微生物金属蛋白酶的研究进展

金属蛋白酶分布广泛 ,性质特异。对微生物金属蛋白酶的研究具有很大的现实意义。本文着重综述了金属蛋白酶的特点和分布 ,微生物金属蛋白酶的结构、来源、性质及其应用等方面的研究现状。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂研究进展

基质金属蛋白酶家族是细胞外基质降解过程中的重要酶类,组织金属蛋白酶抑制剂是基质金属蛋白酶的天然抑制物。研究证实,细胞外基质中基质金属蛋白酶及其组织抑制剂的失衡与多种病理机制有关,尤其与肿瘤的侵袭和转移密切相关。本就基质金属蛋白酶及其组织抑制剂的性质、结构以及功能进行了综述。     

基质金属蛋白酶检测技术的研究进展

基质金属蛋白酶是降解细胞外基质的重要酶类。在正常生理状态下,基质金属蛋白酶参与新生血管的形成及伤口的愈合;在病理状态下它参与组织重构、恶性肿瘤转移等病理进程。通过对基质金属蛋白酶检测,可以深度了解其性质及致病机理,并进一步了解病症的恶化程度,从而进行及时检测治疗。现根据基质金属蛋白酶的功能及特性,对基质金属蛋白酶活性和表达两大方面的检测技术进行了综述,为研究人员选择合适的基质金属蛋白酶检测技术提供参考。     

微生物碱性蛋白酶的研究进展

碱性蛋白酶可源于动物、植物和微生物。微生物来源的碱性蛋白酶因其具有培养简便、产量丰富而应用尤为广泛,同时菌种筛选、纯化、诱变乃至重组工程菌技术的应用为其大规模工业化生产提供了坚实的基础。本文对微生物碱性蛋白酶产生菌的种类、高产菌株选育工作进展以及碱性蛋白酶的分类、性质、基因结构及功能等方面进行了简要概述。     

镰刀菌Q7-31T金属蛋白酶FQME14的分离纯化及鉴定

从镰刀菌Q7-31T燕麦秸秆诱导发酵的粗酶液中分离、纯化并鉴定金属蛋白酶。研究该蛋白酶的酶学特性,丰富和完善金属蛋白酶的基础资料;探究其在纤维素酶系降解纤维素过程中发挥的作用,旨在丰富和完善纤维素酶系降解机制。以燕麦秸秆为碳源诱导发酵镰刀菌Q7-31T,并在发酵第6天收酶。通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-100凝胶过滤层析和DEAE弱阴离子交换层析对粗酶液进行分离纯化得到金属蛋白酶,随后对其进行了酶学性质分析和串联质谱鉴定。结果显示,从镰刀菌Q7-31T菌株的粗酶液中分离得到一种蛋白酶FQME14,其相对分子质量为30 k D;串联质谱鉴定的结果表明FQME14属于M14家族;蛋白酶酶学性质研究表明:该蛋白酶的比酶活为2.85 U/mg,最适反应p H和温度分别为p H 7.0和40℃,在p H 5.0-p H 9.0的范围内具有很好的稳定性,蛋白酶在50℃以下稳定性很好,超过50℃酶活力降低。该蛋白酶对酪蛋白、卵清蛋白和牛血清白蛋白都有很高的降解能力。金属离子Mn~(2+)和Co~(2+)对酶活性有激活作用,Mg~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+)、K~+、Ca~(2+)和Na~+对酶活性有不同程度的抑制作用。从镰刀菌Q7-31T粗酶液中分离纯化得到蛋白酶FQME14,并对其进行了酶学性质的研究和串联质谱鉴定,结果表明FQME14为M14家族蛋白酶,是一种新的金属蛋白酶。     

同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的作用机制及最新进展

1969年,在研究患有同型半胱氨酸遗传代谢疾病的儿童血管生理时,首次提出了动脉粥样硬化的同型半胱氨酸理论。事实上,自从1969年发现动脉粥样硬化的同型半胱氨酸理论后,许多回顾与展望人类的观察性研究已经将高同型半胱氨酸血症作为动脉粥样硬化的一个独立危险因素。本文主要从以下几个方面探讨同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的作用机制:氧化应激,内皮功能障碍和炎症;微生物,脂蛋白和脆性斑块的形成;基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶2。     

锌金属蛋白酶家族介绍及结构机理研究进展

锌金属蛋白酶是一类分布广泛,种类繁多的水解酶家族,是近年来人们研究的热点．一般来说,HEXXH保守序列一直都作为锌金属蛋白酶家族分类的依据．除此之外,不同种类的酶还有一些其它的序列特征．谷氨酸锌蛋白（gluzincin）在锌离子配体处共有2组保守区域;甲硫氨酸锌蛋白（metzincin）则拥有1个延长的保守序列HEBXHXBGBXH,里面包含了第3个His配体．大量的金属蛋白酶晶体结构被解析出来,从中可以发现该类酶的活性中心都包含有1个锌离子．锌金属蛋白酶的催化机理通常认为是锌离子与1个水分子结合活化而成．但是,最近的发现证实了并不是所有的锌金属蛋白酶催化都需要水分子参与活化．在本文中,综述了这些已发表的锌金属蛋白酶家族的分类、结构特征、底物特异性识别和催化机理．     

