植物激素对哈密瓜(Cucumis melo L.)子叶形成愈伤组织和植株再生的作用

用附加2ppm NAA 和0.5ppm 激动素或单附加高浓度(5—10ppm)激动素的 Miller 培养基,能诱导出两种形态不同的愈伤组织,前者松软如海绵,后者质硬成瘤状。只有瘤状愈伤组织在含高浓度激动素的Miller培养基中才能分化出芽,进而形成完整的植株。但改用 White 培养基,或以下胚轴为材料,都未获得再生植株。因此,认为植物产生愈伤组织和再分化为植株不仅与外源激素有关,而且因植物材料和营养条件而异。     

党参叶片愈伤组织的诱导和分化

植物名称:党参(Codonopsis Pilosuta(Franch)Nannf)材料类别:幼嫩叶片。培养条件:MS为基本培养基。每升加水解乳白蛋白500mg。诱导愈伤组织时每升附加2,4-D1mg,玉米素3mg;诱导愈伤组织分化,每升附加玉米素3mg,NAA0.1mg;诱导长根时,培养基内不加生长素和细胞分裂素物质。培养温度为24～28℃,每天光照10～12小时。生长与分化情况:(一)愈伤组织的诱导:外植体培养15天以后,开始形成淡黄色愈伤组织,生长     

玉米原生质体的植株再生

以玉米花粉诱导产生的胚性愈伤组织,在 N6基本培养基附加激动素2 mg/l,6-苄基氨基嘌呤1mg/l,2,4-D 0.3 mg/l,水解酪蛋白500 mg*l 及谷酰胺250 mg/l 的培养基上进行转代培养。用转代培养一年半后的胚性愈伤组织分离原生质体,原生质体培养在附加激动素0.2 mg/l,6-苄基氨基嘌呤0.1 mg/l,2,4-D 0.5 mg/1,水解酪蛋白200 mg/l,谷酰胺100 mg/l及椰乳296的原生质体培养基 Z_2中。培养4—6天后,原生质体的再生细胞进行第一次分裂;培养3星期后发育成肉眼可见的小愈伤组织。此后,需添加降低糖浓度的同样原生质体培养基 Z_2共两次。待再生愈伤组织长到直径2—4 mm 大小时,把它们先后转经第一及第二(即Z_3及 Z_4)分化培养基上诱导器官分化。最后在 Z_4分化培养基上同时有胚状体的发生及植株的分化。     

杜衡离体繁殖的研究

以马兜铃科植物杜衡为研究材料,试图通过茎尖培养来获得愈伤组织,继而诱导愈伤组织分化形成杜衡小植株。试验证明：杜衡茎尖在MS基本培养基附加6-BA 0.6mg/l和NAA0.1mg/;这一激素组合上可诱导茎尖基部形成愈伤组织;将愈伤组织分割转接到附加6-BA0.2mg/l和NAA0.01mg/l 的MS基本幅度基上可使愈伤组织分化形成小芽;分化形成的芽置于1/8-1/4MS(大量元素减少,其余成分不变)附加6-BA0.1mg/l和GA1mg/l的培养基上,可促使芽的正常生长;新生芽转接在1/4MS附加IBA0.5mg/l培养基上促使其生根。     

小麦×天兰冰草杂种体细胞愈伤组织诱导及无性系建立

从普通小麦×天兰冰草杂种F_1的叶、茎、节、幼穗诱导出愈伤组织,建立了体细胞无性系,获得了大量试管苗并移栽成活。 愈伤组织诱导率及分化率以幼穗最高,茎、节、叶较低。完全展开的叶片不能形成愈伤组织,未伸展的幼叶能诱导出愈伤组织,分化程度越低的幼叶部位越容易脱分化。幼叶基部切段的愈伤组织诱导率可达90％以上。改良MS附加4mg/l 2,4-D、0.1mg/l KT、0.5mg/l NAA为最佳愈伤组织诱导培养基。最适宜的分化培养基为改良MS附加0.25mg/l KT、0.5 mg/l NAA、150 mg/l腺嘌呤核苷。杂种的愈伤组织诱导率及分化率高于两个亲本。杂种的愈伤组织长势旺盛,适应性强等都表现了小冰麦杂种在组织培养中的杂种优势,而且这种再生能力杂种优势可以通过无性系得到保持。     

