Bcl-2促进哺乳动物脑中断裂轴突的再生

Ｂｃｌ┐２促进哺乳动物脑中断裂轴突的再生在胚胎发育的一定阶段以后,哺乳动物脑中大多数神经元的轴突都丧失了再生的能力,这是神经系统一个固有的特性,通常认为它是由某种遗传程序所控制。最近Ｃｈｅｎ等研究证明,原癌基因ｂｃｌ－２在轴突的生长和再生中起关键作用...     

再生神经中微管,神经丝与轴突截面积的变化

用电镜及图象分析的方法研究了再生轴突中微管、神经丝与轴突截面积的变化,发现神经再生过程中微管及神经丝的密度增加,并与轴突截面积呈相关关系,而且微管的变化更早,更明显。由于微管参与了轴浆转运的机制,微管的增加提示其在神经再生中起了重要的作用。     

脑源神经营养因子基因转染神经断端促进切断坐骨神经再生

为了研究体内表达的脑源神经营养因子（Ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄＮｅｕｒｏｔｒｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＢＤＮＦ）对脊髓运动神经元存活及切断神经再生的作用,我们将人ＢＤＮＦｃＤＮＡ克隆到真核表达载体ｐＣＢ６中,使ＢＤＮＦ基因在ＣＭＶ启动子控制下表达。在雏鸡出生后３小时内及第二天直接将ｐＣＢ－ＢＤＮＦｃＤＮＡ·ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ混合物注射到坐骨神经预切断位点附近肌肉内。第二天切断坐骨神经,神经切断１０天后进行实验检测,观察到,ＢＤＮＦｃＤＮＡ转染阻止了切断神经一侧的腰脊髓内（Ｌ４－Ｌ６）运动神经元的大量死亡。并显著的促进了切断坐骨神经的再生。这些结果表明直接注射含ＢＤＮＦｃＤＮＡ的质粒对损伤的神经进行基因治疗,具有良好的前景;ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导重组质粒进行基因转染是导入外源基因到体内的一个可行方法。     

精氨酸酶Ⅰ参与环腺苷酸促进脑缺血再灌注大鼠的轴突再生

环腺苷酸（cAMP）作为细胞内的重要第二信使之一,主要通过激活下游cAMP依赖性蛋白激酶A（PKA）,进一步激活转录因子-cAMP效应元件结合蛋（CREB）,达到促进损伤轴突再生的作用.精氨酸酶Ⅰ主要是通过促进多胺的表达,从而克服髓鞘相关抑制因子对轴突再生的抑制作用,达到促进轴突再生的效果.在脑缺血中,cAMP促进轴突再生的过程是否有精氨酸酶Ⅰ的参与及其与RhoA信号通路的关系尚不清楚.本研究采用线栓法制备脑缺血再灌注模型（MACO）,采用Longa 5评分法对大鼠运动功能进行评分,利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western蛋白印迹方法分别检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白43（GAP-43）和RhoA的mRNA和蛋白表达,免疫组化法进行GAP-43的形态学检测,作为轴突再生的标志.通过尾静脉注射cAMP类似物db-cAMP增加脑缺血后大鼠脑组织内cAMP的浓度后发现：db-cAMP处理可明显降低MACO大鼠的运动功能评分,且可促进GAP-43 mRNA及蛋白的表达,抑制RhoA mRNA及蛋白的表达,由此可见db-cAMP处理可促进脑缺血后大鼠运动功能的恢复,且这一过程与抑制RhoA通路,进而促进轴突再生有关;通过在db-cAMP的基础上给予精氨酸酶Ⅰ拮抗剂NOHA来降低精氨酸酶Ⅰ的活性发现：给予NOHA的大鼠运动功能评分明显增加,这一变化趋势与RhoA mRNA及蛋白表达的变化趋势相一致,而与GAP-43 mRNA及蛋白表达的变化趋势相反. 因此可推断：精氨酸酶Ⅰ参与了db-cAMP促进轴突再生、改善脑缺血后大鼠运动功能的过程,且与钝化RhoA通路有关.     

