分泌型磷脂酶A_2家族及其受体

磷脂酶Ａ2 (ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ2 ,ＰＬＡ2 )的系统名为磷脂酰 2 脂酰水解酶 (ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ ｃｈｏｌｉｎｅ 2 ａｃｙｌｈｙｄｒｏｌａｓｅ)。根据其存在位置可分为细胞内型ＰＬＡ2 (ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＰＬＡ2 )和分泌型ＰＬＡ2 (ｓｅｃｒｅｔｅｄＰＬＡ2 ,ｓＰＬＡ2 )两种。ｓＰＬＡ2 可以催化甘油磷酸酯的 2位酰键水解 ,生成游离脂肪酸和溶血酸脂。因为其产物在细胞信号转导及生物活性脂 (包括花生四烯酸、血小板活性因子等 )的生物合成中起重要作用 ,所以ＰＬＡ2 被普遍认为是控制脂介质前体释放的核心…     

分泌型磷脂酶A2亚家族：结构与功能

分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)是磷脂代谢酶中最大的一个亚家族,具有多种生理功能．迄今为止,在人体中总共发现11种sPLA2亚型,它们具有不同的组织分布、水解活性和底物特异性．由于其水解产物主要为花生四烯酸和溶血磷脂,sPLA2常通过影响这两个通路调节细胞功能、炎症反应、抗菌等．本文结合近几年国际上关于sPLA2的研究报道,对于sPLA2的结构、功能、组织定位及与疾病发生发展的关系做一简要概述．     

缺刻缘绿藻磷脂酶A2(PLA2)的基因特征与功能

为进一步鉴定磷脂酶A2(PLA2)在缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa)油脂合成过程中的具体功能,研究利用RACE技术从缺刻缘绿藻H4301中克隆到pla2基因(Mipla2)的cDNA序列全长,共1082 bp。该全长包含180 bp的5′-非翻译区(UTR), 464 bp的3′-UTR和438 bp的开放阅读框(ORF),编码1个由145个氨基酸组成的蛋白。其基因全长为1594 bp,含有3个内含子和4个外显子。多序列比对结果显示, MiPLA2具有保守的Ca²⁺结合基序和催化活性基序。系统演化分析结果显示MiPLA2属于植物s PLA2-XIA家族。利用同源重组技术构建了pET32aMipla2原核表达载体,经过诱导和纯化,得到了分子量大小为31.36 kD的重组MiPLA2蛋白。体外酶促反应的产物经薄层层析分析显示,重组表达的MiPLA2具有催化磷脂酰胆碱(PC)水解成溶血磷脂酰胆碱(LPC)的功能。研究结果有助于解析花生四烯酸被优先用于三酰甘油(TAG)合成的途径与机理,为通过pla2基因的遗传改造提高该藻油脂产率的应用研究奠定了基础。     

钠离子通道疾病及其抑制剂生物学功能研究进展

电压门控型钠离子通道(Voltage-gated sodium channel,VGSC)广泛分布于兴奋性细胞,是电信号扩大和传导的主要介质,在神经细胞以及心肌细胞兴奋传导等方面发挥重要作用。钠离子通道结构和功能的异常会改变细胞的兴奋性,从而导致多种疾病的发生,如神经性疼痛、癫痫,以及心律失常等。目前临床上多采用钠离子通道抑制剂治疗上述疾病。近些年,研究人员陆续从动物的毒液中分离纯化出具有调控钠离子通道功能的神经毒素。这些神经毒素多为化合物或小分子多肽。现已有医药研发公司将这些天然的神经毒素进行定向设计改造成钠离子通道靶向药物用于临床疾病的治疗。此外,来源于七鳃鳗Lampetra japonica口腔腺的富含半胱氨酸分泌蛋白(Cysteine-rich buccal gland protein,CRBGP)也首次被证明能够抑制海马神经元和背根神经元的钠离子电流。以下针对钠离子通道疾病及其抑制剂生物学功能的最新研究进展进行分析归纳。     

人分泌型磷脂酶A2 GIIE的E54突变及其对底物选择性的影响

人分泌型磷脂酶A2GIIE(Human secreted phospholipase A2GIIE,hGIIE)通过发挥酶催化作用,参与炎症反应和脂代谢过程.为了揭示hGIIE的底物选择机制,文中对hGIIE进行了定点突变,采用毕赤酵母Pichiapastoris重组表达突变体蛋白,然后通过阳离子交换和分子排阻两步法纯...     

