林生地霉所致小鼠系统感染的形态学研究

目的用组织病理学和电镜的方法观察林生地霉(Geotrichum Silvicola)所致小鼠各感染脏器的形态学改变。方法将72只健康昆明小鼠随机分为3组,免疫正常 腹腔接种组(A组)、免疫抑制 腹腔接种组(B组)和正常对照组(C组)。分期处死各组小鼠,取出肝、肾、脾、肺、心进行大体观察和组织病理学检查,病理切片分别进行HE和PAS染色,同时送扫描和透射电镜观察。结果A组仅有少数几只小鼠肝脏表面见到针尖至粟粒大小的脓性感染灶,数目较少(1.10±1.63),其余脏器偶见。B组大多数小鼠肝脏表面可见脓灶数目较多(8.18±2.59),约针尖至粟粒大小;其次为肺。C组无变化。B组的病理学改变早期以急性炎症反应为主,后期逐渐形成肉芽肿伴慢性炎细胞浸润,PAS染色可见灶状分布的真菌孢子和菌丝。电镜可见感染组织中的孢子和炎症细胞。结论林生地霉所致的系统性感染,肝脏最为易感。组织病理学改变为真菌感染非特异性炎症。     

氧化炎症级联反应在二氯二丁基酯联合乙醇诱发的小鼠胰腺纤维化进展中的作用

目的:探讨胰腺氧化炎症级联反应在二氯二丁基酯(DBTC)联合乙醇诱发小鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化进展中的作用及机制。方法:健康昆明小鼠36只,随机分为两组(n=18):对照组和模型组,模型组经尾静脉一次性注射DBTC(8 mg/kg)后加饮10%乙醇饲喂诱发慢性胰腺炎。造模后2、4、8周处死动物,HE及Masson胶原纤维染色观察胰腺组织的病理学改变及纤维化程度,免疫组织化学法检测F4/80的表达;制备胰腺组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)的变化。结果:模型组小鼠HE染色和Masson染色显示造模2周后可见成纤维细胞出现、巨噬细胞(F4/80阳染)浸润,4周及8周巨噬细胞浸润增加、伴随胰腺实质明显减少并被大量纤维组织取代。胰腺组织匀浆SOD活性逐渐降低,MDA和MPO逐渐升高,与对照组同时间点相比,有显著性差异(P0.05)。结论:DBTC尾静脉注射联合饮用乙醇可以成功建立小鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化模型,氧化炎症级联反应在胰腺纤维化进展中发挥重要的作用。     

木犀草素对哮喘小鼠转录因子GATA-3表达的影响

目的:观察木犀草素对哮喘小鼠转录因子GATA-3表达的影响.方法:将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘气道重塑组、木犀草素干预组,每组10只;鸡卵清蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠气道重塑模型;HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变:采用Western blot及Real time PCR技术检测治疗前后哮喘小鼠肺组织中GATA-3蛋白和GATA.3 mRNA的表达.结果:HE染色提示哮喘组出现黏膜下层和平滑肌增厚,气道管腔狭窄,大量炎细胞浸润的表现,木犀草素组上述改变较哮喘组为轻:Westernblot结果显示哮喘组小鼠肺组织GATA-3蛋白表达较对照组为高(P＜0.01),木犀草素治疗组表达量低于哮喘组(P＜0.01).Real timePCR结果与Westernblot结果一致.结论:木犀草素干预可下调哮喘引起的GATA一3的表达;木犀草素抑制GATA-3表达可能是其缓解气道炎症的机制之一.     

复发缓解型实验性变态反应性脑脊髓炎动物模型的建立

目的:建立复发缓解型实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型,进行病理学研究,为多发性硬化(MS)的发病机制研究及治疗药物研发提供合适的动物模型。方法:选择不同品系动物(昆明种、BALB/c和C57BL/6小鼠,SD大鼠),采用各自品系来源的脊髓和弗氏完全佐剂混合乳剂一次性注入动物双足垫,1周后半剂量注射进行一次加强,诱导EAE;观察发病情况,HE染色观察病理变化,监牢兰染色观察脱髓鞘情况。结果:昆明种、BALB/c和C57BL/6小鼠均无明显症状,HE染色小脑的脊髓无炎性细胞浸润;SD大鼠对照组正常,模型组临床症状发生率为90%以上,HE染色可见小脑白质及脊髓血管周围有大量的炎性细胞浸润,监牢兰染色可见大片髓鞘脱落。结论:EAE模型在昆明种、BALB/c及C57BL/6小鼠中用脊髓匀浆不易于诱导,而用SD大鼠脊髓髓鞘蛋白和弗氏完全佐剂混合乳剂可高效率诱导出同种SD大鼠的复发缓解型EAE。     

SD大鼠缓解-复发型实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的:建立大鼠缓解-复发型实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型,进行病理学研究,为多发性硬化(MS)的研究提供据.方法:采用大鼠脊髓和弗氏完全佐剂混合乳剂一次性注入 SD 大鼠双足垫和尾部,1周后半剂量注射进行一次加强,诱导大鼠发生 EAE;观察发病情况,HE 染色观察病理变化,监牢兰染色观察脱髓鞘情况.结果:空白对照组大鼠均未出现症状,HE 染色小脑及脊髓无炎性细胞浸润,监牢兰染色未见髓鞘脱失;模型组临床症状发生率为90%以上,HE 染色可见小脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润,监牢兰染色发现有大片髓鞘脱落.结论:用 SD 大鼠脊髓髓鞘蛋白和弗氏完全佐剂混合乳剂可诱导同种 SD 大鼠发生缓解-复发型 EAE.     

