同宗配合蜜环菌与欧美异宗配合蜜环菌狭义种的分子系统学关系

从亚洲、欧洲和北美收集18个蜜环菌狭义种菌株,PCR扩增其rDNA的IGS和ITS区域,用AluI、HaeIII、HinfI和TagI四种限制性内切酶进行酶切,同时用随机扩增微卫星(RAMS)多态性,对蜜环菌狭义种的进行了遗传多样性和分子系统学分析。结果蜜环菌狭义种的IGS和ITS-RFLP类型比以前报道的更多,亚洲、欧洲和北美菌株都具有比较明显的特征片段,通过ITS和IGS图谱可将三个大陆的菌株区分开,其中IGS-HinfI图谱能完全区分3个大陆的菌株。RFLP数据的系统学分析表明,该种存在明显的大陆遗传分化,亚、欧、北美的群体分属三个相互独立的进化系,北美群体IGS变异程度较小,ITS变异程度极高;而欧洲群体IGS的变异程度较大,多态性高,ITS变异程度非常小。RAMS系统分析表明,中国、日本和非洲的同宗配合蜜环菌属于一个系统发育系,该发育系同欧洲和北美的异宗配合种的两个发育系分属3个不同的独立进化分支。据此建议欧洲和北美的异宗配合蜜环菌应作为蜜环菌的两个亚种。     

同宗配合蜜环菌与欧美异宗配合蜜环菌狭义种的分子系统学关系*

从亚洲、欧洲和北美收集18个蜜环菌狭义种菌株,PCR扩增其rDNA的IGS和ITS区域,用AluI、HaeIII、HinfI和TagI四种限制性内切酶进行酶切,同时用随机扩增微卫星(RAMS)多态性,对蜜环菌狭义种的进行了遗传多样性和分子系统学分析。结果蜜环菌狭义种的IGS和ITS-RFLP类型比以前报道的更多,亚洲、欧洲和北美菌株都具有比较明显的特征片段,通过ITS和IGS图谱可将三个大陆的菌株区分开,其中IGS-HinfI图谱能完全区分3个大陆的菌株。RFLP数据的系统学分析表明,该种存在明显的大陆遗传分化,亚、欧、北美的群体分属三个相互独立的进化系,北美群体IGS变异程度较小,ITS变异程度极高;而欧洲群体IGS的变异程度较大,多态性高,ITS变异程度非常小。RAMS系统分析表明,中国、日本和非洲的同宗配合蜜环菌属于一个系统发育系,该发育系同欧洲和北美的异宗配合种的两个发育系分属3个不同的独立进化分支。据此建议欧洲和北美的异宗配合蜜环菌应作为蜜环菌的两个亚种。     

中国与北美大陆的高卢蜜环菌系统发育分析

在中国和北美大陆分别收集53和15株高卢蜜环菌Armillaria gallica菌株,并用ISSR（inter-simple sequence repeat）分子标记对这些菌株进行了亲缘关系及系统发育分析。结果表明：中国和北美大陆的A. gallica因地理隔离产生明显的遗传分异,在系统发育树上分别形成了各自的进化分支;北美大陆的分支内部遗传分化尚不明显,而中国的进化分支遗传分化程度相对较大且更为古老,中国菌株可能是两个大陆A. gallica的祖先株系。     

