透明骨骼标本制做的一点改进

我在制做家鸽透明骨骼标本时发现 ,对所有动物都用一种方法是不可行的 ,对小型动物 (如鱼 )用原方法可以 ,但对家鸽就不行了 ,因为家鸽的胸肌特别发达 ,肌肉很难透明 ,待它还没有完全透明其他部位就已脱解了。为使它们能同步进行 ,就必须对原方法进行改进。通过改进 ,我做的标本从取材到标本制做完成为止 ,只用了6～ 7d的时间 ,标本质量很好。现将改进方法介绍如下 :1)将刚杀死的家鸽剥皮 ,并除去内脏 ,洗净血迹 ,整理好姿势。2 )浸入 95 %的酒精中 ,放置在室温 2 0～ 2 5℃间的室内 ,约需 2 4～ 4 8h。3)移入 2 %～ 3%的氢氧化钾溶液中 (这…     

支持向量机及组合预测在蛋白质四级结构分类中的应用

目的:基于支持向量机建立一个自动化识别新肽链四级结构的方法,提高现有方法的识别精度.方法:改进4种已有的蛋白质一级序列特征值提取方法,采用线性和非线性组合预测方法建立一个有效的组合预测模型.结果:以同源二聚体及非同源二聚体为例.对4种特征值提取方法进行改进后其分类精度均提升了2～3%;进一步实施线性与非线性组合预测后,其分类精度再次提高了2～3%,使独立测试集的分类精度达到了90%以上.结论:4种特征值提取方法均较好地反应出蛋白质一级序列包含四级结构信息,组合预测方法能有效地集多种特征值提取方法优势于一体.     

凝血酶滴定法测定水蛭素活性的改进

目的：通过改进,建立一种简便经济且重复性和准确度好,又省时的凝血酶滴定法测定水蛭素活性。方法：用Markwardt提出的凝敌国酶滴定法和改进后的滴定法分别对同一批样品进行滴定比较,论述改进后的滴定法的过程和优点。结果：改进后,配制不同浓度梯度的凝血酶溶液,采用逐步缩小活性范围,多次换试管重滴的浓度梯度法,结果重复性和准确度较好,省时。     

麦芽糖的改性及其化学修饰胰蛋白酶的研究

目的:通过高碘酸钠氧化法以麦芽糖修饰胰蛋白酶,检验此方法是否能够改善胰蛋白酶的稳定性.方法:采用高碘酸钠改性麦芽糖,使其中具有能够与酶分子中氨基结合的醛基,从而在一定条件下化学修饰胰蛋白酶.结果:改性麦芽糖的最佳条件为,高碘酸钠浓度0.05g/mL,高碘酸钠与麦芽糖质量比1.1∶1,初始pH 1.0,反应时间3h,反应温度30℃;修饰胰蛋白酶的最佳条件为,pH6.0,改性麦芽糖与胰蛋白酶质量比1∶1,修饰温度4℃,修饰时间24h;在最佳条件下修饰酶后,pH在8.9～10.0时,原酶活力与修饰酶活力分别下降了其最高活力的15.8%和9.8%;将酶置于50℃ 2h后,原酶与修饰酶分别保留了其置于4℃ 2h后活力的88.7%和94.7%.结论:该方法能够提高胰蛋白酶的耐碱稳定性和热稳定性.     

全自动电位滴定法检测蔬菜干制品中硫酸铜的含量

目的:研究了用自动电位滴定法测定蔬菜干制品中硫酸铜含量的条件和方法。方法:样品经超声、稀释、过滤后,在酸性及KI共存条件下,以硫代硫酸钠做滴定剂,用DMi140-SC复合铂环氧化还原智能电极作指示电极,滴定Cu2+含量。结果:该方法回收率为97.2%~100.4%,RSD为3.4%~5.4%。结论:该方法测定的准确度和精密度均能满足定量分析的要求,且容易操作,滴定终点清晰,准确可靠,重复性好。     

小鼠精原干细胞不同转染方法效率的比较

本研究采用腺病毒感染、慢病毒感染、脂质体转染和电穿孔转化方法将含有绿色荧光蛋白（GFP）的质粒转入经过差异贴壁法初步分离纯化的小鼠精原干细胞(SSCs)中,转染48 h后通过流式细胞仪检测GFP阳性细胞比例比较4种方法在体外转染精原干细胞的效率.结果显示,脂质体转染效率最高仅为8.64%,不能满足对精原干细胞进一步实验的要求;电穿孔法效率最高达到25.27%,但转化后细胞大量死亡;腺病毒转染细胞的效率达到了32.4%;慢病毒转染效率最高,达到74.25%. 因此,慢病毒转染法是体外转染小鼠精原干细胞的有效方法.     