神经轴突的钠离子通道模型

镶嵌在神经轴突膜中的一种蛋白质分子行使钠通道的功能。沿着跨膜方向,蛋白质分子中与类脂的脂肪酸链相邻部分形成数条α-螺旋。氨基酸极性侧链向螺旋之间的空间伸展,侧链的偶极子或离子基团可以成对地形成氢键,并构成通道的活化或失活闸门。每一极性侧链可以有两种稳定构象,一条侧链处于构象Ⅰ或Ⅱ的几率服从波尔茨曼定律。在膜电场作用下,这些极性侧链在两种构象间发生跃迁,形成门控电流并导致通道呈现关闭或开放态。钠离子以跳跃扩散方式越过势垒。根据电场作用下电介质的极化特性,推导了门控电流和钠电导的稳态和动力学公式,它们是膜电位和时间的函数。用这些公式进行定量估算的结果表踞,与实验事实基本相符。本文并对钠通道和门控过程的一些特性进行了讨论。     

中枢神经损伤后影响轴突再生的因素

与周围神经不同 ,成年哺乳动物中枢神经损伤后轴突不能再生 ,往往造成不可逆的功能丧失。影响再生的原因相当复杂 ,胶质瘢痕形成、神经营养因子缺乏及存在诸多的抑制性因子等。本文就一些影响中枢神经再生的因子从其结构、分布、功能及可能的作用机制诸方面作一综述     

CTx促进远端视神经切断后视网膜节细胞轴突再生与c-Jun表达的关系

目的探讨霍乱毒素(CTx)促进成年金黄地鼠视神经远端切断后视网膜节细胞(RGCs)轴突再生与c-Jun的表达关系。方法远端切断视神经并对接一段自体坐骨神经,玻璃体内注射CTx及/或植入小段坐骨神经分支(SN)。动物随机分为AG CTx组;AG SN组;AG SN CTx组,各组动物分别存活4W,用荧光金(FG)逆行标记和c-Jun免疫荧光组织化学双标法观察轴突再生的RGCs内c-Jun表达情况。结果再生RGCs内有c-Jun蛋白表达,玻璃体内给予CTx或植入SN组RGCs表达c-Jun的再生RGCs分别为35·8±9·57和32·2±7·25个,约占其再生总数的94%及90%,两组相比无显著性差异(P>0·05);CTx与SN联用组c-Jun阳性再生的RGCs为150·2±43·92个,占再生总数的97%,与前两组相比,均有显著性差异(P<0·05)。结论视神经远端切断后约90%以上的再生RGCs有c-Jun表达,提示c-Jun表达与视神经远端受损后节细胞轴突再生密切相关,CTx及外周神经对RGCs轴突再生及c-Jun表达有协同促进作用。     

视神经远端切断后再生视网膜节细胞Bcl-2的表达

目的　成年金黄地鼠视神经远端切断后再生视网膜节细胞 (RGCs)Bcl 2的表达与再生的关系。方法　远端切断视神经并对接一段自体坐骨神经 ,玻璃体内注射CTx及 /或植入小段坐骨神经分支 (SN)。动物随机分为AG +CTx组 ;AG +SN组 ;AG +SN +CTx组 ,各组动物分别存活 4W ,用粒蓝 (GB)逆行标记和Bcl 2免疫荧光组织化学双标法观察再生的RGCs和Bcl 2表达。结果　再生RGCs胞质内有Bcl 2蛋白表达 ,玻璃体内给予CTx或植入SN组表达Bcl 2的再生RGCs分别为 32 2± 4 71和 2 9 4± 3 75个 ,约占其再生总数的 82 5 0 %及 80 96 % ,两组相比无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;CTx与SN联用组Bcl 2阳性再生的RGCs为 15 1 8± 35 6 9个 ,占再生总数的 91 2 2 % ,与前两组相比 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　视神经远端切断后约 80 %的再生RGCs有Bcl 2表达 ,提示Bcl 2表达可能与节细胞再生有密切关系。     

受伤神经的再生

美国斯坦弗大学医学系的神经生物学家EricShootcr和同事们发现脱辅基脂蛋白E(apo-E)在神经被损伤后参与修复工作。apo-E就是能与脂类化合物(脂肪与胆固醇)结合后在血中运行的那种蛋白质。当伤了腿并压坏了坐骨神经时,机体很快就会调     

