院内感染复数菌败血症的临床和耐药分析

目的 探讨院内感染复数菌败血症的临床特征、危险因素、致病菌分布及耐药情况。方法 回顾性分析1970～2004年经血培养和临床资料证实的126例院内感染的复数菌败血症。结果 院内感染复数菌败血症均发生在较严重的基础疾病上．创伤性手术和操作、广谱抗菌药物和免疫抑制剂的应用、放疗与化疗为该病的危险因素。院内感染复数菌败血症感染病死率达52％,致病菌以G^-菌占多数,合并真菌感染者死亡率高。致病菌多为耐药菌株。结论 院内感染复数菌败血症病情危重,病死率高,多系耐药菌株感染。应尽早治疗原发基础疾病,避免危险因素,严格掌握侵入性诊疗手段的运用指征,合理应用抗菌药物。并重视院内环境卫生,严格做好洗手、消毒等是防止耐药菌播散的主要措施。     

复合性感染的复数菌药敏实验分析

从检材中培养出细菌是确立感 (传 )染性疾病诊断和治疗的基本依据 ,单一需氧菌的培养方法易遗漏厌氧菌和缺壁细菌 ,不能概括致病原因菌的全貌 [1 ] ,使多种类细菌的混合性感染不能准确诊断和治疗。我室于 1999年接待了用常规方法仅培养部分需氧菌或未培养出细菌的检材 3例 (血 1例、腹水 1例、尿 1例 ) ,同时进行需氧菌、厌氧菌及细菌 L型培养 ,检测结果报告如下 :1　材料与方法1.1　标本来源　标本来自本市医院患儿 3例 ,拟诊为“败血征”血 1例 ,诊断为“脾亢”腹水 1例 ,诊断为“膀胱炎”尿 1例。1.2　培养基1.2 .1　需氧菌 (简称 X)培…     

复数菌败血症的临床特征和耐药菌谱分析

目的：探讨复数菌败血症发病原因、透发因素、致病菌和耐药菌谱的分析。方法：回顾性分析了1970～2000年间经血培养和临床资料证实的91例复数菌败血症。结果：91例复数菌败血症中都有基础疾病,多系耐菌株感染,医院内感染占多数75.8%（69/91）,医院外感染占24.2%（22/91),其发病率同期单-败血症的不同年代,不同地区不相同,近年来有增多趋势,从9.2%升至13.5%,诱发因素有恶性疾病、免疫抑制、化疗和放疗,操作不当、住ICU、滥用抗生素等,致病菌的特点,耐药菌或条件致病菌增多、合并真菌感染明显增加。结论：复数菌败血症危重,难以控制,病死率高,应积极治疗基础疾病,注意合理用药、细菌培养和药敏试验。     

从腹水和肠坏死组织中同时分离出复数菌

1998年 3月我们从一患者腹水和肠坏死组织中同时分离出——多粘芽胞杆菌、雷极普罗威登斯菌、坚韧链球菌、微小消化链球菌 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　病例简介　患者 ,女 ,2 3岁 ,四川籍打工妹 ,农民。无明显诱因恶心、呕吐胃内容物及黄色液体 3天。入院体检 :下腹膨隆、全腹肌紧张 ,肠鸣音消失 ,肛门停止排气、排便 ,T:38℃～ 40℃、P:96、R:2 0、BP:13/ 9kpa。末稍血 :WBC( 2 .9～2 1.5 )× 10 9/ L、Hb:16 4g/ L、Bpc335× 10 9/ L。 X线示 :肠梗阻。B超示 :腹腔积液 (液体不纯 )。立即行腹腔穿刺抽出血性腹水 ,直接涂片镜检…     

两株假单胞菌菌株的RAPD分析及分子生物学鉴定

根据DNA随机扩增多态性(RandomAmplifiedPolymorphicDNA,简RAPD)分子标记技术设计鉴别引物,建立一种快速、准确检测病人体内新发现的假单胞菌菌株的分子生物学方法.采用RAPD分析方法对该菌种的对照菌株AcinetobactercalcoaceticusKHW14(简称A.calcoaceticusKHW14)和新分离的菌株Acinetobactercalcoaceticus(简称A.calcoaceticus)进行指纹分析,依据两菌株的差异序列设计两对引物,并建立最佳的PCR扩增体系,产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳得菌株特异性电泳图谱.此图谱可作为鉴定两菌株的标准图谱,RAPD分析方法具有良好的重复性,同时也进一步验证了两菌株的同源性.     

