的主要溶黄体因子,通过与其受体结合,激活一系列早期反应基因,进而诱导黄体的功能性(孕酮水平下降)和结构性退化(细胞程序性死亡)。虽然PGF2α已被广泛应用于动物的同期发情、分娩控制和繁殖障碍治疗等方面,但其溶解黄体的分子机制尚未完全明确。综述了PGF2α受体及其诱导的早期反应基因参与卵巢黄体退化的研究进展,旨在为进一步研究PGF2α诱导黄体退化的分子机制提供理论依据。     

Smad2/3上调促进大鼠梗阻性肾病的纤维化和凋亡

目的观察TGF-β1/Smads信号传导途径对大鼠肾间质纤维化表达的影响.方法 40只Wistar大鼠分为假手术组及模型组.单侧输尿管结扎术式(UUO)建立肾梗阻模型.分别于术后3、6、14和28d处死动物.应用免疫组织化学和流式细胞学技术来检测TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3和观察细胞外基质以及细胞凋亡的改变.MASSON染色观察肾间质病变程度.结果与假手术组相比,模型组于术后3d梗阻肾TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3开始升高,细胞凋亡百分率同时升高,I型胶原及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平亦升高.第6d各项指标水平显著升高.第14、28d升高更加明显(P＜0.01).B3、B6、B14和B28组之间也随天数增加而显著升高(P＜0.01).肾间质病变面积增加显著(P＜0.01).结论在肾间质纤维化中TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3及细胞凋亡明显上升,同时I型胶原及α-SMA表达升高及肾间质纤维化程度增加.TGF-β1/Smads信号传导途径在肾间质纤维化形成中可能起着重要促细胞外基质沉积和细胞凋亡的作用.     

大鼠促性腺激素细胞内蛋白激酶C的改变对黄体生成素mRNA表达的影响

目的:分析大鼠黄体生成素(LH)表达的受体后信号转导机制。方法:促性腺激素(GTH)细胞内蛋白激酶C(PKC)兴奋或抑制后,用促性腺激素释放激素(GnRH)脉冲刺激,然后用实时荧光定量PCR方法测定细胞LH的β亚基(LHβ)mRNA的表达量,并与空白组比较。结果:LHβmRNA随着PKC活性的升高而显著升高,随着PKC活性的降低而显著降低。结论:GnRH脉冲刺激引起LHβmRNA表达,其受体后的信号转导是PKC-Ca2+途径。     

粉红单端孢Trichothecium roseum对雄甾-4-烯-3,17-二酮的生物转化

雄甾-4-烯-3,17-二酮（4AD）是甾体化合物合成过程中的关键中间体,其羟化产物通常具有良好的药理活性或作为工业生产甾体药物的重要中间体。利用粉红单端孢Trichothecium roseum对4AD进行生物转化,从其发酵提取物中共分离鉴定了3个4AD羟基化产物：6β-羟基-雄甾-4-烯-3,17-二酮（6β-OH-4AD,1）,14α-羟基-雄甾-4-烯-3,17-二酮（14α-OH-4AD,2）,6β,14α-双羟基-雄甾-4-烯-3,17-二酮（6β,14α-di-OH-4AD,3）,表明T. roseum对4AD的C-6β位和C-14α位具有较强的羟化能力,其中14α-OH-4AD(2)可作为合成强心甾类化合物毛地黄毒素的重要中间体,6β,14α-di-OH-4AD(3)可作为合成具有抗肿瘤活性的14α-羟基-雄甾-4-烯-3,6,17-三酮的重要中间体。提供了1株能够高效制备活性甾醇中间体14α-OH-4AD和6β,14α-di-OH-4AD的菌株,同时可为研究其他甾醇药物奠定基础。     

前列腺素E_2、F_(2α)对大鼠颗粒细胞PA活力的影响

年龄26—27天的Wistar雌鼠用PMSG与HCG诱导成熟,同时分别注射3、6、9 mg消炎痛,分离卵巢颗粒细胞并离体培养,培液中的PA活力经~(125)Ⅰ-纤维蛋白降解法检测,均无被抑制现象(图1)。仅用PMSG激动大鼠的颗粒细胞离体培养于含HCG及不同浓度(10~(-8)mol/L—10~(-5)mol/L)的消炎痛培液内,各组PA活力均未出现明显变化(图2)。离体条件下PGE_2增强PMSG激动大鼠颗粒细胞PA活力的事实说明,消炎痛抑制实验未能显示前列腺素与PA的关系,可能因所用以诱导大鼠临近排卵的PMSG和HCG分别所含FSH与LH的高活力促使PA活力达到最高点,以致前列腺素对PA的影响被掩盖;PGF_(2α)对PA未显示任何作用(图4)。另外,PGE_2使仅接受PMSG大鼠颗粒细胞PA升高的事实(图3)提示,PGE_2有摹拟LH的作用;未经PMSG与HCG处理鼠的卵泡细胞的PA活力也受PGE_2的影响,说明它还有摹拟FSH的作用。     

