一例原发闭经46,X,psu dic(X)(p22. 3::p22.3)

国外自1974年来,已有等臂双着丝粒X的多种病例报道^[5,6]。我国1982年才开始报道,至今已报道约有6例^[1-3]。现将我室发现一例报告如下。     

86例心肌梗死患者尿微量白蛋白测定的意义

近年来,我国心脑血管病逐渐增多,其致残率、死亡率也明显上升。我院于2004年1月-2006年6月对86例心肌梗死患者进行了尿微量白蛋白的检测,并与120例来本院体检的健康者进行比较,发现心肌梗死患者尿微量白蛋白有明显改变,现报告如下。     

人血清白蛋白融合技术研究进展

结合笔者所在课题组的实验研究成果,综述人血清白蛋白融合技术研究进展。人血清白蛋白融合技术是近些年来应用较多的用 于改造小分子蛋白和多肽药物的手段。但是众多的研究结果发现将小分子蛋白/多肽和人血清白蛋白融合后会出现一些共性的问题,例 如目标蛋白产率低、易降解等。这些共性问题可以通过融合蛋白的优化设计、蛋白酶缺陷宿主的构建、融合基因多拷贝以及与分子伴侣 共表达得以解决     

大鼠白蛋白mRNA3''''端顺序的分子克隆(简报)

白蛋白与甲胎蛋白基因是由同一祖先基因进化而来。在小鼠,它们是一前一后定位在同一条染色体DNA上。在个体发育和肝癌变过程中,这两基因的相互关系也呈现相反的表达水平。因此,研究甲胎蛋白基因表达的调控与白蛋白基因是不可分割的。本文简要报道我们克隆了大鼠白蛋白mRNA 3′端顺序,为研究白蛋白基因结构和表达提供了必要的探针。白蛋白mRNA是从Wistar大鼠肝脏用双抗体免疫沉淀法提取。分子克隆技术基本是按“分子克隆”实验手册进行。     

胰高血糖素样肽-1融合蛋白在原核系统中的表达

[目的]构建点突变的GLP-1Gly8,并与人血清白蛋白(HSA)结构域Ⅰ融合,延长GLP-1的半衰期。[方法]采用常规PCR扩增白蛋白结构域Ⅰ片段,利用SOE-PCR扩GLP-1Gly8基因并将两个基因拼接,得到的HSA-GLP-1Gly8融合基因经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到p ET30a表达载体,重组质粒p ET30a-HSA-GLP-1Gly8转入E.coli BL21(DE3)宿主菌中进行IPTG诱导表达。[结果]PCR扩增分别获得140 bp的GLP-1Gly8基因499 bp的HSA的片段及经融合后的HSA-GLP-1Gly8基因。表达载体p ET30a-HSA-GLP-1Gly8在E.coli BL21(DE3)宿主菌中经IPTG诱导,过表达了分子量约为22 k Da的融合蛋白。[结论]成功构建了p ET30a-HSA-GLP-1Gly8原核表达载体,融合蛋白在BL21(DE3)菌中以包涵体的形式过表达。     

荧光法研究血清白蛋白与药物的结合作用

本文应用荧光光谱法,观测了药物分子头孢菌素Ⅳ、异烟肼、维生素B_6和氟哌酸对白蛋白荧光的猝灭。由Lineweaver-Burk双倒数作图法,确定了药物与白蛋白作用的离解常数。并通过Forster偶极-偶极无辐射能量转移机理确定了药物分子氟哌酸在人血清白蛋白中与色氨酸残基之间的距离R为2.55nm,由这一距离确定了药物分子可能进入的区域和位置。     

锁阳原花青素提取方法及抗氧化和抗糖基化研究

为比较不同提取方法对锁阳原花青素得率、抗氧化性和抗糖基化活性的影响,本研究分别采用超声波法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、水提法、微波法和酶解法提取锁阳中原花青素,用香草醛-浓盐酸法测定原花青素含量。采用DPPH·清除能力和·OH清除能力衡量其体外抗氧化能力,采用牛血清白蛋白(BSA)-葡萄糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙醛酸(MGO)模拟反应体系评价原花青素抗糖基化活性。结果表明:微波法提取得率最高,可达15. 00%,提取时间短,仅为19 min。不同提取方法对DPPH·清除能力依次为微波法酶法超声波法乙醇/硫酸铵双水相萃取法水提法;不同提取方法对·OH清除能力依次为:微波法酶解法超声法水提法乙醇/硫酸铵双水相萃取法。微波法制备原花青素在牛血清白蛋白-果糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙酮醛模拟反应中均有最高抑制率;但抗氧化和抗糖基化活性无相关性。     