马兜铃茎段组织培养

植物名称:扎伊尔马兜铃(Aristolochia ele-gams Mast) 材料类别:嫩茎消毒后切成1cm长的切段。培养条件:基本培养基为MS附加BA、IAA和2,4-D等植物激素,培养温度25—30℃,每天照光10小时(光强为2000lux)。生长和分化情况:茎段在附加BA2、IAA0.2-0.4mg/l的MS培养基上或BA2、2,4-D0.2mg/l的MS培养基上,6天茎段开始膨大,7—12天可见透明的愈伤组织产生,诱导率为89—100％,随后又长出绿色瘤状愈伤组织,16天开始由瘤状愈伤组织产生丛芽,这些带芽愈伤组织可以切割、转接不断增殖下去。产生丛芽的最适激素配比浓度是BA2、IAA0.2mg/l,其次是BA2、2,4-D0.2mg/l,     

党参的离体培养及植株再生的研究

在附加激素的MS培养基上,培养党参下胚轴和无菌芽切段,诱导产生愈伤组织并且再生植株。经过两年多(15个世代)的继代培养,建立了党参体细胞无性系。实验结果表明:(1)培养基MS 0.4mg/L 2,4-D 0.8mg/L Kt 2.0mg/L IAA对愈伤组织诱导及继代培养,MS 0.2mg/L 6-BA诱导外植体产生丛芽和愈伤组织再分化,MS 0.5mg/L NAA 0.2mg/L 6-BA及MS 0.2mg/L NAA诱导生根效果最好。(2)愈伤组织再分化经过胚状体途径。     

旱地小麦(金沙江一号)×天兰冰草杂种幼胚愈伤组织诱导及植株再生

旱地小麦(金沙江一号)×天兰冰草远缘杂交结实率较高,可达30.5%。但是,由于种子的胚乳发育不良而不能萌发,未获得杂种F_1实生苗,授粉12天后再把幼胚接种于WG附加2,4—D2mg/l、NAA0.5mg、K70.1mg/l培养基中,30—60%的幼胚诱导出愈伤组织。愈伤组织转入WG附加NAA0.5mg/l、KT0.5mg/l、Ad100mg/l、CH500mg/l的分化培养基后逐渐分化出丛生绿苗。这些绿苗经分根培养后移栽成活。正交和反交的杂种F_1再生植株形态呈中间类型,并且都表现了自交不孕等杂种特性。实验还比较了正交和反交的结实率及幼胚培养的愈伤组织诱导率,讨论了细胞质因子对杂种F_1幼胚再生能力的影响。     

野葛块根脱分化与再分化相关因子研究

采用正交试验、单因子试验和植物组织培养方法,探讨几种因子对野葛块根组织脱分化与再分化的影响。结果表明,野葛块根愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L,暗培养更有利于愈伤组织的诱导;野葛块根愈伤组织的最佳出芽培养基为MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 3.0mg/L或MS+NAA 0.5mg/L+KT 2.0mg/L,光照培养更有利于愈伤组织芽的再分化;野葛块根愈伤组织再生芽生根最佳培养基为MS+NAA 0.5mg/L+PP₃₃₃ 3.0mg/L+蔗糖30g/L;PP₃₃₃ 3.0mg/L和蛭石:珍珠岩(2:1)基质能显著提高再生苗的移栽成活率。     

罗布麻子叶和下胚轴再生植株的培养

本文报道了用罗布麻（Apocynum venetam)幼苗的子叶和下胚轴切段诱导出愈伤组织和再生植株。结果表明,愈伤组织的诱导在附加0.5mg/L6－BA和0.1-1mg/L NAA的MS培养基上为最好。在附加0.5mg/L NAA的MS培养基上培养愈伤组织能促进芽的分化,当NAA浓度增加到1mg/L时则能抑制芽的分化。随后在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上诱导生根,获得完整再生植株。     

