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1.
竹红菌乙素敏化的人红细胞膜结构光损伤的Raman光谱特征 总被引:2,自引:0,他引:2
采用Raman光谱从分子水平揭示了竹红菌乙素光敏损伤的人红细胞膜发生膜蛋白交联和膜脂脂质过氧化导致其功能变化 ;膜流动性和离子通透性增加的本质是竹红菌乙素产生的活性氧 ( 1O2 ,O2 -·和·OH等 )破坏了红细胞膜的有序结构 ,使膜蛋白主链结构的α 螺旋、β 折叠明显减少 ,无规卷曲增加并使其侧链结构的巯基基团、吲哚环、对羟苯基环、单基取代苯基环等也明显减少 .与此同时 ,随着光照时间的增加 ,膜脂的反式构象呈先增加后减少的趋势 ,它的扭曲构象则正好相反 .膜蛋白和膜脂构象不灵敏的CH2 和CH3弯曲振动谱线的明显下降 ,揭示它们有链的断裂 . 相似文献
2.
O -·2增强谷氨酸与其受体的结合力及EBSELEN的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
用放射配体测定受体法研究了黄嘌呤(X)/黄嘌呤氧化酶(XO)体系产生的超氧阴离子自由基(O -·2)对[3H]DL-谷氨酸与大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合的影响,结果表明O -·2明显增强谷氨酸与其受体的结合力,此作用能被2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)酮(EBSELEN)(1 μmol/L)所抑制. 相似文献
3.
八肽胆囊收缩素对大鼠大脑皮质细胞钙调素活性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
为了探讨胆囊收缩素(CCK)受体在中枢神经系统中的信号传递机制,观察了CCK8和CCKA受体拮抗剂L-364,718、CCKB受体拮抗剂L-365,260对大鼠大脑皮质钙调素(CaM)活性的影响.结果表明:a.CCK8对CaM活性的影响具有时间依赖性,15 min达到最高点后逐渐下降;b.CCK8在10-12~10-7 mol/L范围内可刺激CaM活性的增加,超过10-7 mol/L后,逐渐趋于饱和.c.CCKA受体拮抗剂L-364,718、CCKB受体拮抗剂L-365,260均可抑制10-7 mol/L CCK8引起的CaM活性的增加,但两者IC50相差40倍,L-365,260在较低浓度时即能明显拮抗CCK8引起的CaM活性变化.研究结果提示CCK8可能通过CCKB受体引起CaM活性变化,而CaM可能是CCKB受体的重要信号传递机制之一. 相似文献
4.
用化学方法合成编码 2个大肠杆菌tRNALeu(tRNALeu1和tRNALeu2 )的基因和T7启动子 ,分别克隆到pUC1 9载体上 ,并在纯化的T7RNA聚合酶的体外转录系统中转录出不含修饰核苷酸的tRNALeu.在T7转录体系中 ,亚精胺对转录有负影响 .在最适转录条件下 ,可以得到有活力的RNA转录物的量是模板DNA的 2 5 0倍左右 .在大肠杆菌亮氨酰 tRNA合成酶的催化下 ,2种经体外转录产生的未修饰等受体tRNALeu(tRNALeu1和tRNALeu2 )的亮氨酸接受能力基本相同 ,但只有从体内纯化对应的tRNALeu的四分之一左右 ,表明修饰核苷酸在tRNALeu氨酰化过程中起着较为重要但非关键的作用 . 相似文献
5.
中国江浙产短尾蝮蛇突触前神经毒素(β1-Agkistrodotoxin,β1-AgTx)经制备电泳被进一步纯化.经SDS-PAGE鉴定, 观察到天然β1-AgTx以及经电泳纯化获得的碱溶β1-AgTx-OH-成分在电泳图谱上出现的聚合谱带, 然而这些聚合谱带的含量似乎并不随时程的延长而明显地增强.另经双向电泳分析发现, 无论是天然的β1-AgTx或经电泳纯化获得的碱溶β1-AgTx-OH-成分均含有三个具有不同等电点(pI 7.0, 5.8和5.4)及不同含量比例的异构体谱带.天然β1-AgTx中三个异构体的含量比并不随时程延长而明显改变, 碱溶β1-AgTx-OH-成分中的三个异构体的含量比则随着时程的延长而发生显著的变化. 相似文献
6.
