羌活地黄汤对佐剂性类风湿关节炎大鼠作用机制研究

摘要 目的：研究羌活地黄汤对佐剂性类风湿关节炎（RA）大鼠辅助性T细胞/调节性T细胞（Th17/Treg）失衡、血清基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）以及滑膜组织血管内皮生长因子（VEGF）、核因子-κB受体活化因子配基（RANKL） mRNA表达的影响。方法：取40只SD级大鼠进行研究，将其以随机数字表法分为正常对照组、模型组、羌活地黄汤组以及甲氨蝶呤组，每组各10只。除正常对照组外，其余各组大鼠均建立佐剂性RA动物模型。羌活地黄汤组予以羌活地黄汤灌胃干预，甲氨蝶呤组予以甲氨蝶呤灌胃干预，正常对照组及模型组均予以等量生理盐水灌胃干预。各组均进行为期28d的干预，比较各组体重、关节炎指数及关节肿胀度、外周血Th17/Treg相关指标、血清MMP-3、MMP-13水平、滑膜组织VEGF、RANKL mRNA表达。结果：模型组体重低于正常对照组，羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组关节炎指数及关节肿胀度均低于模型组，而体重高于模型组（均P＜0.05）。模型组、羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组的外周血CD4+IL-17+T、Th17/Treg均高于正常对照组，而Foxp3+CD4+CD25+Treg低于正常对照组，且羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组的外周血CD4+IL-17+T、Th17/Treg均低于模型组，而Foxp3+CD4+CD25+Treg高于模型组（均P＜0.05）。模型组、羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组的血清MMP-3、MMP-13水平均高于正常对照组，而羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组的血清MMP-3、MMP-13水平均低于模型组（均P＜0.05）。模型组、羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组的滑膜组织VEGF、RANKL mRNA表达水平均高于正常对照组，而羌活地黄汤组、甲氨蝶呤组的滑膜组织VEGF、RANKL mRNA表达水平均低于模型组（均P＜0.05）。结论：羌活地黄汤可改善佐剂性RA大鼠的症状以及Th17/Treg失衡状态，且有效改善其血清MMP-3、MMP-13水平以及滑膜组织VEGF、RANKL mRNA表达。     

催乳素对佐剂关节炎大鼠滑膜组织MMP-9表达的影响

目的：探讨催乳素（PRL）对佐剂关节炎（AA）大鼠滑膜组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响,为进一步阐明PRL在类风湿性关节炎（RA）发病过程中的作用机制及为RA的治疗提供实验依据。方法：雄性Wistar大鼠32只分为4组（n=10）：①正常对照组（A组）（n=10）;②佐剂关节炎对照组（B组）（n=10）;③高催乳素血症佐剂关节炎组（C组）（n=10）;④低催乳素血症佐剂关节炎组（D组）。放射免疫法测定各组血清PRL含量;明胶酶谱法测定MMP-9的活性;免疫组织化学方法检测各组滑膜组织MMP-9免疫反应变化;Western blot测定各组滑膜组织MMP-9的表达。结果：B组滑膜组织MMP-9的活性及表达明显高于A组,C组MMP-9的活性及表达最高,D组较B组有所减少,但仍高于A组。结论：PRL影响滑膜组织MMP-9分泌是其影响RA发病过程的一种作用机制。     

宽筋藤对类风湿性关节炎模型大鼠踝关节组织病理学的影响

为了观察宽筋藤对弗氏完全佐剂(CFA)诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠踝关节组织病理改变的影响,除正常组外,其余各组大鼠足跖皮内注射CFA致AA大鼠模型,将模型大鼠随机分成模型组、宽筋藤高剂量组、宽筋藤中剂量组、宽筋藤低剂量组、阳性药物组,灌胃给药20 d,观察各组大鼠继发侧足爪肿胀度及踝关节滑膜、软骨、关节腔、周围软组织炎症反应等组织病理改变情况,进行综合评分。实验结果表明,与模型组比较,宽筋藤能减轻AA大鼠关节肿胀程度,并显著抑制炎症细胞的浸润和滑膜增生以及血管翳的形成,减轻软骨及骨质损伤程度(P0.05或P0.01)。实验证明,宽筋藤可显著改善AA大鼠关节组织病理改变。     