瘤胃微生物胞外蛋白酶的提纯及性质鉴定

<正> 反刍动物的瘤胃中不存在腺体,消化酶完全来自于微生物。瘤胃降解的蛋白,除一部分为机体必需外,大部分被微生物浪费。因此,瘤胃微生物蛋白酶活力的高低直接影响饲料蛋白的利用率。目前,研究者们正寻找各种途径增加通过瘤胃的蛋白,但实验中常将微生物的整体作用和具体酶的作用相混淆,故本试验旨在提取瘤胃微生物胞外蛋白酶纯品,较全面地了解其性质和特点。     

新型金属蛋白酶ADAMTS家族的研究进展

含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶ADAMTSs(a disintegrin and metallo-proteinase with thrombospondin motifs)是一类新的Zn2 依赖的金属蛋白酶家族,广泛存在于哺乳动物和无脊椎动物体内.从1997年发现第一个ADAMTSs家族成员以来,迄今共有19个成员被发现,在保持凝血系统的稳态、器官生成、炎症、生育等方面有重要作用.尽管其中大部分酶的功能尚不清楚,但已有研究显示该家族成员与多种疾病密切相关.ADAMTSs与基质金属蛋白酶MMPs、解聚蛋白样金属蛋白酶ADAMs同属金属蛋白酶家族,但在结构组成、组织细胞分布、底物作用的特异性、酶活性的调节等方面有明显差别.本文综述了其在结构功能及与疾病关系的研究进展.     

微生物弹性蛋白酶研究概况

概述了弹性蛋白酶的性质,及在医药、食品和日用化学等方面的重要功用,同时对能够产生胞外弹性蛋白酶的微生物作了详尽的论述。通过微生物发酵法和生化提取法制备弹性蛋白酶的工艺对比得出结论：由微生物发酵法生产弹性蛋白酶成本低,产量大,不受原料限制。若开发出廉价、充足的微生物弹性蛋白酶酶源,必将推动它在各领域的广泛应用。     

产高温蛋白酶微生物菌种资源的研究

对嗜温及嗜热微生物在不同环境中的分布及其产蛋白酶的情况进行了调查。研究结果显示从常温环境中也有可能分离到具有应用前景的嗜热菌菌株。     

水貂源高产蛋白酶枯草芽孢杆菌的分离筛选及酶学性质

【背景】开发、筛选优良益生菌菌种是当下畜牧业的研究热点,益生菌的潜在功能也被广为挖掘。【目的】分离、筛选具有良好耐受性且高产胞外蛋白酶的菌株,研究其生物学特性和酶学性质,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源。【方法】采集健康水貂新鲜粪便,配制酪蛋白培养基初筛和优化Folin-酚法复筛,对筛选菌进行生物学特性研究,获得产蛋白酶能力较强、耐受性较优的菌株,并进行常规鉴定和分子生物学鉴定,最后对蛋白酶酶学性质进行研究。【结果】筛选得到一株高产蛋白酶、耐受性较优的芽孢杆菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),编号为3。在初始发酵培养基条件下,酶学性质研究结果表明,该蛋白酶的最适反应温度为70℃,最适反应pH值为9.0,最佳金属离子激活剂为K+,Cu2+和Fe2+对酶活力有明显的抑制作用,在20%浓度的有机溶剂作用时蛋白酶未变性失活。【结论】从水貂粪便中分离获得一株具有良好的生物学特性、酶学性质和碱性蛋白酶活性的枯草芽孢杆菌,为该菌株在实际生产应用中提供了基础保障。     

低温蛋白酶研究进展与应用*

低温蛋白酶是一类能够在低温下将大分子蛋白质水解为小分子多肽或者氨基酸的水解酶,多由低温环境中的微生物产生。低温蛋白酶在较低温度环境下具有较高的催化活性,在反应过程中仅较少的量就可以达到理想效果,并且可以避免不必要的化学转化,减少挥发性物质的损失。低温蛋白酶在洗涤、食品加工以及医疗等应用领域已经显示出独特的优势和商业价值。综述不同种类及来源的微生物低温蛋白酶,总结其催化性质、结构特征以及目前的应用情况和未来发展前景,以期进一步推动新型低温蛋白酶的开发和应用。     