竹节虫的断足再生观察

竹节虫的断足再生现象,是生物学上很有趣的问题。蔡邦华先生(1956)指出:“腿节与转节间有缝,使足易于脱落。”[1]忻介六等(1985)说,断足在蜕皮时又能长出,但明显短小。[2]戚永和等(1992)发现金平巨树Ｔｉｒａｃｈｉｄｅａｗｅｓｔｗｏｏｄｉ(ＷｏｏｄＭａｓｏｎ)的雌虫或雄虫常会缺少一只或两只足,有些个体则在断足的基部长出了细弱弯曲的“肢芽”,并能够逐渐发育成一只完整的足,但是,看上去比原有那只弱小一些。[3]ＧＯＢｅｄｆｏｒｄ(1978)援引ＪＴＳａｌｍｏｎ(1955)的文章,竹节虫若虫的附肢,蜕皮时可能被损坏(或实验性损坏),在随后的…     

三维取向PLGA神经导管促进坐骨神经再生的实验研究

目的：探讨应用改进静电纺丝技术一次成型制备三维（3D）取向聚乳酸与聚羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米神经导管的可行性,检测其对坐骨神经再生的促进作用。方法：应用改进的静电纺丝技术制备无缝取向PLGA纳米神经导管,通过扫描电镜和透射电镜检测支架的纳米结构;分别制备取向和非取向纳米纤维支架修复13mm坐骨神经缺损模型。36只成年SD大鼠随机分为3组（每组12只）,A组：非取向PLGA神经导管组（阴性对照）;B组：取向PLGA神经导管组,C组：自体神经移植组（阳性对照）,于术后3月通过大体观察、行走足印分析、腓肠肌萎缩率、电生理检测、组织形态学检测、透射电镜检测及图像分析,评价无缝取向PLGA纳米神经导管修复坐骨神经缺损的效果。结果：神经导管修复神经缺损三月后,大体观察显示神经导管结构完整,无坍塌和断裂;各组再生神经均有通过神经导管长入远端。B组与C组的腓肠肌萎缩率和神经电传导速度无统计学差异（P〈0.05）,均优于A组。B组与C组再生神经纤维数量及成熟程度均要明显优于A组。结论：无缝取向PLGA纳米神经导管能够诱导并促进神经再生,提高坐骨神经再生的质量,有望成为自体神经移植的替代物。     

三维取向PLGA神经导管促进坐骨神经再生的实验研究

目的:探讨应用改进静电纺丝技术一次成型制备三维(3D)取向聚乳酸与聚羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米神经导管的可行性,检测其对坐骨神经再生的促进作用。方法:应用改进的静电纺丝技术制备无缝取向PLGA纳米神经导管,通过扫描电镜和透射电镜检测支架的纳米结构;分别制备取向和非取向纳米纤维支架修复13mm坐骨神经缺损模型。36只成年SD大鼠随机分为3组(每组12只),A组:非取向PLGA神经导管组(阴性对照);B组:取向PLGA神经导管组,C组:自体神经移植组(阳性对照),于术后3月通过大体观察、行走足印分析、腓肠肌萎缩率、电生理检测、组织形态学检测、透射电镜检测及图像分析,评价无缝取向PLGA纳米神经导管修复坐骨神经缺损的效果。结果:神经导管修复神经缺损三月后,大体观察显示神经导管结构完整,无坍塌和断裂;各组再生神经均有通过神经导管长入远端。B组与C组的腓肠肌萎缩率和神经电传导速度无统计学差异(P0.05),均优于A组。B组与C组再生神经纤维数量及成熟程度均要明显优于A组。结论:无缝取向PLGA纳米神经导管能够诱导并促进神经再生,提高坐骨神经再生的质量,有望成为自体神经移植的替代物。     

神经网络形成的新途径--向导分子Seman7A通过整合素促进神经轴突体积增长

向导分子Seman7A是旗语隐素(Semaphorins)家族成员之一,一直被认为只是引导轴突向正确方向生长的分子。最近,美国科学家Pasterkamp等惊奇地发现,它可通过整合素介导促进轴突生长而非引导其生长的方向!他们获得的主要实验证据是：(1)在Sema7A缺失的小鼠脑中侧嗅束的生长方向正确无误,但体积却     