活性无烟煤/滤砂双滤料处理微污染原水

将原普通砂滤池改造为活性无烟煤/滤砂双滤料滤池,当挂膜完成后,进入稳定运行期后活性无烟煤/滤砂双滤料滤池可削减氨氮约2.0～3.50mg/L,对CODMn的去除率为50%～60%,均远高于原普通砂滤池,实践证明,生物活性无烟煤滤池是处理氨氮4.0mg/L以下,CODMn(1.40～5.28mg/L)微污染原水的经济性选择。     

基于表型性状构建材用云南松核心种质策略研究

【目的】研究旨在构建可靠的材用云南松核心种质,加强其种质资源选育、开发利用研究,解决其种质资源分布广、保存成本高、保存难度大等问题,促进云南松种质资源有效利用。【方法】以云南松26个天然居群的780株样株为原种质,以18个表型性状为原数据,利用2种不同构建策略（利用地理角度与改进的最小距离逐步取样法）,探讨不同构建策略所构建的核心种质对原种质的代表性。【结果】结果表明：（1）地理角度构建出的包含219株样株的种质子集,其遗传多样性指数显著低于改进的最小距离逐步取样法构建的4个种质子集,略高于原种质;该种质子集与原种质的MD值为3.921%,VD值为83.33%,CR值为82.207%,VR值为99.48%;通过对原种质与该种质子集18个性状做主成分分析,累计贡献率分别为79.376%、82.163%,其种质子集样株分布相对集中。（2）改进的最小距离逐步取样法构建的4个抽样比例分别为10%、20%、30%和40%的种质子集中,其中20%抽样比例的种质子集效果最好,该种质子集的多样性指数极显著大于原种质;20%抽样比例种质子集与原种质的MD值为6.363%,VD值为83.33%,CR值为91.099%,VR值为124.448%;对20%抽样比例的种质子集进行主成分分析,累计贡献率为83.539%,且高于原种质,该种质子集样株分布范围覆盖了整个取样范围。【结论】研究表明,不同方法构建的核心种质均获得了原种质不同程度遗传多样性,这2种构建结果均可代表材用云南松种质资源核心种质;而地理角度构建的种质子集在种质资源采集、保存和更新方面更具有优势,可为材用云南松种质资源保存和优良种质选育提供科学方法,同时为其他种质资源的构建提供一种新的参考方法。     

酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶

报告了应用酶放大镧系元素发光法测定碱性磷酸酶的方法.应用5-氟水杨酸磷酸酯作为酶底物,并对方法学中的多种因素进行了最佳比.用甲基硅油(I)改进了信/噪比的稳定性.方法的灵敏度为4 U/L.精密度为10%.精密度为10%的浓度范围是2.00～3.00×10² U/L.测量值的相对误差＜10%.测定了血清中的碱性磷酸酶浓度,回收率为93%～95%.     

人胎盘组织液氨基氮含量检测方法的建立

目的：建立检测人胎盘组织液氨基氮含量的方法,为产品质量控制和生产工艺稳定性提供判断手段。方法：加入福尔马林溶液后,以麝香草酚蓝为指示剂,用NaOH滴定液滴定。结果：当福尔马林溶液为中性、NaOH滴定液浓度为0.04mol/L时,甲醛滴定氨基氮的方法可靠。结论：本方法回收率高,操作简便,可以作为检测人胎盘组织液氨基氮含量的方法。     