基于光纤式动态光散射的人血清白蛋白研究

人体尿液中血清白蛋白急剧增加会导致肾脏病发生几率增大,利用动态光散射技术(dynamic light scattering,DLS)研究人血清白蛋白有助于推动诊断肾脏病的早期发现。分析了人血清白蛋白的物理模型;利用单模光纤搭建了动态光散射实验系统,并配制了实验所需的人血清白蛋白水溶液;最后使用该系统研究了人血清白蛋白分子的扩散系数在不同蛋白浓度和pH值条件下的扩散系数。实验和分析结果表明库仑力对蛋白质的扩散起主要作用,在等电位点下(pH=5.2)库仑力的影响消失,蛋白质的扩散系数最小;在等电位点测量出扩散系数随浓度的增加而线性减小;在浓度5 mg/mL～40 mg/mL内互扩散系数Dm=D0[1-(0.00194±0.00008)],D0=(6.74±0.01)×10-7cm2/s为外推至零浓度下23℃时蛋白质的扩散系数。这里C为蛋白质浓度,实验测得人血清白蛋白的半径为(3.44±0.01)nm。     

新型甘露聚糖酶-乙酰酯酶双功能酶的功能和结构域协同研究

[目的] 分析鉴定高效木质纤维素降解菌群EMSD5来源的新型甘露聚糖酶-乙酰酯酶双功能酶44884,解析催化域间的协同关系,以及碳水化合物结合模块（CBM）对催化域特性的影响,拓展对该类双功能酶的认识,为甘露聚糖酶的升级改造和应用提供依据。[方法] 通过大肠杆菌异源表达甘露聚糖酶-乙酰酯酶双功能酶44884,并构建截短和定点突变的突变体,利用TLC和DNS法比较野生型和突变体的酶学性质。[结果] 成功对44884全长和突变蛋白进行克隆表达,并发现44884中2个催化域能够彼此促进各自产物的释放,而且以双功能酶形式存在时,这种促进效果更为明显。44884中的2个CBM65均有甘露聚糖和结晶纤维素结合活性,且CBM65的存在并不改变甘露聚糖酶和乙酰酯酶的最适反应条件和水解模式。虽然CBM65显著降低了2个催化域的热稳定性,但水解天然底物时,2个CBM65对各自临近催化域的水解具有明显的促进效果。[结论] 本研究首次发现并探究了新型甘露聚糖酶和乙酰酯酶形成的双功能酶44884的功能,解析了催化域之间高效的协同效应,以及新型甘露聚糖结合模块CBM65对双功能酶水解的促进作用。     

外源RNA对小鼠白蛋白基因表达及DNaseI敏感性的影响

兔肝RAN诱导培养的小鼠成纤维细胞,大鼠肝RNA注射入小鼠前列腺,用免疫组织化学染色检测外源RNA对小鼠白蛋白基因表达的影响;不同RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞,提取细胞核,DNaseI消化,PCR法扩增小鼠白蛋白基因,检测白蛋白基因消化情况。发现外源RNA可促进小鼠白蛋白基因表达并增加该基因DNaseI敏感性。     

FOLFIRI化疗前后口腔粘膜细胞凋亡率和营养状况及肠道通透性的相关性研究

目的:探讨化疗前后口腔粘膜细胞凋亡率和患者营养状况及肠道通透性的相关性。方法:观察30例老年结直肠癌术后肝转移患者,采用FOLFIRI方案化疗,流式细胞仪检测化疗前后患者口腔粘膜细胞率,同时检测血清白蛋白、前白蛋白及血浆D-乳酸,并对口腔黏膜细胞凋亡率与血清白蛋白、前白蛋白、血浆D-乳酸水平的变化作相关分析。结果:化疗后d1、d3、d5、d7口腔黏膜细胞凋亡率较化疗前均有所上升,较化疗前比较有高度统计学意义(P0.01),该变化与同步测量的血白蛋白、前白蛋白以及D-乳酸含量的变化显著相关(r=0.641,P0.01)。结论:本研究发现FOLFIRI化疗前后口腔粘膜细胞凋亡率和患者营养状况及肠道通透性密切相关。口腔黏膜细胞凋亡率的变化很有希望成为化疗后患者营养状况及肠道粘膜通透性的简易、快速评估指标之一。     