人分泌型磷脂酶A2(hsPLA2-IIA)基因的克隆、表达及活性鉴定

目的为了构建人分泌型磷脂酶A2(secretaryphospholipaseA2,sPLA2-IIA)的有效表达系统,从胎脾中提取总RNA。方法采用RT-PCR方法扩增出编码sPLA2-IIA的基因定向地克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pET32a的TrxA基因3′末端,构建符合读码框的融合表达载体pET32a-sPLA2-IIA。37℃下经IPTG诱导,hsPLA2-IIA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,表达产物以包涵体的形式存在。包涵体经8mol/L尿素溶解、复性后检测结果显示具有较高的催化活性并呈现剂量依赖关系。结论以大肠杆菌为宿主,成功表达了hsPLA2-IIA蛋白,为进一步进行hsPLA2-IIA的大量生产和功能研究奠定了基础。     

人分泌型磷脂酶A2(hsPLA2-IIA)基因的克隆、表达及活性鉴定

目的 为了构建人分泌型磷脂酶A2(secretary phospholipase A2, sPLA2-IIA) 的有效表达系统,本文从胎脾中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增出编码sPLA2-IIA的基因定向地克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pET32a的TrxA基因3’末端,构建符合读码框的融合表达载体pET32a-sPLA2-IIA。37℃下经IPTG诱导,hsPLA2-IIA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,表达产物以包涵体的形式存在。包涵体经8M尿素溶解、复性后检测结果显示具有较高的催化活性并呈现剂量依赖关系。结论：以大肠杆菌为宿主,成功表达了hsPLA2-IIA蛋白,为进一步进行hsPLA2-IIA的大量生产和功能研究奠定了基础。     

血浆IIA分泌型磷脂酶A2水平与冠脉支架术后再狭窄关系

目的：测定稳定型冠心病患者支架植入术（percutanous coronary intervention,PCI）前血浆IIA分泌型磷脂酶A2（group IIA secretory phospholipase A2,IIA-sPLA2）的水平,以探讨该酶与冠脉支架术后再狭窄的可能关系。方法：稳定型冠心病行PCI患者63例,非冠心病患者39例,健康正常对照组42例,分别取外周静脉血测定血浆IIA-sPLA2酶浓度。PCI患者6个月后复查造影。结果：PCI患者术前该酶浓度显著高于正常对照组（P〈0．05）,支架内再狭窄率34．9％,再狭窄（restenosis,RS）患者支架术前该酶水平与无再狭窄患者该酶水平无统计学差异（P〉0．05）。结论：PCI患者术前血浆IIA-sPLA2酶浓度显著高于正常对照组,但可能与支架术后再狭窄无关。     

血浆IIA 分泌型磷脂酶A2 水平与冠脉支架术后再狭窄关系

目的:测定稳定型冠心病患者支架植入术(percutanous coronary intervention,PCI)前血浆IIA分泌型磷脂酶A2(group IIAsecretory phospholipase A2,ⅡA-sPLA2)的水平,以探讨该酶与冠脉支架术后再狭窄的可能关系。方法:稳定型冠心病行PCI患者63例,非冠心病患者39例,健康正常对照组42例,分别取外周静脉血测定血浆ⅡA-sPLA2酶浓度。PCI患者6个月后复查造影。结果:PCI患者术前该酶浓度显著高于正常对照组(P<0.05),支架内再狭窄率34.9%,再狭窄(restenosis,RS)患者支架术前该酶水平与无再狭窄患者该酶水平无统计学差异(P>0.05)。结论:PCI患者术前血浆ⅡA-sPLA2酶浓度显著高于正常对照组,但可能与支架术后再狭窄无关。     