ε-聚赖氨酸生产菌株的筛选和鉴定

建立了一种灵敏的ε-PL产生菌高通量的筛选方法。在分离培养基中加入150mg／L K2Cr2O7,以有利于放线菌的富集分离;并添加美蓝染料,利用产碱菌株碱性分泌物和美蓝之问的静电作用而形成独特的透明圈,从而灵敏地筛选得到产碱菌株;利用Dragendorff试剂与生物碱特有的颜色反应从产碱菌株中检出得到46株生物碱产生株;最后对产生物碱的菌株的发酵液进行ε-PL含量分析,确定4株ε-PL产生菌株。对其中一株ε-PL高产菌PL6-3菌株进行形态、生理生化和16S rDNA分析,结果表明PL6-3为北里孢菌属（Kitasatospora）。     

一株聚羟基脂肪酸酯合成菌的筛选及鉴定

【背景】传统石油基塑料产品给人类和环境带来的危害日益严重,聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalknoates,PHA)作为新型可降解塑料原料越来越受到青睐。但PHA生产成本过高,使其推广应用严重受限。筛选适合大规模生产PHA的高产菌株是解决这一问题的重要途径。【目的】以挖掘合成PHA的菌种资源为目标,从极端环境筛选和鉴定新的高产PHA合成菌。【方法】通过尼罗蓝平板分离法和PCR法分离纯化菌株,采用16S rRNA基因鉴定并通过MEGA 6.0软件构建系统发育树,分析菌株的进化关系,最后通过尼罗红染色定性分析和气相色谱法定量测定该菌株在不同时期的PHA积累量。【结果】从盐碱地垃圾沉积物中分离得到了一株高产PHA的菌株,PhaC的PCR扩增结果证实了该菌株是PHA合成菌,经16S rRNA基因鉴定为Pseudomonas brassicacearum,将其命名为NP-2,进一步优化了菌株NP-2的培养条件,在培养48h时PHA积累量最大,达到3.78 mg/mL。【结论】NP-2属于Pseudomonas brassicacearum,能高产PHA。本研究为生产PHA提供了极端环境的...     

皮肤癣菌表型及分子生物学鉴定

皮肤癣菌（Dermatophytes）是浅部真菌病的主要致病菌种,是一群浅在寄生性真菌,侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲,寄生或腐生于表皮角质、毛发和甲板的角蛋白组织中。在生物分类学上,皮肤癣菌的有性时代属于子囊菌亚门,其无性阶段属于半知菌亚门、丝孢菌纲、丝孢菌目、丛梗孢科,根据大分生孢子的特征可将皮肤癣菌的3个属加以区分。     

射流雾化联合振动排痰防治颅脑术后肺部感染的效果研究

目的探讨颅脑术后肺部感染的有效防治方法。方法选择脑出血或颅脑外伤手术后患者86例,随机分为观察组和对照组各43例,两组患者分别采用药物进行射流雾化后5~10min,对照组采用传统方法给予翻身叩背协助排痰,观察组采用振动式物理治疗仪辅助排痰。结果观察组排痰效果明显,肺部感染发生率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论沐舒坦和庆大霉素射流雾化联合振动排痰,能有效预防和控制颅脑术后肺部感染的发生。     

土壤中PHA高产菌株的分离及鉴定

从成都某炼油厂油罐和排污口附近土壤中分离到1株PHA(聚羟基烷酸)的高产菌株,最高含量为19.25%。根据形态特征观察、生理生化特征鉴定及16S rDNA序列比对,结果表明该菌株为蜡状芽胞杆菌。并对其发酵条件进行初步探索,确定培养的最适温度为37℃,最适pH值为7.0,为下一步构建基因工程菌和优化发酵条件提供了理论基础。     