锁阳原花青素提取方法及抗氧化和抗糖基化研究北大核心CSCD

为比较不同提取方法对锁阳原花青素得率、抗氧化性和抗糖基化活性的影响,本研究分别采用超声波法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、水提法、微波法和酶解法提取锁阳中原花青素,用香草醛-浓盐酸法测定原花青素含量。采用DPPH·清除能力和·OH清除能力衡量其体外抗氧化能力,采用牛血清白蛋白(BSA)-葡萄糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙醛酸(MGO)模拟反应体系评价原花青素抗糖基化活性。结果表明:微波法提取得率最高,可达15. 00%,提取时间短,仅为19 min。不同提取方法对DPPH·清除能力依次为微波法>酶法>超声波法>乙醇/硫酸铵双水相萃取法>水提法;不同提取方法对·OH清除能力依次为:微波法>酶解法>超声法>水提法>乙醇/硫酸铵双水相萃取法。微波法制备原花青素在牛血清白蛋白-果糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙酮醛模拟反应中均有最高抑制率;但抗氧化和抗糖基化活性无相关性。     

外源RNA对小鼠白蛋白基因表达及DNaseⅠ敏感性的影响

兔肝RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞 ,大鼠肝RNA注射入小鼠前列腺 ,用免疫组织化学染色检测外源RNA对小鼠白蛋白基因表达的影响 ;不同RNA诱导培养的小鼠成纤维细胞 ,提取细胞核 ,DNaseⅠ消化 ,PCR法扩增小鼠白蛋白基因 ,检测白蛋白基因消化情况。发现外源RNA可促进小鼠白蛋白基因表达并增加该基因DNaseⅠ敏感性     

采用双抗体免疫沉淀技术分离和提纯大鼠肝细胞白蛋白mRNA

采用双抗体技术和Poly(U)-Sepha-rose 亲和层析法,分离和纯化出为均一的大鼠肝细胞白蛋白mRNA。把酸乙醇—硫酸铵分部和Sephadex G-150柱层析得到均一的大鼠血清白蛋白,免疫家兔得到抗血清,上白蛋白-Sepharose 柱,得到了纯的抗白蛋白抗体。用它与肝聚核糖体一起温育,得到合成白蛋白的聚核糖体。它们之间的结合是高度专一的,似乎是通过核糖体上的初生白蛋白多肽的免疫识别作用所致。反应的免疫复合物用第二抗体追踪,然后把聚核糖体—第一抗体—第二抗体复合物,通过一个不连续的蔗糖梯度,除去未反应的聚核糖体和抗体。用苯酚—氯仿—异戊醇(50∶48∶2)从免疫沉淀中分离出白蛋白聚核糖体RNA,上poly(U)-Sepharose 柱,得到大鼠肝细胞白蛋白mRNA。所分离白蛋白mRNA,在2%聚丙烯酰胺—0.5%琼脂糖凝胶电泳时为一条带。在依赖于mRNA 的麦胚无细胞蛋白合成系统中,所有的翻译产物由第一抗体识别,第二抗体追踪,用凝胶电泳法鉴定为真正的白蛋白——约有70—80%新生白蛋白多肽与天然白蛋白一起移动。麦胚抽提物的翻译分析表明,提纯的白蛋白mRNA 的活力可高达白蛋白pRNA 的53倍。     

白蛋白对低粘切变流中的红细胞流变特性的影响

用一种新型激先衍射法,研究了白蛋白对低粘切交流动中红细胞取向的影响。所得结果表明,当白蛋白浓度小于０．０４ｇ／Ｌ时,测得的取向指数（ＤＩ）ｏｒ随蛋白浓度迅速增加,在白蛋白浓度等于０．０４ｇ／Ｌ时,其取向指数（ＤＩ）ｏｒ达到最大值,以后又随白蛋白浓度的增加而很快降低到一稳定值（白蛋白浓度大于０．５ｇ／Ｌ时）。同时作者从流变学观点对上述实验结果作了解释,并通过实验证明了取向指数可用于描述红细胞变形性,从而证明了在一定浓度下（０．０４ｇ／Ｌ）白蛋白有增加红细胞变形性,保持红细胞双凹圆盘形的功能。该研究提示我们,在用此新型激光衍射法时,必须在介质中加入适量的白蛋白（０．０４ｇ／Ｌ）。     