应用前列腺素治疗奶牛持久黄体病的效果观察

在北京市科技局及中越友好人民公社畜牧企业分场领导的热情支持下,1975年9月中越友好人民公社畜牧四队及中国科学院北京动物研究所内分泌室的科技人员组成了工人、干部、科技人员三结合的试验组,利用前列腺素F_(2α)(以下简称PGF_(2α))及其类似物15甲     

多聚甲醛固定对流式细胞术检测HepG2细胞整合素αVβ3的影响

目的:检测HepG2细胞表面整合素αVβ3的表达情况,同时探讨多聚甲醛的固定处理对HepG2细胞表面αVβ3检测的影响。方法:分别用0.25%的胰蛋白酶和1%的EDTA消化收集HepG2细胞,以FITC标记的抗αVβ3单抗检测细胞表面αVβ3的表达情况;在检测中,用2%浓度的多聚甲醛固定细胞后,采用流式细胞仪测定多聚甲醛固定组和未固定组HepG2细胞的平均荧光强度和阳性细胞率,对结果进行统计学分析。结果:以胰蛋白酶消化HepG2细胞后,抗αVβ3单抗标记的阳性细胞率为3.6%,远低于EDTA消化组的阳性细胞率(47%)。多聚甲醛固定组的平均荧光强度为2.23,阳性细胞率为4.6%;而未固定组的平均荧光强度为6.97,阳性细胞率为30.1%。以上结果经统计学分析,均具有显著性差异(P<0.05)。结论:HepG2细胞表达整合素αVβ3,多聚甲醛固定处理可干扰对HepG2细胞αVβ3的检测。     

栀子苷通过TGF-β1/Smad信号通路抑制肝纤维化和肝星状细胞活化

本研究旨在观察栀子苷对肝纤维化和肝星状细胞活化的影响,并探讨其可能机制。人肝星状细胞LX-2用5 ng/mL转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)处理,并用不同浓度(0, 1, 2.5, 5, 10, 20, 40, 60, 80, 100μmol/L)的栀子苷联合培养,MTT法进行细胞活力测定,LX-2分别经5 ng/mL TGF-β1、TGF-β1+栀子苷(20μmol/L)处理后,用qPCR和Western blot分别检测I型胶原蛋白(collagen I)、纤连蛋白(fibronectin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、p-Smad2和p-Smad3基因和蛋白的表达。BALB/c小鼠用CCl₄ (25%, 1 mL/kg)诱导肝纤维化,设立对照组、CCl₄组和CCl₄+栀子苷组(40 mg/kg),4周后检测肝功能及血清肝纤维化指标,用HE和Masson染色进行组织学观察,免疫组织化学分析组织α-SMA...     

妇科千金胶囊联合桂枝茯苓丸对老年卵巢囊肿患者血清NO、TNF-α及性激素水平的影响

目的:探讨妇科千金胶囊联合桂枝茯苓丸治疗老年卵巢囊肿的临床疗效及对患者血清一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、性激素水平的影响。方法:将2015年1月-2016年10月来我院就诊的107例老年卵巢囊肿患者按照随机数表字法分成观察组(54例)和对照组(53例)。对照组患者口服妇科千金胶囊进行治疗,观察组患者口服妇科千金胶囊和桂枝茯苓丸联合治疗。观察治疗前后患者血清NO,TNF-α以及患者性激素水平,并比较两组临床疗效。结果:观察组总有效率为94.44%明显高于对照组的81.13%(P0.05)。两组患者血清NO、TNF-α、雌二醇(E2),促黄体生成素(LH),促卵泡刺激素(FSH)水平在治疗前无明显差异(P0.05);治疗后两组患者血清NO、TNF-α、E2水平均显著降低,且观察组显著低于对照组(P0.05);同时两组LH、FSH水平显著升高,且观察组显著高于对照组(P0.05)。结论:妇科千金胶囊联合桂枝茯苓丸治疗老年卵巢囊肿患者临床疗效显著,能够调节患者血清NO、TNF-α以及性激素水平,值得临床推广。     