达氏鳇不同发育期胚胎对低温的耐受研究

研究了达氏鳇12个发育期胚胎经过不同低温（2 ℃、3 ℃、5 ℃、7 ℃和8 ℃）处理12 h、24 h、2 d、3 d、6 d、10 d、15 d、20 d和30 d后的孵化率和仔鱼成活率.结果表明,卵黄栓期、隙状胚孔期、神经管闭合期胚胎在2～8 ℃水温下,处理24 h后孵化率为0;卵裂期、囊胚早期、原肠中期胚胎在2～8 ℃水温下,处理3 d后孵化率低于30%;囊胚晚期、原肠早期、眼基期、尾芽期、心跳期和尾达头部期胚胎在5～8 ℃水温下,处理3 d后孵化率、仔鱼成活率超过70%;随低温处理时间延长,胚胎和仔鱼的死亡率增加,处理时间与孵化率、仔鱼成活率呈负相关;囊胚晚期、原肠早期、眼基期胚胎在5 ℃水温下耐受力较强,处理10 d后孵化率、仔鱼成活率超过70%.本研究表明,达氏鳇胚胎发育过程中囊胚晚期、原肠早期和眼基期胚胎可以在某一低温下进行短期保存,其孵化率、仔鱼成活率与常温（16～17 ℃）下没有显著差异.这对于达氏鳇胚胎（受精卵）的长途运输有重要意义.     

两种HSV-1及猴B病毒相关抗体测定方法的比较

目的以人单纯疱疹病毒（HSV-1）做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数,算出病毒悬液中每毫升所含蚀斑单位,即滴定出HSV-1的TC ID50。同时,用免疫荧光方法（IFA）对猴和人疱疹阳性血清进行滴定,得到其血清的效价。其次,用滴定出的病毒液分别与两种阳性血清体外中和后,接种到单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数。最后,计算出其蚀斑减少率。结果用1%甲基纤维素作覆盖层的蚀斑数量平均为10-5PFU,能形成115-116个/mL蚀斑,形状呈黍米大小的规则圆形,其蚀斑边缘清晰。IFA滴定的人HSV-1阳性血清与猴BV阳性血清的中和抗体均为1∶80。人HSV-1和猴BV两种阳性血清的空斑减少率均为100%。结论确定了利用1%甲基纤维素做为覆盖层可得到清晰可靠的蚀斑,由此方法检测到用人HSV-1可以代替猴B病毒,筛查猴B病毒抗体。且为将来进行药物筛选和中和实验中利用病毒空斑法建立方便、可靠的方法。     

组培广藿香形态特征及挥发油成分分析

对原产于广州石牌和海南的两个广藿香(Pogostemon cablin)栽培品种进行组织培养并获得了再生植株.用GC法对广藿香再生植株的挥发油成分进行分析研究.结果表明,广藿香两个品种的再生植株生长2～3个月后形态上有明显的差异.生长3个月的再生植株中,原产于广州石牌的广藿香挥发油含量为1.4%,低于原产于海南的广藿香(2.9%);而挥发油的成分中,广州石牌广藿香的广藿香酮含量为375.76 mg ml1,显著高于海南广藿香(7.82 mg ml1).这说明组织培养获得的再生植株保持了其原植物在形态、挥发油含量和成分上的差异性,为广藿香的品种分类提供了实验依据.     

云南似原吸鳅属鱼类一新种记述(鲤形目,平鳍鳅科)

2003年6月2日作者于云南省沾益县德泽乡牛栏江(属金沙江水系)采集到似原吸鳅属鱼类7尾标本,经鉴定为1新种.新种鳃孔窄,可与同属中鳃孔较宽的似原吸鳅Paraprotomyzon multifasciatus和龙口似原吸鳅P.lungkowensis明显区分,而与鳃孔窄的巴马似原吸鳅P.bamaensis和云南似原吸鳅P.yunnanensis相似.新种与巴马似原吸鳅P.bamaensis相比,两者在下列特征上可明显区分:1)新种下唇无向后伸展的唇片,后者具唇片;2)新种吻褶两侧后角之后具侧沟,后具无侧沟;3)新种腹鳍为i-15～17,后者为i-12～13.与云南似原吸鳅P.yunnanensis相比,两者的鉴别特征如下:1)新种吻褶后侧具侧沟,后者吻褶后侧无侧沟;2)新种胸鳍为i-19～22,而后者为i-26;3)新种腹鳍为i-15～17,后者为i-20.     