中国与欧洲高卢蜜环菌的遗传多样性

高卢蜜环菌(Armillaria gallica)为北半球广布种,不同大陆间的菌株遗传相似性和多样性水平能反映出该种在洲际大陆尺度上的地理遗传变异关系。作者用ISSR(inter-simple sequence repeat)分子标记技术,对从中国和欧洲收集到的高卢蜜环菌79个菌株进行了遗传多样性分析。用6个ISSR引物扩增得到210个位点,其中多态性位点(频率<0.95)为202个,占96.2%,平均每个引物多态位点多达33.6个,表明ISSR标记在蜜环菌中存在较高的多态性。根据非加权类平均法(UPGMA)聚类分析,中国53个菌株中的49个在0.773的相似性水平上聚成了中国类群(China group);而欧洲26个菌株遗传分化较大,分别在0.775和0.763的相似性水平上聚成了欧洲类群A(Europe group A)和B(Europe group B);2个欧洲类群间的相似性水平仅为0.738,而欧洲类群A与中国类群间的相似性却达到了0.770;两个大陆均有少数菌株表现出较为明显的遗传分化,个别菌株的种内遗传相似性甚至低于蜜环菌种间的遗传相似性。结果表明,中欧两个大陆间的A.gallica菌株因地理隔离已经表现出明显的遗传分化,处于异域物种形成过程中;欧洲大陆的菌株遗传分化更为明显,可能是两个大陆A.gallica菌株的起源地。     

大兴安岭和长白山地区蜜环菌生物种的研究

从大兴安岭和长白山采集到３０号蜜环菌标本,选其中有代表性的１０个号的担子果获得单孢株。交配试验表明每一担子果都具有双因子异宗配合系。不同子实体交配型之间交配结果表明,在大兴安岭和长白山地区蜜环菌目前至少存在５个生物种,分别称为生物种Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ和Ｅ。将这５个生物种的单孢菌种与欧洲５个蜜环菌生物种的单孢菌株进行配合,生物种Ｂ与欧洲Ａ．ｇａｌｌｉｃａ,生物种Ｅ与欧洲Ａ．ｏｓｔｏｙａｅ亲和交配,因此将     

天麻栽培用蜜环菌的遗传多样性、生长和水解酶

蜜环菌Armillaria是一种广泛分布的担子菌,是栽培中药天麻所必须的共生菌。为揭示我国天麻栽培用和鄂西地区部分野生蜜环菌资源的遗传多样性和生物学特性,本文收集了9个省市EF-1-α的19个蜜环菌商品菌株和鄂西地区20株野生蜜环菌菌株,以IGS、ITS和elongation factor-1-alpha（EF-1-α）为分子标记对这些菌株进行系统发育与遗传多样性分析,并对影响与天麻共生的生物学特性（菌索发育和胞外水解酶活性）进行对比研究。结果表明,这19株蜜环菌商品菌株分别归属于2个clade。其中,有18个菌株聚在cladeⅢ,说明不同来源的蜜环菌商品菌株之间系统发育关系很近;通过对蜜环菌的系统发育、菌索生长以及胞外水解酶活性的研究,总体上商品种优于鄂西的野生蜜环菌生物种。从鄂西野生蜜环菌中筛选出4个具有潜在栽培价值的菌株。本研究为天麻栽培生产中蜜环菌菌种的选择提供参考。     

大兴安岭和长白山地区蜜环菌生物种的研究

从大兴安岭和长白山采集到30号蜜环菌(Armillaria mellea)标本,选其中有代表性的10个号的担子果获得单孢株。交配试验表明每一担子果都具有双因子异宗配合系。不同子实体交配型之间交配结果表明,在大兴安岭和长白山地区蜜环菌目前至少存在5个生物种,分别称为生物种A、B、C、D和E。将这5个生物种的单孢菌种与欧洲5个蜜环菌生物种的单孢菌株进行配合,生物种B与欧洲A.gallica,生物种E与欧洲A.ostoyae亲和交配,因此将生物种B和E分别定为A.gallica和A.ostoyae。生物种A、C和D则不与任何欧洲生物种交配。     

用ISSR标记研究高卢蜜环菌系统发生学的尝试

用ISSR(Inter-Simple Sequence Repeat)标记对黑龙江省牡丹江地区高卢蜜环菌的系统发生学进行了研究,用6个引物对35个菌株的DNA模板进行扩增。结果表明该地区的35个菌株分属3个不同的发育系,并且3个发育系在地理分布上是交错在一起的。同时表明ISSR标记是研究蜜环菌系统发育关系的理想的分子标记手段。     