马蜂肠道菌的分离鉴定及产消化酶功能菌株的筛选

【背景】马蜂(Vespa mandarinia Smith)可以防治多种田间害虫,还具有药用价值,其肠道菌群结构和功能还有待研究。【目的】获得马蜂肠道可培养细菌并筛选出具有产消化酶功能的菌株,为理解肠道菌对宿主的影响机理及功能菌株的利用提供科学依据和研究材料。【方法】采用传统细菌分离培养法获得马蜂肠道菌,结合形态学以及16S rRNA基因序列分析进行鉴定;利用水解圈法分别筛选产蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶菌株;通过测量水解圈D与菌落直径d的比值,比较不同细菌的产酶能力。【结果】在马蜂肠道中共分离出6属10种细菌,其中芽孢杆菌属5种,肠球菌属、葡萄球菌属、明串珠菌属、乳球菌属和不动杆菌属各1种。从获得的61个菌株中筛选出6个具有产消化酶功能的菌株。其中,苏云金芽孢杆菌V44具有产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶4种消化酶的能力;粪肠球菌V6具有产淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶3种消化酶的能力;蜡样芽孢杆菌V43具有产蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶3种消化酶的能力;粪肠球菌V20、蜡样芽孢杆菌V19和维德曼氏芽孢杆菌V22均具有产蛋白酶的能力。【结论】马蜂肠道细菌资源较丰富,部分有产消化酶的功能,可帮助马蜂消化食物,对宿主健康有一定影响。本研究筛选的6个菌株都能产蛋白酶,其中菌株V43和V44分别具有最强产淀粉酶和脂肪酶的能力,是可进一步开发利用的肠道功能菌株资源。     

1株用于甜瓜采后病害生物防治的假单胞菌株的分离及鉴定

甜瓜以营养丰富口味独特而深受世人青睐。同时,其采后病害高效、"绿色"防治药剂的缺乏也成为多年来困扰甜瓜生产的难题。本文采用直接生物测定的方法,从健康的甜瓜表面分离到1株有生防潜能的菌株X4。该菌株对引起甜瓜主要采后病害的粉红单端胞菌(Trichothecium roseum)、镰刀菌(Fusarium spp.)和链格孢菌(Alternaria alternata)的防治效果分别达到了90.6%、84.4%和67.4%;定殖实验显示,接菌4 d后该菌在瓜内数量可上升并稳定至1.1×10~6CFU/ml;通过16S rDNA测定、形态特征观察及生理生化测定结果表明该菌为Pseudomonas fluorescens biovarⅢ。     

粘质沙雷菌裂解性噬菌体ФSM9-3Y的分离和鉴定

目的从医院污水中分离粘质沙雷菌噬菌体,并分析其生物学特性,为进一步研究针对耐药性粘质沙雷菌的噬菌体制剂提供依据。方法采用双层琼脂平板法分离纯化针对粘质沙雷菌的裂解性噬菌体,观察噬菌体对宿主菌的裂解特异性,通过负染法电镜观察噬菌体的形态结构,提取噬菌体核酸进行酶切电泳,测定噬菌体的最佳感染复数和一步生长曲线,SDS-PAGE电泳初步分析噬菌体的结构蛋白和非结构蛋白。结果从医院污水分离出7株可裂解粘质沙雷菌的噬菌体,对其中一株噬菌体(命名为ФSM9-3Y)的生物学特征进行了初步研究。电镜显示噬菌体呈蝌蚪状,头部为20面体立体对称、直径约70 nm;尾部长约50 nm。ФSM9-3Y的最佳感染复数为1。一步生长曲线表明;ФSM9-3Y的潜伏期约30 min,暴发时间70 min,暴发量为629 PFU/cell。凝胶电泳显示噬菌体基因组为双链DNA、大小约54 kb。SDS-PAGE呈现至少包括13种蛋白,相对分子质量范围在25～130 kD,其中主要蛋白的相对分子质量约为48 kD。结论此次分离的噬菌体ФSM9-3Y为裂解性噬菌体,根据形态和结构特征,粘质沙雷菌噬菌体ФSM9-3Y属于有尾病毒目,肌尾噬菌体科。     