口服柔嫩梭菌对OVA致敏小鼠气道炎症的影响

目的 在动物水平探索口服柔嫩梭菌(Clostridium leptum)对哮喘小鼠气道炎症的影响.方法 建立OVA致敏的BALB/c小鼠哮喘模型,依据检测气道炎症情况和气道反应性确定哮喘模型构建成功.30只BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组,安慰剂组和口服柔嫩梭菌治疗组,每组10只.通过HE染色检测小鼠肺组织病理变化,细胞计数检测肺泡灌洗液中炎性细胞(嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞)的数目,ELISA方法检测肺泡灌洗液中炎性因子(IL4、IL-5、IL-13)的表达情况,并检测各组小鼠的气道反应性.结果 验证OVA致敏哮喘小鼠模型构建成功;口服柔嫩梭菌可显著减轻OVA致敏小鼠的气道高反应性,气道炎症细胞浸润和炎性细胞因子分泌(P＜0.05).结论 口服柔嫩梭菌可显著减轻OVA致敏小鼠的气道炎症和气道高反应性,这可能为哮喘治疗提供新思路.     

Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎病理探讨

目的研究缓解-复发型EAE大鼠的基本病理改变。方法对缓解-复发型EAE大鼠进行HE染色、Weil髓鞘染色和改良的Bielschowsky染色,以免疫组化方法标记GFAP和MMP-2、MMP-9。结果组织内可见多个血管周围淋巴细胞浸润呈袖套样分布,伴有大片状脱髓鞘,部分脱失的髓鞘内有炎细胞浸润,轴索呈空泡样缺失,GFAP染色证明在旧病灶的周围部分可见星形胶质细胞增生,MMP-2、MMP-9在血管内皮细胞、细胞外基质、炎细胞及脑(脊)膜内呈阳性表达。结论①缓解-复发型EAE大鼠的组织病理学改变与临床表现一致,有活动性和非活动性病灶并存的现象。②MMP-2、MMP-9在活动性病灶内表达,参与疾病的发生。③缓解-复发型EAE病理改变与MS相似,是理想的动物模型。     

AZD5069通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎的机制研究

目的:探讨CXCR2拮抗剂AZD5069能否通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎(RA)。方法:将45只雄性DBA/1J小鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)、AZD5069组(n=15);除对照组外,其余两组均给予牛Ⅱ型胶原蛋白+弗氏佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)模型。观察记录小鼠关节炎评分。二次免疫后第二天给与药物治疗,治疗3周后处死小鼠检测关节病理、中性粒细胞浸润、外周血炎症因子等指标。结果:与对照组相比,模型组小鼠关节炎发病率明显升高(P0.05);与模型组相比,AZD5069组小鼠关节炎发病率明显降低(P0.05)。与对照组相比,模型组小鼠关节炎评分明显升高(P0.05);与模型相比,AZD5069组小鼠关节炎评分明显降低(P0.05)。对照组小鼠踝关节间隙正常,滑膜无增生,无炎症细胞浸润,软骨面光滑无破坏;模型组小鼠踝关节间隙狭窄,滑膜增生明显,可见大量炎症细胞浸润,软骨侵蚀破坏;与模型组相比,AZD5069组小鼠踝关节间隙未见明显狭窄,滑膜未见明显增生,炎症细胞浸润明显减轻,软骨未见明显破坏。与对照组相比,模型组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β的水平明显升高(P0.05);与模型组相比,AZD5069组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β的水平明显降低(P0.05)。与对照组相比,模型组小鼠踝关节中性粒细胞明显增多,可见大量中性粒细胞浸润;与模型组相比,AZD5069组小鼠踝关节中性粒细胞明显减少,中性粒细胞浸润情况明显减轻。结论:CXCR2拮抗剂AZD5069可通过抑制中性粒细胞迁移治疗类风湿关节炎,为开发新型治疗RA药物提供理论基础。     

髓鞘碱性蛋白片段69-85诱导建立大鼠自身免疫性脑脊髓炎模型

目的探索以大鼠髓鞘碱性蛋白片段69-85（MBP69-85）为单一抗原,建立Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型,并观察其病理改变。方法MBP69-85以生理盐水溶解,与完全福氏佐剂（CFA）充分混匀制备免疫乳剂;雌性Wistar大鼠70只,留取10只作为正常对照组,余者根据免疫乳剂组分的不同随机分为A、B、C组（n=20）。A组：MBP69-85每只50μg＋CFA（含卡介苗6 mg）;B组：MBP69-85每只25μg＋CFA（含卡介苗6 mg）;C组：MBP69-85每只25μg＋CFA（含卡介苗12 mg）。脑和脊髓组织切片进行HE染色,MBP及神经微丝（neurofilament,NF）免疫组化检测,观察神经组织的病理改变。结果A组内部分大鼠在免疫后第12-16天发病,表现为尾部及四肢无力或麻痹、斜颈等,平均临床症状评分为2.38±1.89;B、C组均未见发病;HE染色可见神经组织内炎细胞浸润,血管＂袖套＂样病灶形成;MBP及NF免疫组化染色显示病变组织内白质脱髓鞘及轴突损伤明显。结论EAE模型建立与免疫抗原的剂量有一定的依赖关系;佐剂中的卡介苗含量不是诱导大鼠发病的主要原因;本模型具有多发性硬化的典型临床表现及病理改变,是研究多发性硬化发病机制及治疗的可靠的动物模型。