中国蜜环菌的新生物种

在调查研究蜜环菌生物种的过程中,先后在东北、华北、华中和西南地区,发现了四个新的中国蜜环菌生物种,CBS F、CBS G、CBS H和CBS I。研究表明,CBS G属于典型的同宗配合种,其余三个为异宗配合。CBS H与CBS C之间存在部分互交可育,比例高达17.8%,在同一个国家的两个种之间出现如此高的互交可育比例还是首次报道。上述三个生物种同欧美的已知蜜环菌种均互交不育,为亚洲特有种。CBS I为无菌环的假蜜环菌A.tabescens (Scop. ) Emel,它与欧洲的假蜜环菌互交可育,属于同种。但同中国其它各生物种互交不育。同时讨论了蜜环菌生物种的群体观点。     

鄂西地区蜜环菌生物种的遗传多样性研究

蜜环菌属Armillaria真菌是世界范围内广泛分布的担子菌,既是引起森林病害的重要病原菌,也是天麻和猪苓生长的必须共生真菌,具有重要的经济价值。本文对我国鄂西天麻主产区即神农架林区、大老岭自然保护区、宜昌市所属的夷陵区和五峰县、恩施自治州等地进行了系统的调查采样,共获得45份蜜环菌子实体样本及其二倍体菌株,其中通过孢子印分离获得约320个单孢菌株。在此基础上,采用IGS、ITS和elongation factor-1 alpha（EF1-α）分子标记对45份二倍体菌株进行测序和系统发育分析,对有单孢株的样本采用遗传互交不育性实验进行生物种鉴定。结果表明,鄂西地区的蜜环菌分为4个clade,共有6个不同的蜜环菌生物种,分别为CBS J,CBS L,CBS N,CBS O,CBS F和Armillaria mellea,具有丰富的遗传多样性。其中,24个样本鉴定为CBS L,是鄂西地区的优势种;9个样本鉴定为CBS J;9个样本鉴定为CBS N;另有3个样本分别鉴定为CBS O,CBS F和Armillaria mellea。其中CBS L、CBS N、CBS O首次在湖北地区报道,扩大了这3个生物种的分布范围。本研究为了解鄂西地区蜜环菌的资源情况提供基础数据,对天麻生产蜜环菌菌种选育具有重要的参考价值。     

新的蜜环菌生物种

对湖北、西藏等地区的蜜环菌进行调查,发现了1个新蜜环菌生物种CBSP和2个互交不育子实体标本,均为四极性异宗配合。扩大了部分生物种的分布范围,试验结果显示西南地区为CBSJ的分布中心。     

新的蜜环菌生物种

对湖北、西藏等地区的蜜环菌进行调查,发现了1个新蜜环菌生物种CBS P和2个互交不育子实体标本,均为四极性异宗配合。扩大了部分生物种的分布范围,试验结果显示西南地区为CBS J的分布中心。     

新的蜜环菌生物种

对湖北、西藏等地区的蜜环菌进行调查,发现了1个新蜜环菌生物种CBS P和2个互交不育子实体标本,均为四极性异宗配合。扩大了部分生物种的分布范围,试验结果显示西南地区为CBS J的分布中心。     

中国蜜环菌生物种与北美种的交配关系

将中国三个未知蜜环菌生物种A、C、D的38个代表菌株与北美蜜环菌A．sinopina、A．calvescens、A．nabsnona、A．gemina、A．ostoyae、NABSX等六个种的22个代表菌株进行了配对试验,结果表明中国生物种A与北美种A．sinopina互交可育,属于同一种。中国生物种C与任一北美种都互交不育,不存在部分可育现象,为亚洲特有种。中国生物种D与欧美的A．ostoyae的两个菌株互交可育,实验证实该种另外四个欧美菌株已经失去交配能力,因此确认中国生物种D与A．ostoyae属于同种。     