来氟米特联合依那西普对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响

目的:研究来氟米特和依那西普联合使用对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法:建立AA大鼠关节炎模型,分为正常对照组、模型组、来氟米特组、依那西普组、来氟米特联合依那西普配伍组;采用关节炎指数评分法评价大鼠关节炎症程度,半定量RT-PCR和放射免疫法检测滑膜组织及血清中IL-1β、TNF-α表达水平,免疫组化方法检测滑膜组织中MMP-3含量。结果:①相较于AA模型组,来氟米特组、依那西普组和配伍组中大鼠的AI评分均显著下降(P<0.01),其中以配伍组关节炎指数为最低(P<0.05)。②模型组大鼠血清及滑膜组织的IL-1β和TNF-α水平明显高于正常对照组(P<0.01),用药后各组的IL-1β和TNF-α水平均有所下降,并以配伍组降低最为明显(P<0.01或P<0.05);③模型组大鼠滑膜组织MMP-3表达阳性密度显著高于正常对照组(P<0.01),用药后各组的MMP-3阳性密度降低(P<0.01),其中配伍组下降程度明显高于来氟米特组和依那西普组(P<0.01)。结论:来氟米特和依那西普联合使用可明显减轻AA大鼠的关节炎症,降低血清和滑膜组织中IL-1β和TNF-α水平,减少滑膜中MMP-3的表达,疗效优于单独使用来氟米特或依那西普。     

高血尿酸状态大鼠痛风性关节炎模型研究

目的:以高尿酸血症为基础,探讨一种接近临床痛风性关节炎发生的模型塑造方法。方法:选择雄性SD大鼠20只,随机分为正常组、模型组。塑造高血尿酸状态大鼠,诱导痛风性关节炎模型。检测两组大鼠踝关节不同时间段肿胀度、炎症分级;检测两组大鼠血清中尿酸及其生成排泄相关指标、血清中氧化应激反应和炎症表达相关指标;观察大鼠踝关节滑膜病理情况。结果:与正常组相比,痛风模型造模48小时内,模型组大鼠踝关节肿胀度显著升高(P0.05或P0.01),模型组炎症分级评分较高;实验第21、28 d,模型组大鼠血清UA含量升高(P0.01);实验第28d,模型组大鼠血清及肝脏中XOD、ADA活性均升高,血清及肝脏MDA表达增多、SOD表达减少(P0.05或P0.01);模型组大鼠血清及踝关节组织中IL-1β含量增加;HE染色表明模型组大鼠踝关节有明显病理损伤。结论:在大鼠高血尿酸状态下可诱导急性痛风性关节炎模型,此模型一定程度上符合人类痛风发作过程,并可维持一定的时间。     

反义c-myc重组腺病毒载体的构建及其对大鼠胸腺淋巴细胞的增殖抑制作用

目的:观察反义c-myc重组腺病毒载体对大鼠胸腺淋巴细胞的增殖抑制作用.方法:构建大鼠反义及正义c-myc细菌质粒,并将所得细菌质粒与E1缺失腺病毒质粒导入293细胞系,经共转染得到正义及反义重组腺病毒载体.MTS法检测重组腺病毒载体对大鼠淋巴细胞增殖的抑制作用,RT-PCR检测重组腺病毒载体对c-myc mR-NA表达的影响.结果:反义c-myc重组腺病毒载体可抑制大鼠淋巴细胞增殖,降低淋巴细胞c-myc mRNA的表达.结论:反义c-myc重组腺病毒载体可抑制大鼠淋巴细胞增殖.     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子及其受体2在大鼠3期压力性损伤皮肤组织中的表达及意义*

目的:分析缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体2(KDR)在不同受压时间点大鼠压力性损伤局部皮肤组织中的表达及相互关系,探讨3期压力性损伤慢性难愈的可能机制。方法:将40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、受压3 d、5 d、7 d、 9 d组( n=8 ),使用磁铁压迫法建立3期压力性损伤动物模型。HE染色观察皮肤组织形态;免疫组化法检测VEGF表达,Western blot 检测皮肤组织HIF-1α、VEGF、KDR蛋白表达;对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果:①HE结果显示,与正常对照组相比,受压组大鼠表皮逐渐增厚,血管数量不断减少,胶原排列紊乱,炎症细胞浸润增加。②免疫组化结果显示:受压3 d组大鼠皮肤组织中VEGF蛋白表达量较正常对照组明显增高(P＜0.01);受压5 d、7 d和 9 d组大鼠皮肤组织中VEGF蛋白表达量均明显低于正常对照组(P＜0.05)。WB结果和免疫组化结果一致。③WB结果显示:受压3 d、5 d和7 d组大鼠皮肤组织中HIF-1α表达量均明显高于正常对照组(P＜0.01 或 P＜0.05);4组受压组大鼠皮肤组织KDR蛋白表达量均低于正常对照组(P＜0.05或P＜0.01)。结论:HIF-1α介导的VEGF和KDR蛋白表达减少引起组织血管生成减少可能是3期压力性损伤慢性难愈的重要原因之一。     