大肠杆菌tRNALeu的基因克隆、高效表达和纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
用化学法合成的tRNALeu 和tRNALeu 2的基因分别连接到 pTrc99B质粒载体上 ,转化到大肠杆菌MT10 2中 .DNA测序筛选得到与已知tRNALeu1 和tRNALeu2 的基因顺序完全相同的克隆 .对带有tRNALeu1 和tRNALeu2 基因的 2个转化子 (MT -Leu1和MT- Leu2 )表达条件进行了优化 ,MT- Leu1和MT- Leu2总tRNA中的亮氨酸接受活力分别达到 810 pmol/A2 6 0 和 5 60 pmol/A2 6 0 :tRNALeu1 占MT -Leu1总tRNA的5 0 % ;tRNALeu2 占MT- Leu2总tRNA的 3 0 % .经DEAE Sepharose、BD -纤维素层析柱 ,可分别将MT- Leu1和MT -Leu2的总tRNA纯化到 160 0pmol/A2 6 0 .首次准确地测得了 2种等受体tRNALeu的氨酰化反应动力学常数 . 相似文献
7.
超氧阴离子诱导的叶绿素荧光猝灭 总被引:4,自引:0,他引:4
分别通过黄嘌呤(X)与黄嘌呤氧化酶(XO)反应和甲基紫金(MV)的作用,观察了O·-2诱导莴苣叶绿体的叶绿素荧光猝灭过程.结果表明,O-·2的产生明显使光化学猝灭(qP)和非光化学猝灭(qN)增加.叶绿体内SOD被DDC抑制后,X+XO诱导的叶绿素荧光猝灭过程中,qP下降,qN上升;MV诱导的叶绿素荧光猝灭过程中,qP上升幅度不大,qN增加不明显.当碳代谢被碘乙酰胺(JAA)抑制后, qP下降,qN上升.解偶联剂NH4Cl增加质子跨类囊体膜的通透性,导致qP增加和qN降低,加入MV后qP和qN增加不明显.分析认为,-·2的产生和及时被清除对保持光合电子传递和增加跨膜ΔpH有很重要的作用,有利于叶绿体吸收的光能得到转化和耗散,在一定程度上减轻过量光能引起的光抑制损伤. 相似文献
8.
许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4 制作雌性小鼠肝纤维化模型,在CCl4 损伤后立即或1周后经尾静脉注射Flk1+ MSC ,2或5周后检测受体小鼠肝脏的纤维化程度和供体细胞的植入。结果发现,CCl4 损伤后立即注射Flk1+ MSC ,可以使肝脏损伤程度明显减轻,减少胶原沉积,使肝脏羟脯氨酸含量及血清纤维化指标显著下降;而损伤1周后注射细胞则无明显变化。免疫荧光、PCR和荧光原位杂交方法证实,在受体肝脏中有供体细胞植入,呈上皮细胞形态,并表达白蛋白,但是数量很少。因此,Flk1+ MSC具有潜在的植入肝组织的能力,并可能启动肝组织的内源性修复,减轻CCl4 导致的肝纤维化。 相似文献
9.
中华绒螯蟹眼柄MTXO细胞GABA受体通道研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)眼柄视神经节端髓X器官(MTXO)三种类型神经内分泌细胞对0.01~5mmol/L γ氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的反应,并结合选择性拮抗剂和激动剂的使用进行了GABA受体研究.在电流钳模式下,依据不同Nernst Cl-电位,三种类型细胞均对GABA产生去极化或超级化反应.在电压钳模式下,GABA激活Cl-通道电流(IGABA).IGABA在灌流GABA后约1 200 ms内激活,800 ms内达到峰值,没有明显的脱敏反应,反转电位接近Nernst Cl-电位.IGABA幅值呈浓度依赖性,激活阈值为0.01 mmol/L,约在0.5 mmol/L达到饱和.药理学实验结果表明,中华绒螯蟹眼柄神经内分泌细胞GABA受体是Cl-通道蛋白,对Cl-离子通道阻断剂Picrotoxin和Niflumic acid敏感,但是对GABAA受体拮抗剂Bicuculline和GABAC受体激动剂cis-4-aminocrotonic acid (CACA)和trans-4-aminocrotonic (TACA)均不敏感. 相似文献
10.