浙江省热原检查用兔敏感性状况调查

目的调查浙江省热原检查用兔对细菌内毒素的敏感性情况,为提高热原检查结果的准确性和可靠性提供参考。方法对全省所有取得生产许可证单位的家兔,用国家颁发的细菌内毒素标准品,＂热原检查法＂进行检查,剂量分别为5EU/Kg和10EU/Kg,记录并比较各单位家兔的平均升温值和升温率。结果对细菌内毒素,各兔场家兔的敏感性有一定的差异。静脉注射5EU/kg,平均升温值为0.40℃～0.87℃,升温率为35%～83%;静脉注射10EU/kg,平均升温值为0.74℃～1.16℃,升温率为70%～94%。结论不同生产单位的家兔对细菌内毒素的敏感性不同,有必要对热原检查用家兔进行细菌内毒素敏感性检查。     

用PCR-DGGE对岩原鲤×锦鲤杂交F1代进行分子鉴定

运用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,选用核基因光间受体视黄类物质结合蛋白(IRBP)作为分子标记,成功鉴定了岩原鲤Procypris rabaudi×锦鲤Cyprinus carpio的杂交F1代.DGGE胶图显示,杂交个体IRBP基因的等位基因条带分别与岩原鲤和锦鲤的IRBP基因条带相对应.对各条带切胶回收后的测序表明,岩原鲤等位基因的相似性为99.8％,锦鲤等位基因的相似性为98.8％,而杂交个体等位基因的相似性为95.8％ ～96.7％,与岩原鲤和锦鲤间基因的相似性(95.5％～96.9％)接近.这一方法将有助于鱼类的杂种鉴定和种质研究.     

人工疏果对黄皮果实品质及部分内源激素含量的影响

以'大鸡心'黄皮为材料,研究了不同程度人工疏果对黄皮果实品质及内源激素含量的影响.结果表明:与对照相比,疏果50%和25%后,黄皮果实中可溶性糖、维生素C、可食率等显著提高,可滴定酸含量显著降低;疏果50%和疏果25%后,黄皮果实种子及果皮的IAA、GA3、ZT含量增加,ABA含量降低.实验表明,人工疏果可以提高黄皮果实的品质,提高果实内促进生长类激素含量、降低抑制生长类激素含量.     

中国李种质资源形态性状和农艺性状的遗传多样性分析

以国家果树种质熊岳李杏圃中保存的405份中国李和杂种李为材料,依据32个主要形态性状和农艺性状的评价数据,对这些主要性状进行了遗传多样性、相关性和主成分分析.结果表明,中国李表现出丰富的遗传多样性;从字符型形态和农艺性状数据看,叶形、果形、果皮彩色和果肉色泽等性状均表现出较为丰富的多样性;从数值型形态和农艺性状数据看.各性状的变异系数为47.09%～14.85%;其中单果重的变异系数最大,为47.09%,其变幅为4.50～107.90g.其次是维生素C含量,变异系数为40.44%,变幅为0.80～14.70mg/100g;相关性分析得出,节间长度与一年生枝条长度和可溶性糖含量呈正相关,果实发育期与可溶性固形物和可溶性糖含量也呈正相关,而与可滴定酸和维生素C含量呈负相关.     

用生物素标记结核菌单克隆抗体检测脑脊液结核菌抗原的研究

应用生物素标记结核菌单克隆抗体酶联免疫吸附试验(BA-ELISA)检侧脑脊液结核菌扰原,并在同一滴定板上与常规ELISA比较。结果表明在85.4%的脑脊液中,BA-ELISA较常规ELiSA敏感,抗原滴度为后者的2.5倍。本法阳性率为88.5%,明显高于常规ELISA法(p<0.05),而其非特异性却无明显增加,提示本法为结核性脑膜炎的免疫学诊断提供了一种比常规ELISA更为敏感的新方法。     

小鼠精原干细胞冻存后体外培养

目的:研究冷冻后精原干细胞体外培养时的生物学行为.方法:体外培养冻存后的6日龄小鼠生精上皮细胞,并利用碱性磷酸酶活性及细胞形态,检测其中的精原干细胞.结果:当有BRL饲养层时,冻存后的精原细胞在贴壁、存活及增殖等生物学行为方面与新分离的精原细胞均无明显不同.培养25～30 d,培养体系中仍保留有少量精原干细胞及其最初几代分化细胞.结论:冷冻保存后的精原干细胞能在BRL细胞饲养层上正常地贴壁、生长和分裂.