p27~(Kip1)和CyclinD1在非小细胞肺癌中表达及意义

为了探讨p27Kip1蛋白和CyclinD1蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义,收集临床手术切除的非小细胞肺癌组织蜡块64例及正常肺组织10例,应用免疫组化(S-P法)检测组织中p27Kip1蛋白和CyclinD1蛋白的表达,结合临床病理资料和随访资料进行回顾性研究。实验发现NSCLC组织中p27Kip1蛋白表达和CyclinD1蛋白表达均明显不同于正常肺组织(P<0.01)。p27Kip1蛋白表达降低与NSCLC肿瘤大小、病理分级、分期增加、淋巴结转移之间有相关性(P<0.05),但与肿瘤组织学分型无相关性(P>0.05)。CyclinD1蛋白过表达与组织学分型、肿瘤大小、病理分级、临床分期、淋巴结转移无相关性(P>0.05)。p27Kip1蛋白表达与CyclinD1蛋白表达之间呈显著负相关(P<0.01)。cox单因素及多因素分析,p27Kip1蛋白低表达及CyclinD1过表达是影响NSCLC患者预后的主要因素。实验结果显示,NSCLC组织中,p27Kip1蛋白表达降低,而CyclinD1过表达,二者与NSCLC的发生发展机制有关,可作为预后指标,有利于NSCLC患者预后判断及个体化治疗。     

食管鳞癌中牙龈卟啉单胞菌通过14-3-3σ调控程序性死亡-配体1蛋白降解

牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)是口腔疾病的重要致病菌之一，与人食管鳞癌(ESCC)进展密切相关。然而P.gingivalis促进ESCC发生发展的分子机制尚不十分清楚。该研究探讨了ESCC中P.gingivalis通过诱导程序性死亡-配体1(PD-L1)蛋白表达上调的分子机制。Western印迹和RT-PCR结果显示，KYSE140和KYSE150细胞中14-3-3σ与PD-L1的蛋白质表达呈负相关，但二者的mRNA表达无相关性。免疫共沉淀结果表明，14-3-3σ蛋白通过与PD-L1蛋白结合，促进PD-L1的泛素化降解，P.gingivalis感染干预了14-3-3σ与PD-L1蛋白质复合体形成；KYSE140和KYSE150细胞中14-3-3σ沉默，降低了PD-L1泛素化介导的蛋白质酶体降解，14-3-3σ过表达明显抑制P.gingivalis诱导的PD-L1蛋白表达上调。免疫组化结果进一步证实，在ESCC组织中P.gingivalis丰度与14-3-3σ蛋白表达呈负相关，与PD-L1蛋白表达呈正相关，14-3-3σ与PD-L1的蛋白质表达呈负相关...     

Pirh2和P27kip1蛋白在肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨pirh2、p27Kip1在肺癌和癌旁组织中表达的相关性及其与肿瘤发生发展的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测53例肺癌和17例癌旁石蜡包埋存档标本组织中pirh2和p27kip1蛋白的表达,并对其所在肺癌组织不同病理类型、分级、和临床分期及转移中的表达水平进行对统计学分析。结果pirh2蛋白在肺癌组织中呈高表达,表达率为79.2%,P27Kip1蛋白呈低表达,为22.6%,二者与癌旁组织相比(阳性表达率分别为11.8%和64.7%),差异具有显著性意义(P<0.01),但是二者与肿瘤的病理类型、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期均无明显相关关系(P>0.05)。Pirh2表达阳性的肺癌组织中,p27Kip1的阳性率较低,二者呈显著负相关。结论pirh2过表达和p27Kip1蛋白的低表达可促进肿瘤的发生;二者之间呈负性相关关系,提示降解p27Kip1蛋白可能是pirh2促进肿瘤形成的途径之一。     