以 125碘标记不含apoE的人HDL3为配体,采用简便的聚乙二醇沉淀分离法,建立了纯化的大鼠肝细胞膜HDL受体分析法,并对膜HDL受体的性质进行了研究。 相似文献
11.
放射受体法测定表皮生长因子 总被引:1,自引:1,他引:0
介绍用大鼠肝细胞膜为材料 EGF 放射受体分析方法. 125I-EGF 采用 Iodogen 方法,其标记率为50%左右, 125I-EGF 对受体的结合率为20—30%.大鼠肝细胞膜 EGF放射受体法的灵敏度为 28pg/管,精密度为6.3%.应用此法测定了大鼠血清,颌下腺和唾液中的 EGF 的含量. 相似文献
12.
用 125I-EGF与人多形成胶质细胞瘤BT325细胞系膜上EGF受体的饱和结合实验, 竞争抑制实验研究GM3,BBG(bovine brain gangliosides)对EGF受体最大结合量, 亲和常数及受体数目的影响; 放射受体法观察EGF-EGFR复合物内吞过程, 测定胞质和培养基中EGF含量.结果表明: BT325细胞质膜上存在高亲和力EGF结合位点,GM3对EGF与其受体的亲和力无明显抑制作用(P>0.05),但能明显减少其受体的数目(P<0.05); GM3能明显延长EGF-EGFR复合物内吞过程; GM3处理的胞质中EGF浓度比对照组显著升高(P<0.05), 培养液中无明显差异,这可能是由于GM3抑制EGF分泌所致. 相似文献
13.
肝靶向配体半乳糖基白蛋白和多聚谷氨酸 总被引:10,自引:0,他引:10
化学合成两类去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的人工配体——半乳糖基白蛋白(GalnHSA)和半乳糖基多聚-L-谷氨酸(GalnPLGA), 并以 125I标记的去唾液酸胎球蛋白(ASF)为标准配体,测定了合成配体抑制 125I-ASF与大鼠肝细胞膜ASGPR结合的IC50值. 结果表明,Gal12HSA、Gal15HSA、Gal26HSA、Gal30HSA和Gal34PLGA均能够有效地抑制 125I-ASF与ASGPR的结合,且前者与ASGPR的亲和力随半乳糖基化程度的增加而增加. 这些合成配体来源丰富、制备简单,适合于作为药物或基因肝靶向运送的导向配体. 相似文献
14.
超氧歧化酶(SOD)对人红细胞膜的保护作用 总被引:10,自引:0,他引:10
前文曾报道,红细胞膜经外源O2-·自由基(碱性条件下,邻苯三酚自氧化产生)处理后有明显损伤作用。在此基础上,本文研究猪红细胞SOD对人红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果表明,外源SOD对人红细胞膜有明显保护作用,表现为膜流动性和膜重封闭能力保持正常水平,膜蛋白交联作用有显著减小。 相似文献
15.
信息跨膜传递的分子机制 总被引:2,自引:0,他引:2
徐友涵 《生物化学与生物物理进展》1987,14(1):10-15
胞外信息作用于质膜表面的受体,转变为胞内信使分子完成信息的跨膜传递。β受体结合配体后活化G蛋白(通过α亚基与β、γ的解离)影响环化酶的活性。而钙联受体则通过触发肌醇磷脂的代谢,生成胞内信使甘油二酯(DG)和三磷酸肌醇酯(IP3),胞内游离Ca2+浓度瞬间增高(Ca2+动员过程),通过不同的蛋白激酶引起特定的生理效应。DG活化蛋白激酶-C,IP3动员胞内Ca2+,它们通过二个相互独立而协同的过程调节细胞的代谢。 相似文献
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人心肌肌钙蛋白T的纯化和单克隆抗体的制备 总被引:5,自引:0,他引:5
从人左室心肌中成功纯化心肌肌钙蛋白T(cTnT). 经匀浆, 70℃加热处理, 咪唑盐酸透析, DEAE-纤维素层析, 100g心肌获取cTnT 5mg, 纯度为97.6%. 同时采用脾内免疫法, 免疫Balb/C小鼠, 经细胞融合, 筛选, 克隆化得5株稳定分泌抗人cTnT单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(G3, G8, G10, A5, A7), 4株为IgM, 1株为IgG, 染色体数目92~110条. 腹水效价为3.2×10-6~1. 6×10-7. 相似文献
17.