怀山药微型块茎愈伤组织的诱导形成及高频率再生

对怀山药微型块茎愈伤组织的诱导及高频率再生进行了研究。结果表明 :(1)光下诱导铁棍山药脱分化形成愈伤组织 ,6 -BA2 mg/L NAA2 mg/L 为最佳激素组合。KT2 mg/L 2 ,4 - D2 mg/L 有利于铁棍山药愈伤组织的增殖。附加 2 mg/L NAA能缩短 4 7号山药愈伤组织的诱导时间。KT2 mg/L NAA2 m g/L 有利于 4 7号山药愈伤组织增殖 ;(2 )不同光照条件对愈伤组织的诱导和增殖影响不同。光照是缩短 4 7号山药愈伤组织诱导时间的另一因素。暗培养有利于愈伤组织的增殖 ,对 4 7号山药来说 ,暗培养下诱导率也较高 ;(3)基因型不同 ,愈伤组织类型不同 ,诱导率和不定芽分化率也有差异 ,4 7号山药高于铁棍山药 ;(4 )KT对 4 7号山药愈伤组织分化形成不定芽起主要作用 ,2 ,4 - D2 mg/L KT2 mg/L 为最佳激素组合 ;(5 )光培养有利于不定芽的分化     

‘光叶蔷薇’器官间接再生体系的建立及GUS基因转化的初步研究

以‘光叶蔷薇’(Rosa wichuriana‘Basye's thornless’)无菌苗的顶生幼嫩小叶为外植体,探讨了其愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明,高浓度的生长素NAA能诱导外植体产生愈伤组织;由NAA诱导的愈伤组织在附加TDZ的MS培养基上,先暗培养再进行光照培养可直接分化出不定芽。诱导愈伤组织的最佳NAA浓度是7.0 mg/L、暗培养时间为10 d,而最佳分化培养基是MS+5.0 mg/L TDZ+30 g/L葡萄糖+2.5 g/L GEL,分化率达18.34%。以诱导产生的愈伤组织为侵染受体,初步建立了‘光叶蔷薇’GUS基因转化体系。农杆菌菌液浓度OD600值为0.5、侵染30 min、共培养2 d、乙酰丁香酮的浓度为50μmol/L是‘光叶蔷薇’愈伤组织转基因的最优条件。     

月光花素对彩叶芋愈伤组织细胞生长和分化的影响

在含有NAA0.2mg/L,2.4-D 0.2mg/L的MS基础培养基中添加月光花素培养彩叶芋愈伤组织,结果显示,低浓度的月光花素能促进愈伤组织生长,高浓度则有明显的抑制作用,最适浓度为1.0~2.0mg/L;培养两个月后,添加适宜浓度的月光花素(0.2~2.0mg/L)的培养基能促进体细胞分化和植株再生,而高浓度(10.0mg/L)处理和对照均未能分化出绿苗。表明适宜浓度的月光花素在合适的生长素剂量的协同作用下,对植物愈伤组织细胞的生长和分化有较强的调节作用。     

三七胚培养中的胚胎发生

三七成熟胚培养于MS 1 mg/l IAA或NAA或2,4-D的培养基上。二月后,在MS 1mg/l IAA或NAA的培养基上由外植体可诱导产生胚状体,但在含2,4-D的培养基上只产生愈伤组织而无器官分化。胚状体转入MS GA_3 1mg/l IAA0.5 mg/l培养基上可发育成具胚根、根芽的小植株。     

KT和NAA对知母愈伤组织再分化的影响

以知母愈伤组织为材料,采用单因子试验方法,探讨不同浓度KT和NAA对其再分化的影响。结果表明:知母愈伤组织生根的最佳培养基为MS+KT 2 mg/L;愈伤组织再生芽的最佳培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 1 mg/L;愈伤组织再生苗长高的最佳培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 1 mg/L。     

植物激素对褐斑伽蓝叶片分化的影响

首次以景天科多肉植物褐斑伽蓝叶片为外植体进行组织培养.建立植株再生系统后,研究了不同植物激素及其不同浓度配比对叶片分化的影响.试验结果表明:褐斑伽蓝叶片分化方式特殊,初代培养时外植体叶片分化困难,仅在附加6-BA(6-苄基腺嘌呤) 1.5 mg/L、IBA(吲哚丁酸) 0.5 mg/L的MS培养基上分化出绿色球状体.试管苗叶片与外植体叶片分化方式不同,在单独附加6-BA 1.0～2.5 mg/L或(萘乙酸)NAA 0.1～1.0 mg/L,以及6-BA与NAA不同浓度配比的培养基上出现了根、芽及愈伤组织等多种器官分化方式,且分化出的器官生长情况差异很大,可以根据不同的培养目的筛选不同的培养途径和适宜的培养基.     