精子顶体反应期间磷脂酶A2的信号转导及其调节

磷脂酶A2是精子重要的脂解酶类,包括多种不同亚型。在精子顶体反应期间磷脂酶A2受天然激动剂卵透明带、孕酮和γ-氨基丁酸激活,引起胞外Ca2 内流,使磷脂水解为花生四烯酸和溶血磷脂酰胆碱,从而促进膜的融合即顶体反应。天然激动剂引起PLA2激活受Gi蛋白、甘油二酯、蛋白激酶A、蛋白激酶C、促分裂原蛋白激酶和活性氧等多条信号通路的调节,此外,磷脂酶A2与特异性磷酯酶C之间可以发生信号串话。研究PLA2的信号通路为了解受精机制、男性不育之病因和开发男性避孕药提供依据。     

Phospholipase A2 (PLA2) enzymes in membrane trafficking: mediators of membrane shape and function

Since the mid-1990s, there have been tremendous advances in our understanding of the roles that lipid-modifying enzymes play in various intracellular membrane trafficking events. Phospholipases represent the largest group of lipid-modifying enzymes and accordingly display a wide range of functions. The largest class of phospholipases are the phospholipase A(₂) (PLA₂) enzymes, and these have been most extensively studied for their roles in the generation lipid signaling molecules, e.g. arachidonic acid. In recent years, however, cytoplasmic PLA₂ enzymes have also become increasingly associated with various intracellular trafficking events, such as the formation of membrane tubules from the Golgi complex and endosomes, and membrane fusion events in the secretory and endocytic pathways. Moreover, the ability of cytoplasmic PLA₂ enzymes to directly affect the structure and function of membranes by altering membrane curvature suggests novel functional roles for these enzymes. This review will focus on the role of cytoplasmic PLA₂ enzymes in intracellular membrane trafficking and the mechanisms by which they influence membrane structure and function .     

Expression and Induction of Secretory Phospholipase A Group IB in Brain

Summary Secretory phospholipases A₂ (sPLA₂) form a diverse family of enzymes involved in physiologicand pathologic processes. Common among all sPLA₂ is the ability to cleave acyl groups of phospholipids at 2_C of the glycerol backbone, thereby releasingfatty acid and a lysophospholipid. Several sPLA₂ have been cloned and characterized in various tissues.Furthermore, receptors have been identified. In the nervous system sPLA₂ groups IIA, IIE, IIF, V, and XII have been identified, and binding sites for sPLA₂ group IB (sPLA₂-IB) have been found. Here, we report sPLA₂-IB in rat and human brain as well as in neurons in primary culture. The distribution of sPLA₂-IB seems to be mainly neuronal, with the highest abundance occurring in the cerebral cortex and hippocampus. We also find that genes encoding sPLA₂-IB are induced by kainic acid and by electroshock-induced convulsions.Based on the present results we suggest that sPLA₂-IB may be a neuronal intercellular signalling modulator.     

PLD 的生化特性及在信号传导中的作用

磷脂酶 D(PLD)是一种分解磷脂的多功能酶,磷脂酶可激活调控许多重要的细胞生理功能,在信号转导、小泡运输、有丝分裂、激素作用的发挥、细胞骨架组装、防御反应以及种子萌发和衰老过程中都起重要作用．主要介绍了磷脂酶基因的生化特性及在植物信号转导中的作用．     

锌α2糖蛋白生物学功能

锌α2糖蛋白(zinc alpha-2 glycoprotein,ZAG)是一种42 kD可溶性蛋白,广泛存在于人体液中.自从ZAG被发现以来,有许多关于其结构及功能的报道.最初ZAG被认为与生殖及脂代谢有关,后又发现ZAG具有载体蛋白、核糖核酸酶的活性等功能.ZAG也参与免疫控制、细胞黏着、调节黑色素生成等.近年来,多项研究表明,ZAG与促进骨骼肌合成、抑制肿瘤细胞增殖、诊断早期癌症、抗糖尿病有关.本文从ZAG分子结构出发,对ZAG生物学功能的研究进展进行综述.     

Activation of Phospholipase C β by Gβγ and Gαq Involves C-Terminal Rearrangement to Release Autoinhibition

1. Download : Download high-res image (144KB)
2. Download : Download full-size image