诺丽叶片的离体再生

以诺丽(Morinda citrifolia)叶片为外植体,在添加不同激素种类和浓度的MS培养基上进行离体培养,建立两种离体再生模式:模式Ⅰ为先脱分化愈伤组织,再分化不定根和不定芽;模式Ⅱ为直接培养生根后分化不定芽。结果表明:在模式Ⅰ中,诱导诺丽叶片产生愈伤组织的最优培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)6-BA+2.0mg·L~(-1)2,4-D;诱导叶片愈伤组织再分化出不定根和不定芽的最优培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.4 mg·L~(-1) NAA或MS+2.0 mg·L~(-1)6-BA+0.4 mg·L~(-1) NAA,其中MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.4 mg·L~(-1) NAA生根时间最早为10 d左右,根系较发达,而MS+2.0 mg·L~(-1)6-BA+0.4 mg·L~(-1) NAA生根时间在15 d左右,根系发达。在模式Ⅱ中,诱导叶片直接生根长芽的培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.4 mg·L~(-1) NAA。将模式Ⅰ和模式Ⅱ中,完成诺丽叶片离体再生的苗切下后接种到MS+0.2 mg·L~(-1) NAA培养基中诱导生根,15 d左右分化出不定根,45 d获得完整植株。该研究结果为后续的遗传转化和基因改良研究奠定了基础。     

Bcl-2蛋白的研究进展

Bcl-2基因属于Bcl-2基因家族,其表达的Bcl-2蛋白在细胞凋亡过程中通过抑制线粒体中细胞色素C的释放,可明显地抑制细胞凋亡。由于在大规模的细胞培养过程中,细胞的死亡以凋亡为主,所以可通过建立稳定过表达Bcl-2蛋白的重组细胞株,以抑制细胞的凋亡。同时,Bcl-2蛋白的变化不但可预见肿瘤的发生,而且通过药物降低Bcl-2的含量对于肿瘤的治疗也具有积极的意义。本文综述了Bcl-2蛋白的结构、功能、抗凋亡作用的机理,以及目前在生物制药和临床方面的应用和前景。     

沙葱(Allium mongolicum Regel)离体培养再生可育植株

以沙葱（Allium mongolicum Regel)的叶基切段作外植体,成功地诱导出愈伤组织和再生植株。诱导愈僵组织的培养基为附加2mgL^-22,4-D和0.2mgL^-1KT的MS培养基。愈伤组织转移到附加2mgL^-16BA和0.4mgL^-1NAA的MS培养基后分化出大量的苗;分化苗在含有IBA1mgL^-1的1/2MS培养基上生根最佳。再生植株移栽成活率在95%以上。移栽到田间的植株第二年以后可正常开花结实。     

中华真地鳖的断足再生

报道了中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker的断足再生特征。研究结果表明,不同虫龄期的若虫都有断足再生能力;足的不同部位断足后均能再生;断掉不同数量的足后,只要能成活均可再生。断足再生后,继续断掉再生足的原位或其他部位也可以再生。再生足的跗节均比正常的少一节,具有再生不完整性。断足后,只要经1～2次蜕皮,均可再生。断掉一对足的腿节后,再生足出现大小不一的现象,小的一般发育不全,断足数量多容易出现再生足发育不全。再生足比正常足要小,但生长速度要快,断掉足的腿节或跗节后的再生足经过2次蜕皮后基本可恢复到正常足大小。     

褪黑激素和儿茶酚胺可促进人类离体培养颗粒细胞分泌孕酮

美国Webley等为了解决儿茶酚胺是否与灵长类卵巢孕酮生成有关,进行了以下实验。他们从进行体外授精病人的卵泡中抽吸颗粒细胞,在补充血清的培养介质中进行离体培养3～4天,结果发现,肾上腺素和去甲肾上腺素可促进颗粒细胞分泌孕酮,其程度与所用剂量(10~(-7)～10~(-4)mol/L)相关,在浓度为10~(-5)mol/L时,促进作用最强,而且此反应可被β-拮抗剂心得安(10~(-5)mol/L)所阻止。肾上腺素(10~(-5)mol/L)和人类绒毛膜促性腺激素(10和100ng/ml,培养6天)促进孕酮分泌的特点相似,但两者无协同作用。褪黑激素(200kg/ml)也促进孕酮分泌,与肾上腺素相似,此促进作用也可被心得安(10~(-(?))mol/L)所阻止。肾上腺素和褪黑     

没有神经的腿的再生

对于嵘螈肢体的再生,神经系统特别是切割后的残肢裹的神经纤维,一向是被认为有决定性意义的。晚近利用成体或接近变态的幼体的研究证明了:在再生芽基形成之后,切断神经,已经形成的芽基仍然可以继续发育成正常的肢体;但在再生芽基形成之