14-3-3θ蛋白在乳腺癌中的表达和预后的临床研究

目的:研究14-3-3夼蛋白在人乳腺癌中的表达和预后的临床意义。方法:在210例人乳腺癌组织样本中,通过免疫组化的方法检测14-3-3夼蛋白的表达情况,并分析其表达与乳腺癌临床病理学特征间的相关性及与患者总生存期的关系。结果:在210乳腺癌组织中,14-3-3夼蛋白的阳性表达为64.3%。卡方检验分析表明,14-3-3夼蛋白的表达与患者的发病年龄、肿瘤大小、组织分化程度以及HER2状态均没有相关性(P0.05);而14-3-3夼蛋白高表达与高TNM分期(P=0.013)、淋巴结转移(P0.0001)以及ER阴性(P=0.006)存在相关性。Spearman相关性分析检测发现,14-3-3夼蛋白高表达与高TNM分期(r=-0.187,P=0.006)、阳性淋巴结转移(r=-2.272,P0.0001)呈正相关,而与ER阳性状态(r=-0.046,P=0.003)呈负相关。Kaplan-Meier分析结果显示:伴有14-3-3夼蛋白高表达患者的DFS与OS明显少于14-3-3夼蛋白低表达的患者,log-rank检验提示P值分别为0.0379和0.0037,具有统计学意义。结论:在乳腺癌组织中,14-3-3夼作为癌基因表达增加,与乳腺癌的发展和转移发生呈正相关,14-3-3夼可以作为乳腺癌患者预后和疾病复发的检测指标。     

人GST-14-3-3σ融合蛋白的原核表达、纯化及活性检测

目的:构建人14-3-3σ基因的原核表达载体,获得其原核表达产物,并对融合蛋白进行纯化及活性检测。方法:采用PCR技术从人乳腺文库中扩增14-3-3σ基因编码序列,将其克隆到pGEX-KG载体中,重组质粒转化大肠杆菌Rossate后表达重组蛋白,利用GST-Sepharose 4B亲和珠对原核表达产物进行纯化,并通过SDS-PAGE和Western印迹检测融合蛋白的表达,采用GST pull-down技术检测已纯化的蛋白与已知体外相互作用蛋白AKT之间的相互作用。结果:从人乳腺文库中扩增获得约750 bp的DNA片段,并成功克隆至pGEX-KG载体上,经双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,测序与目的基因序列完全一致;在Rossate菌株中诱导表达出相对分子质量约52 000的目的蛋白,SDS-PAGE和Western印迹结果表明融合蛋白表达成功,并纯化得到GST-14-3-3σ融合蛋白;通过GST pull-down技术检测证实GST-14-3-3σ融合蛋白可以和AKT在体外结合,并证实其具有生物学活性。结论:获得了原核表达的活性较好的GST-14-3-3σ蛋白,为后续研究细胞周期蛋白调控机制奠定了实验基础。     

基因甲基化导致鼻咽癌组织14-3-3σ表达下调

为探讨14-3-3σ基因甲基化在鼻咽癌发病中的作用,以75例鼻咽癌活检组织和25例正常鼻咽黏膜活检组织作为研究对象,采用甲基化特异性聚合酶链式反应 (MSP)检测14-3-3σ基因甲基化状态,逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR)检测　14-3-3σ mRNA表达,免疫组织化学染色检测14-3-3σ蛋白质表达．结果发现,鼻咽癌组织14-3-3σ基因完全甲基化、不完全甲基化和未甲基化的例数分别为4例、59例和12例,正常鼻咽黏膜组织不完全甲基化和未甲基化的例数分别为7例和18例,鼻咽癌14-3-3σ基因甲基化频率显著高于正常鼻咽黏膜组织(84% vs 28%,χ2=28,P < 0.05)．RT-PCR和免疫组织化学染色结果显示：14-3-3σ基因完全甲基化的组织样本无14-3-3σ表达,不完全甲基化的组织样本14-3-3σ表达显著降低,14-3-3σ基因甲基化与鼻咽癌淋巴结转移及鼻咽癌临床分期正相关． 研究结果表明,鼻咽癌组织14-3-3σ基因存在高频甲基化,14-3-3σ基因甲基化导致14-3-3σ表达降低或缺失,14-3-3σ表达水平与鼻咽癌淋巴结转移及其临床分期相关．     