白藜芦醇对急性痛风性关节炎大鼠的影响(英文)

目的:观察白藜芦醇对急性痛风性关节炎大鼠的影响。方法:选取Wista大鼠36只,随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、白藜芦醇低剂量组、白藜芦醇中剂量组、白藜芦醇高剂量组,各组相应采用生理盐水、秋水仙碱、白藜芦醇低、中、高剂量灌胃7天(1次/日),模型组及各实验组于灌胃第四天把25g/mL(0.05mL)浓度的尿酸盐溶液注射到大鼠踝关节腔内,制备急性痛风性关节炎模型,正常对照组大鼠关节腔内注射生理盐水0.05 ml,72 h后留取踝关节关节液及关节滑膜,应用ELISA法观察关节液中IL-1β、CXCL10的变化。关节滑膜用10%福尔马林固定待做病理。结果:与模型组比较,白藜芦醇能显著降低关节液中IL-1β、CXCL10水平(P0.05),病理结果显示,白藜芦醇可减轻急性痛风性关节炎大鼠踝关节组织的水肿和炎性细胞浸润。结论:急性痛风性关节炎发病过程中IL-1β,CXCL10明显增高,白藜芦醇可有效抑制急性痛风性关节炎发作,且该作用呈一定的剂量依赖性。关键词:痛风性关节炎;白藜芦醇;白介素1-β     

来氟米特联合依那西普对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响

目的：研究来氟米特和依那西普联合使用对佐剂性关节炎（AA）大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法：建立AA大鼠关节炎模型,分为正常对照组、模型组、来氟米特组、依那西普组、来氟米特联合依那西普配伍组;采用关节炎指数评分法评价大鼠关节炎症程度,半定量RT-PCR和放射免疫法检测滑膜组织及血清中IL-1β、TNF-α表达水平,免疫组化方法检测滑膜组织中MMP－3含量。结果：①相较于AA模型组,来氟米特组、依那西普组和配伍组中大鼠的AI评分均显著下降（P〈0．01）,其中以配伍组关节炎指数为最低（P〈0．05）。②模型组大鼠血清及滑膜组织的IL-1β和TNF-α水平明显高于正常对照组（P〈0．01）,用药后各组的IL-1β和TNF-α水平均有所下降,并以配伍组降低最为明显（P〈0．01或P〈0．05）;③模型组大鼠滑膜组织MMP-3表达阳性密度显著高于正常对照组（P〈0．01）,用药后备组的MMP-3阳性密度降低（P〈0．01）,其中配伍组下降程度明显高于来氟米特组和依那西普组（P〈0．01）。结论：来氟米特和依那西普联合使用可明显减轻AA大鼠的关节炎症,降低血清和滑膜组织中IL-1β和TNF-α平,减少滑膜中MMP-3的表达,疗效优于单独使用来氟米特或依那西普。     