中国蜜环菌生物种与北美种的交配关系

将中国三个未知蜜环菌生物种Ａ、Ｃ、Ｄ的３８个代表菌株与北美蜜环菌Ａ．ｓｉｎａｐｉｎａ、Ａ．ｃａｌｖｅｅｓｃｅｎｓ、Ａ．ｎａｂｓｎｏｎａ、Ａ．ｇｅｍｉｎａ、Ａ．ｏｓｔｏｙａｅ、ＮＡＢＳＸ等六个种的２２个代表菌株进行了配对试验,结果表明中国生物种Ａ与北美种Ａ．ｓｉｎａｐｉｎａ互交可育,属于同一种。中国生物种Ｃ与任一北美种都互交不育不存在部分可育现象,为亚洲特有种,中国生物种Ｄ与欧美的Ａ．ｏｓｔｏｙａｅ     

中国蜜环菌和新生物种

在调查研究蜜环菌生物种的过程中,先后在东北、华北、华中和西南地区,发现了四个新的中国蜜环菌的生物种,ＣＢＳ Ｆ、ＣＢＳ Ｇ、ＣＢＳ Ｈ和ＣＢＳ Ｉ。研究表明,ＣＢＳ Ｇ属于典型的同宗配合种,其余三个为异宗配合。ＣＢＳ Ｈ与ＣＢＳ Ｃ之间存在部分互交可育,比例高达１７．８％,在同一个国家的两个种之间出现如此高的互交可育比例还是首次报道。上述三个生物种同欧美的已知蜜环菌种均互交不育,为亚洲特有种。ＣＢ     

法国蜜环菌Armillaria gallica菌株遗传多样性的ISSR分析

在中国东北地区共采集到53个法国蜜环菌Armillaria gallica菌株,用ISSR（Inter-Simple Sequence Repeat）标记技术对这些菌株进行遗传多样性分析。用6个ISSR引物扩增所得条带表明,ISSR标记在蜜环菌中存在较高的多态性;亲缘关系树状图表明,有3个菌株遗传分化明显;其余50个分别来自3个不同地理居群的菌株聚成一类,亲缘关系较近,没有表现出地理隔离。     

中国北方地区蜜环菌生物种的初步研究

对采自北京东灵山地区、黑龙江带岭地区、以及帽儿山地区不同寄主上的１５个蜜环菌子实体进行了极性测试和生物种测定。配对培养结果表明１５个子实体中共存在着四个生物种,分别命名为ＣｈＢＳＩ、ＣｈＢＳＩ、ＣｈＢＳⅢ和ＣｈＢＳⅣ。除生物种ＣｈＢＳⅢ的极性不清楚外,其它生物种都是四极性异宗配合的真菌。东灵山菌株中的两个生物种是ＣｈＢＳⅡ和ＣｈＢＳⅣ,带岭菌株中的两个生物种是ＣｈＢＳＩ和ＣｈＢＳⅢ,帽儿山菌株是生物种ＣｈＢＳⅠ。经过中国生物种与欧洲生物种的配对培养,发现生物种ＣｈＢＳⅣ与Ａｒｍｉｌａｒｉａｇａｌｉｃａ融合。     

中国蜜环菌生物种新记录

在华中、西北和西南地区,发现了6个新的中国蜜环菌生物种CBS J、CBS K、CBS L、CBS M、CBS N和CBS O,研究证明都是异宗配合种类。CBS J与CBS A、CBS K与CBS G 以及CBS L与CBS H之间存在较低的互交可育现象。CBS K与Armillaria mellea互交可育, CBS M与A.borealis互交可育,且首次在欧洲以外地区被发现,其余4种为亚洲特有种。     

内蒙古沙棘共生菌Frankia的遗传多样性

利用RFLP分子标记方法,在自然条件下对内蒙古东、西部8个地点采集的24个沙棘根瘤样品进行沙棘共生菌Frankia的遗传多样性分析。结果表明,供试样品nifD-nifK基因间隔区(IGS)扩增片段的大小约1 100bp;不同样品的酶切图谱有明显差异;有些样品产生复合RFLP型,揭示在自然状态下不同基因型的Frankia菌株可共同侵染同一沙棘寄主。聚类分析显示,来源于相同地点和不同地点的根瘤样品内的Frankia菌株间均有遗传多样性;没有发现Frankia菌株遗传多样性的分布与采样地点有相关性。