两种微泡造影剂评价输卵管通畅性的临床效果观察

目的:研究全氟丙烷人血白蛋白微球注射液(简称全氟丙烷白蛋白)在评价输卵管通畅性的临床应用效果。方法:96例不孕症患者分为两组,分别应用全氟丙烷白蛋白和Sono Vue进行子宫输卵管造影,实时观察造影剂在子宫、输卵管及盆腔显影情况,判断输卵管通畅性并记录病人即时疼痛指数。其中全氟丙烷白蛋白组中19例进行X线子宫输卵管造影。结果:两组超声造影结果对比,显影清晰率、图像质量及即时疼痛指数无统计学差异,一致性较好。全氟丙烷白蛋白Hy Co Sy组19例同时进行X线子宫输卵管造影,两种方法一致程度较好。结论:应用全氟丙烷白蛋白进行子宫输卵管超声造影可作为临床评价输卵管通畅性的一种有效方法。     

仙灵脾对2型糖尿病大鼠血糖及氧化应激的影响

目的:研究仙灵脾对2型糖尿病大鼠血糖及氧化应激的影响。方法:利用链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠动物模型,将wistar大鼠随机分为对照组、单纯造模组、仙灵脾组及二甲双胍组。治疗8周,观察治疗期间及治疗后大鼠的一般状况、血糖、胰岛素、MCP-1、8-iso-PGF2α及24h尿白蛋白排泄量,计算ISI。结果:仙灵脾能改善2型糖尿病大鼠基本状况,仙灵脾组大鼠的血糖、胰岛素、8-iso-PGF2α及24h尿白蛋白排泄量均较单纯造模组降低,ISI明显提高;降低尿白蛋白优于二甲双胍组(P0.05),改善ISI、降低血糖不及二甲双胍组明显,胰岛素、MCP-1、8-iso-PGF2α,两组无明显差异(P0.05)。结论:仙灵脾对2型糖尿病大鼠有降糖、改善氧化应激作用,其降糖作用可能与降低MCP-1、8-iso-PGF2α有关。     

霉菌、幽门螺杆菌及双菌种感染在胃溃疡、胃癌中检出的意义

探讨霉菌、幽门螺杆菌(Hp)单菌种感染和霉菌、Hp(双菌种)同时感染在胃癌及胃溃疡中的组织病理学变化、发病情况及意义。采用常规石蜡切片,HE染色和PAS、Giemsa特殊染色、免疫组织化学染色及PCR方法,对223例慢性浅表性胃炎、111例慢性萎缩性胃炎、116例胃溃疡、121例胃癌纤维胃镜活检标本进行回顾性研究。结果显示,慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎未检出双菌种感染。胃溃疡双菌种感染11例,检出率9.5%;胃癌双菌种感染21例,检出率17.4%。双菌种感染在胃癌及胃溃疡中的发现,表明双菌种感染可能是导致胃溃疡、胃癌发生的又一致病因素。     

糖尿病肾病标志物的研究进展

糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,最终导致终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD)。目前DKD的诊断和监测主要依靠尿微量白蛋白,但越来越多的证据显示单纯依靠尿微量白蛋白存在不足,有些DKD患者肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,e GFR)不断下降而尿微量白蛋白依然正常,有些早期DKD患者尿微量白蛋白也未见异常,这对于临床的诊断和治疗造成不小的困难。因此,需要寻找能够替代或联合尿微量白蛋白的标志物,以此来早期诊断和监测DKD。本文回顾以往DKD标志物的报道,根据DKD发病机制加以总结,期望发现优于尿微量白蛋白的标志物。     

丙肝抗体、丙肝病毒RNA、白蛋白及谷丙转氨酶在丙肝诊断中的应用

目的:探讨丙肝抗体、丙肝病毒(HCV)RNA、白蛋白(ALB)及谷丙转氨酶(ALT)在丙肝诊断中的应用。方法:采用ELISA法测定丙肝抗体,实时荧光定量PCR检测HCV-RNA含量,全自动生化仪检测白蛋白和ALT水平,应用SPSS 19.0软件对数据进行统计学处理。结果:77例患者中,丙肝抗体阳性56例,阴性21例;HCV-RNA阳性71例,阴性6例。这2种方法检测出的结果差异有统计学意义(P0.05)。将45例HCV-RNA阳性的标本按拷贝数不同分成6组,检测各组白蛋白的变化,前4组随着HCV-RNA拷贝数的增加,白蛋白含量依次降低。57例HCV-RNA阳性的标本中,有22例ALT含量异常,并且随着HCV-RNA拷贝数的增加,ALT的异常率及平均值也在上升;经相关性分析,ALT平均值与HCV-RNA拷贝数成正相关(r=0.999,P=0.032)。结论:在丙型肝炎的诊断中,HCV-RNA拷贝数是重要的检测指标,同时应联合检测丙肝抗体、白蛋白和ALT。