棉花143-3L基因的分子鉴定及其在纤维发育中优势表达分析

14-3-3蛋白以二聚体形式存在于所有真核生物中,是一种高度保守的调节蛋白,在细胞生长、增殖、凋亡、信号转导等生命活动中发挥着重要调控作用。我们在棉纤维cDNA文库中分离克隆到1个基因(cDNA),编码14-3-3蛋白类似物,命名为Gh14-3-3L(Gossypiumhirsutum14-3-3-like)。该cDNA长度为1,029bp,包含762bp开放阅读框,其编码蛋白由253个氨基酸组成。Gh14-3-3L与其他真核生物的14-3-3蛋白具有较高的同源性,并具有14-3-3蛋白的基本结构:二聚体结构域、磷酸化丝氨酸富集识别序列、4个CC结构和1个EFHand结构。Northern杂交分析显示Gh14-3-3L在棉纤维发育早期优势表达,且在10DPA棉纤维细胞中表达量最高,这表明Gh14-3-3L基因可能涉及棉纤维细胞伸长过程的调节。研究还表明,该基因在胚珠和花瓣组织中也有较强的表达,但在其他组织中表达较弱或不表达。     

肝细胞癌组织miR-124-3p、miR-212-5p表达与PI3K/Akt信号通路和预后的关系研究

摘要 目的：探讨肝细胞癌组织中微小核糖核酸（miR）-124-3p、miR-212-5p表达与磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路和预后的关系。方法：选择2017年9月至2019年9月徐州医科大学附属医院肝胆外科收治的93例肝细胞癌患者,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肝细胞癌组织中miR-124-3p、miR-212-5p、PI3K 信使RNA（mRNA）、Akt mRNA的表达。Pearson相关性分析miR-124-3p、miR-212-5p表达与PI3K/Akt信号通路相关mRNA表达的相关性。绘制Kaplan-Meier生存曲线,Log-Rank检验不同miR-124-3p、miR-212-5p表达肝细胞癌患者3年总生存率（OS）的差异。结果：肝细胞癌组织中miR-124-3p表达低于癌旁组织（P＜0.05）,miR-212-5p、PI3K mRNA、Akt mRNA表达高于癌旁组织（P＜0.05）。肝细胞癌组织中miR-124-3p表达与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈负相关（P＜0.05）,miR-212-5p表达与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈正相关（P＜0.05）。Ⅱa期、低分化患者肝细胞癌组织中miR-124-3p表达低于Ⅰa-Ⅰb期、中高分化患者（P＜0.05）,miR-212-5p表达高于Ⅰa-Ⅰb期、中高分化患者（P＜0.05）。随访期间死亡37例, miR-124-3p低表达组3年OS为42.55%,低于miR-124-3p高表达组的78.26%（P＜0.05）,miR-212-5p高表达组3年OS为50.00%,低于miR-212-5p低表达组的71.11%（P＜0.05）。结论：肝细胞癌组织中miR-124-3p表达下调,miR-212-5p表达上调,且与肝细胞癌PI3K/Akt信号通路激活,PI3K mRNA和Akt mRNA高表达,低分化,CNLC分期Ⅱa期以及低OS有关。     

MMP-3与乳腺癌上皮间质转化的关系及其意义

为了探讨MMP-3在乳腺癌中表达与乳腺癌上皮间质转化的关系及其在乳腺癌浸润转移中的作用.采用免疫组织化学检测正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织中MMP-3、Claudin-1、Vimentin的表达情况.研究发现:1)MMP-3在乳腺癌组织的阳性表达率较癌旁组织及正常乳腺组织高且具有统计学意义(P<0.05).Claudin-1在乳腺癌中的阳性表达率明显低于癌旁组织及正常乳腺组织具有统计学意义(P<0.05).Vimentin在乳腺癌组织阳性表达率高于癌旁组织及正常乳腺组织具有统计学意义(P<0.05);2)随着乳腺癌病理分期的增加MMP-3表达逐渐增加,同时出现Claudin-1蛋白表达降低及Vimentin蛋白表达升高.相关分析表明MMP-3与Claudin-1的表达呈负相关(r=-0.301,P=0.019),与Vimentin的表达呈正相关(r=0.378,P=0.03),Claudin-1与Vimentin的表达呈负相关(r=-0.278,P=0.031).结果提示,MMP-3可能是通过介导乳腺癌细胞发生上皮间质转化来参与乳腺癌的浸润转移.     