骆驼蓬在类风湿关节炎大鼠中的抗炎作用及对关节功能、关节滑膜组织NLRP3，ASC，Caspase-1的影响

摘要 目的：探讨骆驼蓬在类风湿关节炎大鼠中的抗炎作用及对关节功能、关节滑膜组织NLRP3,ASC,Caspase-1的影响。方法：采用胶原诱导性关节炎模型。将大鼠分为对照组（假手术组）、模型组、骆驼蓬组、扶他林组、甲氨蝶呤组。关节围度及疼痛情况测定;关节滑膜组织HE染色;关节滑膜组织TUNEL染色观察凋亡;免疫组化检测大鼠关节滑膜组织NLRP3,ASC,Caspase-1表达。结果：与空白组相比,模型组、甲氨蝶呤组、骆驼蓬组、扶他林组左右踝关节肿胀程度和关节疼痛指数明显更高（P＜0.05）;与模型组相比,甲氨蝶呤组、骆驼蓬组、扶他林组左右踝关节肿胀程度和关节疼痛指数明显更低（P＜0.05）,且骆驼蓬组左右踝关节肿胀程度和关节疼痛指数明显低于甲氨蝶呤组、扶他林组;与空白组相比,模型组、甲氨蝶呤组、骆驼蓬组、扶他林组NLRP3、ASC、Caspase-1明显更高（P＜0.05）;与模型组相比,甲氨蝶呤组、骆驼蓬组、扶他林组NLRP3、ASC、Caspase-1明显更低（P＜0.05）,且骆驼蓬组NLRP3、ASC、Caspase-1明显低于甲氨蝶呤组、扶他林组;与空白组相比,模型组、甲氨蝶呤组、骆驼蓬组、扶他林组凋亡率明显更高（P＜0.05）;与模型组相比,甲氨蝶呤组、骆驼蓬组、扶他林组凋亡率明显更低（P＜0.05）,且骆驼蓬组凋亡率明显低于甲氨蝶呤组、扶他林组;与模型组比较,甲氨蝶呤组、扶他林组、骆驼蓬组三组关节软骨面均较光滑,滑膜组织增生及炎细胞浸润程度均减轻（P＜0.05）。结论：骆驼蓬可通过调节滑膜组织NLRP3炎症小体的表达抑制滑膜组织炎症反应,进而达到改善关节肿胀和疼痛的目的。     

我国葫芦科植物离体培养研究进展

葫芦科植物包括多种瓜类蔬菜,对其进行离体培养研究具有重要的理论和实践意义.综述了国内在葫芦科植物器官培养、体细胞胚胎发生、花药培养、原生质体培养和体细胞杂交及离体遗传转化等方面取得的研究进展,并对葫芦科植物离体培养、遗传转化与育种的前景作了展望.     

我国葫芦科植物离体培养研究进展

葫芦科植物包括多种瓜类蔬菜,对其进行离体培养研究具有重要的理论和实践意义。综述了国内在葫芦科植物器官培养、体细胞胚胎发生、花药培养、原生质体培养和体细胞杂交及离体遗传转化等方面取得的研究进展,并对葫芦科植物离体培养、遗传转化与育种的前景作了展望。     

国内双歧杆菌制剂预防小儿继发性腹泻临床疗效的Meta分析

目的系统评价国内双歧杆菌制剂临床预防小儿继发性腹泻的效果。方法按照系统评价的要求检索CBMd isc、VIP、CNK I以及万方数据库等,获得18篇符合纳入标准的文献,共计患儿4050例,对其进行M eta分析,并评价M eta分析结果的稳定性和发表偏倚。结果异质性检验χ^2=34.60,P=0.007〈0.05,采用随机效应模型进行M eta分析,合并RR=0.41,95%C I为0.35～0.49,总体效应检验,Z=10.39,P〈0.00001,差异具有非常显著性,固定效应模型RR值和95%C I与随机效应模型完全一致,剔除小样本报道后的合并RR=0.42,95%C I为0.35～0.50,与剔除前的结果基本一致,且本研究的发表偏倚得到了很好地控制。结论从现有的临床证据来看,双歧杆菌制剂能降低小儿继发性腹泻的发生率,对预防小儿继发性腹泻起到了满意的效果。     

右美托咪啶用于SICU镇静时血流动力学效应与年龄的关系

目的：以心率（HR）、心指数（CI）、体循环阻力（SVR）作为效应指标,明确右美托咪啶（Dex）用于SICU 镇静时年龄和血流动 力学效应的关系。方法：选择2014 年3 月~7 月间在我院SICU 接受普胸或者普外科手术后需要短期镇静患者38 例,各年龄段分 布相对均匀。在病人术后Ramsay评分≤ 3 分时给予右旋美托咪啶6.0 ug/kg/h,连续静脉输注10 min 后停药,应用脉搏指示连续 心输出量监测技术(PICCO)记录用药前及用药后3 min、5 min、8 min、10 min、15 min、20 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min 的11 个时间点的HR、CI 和SVR。结果：HR、CI 和SVR 的EMAX 随着年龄的增加而增大,可以通过数学模型表示：E= （P<0.05）。结论：右美托咪啶用于SICU 镇静时,患者HR、CI和SVR的EMAX 呈 年龄依赖性变化。