转移缓冲液对蛋白质印迹的影响

利用三种转移缓冲液,分别以半干和湿转法,检测癌基因产物Bcl-2, 并获得不同强度的印迹结果.不含SDS的转移缓冲液转移效果明显优于含SDS的转移缓冲液,且SDS含量越高印迹带越弱;此外,半干转移与湿转相比,可大大缩短转移时间,但转移效果不及湿转理想且稳定性较差.     

SDS电泳技术的实验考虑及最新进展

水平薄层SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定分子量的好方法。本文简述了方法的原理,技术的实验考虑和最新进展。提供了制胶的方法。指出了配制SDS电泳样品的关键。同时介绍了新的银染色方法和不使用缓冲液和滤纸桥,而使用缓冲液凝胶条作电极的最新进展。     

重组生物制品十二烷基硫酸钠含量检测方法的建立

目的：用亚甲基蓝-分光光度法检测重组生物制品中十二烷基硫酸钠（SDS）的含量。方法：将送检样品按比例稀释后与亚甲基蓝混合,加入氯仿进行萃取,然后用紫外分光光度计测定各样品的吸光度D值。结果：SDS浓度为0～0.01mg/mL时,SDS与D651nm值呈线性关系。结论：在一定的SDS浓度范围内可用亚甲基蓝-分光光度法检测重组生物制品中SDS的含量。     

利用天然凝胶电泳法分析多肽的相互作用

目的:建立一种改进的利用天然凝胶电泳(N-PAGE)分析多肽间相互作用的方法。方法:主要对上样缓冲液和染色液做了改进。其中,上样缓冲液中除去了SDS和还原剂(DTT或β-巯基乙醇);染色液中加入了0.1%的CuSO4.5H2O,并含有25%的异丙醇。结果:在经过约3h的电泳后,上样量约10μg的多肽(相对分子质量为4000)可与其复合物清晰分离。结论:改进的N-PAGE法可用于研究多肽的相互作用。     

家蚕信使核糖核酸的分离及体外活性测定

总RNA的制备主要参考Schutz等(1972)的方法,加以修改。除注明外,实验操作控制在4℃以下。以家蚕幼虫的整体 (除去消化道) 为材料,按1:8(W/V)加入pH8.3缓冲液(0.01M Tris,0.075M NaCl,0.005M EDTA,0.5％SDS),置组织捣碎机中迅速匀浆一分钟。加入4倍组织体积(W/V)90％酚液(9份体积重蒸酚溶     

《生态科学》对论文各部分的格式要求

正1.论文题目:言简意赅,一般不采用副标题,不超过20个字,中英文题目一致,左对齐顶格书写。2.作者:应限于主要参加者,多位作者须注明通讯联系人。3.单位:应写标准中英文全称。4.论文摘要:摘要须说明论文采用的方法、结果(包括主要数据)和结论。以第3人称写,避免使用"本文研究了……"、"作者研究了……"等字样;英文摘要应与中文对应,无语言表达错误,符合英文语言习惯;为便于国际交流。中文摘要以250个     

提取航天诱变向日葵种子总RNA的一种有效方法

目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量的总RNA.方法:采用改进的SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提一次,经LiCl过夜沉淀、DNase I处理、1/2体积的无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积的醋酸钠和2倍体积的无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用...     

《生态科学》对论文各部分内容的要求

1.论文题名:言简意赅,一般不采用副标题,不超过20个字,中英文题目一致,左对齐顶格书写。2.作者:应限于主要参加者,多位作者须注明通讯联系人。3.单位:应写标准中英文全称。4.论文摘要:摘要须说明论文采用的方法、结果(包括主要数据)和结论。以第3人称写,避免使用"本文研究了……"、"作者研究了……"等字样;英文摘要应与中文对应,无语言表达错误,符合英文语言习惯;为便于国际交流。中文摘要以250     

更正启事

应作者请求,本刊2010年第21卷第5期第686～690页刊发的文稿"O1群霍乱弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立"(作者:杜昕颖等),需要对以下内容进行更正:     

‘鸭梨’果心多酚氧化酶提取方法的优化

以‘鸭梨’为供试材料,通过设定不同实验条件,分析影响果心多酚氧化酶（polyphenoloxidase,PPO）提取效率的部分因素,以期找到提取‘鸭梨’果心多酚氧化酶的最适条件。结果表明：磷酸盐提取缓冲液的pH≥7．0,提取缓冲液中分别含有0．2％TritonX-100、1％SDS、6％-8％PVP、2％PVPP以及每克果心鲜样中加入2mg抗坏血酸时均能高效提取‘鸭梨’果心PP0。     

杜氏盐藻电击转化方法的系统优化

本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率达到1.85‰;电击缓冲液中加入0.4mol/L的甘油可使转化效率显著提高至2.03‰(P<0.05)。在上述优化电击体系下,运用3种不同质粒分别转化盐藻细胞后获得的转化效率无显著差异。通过对电击转化中相关因素的优化,本研究建立了一种适用于杜氏盐藻的高效稳定的电击转化体系,为杜氏盐藻的转基因研究提供有效方法。     