喉鳞状细胞癌组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达水平与PI3K/Akt信号通路、临床病理特征和预后的关系

摘要 目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达水平与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、临床病理特征和预后的关系。方法：选取2017年1月至2020年1月南充市中心医院收治的120例LSCC患者,取手术切除的LSCC组织和癌旁组织。检测miR-1207-5p、miR-186-5p、PI3K mRNA、Akt mRNA表达。患者出院后随访3年,统计总生存（OS）和无复发生存（RFS）情况。分析miR-1207-5p、miR-186-5p与PI3K、Akt的相关性以及影响LSCC患者预后的因素。结果：LSCC组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达低于癌旁组织（P＜0.05）,PI3K mRNA、Akt mRNA表达高于癌旁组织（P＜0.05）。LSCC组织miR-1207-5p、miR-186-5p表达与PI3K mRNA、Akt mRNA表达呈负相关（P＜0.05）。肿瘤直径≥1 cm、低分化、TNM分期Ⅲ期、颈部淋巴结转移LSCC组织中miR-1207-5p、miR-186-5p表达低于肿瘤直径＜1 cm、中高分化、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、无颈部淋巴结转移（P＜0.05）。miR-1207-5p低表达、miR-186-5p低表达LSCC患者3年总生存（OS）率和无复发生存（RFS）率低于miR-1207-5p高表达、miR-186-5p高表达LSCC患者（P＜0.05）。多因素COX回归分析显示TNM III期、颈部淋巴结转移是LSCC患者复发和死亡的危险因素（P＜0.05）,高miR-1207-5p、高miR-186-5p是保护因素（P＜0.05）。结论：LSCC组织中miR-1207-5p和miR-186-5p表达均下调,与LSCC恶性病理特征、PI3K/Akt信号通路激活以及低生存率有关。     

结合素-4（nectin-4）在乳腺癌中表达及其临床意义研究

目的：观察乳腺癌患者血清及乳腺组织中结合素4的表达并探讨其临床意义。方法：选择2007年6月至2008年12月哈尔滨医科大学附属三院收集的40例乳腺癌患者和20例乳腺良性肿瘤患者为研究对象,分为正常对照组、乳腺癌组、乳腺良性肿瘤组,采用Elisa法和免疫组化法对所选择的血清及组织标本中nectin-4及血清中癌胚抗原（CEA）、CA153的表达进行检测。结果：（1）nectin-4的阳性表达定位于细胞质和细胞膜,其在乳腺癌组织中的阳性表达率显著高于乳腺良性组织（P〈0．05）;nectin-4的表达与患者的年龄、临床分期无关（P〉0．05）,但与乳腺癌的病理类型、腋窝淋巴结转移与否、Her-2、ER和PR的表达均显著相关（P〈0．05）。②乳腺癌组血清nectin-4表达水平最高,为238＋4．95pg／ml;乳腺良性病变组为1205：3．28pg／ml;正常对照组为104±5．86pg／ml,三者之间比较,差别有统计学意义（P〈0．01）。③与正常对照组、乳腺良性病变组比较,乳腺癌组血清CEA、CAl53水平均明显升高,差异有显著统计学意义（P〈0．01）。④nectin-4、CEA和CA153诊断乳腺癌的敏感性分别为31．67％、43-33％、28．33％,特异性分别为92．50％、95％、95％,三者联合检测诊断乳腺癌的敏感性较单独检测显著升高（P〈0．05）,可达81．67％。结论：Nectin-4在乳腺癌中高表达,且与乳腺癌的病理类型、腋窝淋巴结转移与否、Her-2、ER和PR的表达均呈显著相关,通过联合检测血清nectin-4、CEA和CA153水平可显著提高乳腺癌诊断的敏感性,有助于乳腺癌的治疗和预后评估,值得临床进一步深入研究。     

Akt-dependent phosphorylation of p27Kip1 promotes binding to 14-3-3 and cytoplasmic localization