γ-氮基丁酸(GABA)是脊椎动物脑内一种重要的神经递质.它与其特异性受体(即 GABAR)分子的相互作用,可引起该受体偶联的 Cl-,K+和 Ca2+通道传导的改变并产生神经元抑制效应.近年 GABAAR 基因及其表达的研究,已为不同的种属、不同脑区域和细胞类型中 GABAAR 的亚基组成、生理功能及其对很多中枢神经系统药物反应的多样性提供了令人信服的依据,可以预见不久这方面深入的探索也必将为有关该受体的神经精神病发病的分子机理研究及其治疗性药物的设计提出新的线索. 相似文献
18.
变形链球菌 (Streptococcus mutans) 是最主要的龋齿致病菌,其基因 Smu.260 编码一个约 23 ku (200 个氨基酸 ) 的蛋白质. Smu.260的 DNA 片段被克隆到表达载体 pET28a 后在大肠杆菌 BL21(DE3) 菌株中表达得到很好的产量. 产物 Smu.260 蛋白通过 Ni2+亲和柱和分子筛两步法纯化,并发现纯化后的蛋白以两种形式存在,二聚体 (约46 ku) 和四聚体,前者呈亮黄色,后者无色. 采用悬滴气象扩散法得到了二聚体形式的晶体. 晶体的 X 射线衍射分辨率达到 2.3埃,晶体属正交空间群 P212121,晶格参数为a=89.88埃, b=90.91埃, c=105.17埃. 晶胞不对称单元内估计含有一个二聚体,溶剂含量为 53% . 相似文献
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为探讨水稻(Oryza sativa L.)中CPR5 基因的功能,以其cDNA 文库为基础进行序列比对,并将1 个同源性较高的序列命名为OsCPR5.生物信息学分析表明,OsCPR5 的开放阅读框长度为1551 bp,编码516 个氨基酸.软件预测该编码蛋白可能是1 个具有5 个跨膜区的膜蛋白和核定位蛋白.组织表达和亚细胞定位分析表明,OsCPR5 在根中的表达水平较高,且广泛分布在细胞膜、细胞质和细胞核上.逆境胁迫分析实验表明,植物激素脱落酸(Abscisic acid, ABA)、过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)、氯化钠(NaCl)、甲基紫精(Methyl viologen, MV)等环境胁迫可诱导OsCPR5 的上调表达,其中氧化胁迫相关的MV 和H2O2 处理效果最为明显.拟南芥(Arabidopsis thaliana)转基因株系atcpr5/OsCPR5 在浓度为0.5 μmol L-1、 1.0 μmol L-1 的MV以及6 mmol L-1、 8 mmol L-1 的H2O2 处理下,种子萌发率明显高于atcpr5 突变体.这揭示了OsCPR5 基因在植物抗氧化胁迫响应中具有一定的作用. 相似文献
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本实验用 60Coγ线照射正常人新鲜全血,观察电离辐射对多形核白细胞(PMN)释放超氧化物阴离子自由基(O2-·)的影响,以及人血甲2巨球蛋白(α2M)制剂对辐射引起的PMN释放O2-·的作用。结果表明:正常人新鲜全血照射(5-20Gy)后1h,PMN释放O2-·的量较不照射组增高(P<0.01),红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活力较不照射组降低(P<0.01)。照前1h加入人血α2M制剂(每ml全血中加入138.5单位)能有效地降低PMN的O2-·释放量,提高红细胞中SOD的活力。离体实验结果提示α2M治疗辐射损伤作用可能与其抑制过多的O2-·产生有关。 相似文献