作者更正启事

<正>应作者要求,本刊2010年第21卷第3期第355～358页刊发的论著"用Far-Western印迹技术筛选人肝组织中与乙肝病毒表面抗原PreS1相互作用的蛋白(作者:苏婧,杨静,     

适合流式细胞仪分析的小麦细胞核提取方法比较

为制备供流式细胞仪分析的高纯度小麦细胞核悬液,以冬小麦"临优2018"为材料,分别采用酶解法和直接剪切法对其幼苗的细胞核进行提取,对所得到的细胞核在形态结构和数量等方面进行了分析和比较,根据其优缺点优化出最适合流式细胞仪分析的小麦幼苗细胞核的提取方法。结果显示:在直接剪切法所用的3种细胞核提取缓冲液中,MgSO4缓冲液的提取效果最好,细胞核形态及内部结构完整,且得到的细胞核量多;OttoⅠ对细胞核的提取效果显著,但是在加入OttoⅡ后细胞核破裂明显;Tris.MgCl2缓冲液提取的细胞核数量较少;酶解法制备的细胞核悬浮液中杂质较多,且需时较长。结果表明采用MgSO4提取缓冲液的直接剪切法是适合流式细胞仪对小麦幼苗DNA含量的分析。     

纳米多孔硅阻抗生物传感器的研究

构建了1种基于多孔硅材料,无需标记的纳米生物传感器,用于对牛血清白蛋白分子进行检测。通过对多孔硅进行表面处理,形成氧化膜,将抗体固定到多孔硅氧化层表面。在磷酸盐缓冲液中,通过电化学检测系统检测加入抗原后,传感器的阻抗值的变化。磷酸缓冲液（PBS）/抗体-氧化层/硅,构成电解液/绝缘层/半导体（electro-lyte-insulator-semiconductor,EIS）结构。传感器的线性检测范围为0.01～0.27mg/mL,检测限为0.01mg/mL。     

更正

本刊2010年第6期刊登的贺军军、罗萍等文章"菠萝渣淀粉功能降解菌筛选及s2b7-4"及2011年第1期刊登的贺军军、罗萍等文章"甘蔗渣纤维素降解菌的筛选及鉴定",应作者本人要求,文中作者单位排序修改为"1.中国热带农业科学院湛江实验站;2.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所;     

加替沙星注射液无菌检查方法的验证

目的:建立加替沙星注射液无菌检查方法。方法:根据《中国药典》2010年版二部附录XIH无菌检查法验证试验指导原则,采用薄膜过滤法和添加硫酸锰中和剂去除加替沙星抑菌活性的实验方法和条件进行了验证,建立了加替沙星注射液无菌检查的方法。结果:采用薄膜过滤法用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行冲洗,每桶5×100mL的冲洗量,每桶(100mL)培养基中加入硫酸锰溶液可去除加替沙星对各菌株的抑菌作用。结论:加替沙星注射液的无菌检查可采用上述方法。     

姜老师信箱

<正>蛋白质研讨班学员问:姜老师,您好!我是"第十七期蛋白质分离纯化技术专题研讨班"学员,将要进行MBP融合蛋白纯化,向您请教几个问题:(1)哪家公司的直链淀粉树脂好?(2)纯化过程中有什么需要特别注意的问题?(3)Tris-HCl缓冲液和磷酸盐缓冲液哪个好?pH值影响大吗?为什么不同标签用不同裂解缓冲液?非常感谢!姜老师答:学员你好。     

SDS电泳半干新技术

在SDS薄层凝胶水平电泳中应用半干技术缩短了电泳时间,提高了分辨率,简化了操作,免除经常大量配制电极缓冲液的麻烦．用滤纸条代替电极缓冲液和纸桥或代替凝胶条的新技术更方便．     

更正

<正>因排版错误,本刊2014年第4期第41页"‘血糖调节’微型课实录及评价"一文中的图5和图8内容应互换,特此更正,并向作者和读者致歉。     

人外周血树突状细胞体外诱导扩增的研究

目的:探讨可用于临床治疗功能成熟的DC体外扩增的优化培养方案。方法:胎牛血清培养基联合细胞因子rhGM-CSF(100ng/mL)和rhIL-4(50 ng/mL)扩增人外周血分离的单个核细胞,细胞培养分别按5×106/mL、6×106/mL和7×106/mL的密度,加入6孔培养板。第6d加入rhTNF-a(100 ng/mL)联合培养,分别于第6 d,第9 d和12 d收获细胞。从形态学、细胞表面标志方面进行鉴定。结果:显微镜观察,经过9 d诱导后,培养细胞具有典型树突细胞外形。流式细胞仪分析,6×106/mL密度的细胞培养组培养到第9天最宜。结论:细胞具有典型的DC的形态特征,细胞表型及功能实验证实其DC的特性,说明建立的血清培养基联合细胞因子rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-a体外诱导DC的方法是切实可行的。