In many human cancers, the cyclin-dependent kinase inhibitor p27(Kip1) is expressed at low or undetectable levels. The decreased p27(Kip1) expression allows cyclin-dependent kinase activity to cause cells to enter into S phase and correlates with poor patient survival. Inhibition of serine/threonine kinase Akt signaling by some pharmacological agents or by PTEN induces G(1) arrest, in part by up-regulating p27(Kip1). However, the role of Akt-dependent phosphorylation in p27(Kip1) regulation is not clear. Here, we show that Akt bound directly to and phosphorylated p27(Kip1). Screening p27(Kip1) phosphorylation sites identified the COOH-terminal Thr(198) residue as a novel site. Further analysis revealed that 14-3-3 proteins bound to p27(Kip1) through Thr(198) only when it was phosphorylated by Akt. Although Akt also phosphorylated p27(Kip1) at Ser(10) and Thr(187), these two sites were not involved in the binding to 14-3-3 proteins. p27(Kip1) phosphorylated at Thr(198) exists only in the cytoplasm. Therefore, Akt promotes cell-cycle progression through the mechanisms of phosphorylation-dependent 14-3-3 binding to p27(Kip1) and cytoplasmic localization.     

pSTAT3和SOCS3在人乳腺癌组织中的表达及意义

目的 研究激活STAT3( pSTAT3)蛋白和SOCS3在人乳腺癌和乳腺良性病变组织中的蛋白表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学检测160例乳腺癌和36例乳腺良性病变组织pSTAT3和SOCS3蛋白的表达情况,分析它们与患者临床病理特征的关系.结果 人乳腺癌组织中pSTAT3和SOCS3蛋白表达阳性率分别为69.4％和40.0％,乳腺良性病变组织中pSTAT3和SOCS3蛋白表达阳性率分别为33.3％和22.2％,前者与后者相比具有统计学意义(P＜0.01和P＜0.05);乳腺癌pSTAT3蛋白表达与肿瘤的大小、淋巴结转移和临床分期均呈显著正相关(均P＜0.01),但与患者年龄、肿瘤的组织学分级、雌孕激素受体表达和c-erBb-2表达均无显著相关(均P＞0.05);SOCS3蛋白表达与肿瘤大小呈显著正相关(P＜0.05),但与患者年龄、淋巴结转移、临床分期、肿瘤的组织学分级、雌孕激素受体表达和c-erBb-2表达均无显著相关(均P＞0.05);乳腺癌pSTAT3和SOCS3表达呈显著正相关(r=0.237,P＜0.01).结论 乳腺癌pSTAT3和SOCS3表达状况与肿瘤生长、侵袭和转移等呈密切相关,提示STAT3和SOCS3可能在乳腺癌发生发展过程中发挥了重要作用.     

BRCA1、PTEN、Rb、C-myc和C-myb在乳腺癌中的异常表达及临床意义探讨

目的 探讨BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白异常表达在乳腺癌发生、发展中的作用及其临床意义.方法应用免疫组织化学S-P法检测150例乳腺癌、20例不典型增生和30例良性增生性病变组织中BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白的表达;结合临床病理指标进行分析.结果 乳腺癌组织和不典型增生组织中 BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白表达与良性增生性病变组织中表达均具有显著性差异(P<0.05).BRCA1蛋白失表达率随乳腺癌组织学分级的增高而增高,在年龄<50岁和ER(雌激素受体)阴性时BRCA1蛋白失表达率增高.PTEN蛋白的失表达与淋巴结转移、ER失表达有关(P<0.05).Rb蛋白在乳腺癌Ⅲ级中失表达率较高,但无统计学差异(P＞0.05).C-myc蛋白的过表达与组织学分级、淋巴结转移及病理类型有关(P<0.05).C-myb蛋白的过表达与乳腺癌组织学分级有关(P<0.05).结论 BRCA1、PTEN、Rb、C-myc、C-myb蛋白异常表达均在乳腺癌的发生过程中起作用;PTEN、C-myc、C-myb 蛋白的异常表达参与了乳腺癌的浸润和转移.     