藏东南森林土壤微生物群落结构与土壤酶活性随海拔梯度的变化

【目的】针对青藏高原藏东南地区色季拉山不同海拔森林土壤,探讨微生物群落与土壤酶活性之间的联系以及受控因子。【方法】利用微生物细胞膜磷脂(PLFA)方法研究土壤微生物群落结构随海拔变化情况,分析土壤葡萄糖苷酶、酚氧化酶、蛋白酶、L-天冬酰胺酶、脲酶和酸性磷酸酶活性以及土壤理化性质随海拔的变化趋势。【结果】土壤理化性质和生化指标随海拔增高没有显著变化,如水分含量、有机碳、全氮、碳氮比、pH、无机氮和硝态氮,土壤葡萄糖苷酶、酚氧化酶、蛋白酶、L-天冬酰胺酶和酸性磷酸酶活性等;然而,微生物丰度呈现中峰优势分布规律,细菌、真菌、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和放线菌含量在海拔3 900 m和4 000 m处生物量显著高于低海拔和更高海拔。皮尔森相关性分析表明土壤pH是影响微生物群落结构的主要因子,但海拔梯度上的温度变化与微生物群落结构和酶活性不存在显著相关性;同时,有机碳、全氮、水溶性有机碳和水溶性有机氮和pH等理化指标与土壤酶活性显著相关。【结论】在藏东南色季拉山森林生态系统,海拔梯度对土壤微生物群落结构影响较大,土壤理化指标与生物特征对海拔梯度的响应较弱。     

人组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1在Pichia pastoris酵母中重组表达研究

 为研究组织型基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMPs)的分子作用机制 ,探讨了在 Pichia pastoris酵母中高效表达分泌型人组织型基质金属蛋白酶抑制剂 - 1 (TIMP- 1 )的技术路线 ,并对产物性质进行初步研究 .通过 PCR从含有 TIMP- 1基因的 p BS质粒获得了该基因的全长序列 ,构建了 p PIC9/T1表达载体 ,电击法转化酵母 ,通过表型筛选和 PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入 Pichiapastoris酵母基因组中 .SDS- PAGE表明表达量高达 40 mg/L培养上清 .用免疫印迹法确定了产物的正确性 ;同时 ,反向明胶酶谱法证明了重组蛋白具有抑制基质金属蛋白酶的活性 .     

微生物产生的弹性蛋白酶研究现状

介绍了微生物产生的弹性蛋白酶的来源,性质结构。克隆表达,蛋白质工程改造及其应用方面的研究进展。并展望其在生产开发方面的前景。     

基质金属蛋白酶与脑血管急性损伤

基质金属蛋白酶是一组金属依赖性的蛋白内切酶家族,可对细胞外基质进行特异的降解,在生理和璃理过程中都发挥着重要作用。已有许多有关基质金属蛋白酶在中枢神经系统的作用的研究报道,本文对基质金属蛋白酶在脑缺血和脑出血等脑血管的急性损伤作用进行了综述,并对进一步研究方向作出展望。     

食线虫真菌致病相关丝氨酸蛋白酶的研究进展

食线虫真菌是一类土壤微生物,作为线虫的天敌,它们对于维持线虫在土壤生态环境中的种群动态平衡发挥着十分重要的作用。食线虫真菌通过形成特殊的捕食器官或产生毒素等方式来捕捉和杀死线虫。丝氨酸蛋白酶是食线虫真菌侵染线虫的重要毒力因子,近年来,研究人员对不同食线虫真菌来源的致病相关丝氨酸蛋白酶进行了大量的研究,尤其在丝氨酸蛋白酶的晶体结构和分子进化方面的研究取得了较大的进展。本文对食线虫真菌致病相关丝氨酸蛋白酶的生物化学性质和功能进行了系统的总结,对丝氨酸蛋白酶的晶体结构、催化机制及分子进化等最新的进展进行了评述。     

微生物产生的弹性蛋白酶研究现状*

介绍了微生物产生的弹性蛋白酶的来源、性质结构、克隆表达、蛋白质工程改造及其应用方面的研究进展,并展望其在生产开发方面的前景。     

酸性矿山废水污染的水稻田土壤中重金属的微生物学效应

采样调查了广东大宝山地区受酸性采矿废水长期污染的亚热带水稻田的土壤理化性质 ,重金属 Cu、Pb、Zn、Cd的全量及其 DTPA浸提量 ,以及微生物生物量及其呼吸活性等指标。利用主成分和逐步回归分析了影响土壤重金属的有效性及其微生物学效应的因素。结果表明 :土壤高含硫 ,强酸性 ,有机碳、全氮较低 ,4种金属的全量普遍超标。DTPA可提取态金属含量较高 ,不仅与其全量呈显著正相关 ,而且与土壤酸度和粘粒含量正相关 ,和 Mn含量负相关。过量的金属显著降低了土壤微生物生物量 C、N、微生物商、生物量 N/全 N比 ,并抑制了微生物呼吸强度和对有机碳的矿化率 ,导致了土壤 C/N比的升高。同时 ,金属对微生物群落及生理代谢指标 ,如微生物生物量 C/N比和代谢商的影响不显著。 DTPA可提取态金属 ,特别是 DTPA- Cu是导致微生物生物量和活性指标变化的主要因素。以有机碳 (或全氮 )为基数的复合微生物指标降低了土壤性质差异造成的干扰 ,较单一指标更能准确指示微生物对金属胁迫的反应。土壤硫没有对金属有效性和微生物指标产生明显影响 ,但其氧化过程可能引起酸化和金属离子的释放