沙打旺(Astragalus adsurgens Pall cv.)单细胞培养再生植株

切取沙打旺无菌苗下胚轴接入固体M5培养基(MS 0.2 mg/1生物素 1 mg/1泛酸钙 1 mg/1 2,4-D 0.7 mg/1 BA 0.2 mg/l NAA)上形成愈伤组织,选用褐绿相间的愈伤组织放入液体CM2培养基(M5 1.3 g/l“1640”)中振荡暗培养。每隔15天换一次液,经过4次换液,用400目网过滤得到大量单细胞。取出单细胞进行双层静止暗培养,每隔7—10天加一次液,一个半月形成小块愈伤组织。然后转入固体M5培养基中增殖,20天形成大块愈伤组织,再转入分化培养基MF2(M5去掉2,4-D)中,一个月左右分化出苗,将苗转入生根培养基,长成完整植株。     

非洲菊试管苗叶柄愈伤组织的诱导与分化研究

以非洲菊(Gerbera janesonii Bolus)品种‘Sunanda'试管苗幼叶的带叶叶柄为材料,研究了培养基、外植体类型和继代次数等因素对愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:培养基上附加不同植物生长调节剂所诱导出的愈伤组织在形态和分化能力上存在显著差异,叶柄基部诱导愈伤组织的最适培养基是MS+TDZ 0.3 mg L-1+NAA0.1 mg L-1.外植体以叶片长度＞0.5 cm,叶片已舒展,颜色嫩绿的幼叶最佳,继代培养基以MS+KT 1.0 mg L-1较适宜,愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1上分化出芽的同时还会增殖,分化率达87.4%,继代培养2次的愈伤组织分化率可提高至95%.不定芽在生根培养基1/2MS+IBA0.6 mg L-1上的生根率达100%,试管苗移栽45 d后,成活率达97%以上.     

骆驼蓬的组织培养及植株再生

以骆驼蓬(Peganum harmala L)无菌苗下胚轴切段为材料,在不同的培养基上进行愈伤组织的诱导,发现在MS基本培养基附加2．0mg/L 2,4—D、0．5mg／L 6—BA和3％蔗糖时,可100％的诱导出愈伤组织。愈伤组织在附加2．0mg／L 6—BA、0．5mg／L NAA、500mg／L CH和3％蔗糖的MS培养基上诱导出丛生芽,进而发育成苗,苗的分化频率在30％左右。分化苗或其茎切断在附加0．2mg／L IBA、0．2mg/L NAA和3％蔗糖的l／2MS培养基上出现根的分化,分化频率在90％以上。再生植株经炼苗后移栽成活,成活率在80％以上。     

‘光叶蔷薇’器官间接再生体系的建立及GUS基因转化的初步研究

以‘光叶蔷薇’（Rosa wichuriana ‘Basye’s thornless’）无菌苗的顶生幼嫩小叶为外植体,探讨了其愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明,高浓度的生长素NAA能诱导外植体产生愈伤组织;由NAA诱导的愈伤组织在附加TDZ的MS培养基上,先暗培养再进行光照培养可直接分化出不定芽。诱导愈伤组织的最佳NAA浓度是7.0 mg/L、暗培养时间为10 d,而最佳分化培养基是MS + 5.0 mg/L TDZ + 30 g/L葡萄糖 + 2.5 g/L GEL,分化率达18.34%。以诱导产生的愈伤组织为侵染受体,初步建立了‘光叶蔷薇’GUS基因转化体系。农杆菌菌液浓度OD₆₀₀值为0.5、侵染30 min、共培养2 d、乙酰丁香酮的浓度为50 μmol/L是'光叶蔷薇’愈伤组织转基因的最优条件。