Phosphorylation of p27Kip1 at threonine 198 by p90 ribosomal protein S6 kinases promotes its binding to 14-3-3 and cytoplasmic localization

The cyclin-dependent kinase inhibitor p27Kip1 plays an important role in cell cycle regulation. The cyclin-dependent kinase-inhibitory activity of p27Kip1 is regulated by changes in its concentration and its subcellular localization. Several reports suggest that phosphorylation of p27Kip1 at serine 10, threonine 157, and threonine 187 regulate its localization. We have previously identified that carboxyl-terminal threonine 198 (Thr198) in p27Kip1 is a novel phosphorylation site and that Akt is associated with the phosphorylation at the site (Fujita, N., Sato, S., Katayama, K., and Tsuruo, T. (2002) J. Biol. Chem. 277, 28706-28713). We show herein that activation of the Ras/Raf/mitogen-activated protein kinase kinase (MAPK kinase/MEK) pathway also regulates phosphorylation of p27Kip1 at Thr198. MAPKs were not directly associated with p27Kip1 phosphorylation at Thr198, but the p90 ribosomal protein S6 kinases (RSKs) could bind to and directly phosphorylate p27Kip1 at Thr198 in a Ras/Raf/MEK-dependent manner. RSK-dependent phosphorylation promoted the p27Kip1 binding to 14-3-3 and its cytoplasmic localization. To prove the direct relationship between 14-3-3 binding and cytoplasmic localization, we constructed a p27Kip1-R18 fusion protein in which the R18 peptide was fused to the carboxyl-terminal region of p27Kip1. The R18 peptide is known to interact with 14-3-3 independent of phosphorylation. The p27Kip1-R18 distributed mainly in the cytosol, whereas mutant p27Kip1-R18 (p27Kip1-R18-K2) that had no 14-3-3 binding capability existed mainly in the nucleus. These results indicate that RSKs play a crucial role in cell cycle progression through translocation of p27Kip1, in addition to Akt, to the cytoplasm in a phosphorylation and 14-3-3 binding-dependent manner.     

EGCG经AKT1-Mdm-2-p53途径抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖

目的：初步探讨EGCG对卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制作用及其机制。方法：通过绘制细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验观察EGCG对HO-8910细胞增殖的抑制作用;Westem—blotting检测AKT1、Mdm-2与p53蛋白的表达。结果：（1）细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验结果显示,EGCG可有效抑制HO-8910细胞的增殖（n=3,P〈0．05）。（2）Western—blotting检测结果显示,EGCG处理后AKT1与Mdm-2蛋白表达均降低,而p53蛋白表达升高（P〈0．05）。结论：EGCG通过抑制HO-8910细胞中AKT1与Mdm-2蛋白表达,促使p53蛋白表达而发挥其对细胞增殖的抑制作用。     

乳腺癌中Abi1和c-Abl及WAVE 2的表达及其相互关系

目的研究乳腺癌组织中Abi1、c-Abl和WAVE2蛋白的表达及其相互关系。方法应用免疫组化SP法检测66例乳腺癌组织和24例正常乳腺组织中Abi1、c-Abl和WAVE2蛋白的表达情况。结果 1.正常乳腺组织与乳腺癌组织相比,Abi1和WAVE2蛋白表达有显著性差异(P0.05),而c-Abl蛋白表达无显著性差异(P0.05),但有定位的改变。2.Abi1强阳性率与乳腺癌的肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移及临床分期呈负相关性(P0.05);与患者年龄无关(P0.05)。c-Abl阳性率及WAVE2强阳性率均与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期呈负相关性(P0.05);与患者年龄及肿瘤大小无关(P0.05)。3.Abi1蛋白表达与c-Abl和WAVE2蛋白表达呈正相关(P0.05)。结论乳腺癌中Abi1低表达与预后不良有关。乳腺癌中Abi1蛋白表达的变化可影响c-Abl蛋白的定位和WAVE2蛋白的表达。推测Abi1在Abl/Abi1/WAVE2通路中具有至关重要的地位。     