胃内PGE和PGF_(2α)介导胃蛋白酶的适应性细胞保护作用的观察

胃粘膜细胞不断合成和释放的前列腺素(PGs),具有很强的细胞保护作用。我们的前一工作表明,预先用胃蛋白酶灌胃,可防止牛磺胆酸所致的胃粘膜坏死的发生,这一保护作用可被消炎痛所阻断;间接提示这种适应性细胞保护的发生机制可能与内源性PGs有关。本文则用放射免疫方法,直接测定了胃粘膜组织PGE和PGF_(2α)含量在不同情况下的变化。结果表明,单纯胃蛋白酶225U,胃蛋白酶150U溶于 0.1N HCl或75单位溶于 0.2N HCl中,提前 15min灌胃,均可防止由0.2N NaOH、0.6N HCl 和无水乙醇所致的胃粘膜坏死的发生,这种保护作用呈明显的量效关系。上述三种配方的胃蛋白酶溶液灌胃后15min,胃粘膜组织PGE和PGF_(2α)含量明显升高,分别为对照组的2.7—2.9倍和1.9—2.5倍;且以PGE含量的上升占优势。进一步观察不同浓度胃蛋白酶溶于生理浓度盐酸中对胃粘膜PG含量的影响发现,胃蛋白酶与胃粘膜组织PGE和PGF_(2α)含量的增加呈现明显的量效关系。这些结果说明,胃蛋白酶作为弱刺激对强酸、强碱和无水乙醇所致的胃粘膜损伤均有保护作用,其作用机制则是通过诱发内源性PGs的合成和释放而实现的。     

排卵期生殖道局部细胞免疫与黄体功能不全患者不孕的关系研究

目的:探讨排卵期生殖道局部细胞免疫与黄体功能不全(LPD)患者不孕之间的关系,旨在为临床防治不孕不育提供依据及参考。方法:选择2014年10月~2015年10月本院确诊的LPD患者50例为观察组,同期筛选同期50例健康体检者为对照组,排卵后第4 d、6 d、8 d采用酶联免疫法检测两组排卵期血清孕酮(P)水平,采用放射免疫法(RIA)检测两组排卵期血清以及宫颈黏液中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素1-β(IL-1β)的表达水平,对以上检测指标予以比较分析。结果:排卵后第4d、6d、8d观察组血清P明显低于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.05)。排卵期观察组血清TNF-α及IL-1β水平与对照组比较,差异不具有统计学意义(P0.05),但观察组宫颈黏液中TNF-α及IL-1β水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。排卵期观察组宫颈黏液中TNF-α、IL-1β水平与血清P存在负相关关系(r=-0.879,-0.886,P0.05),且宫颈黏液中TNF-α、IL-1β二者存在显著正相关关系(r=0.768,P0.05)。结论:排卵期生殖道局部细胞免疫激活,宫颈黏液中TNF-α及IL-1β水平升高,对黄体发育产生影响,并导致LPD的发生。     

肿瘤坏死因子α和β对电离辐射诱导细胞凋亡的效应

为探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis foctor)α和β(TNFα和β)对电离辐射诱发细胞凋亡的效应及其机理,采用DNA琼脂糖凝胶电泳和FACS分析等方法,观察了人肿瘤坏死因子α(hTNFα)和β(hTNFβ)对~(60)Co-γ射线诱发细胞凋亡的形态学,生化学变化。结果显示:hTNFα或hTNFβ均可明显抑制~(60)Co-γ射线诱发正常人胚肺二倍体细胞(2BS)的凋亡,而相同剂量的hTNFα能促进~(60)Co-γ射线诱发的人体肺腺癌细胞系A549细胞凋亡,而对另一株人体肺癌SPC细胞的效应比A549降低1倍;hTNFβ能分别增强A549和SPC的细胞凋亡频率。由此认为,hTNFα和hTNFβ均可通过调节细胞的生理生化反应来改变细胞对电离辐射的敏感性,可保护正常细胞免受辐射损伤,而增加某些肿瘤细胞对辐射的敏感性。     

止血方对围绝经期异常子宫出血肝肾阴虚证患者内分泌激素水平的影响

目的分析止血方对围绝经期异常子宫出血肝肾阴虚证患者内分泌激素水平的影响。方法将93例围绝经期异常子宫出血患者随机分为对照组46例和观察组47例,对照组予以米非司酮片治疗,观察组加用自拟止血方治疗,观察比较两组患者的临床疗效以及治疗前后促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、子宫内膜厚度、控制出血时间与完全止血时间的情况。结果观察组的FSH、LH、子宫内膜厚度、控制出血时间及完全止血时间均低于对照组(P0.05)。观察组E_2水平及总有效高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论止血方可通过补益肝肾作用调节内分泌激素水平,改善卵巢功能,其凉血止血等作用能快速控制异常子宫出血,对围绝经期异常子宫出血肝肾阴虚证患者的疗效显著,值得临床推广。     

前列腺素、(PGs)的放射免疫测定法

一、抗体制备 以结合抗原PG-BSA(17∶1)免疫8个月后所得兔抗PG血清的最终工作稀释度及相对交叉反应分别为:4号兔抗PGE_2血清,1∶450;PGE_1 100％,PGA 3％,PGF_(2α) 0.75％。7号兔抗PGE_2血清,1∶1,500;PGA 100％,PGE_1 17.3％,PGF_(2α) 0.39％。5号兔抗 PGF_(2α)血清,1∶900;PGF_(2α) 100％,PGA<0.01％,PGE_1 0.52％。