GRP94和CD8在宫颈病变组织中的表达及意义

目的：探讨葡萄糖调节蛋白94（glucose—regulated protein94,GRP94）和CD8在宫颈病变组织中的表达及与HPV感染的关系。方法：采用免疫组化S—P法检测32例原发宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）及40例慢性宫颈炎组织中GRP94和CD8的表达及定位;采用western blot技术检测6例宫颈癌及6例正常宫颈组织中GRP94和CD8的表达。结果：①在宫颈癌、CIN2／3、CIN1及慢性宫颈炎组织中,GRP94的阳性表达率分别为87．5％、82．4％、40％和22．5％;CD8的阳性表达率分别为28．1％、64．7％、90％和97．5％;GRP94在宫颈癌和CIN2／3中的表达均显著高于慢性宫颈炎和CIN1组织（P均〈0．05）;CD8在宫颈癌组的表达显著低于慢性宫颈炎组、CIN1组及CIN2／3组（P均〈0．05）。②Western blot结果示GRP94在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织（P〈0．01）;CD8在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织（P〈0．01）。③GRP94的表达与宫颈癌分化程度、有无脉管侵袭有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、临床分期及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）;CD8的表达与有无脉管侵袭有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。④宫颈病变组织中,GRP94的表达与HPV感染呈正相关（rs=0．377,P=0．000）;cD8的表达与HPV感染呈负相关（rs=-0．395,P=0．000）;GRP94与CD8的表达呈负相关（rs=-0．608,P=0．000）。结论：GRP94表达可能是宫颈CIN进展及宫颈癌预后判断的重要预测指标。     

乳腺、甲状腺多原发癌患者乳腺癌组织中RETmRNA的表达及意义

目的：研究乳腺癌术后发生甲状腺癌患者乳腺癌组织中RET（rearranged during transfection）基因的表达及临床意义。方法：用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测33例乳腺、甲状腺多原发癌患者乳腺癌组织中RET基因的酪氨酸激酶区（TK）的表达进行分析,并设30例单纯乳腺癌和20例乳腺良性病变做对照组。结果：（1）乳腺、甲状腺多原发癌患者乳腺癌组织中RET-TK阳性检测率达57.6%（19/33）,单纯乳腺癌患者癌组织中RET-TK阳性检出率30%（9/30）,乳腺良性病变患者病变乳腺组织中RET-TK阳性检出率为10%（2/20）。三组的阳性率差别分别都有统计学意义（P＆lt;0.05）。（2）RET-TK的阳性表达与患者的ER情况相关（P＆lt;0.05）,而与患者年龄、肿瘤直径、同侧腋窝淋巴结转移、Her-2表达等病理学特征无关（P＆gt;0.05）。结论：RET基因的过量表达可能与乳腺、甲状腺多原发癌的发生有关。     

Akt基因转染对骨髓间充质干细胞缺氧时凋亡和增殖的影响

目的采用Akt基因转染鼠骨髓MSCs探讨Akt基因是否减轻MSCs缺氧时的凋亡和提高缺氧时的增殖能力,即耐缺氧能力。方法将转染和未转染Akt基因的MSCs置于94%N2、1%O2和5%CO2缺氧箱中37℃孵育不同时间（常氧、缺氧0.5h、1h、2h、4h和8h）后,Annexin V/PI双染法行流式细胞仪分析凋亡率（apoptoticrate,AR）和死亡率（deadrate,DR）、MTT法分析细胞增殖状态、Rt-PCR和Western blot等检测Akt和p-Akt表达以及放射同位素法检测MSCs对氚标-葡萄糖（^3H-G）的摄取等。结果1.Akt基因显著降低MSCs缺氧时AR和DR（P〈0.01）,而各缺氧时间点没有统计学意义（P〉0.05）;2.Akt基因显著增高MSCs常氧和缺氧（与未转染Akt基因MSCs同等条件下比较）时增殖能力（P〈0.01）,缺氧时增殖能力显著低于常氧时（P〈0.01）;3.Akt基因显著增高常氧时MSCsAkt mRNA（P〈0.01）和蛋白（P〈0.01）表达,而不增高p-Akt蛋白（P〉0.05）表达;Akt基因显著提高缺氧时p-Akt蛋白（P〈0.01）表达,而不提高常氧时p-Akt蛋白（P〉0.05）表达;4.Akt基因显著增高MSCs常氧和缺氧（与未转染Akt基因MSCs同等条件下比较）时^3H-G的摄取（P〈0.01）,缺氧时^3H-G的摄取显著性低于常氧培养时（P〈0.01）;^3H-G的摄取与细胞增殖显著正相关（r=0.79,P=0.015）而与细胞凋亡显著负相关（r=-1.47,P=0.023）。结论Akt基因转染可显著提高MSCs耐缺氧能力,此可能与缺氧时改善MSCs葡萄糖摄取等有关。