肾移植术后肺部感染的鉴别诊断

肾移植术后并肺部感染是重症监护病房患者死亡的重要原因,感染的症状及体症呈复杂多样化,变化迅速。肾移植后因长期使用免疫抑制剂,肺部感染的病原体多为混合性感染,常见的病原体如铜绿假单胞杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、尤其是耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、结核杆菌、麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒、真菌、军团菌及卡氏肺孢子虫等病原体引起的肺部感染,尤其是军团菌及卡氏肺孢子虫在免疫抑制患者中感染逐渐增加。从临床表现判断肺部感染病因的诊断较困难,病原学检查需要特殊的检查手段如肺泡灌洗及保护性样本刷取样,胸部X线表现具有一定的参考价值,尤其早期CT检查更有意义。为了明确肺部感染的病因学,患者表现、实验室检查结果及X线表现进行综合考虑是十分必要的,这有利于肺部感染的预防及控制。     

发根农杆菌菌株的综合鉴定及活力比较

利用3-酮乳糖产物法、差异酸生成实验和游动性实验鉴定发根农杆菌菌株A4、R1205、R1000、R1601、R1022和15834的菌株类型和活力。结果表明,R1205、R1601、R1000、A4为Ⅱ型农杆菌,其活力从大到小依次是R1000、R1205、A4、R1601。利用PCR方法鉴定表明,A4、R1205、R1000和R1601为发根农杆菌,而R1022和15834未出现阳性结果。黄瓜遗传转化力鉴定结果表明,R1000的遗传转化力最大,达到79.16%,其它菌株依次是R1205、R1601、A4。根据上述三方面综合鉴定,R1000菌株活力最大。     

枯草杆菌弹性蛋白酶高产菌株的筛选与鉴定

从稻草中初筛出14株具有溶解弹性蛋白作用的G＋产芽孢杆菌,经分离纯化筛选诱变,并进行生理生化鉴定后,得到2株产酶活较高的枯草芽孢杆菌B．subtilis HW236-5和HW245－1,作为是制备抗动脉粥样硬化枯草杆菌弹性酶的产酶菌株。     

一株抗万古霉素耐药菌的抗生素产生菌AR1148的鉴定

从土壤中分离得到一株放线菌AR1148,其代谢产物对万古霉素耐药肠球菌有较明显的抑菌活性。该菌株的基内菌丝无横隔,气生菌丝丰茂,分枝较好,孢子椭圆形,表面光滑。菌丝细胞壁工型,含有L-2,6-二氨基庚二酸（LL-DAP）和甘氨酸。菌株AR1148归属于链霉菌属金色类群。根据16SrDNA序列分析,该菌株与现有种差异明显,聚类在不同的分支。定名为Streptomyces sp．AR1148。     

番茄内生菌的分离鉴定及菌株FQ-G3抗病促生特性

由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是番茄生产中最重要的病害之一,当前使用的杀菌剂因药物残留、病原菌抗药性及食品安全等原因逐渐受到限制。因此,利用拮抗微生物的生物防治逐渐成为灰霉病防控的有效策略。【目的】从番茄植株体内筛选具有抗病促生特性内生菌株并对其生防潜力进行评估,为开发番茄灰霉病生物防治新策略提供理论依据。【方法】采用组织分离法在番茄植株不同部位分离出内生细菌、真菌,结合16SrRNA和ITS序列分析,对候选菌株进行初步鉴定;通过菌株对峙培养、果实离体接种筛选对灰葡萄孢具有拮抗活性的内生菌;进一步测定菌株分泌生长素、嗜铁素的能力及其对拟南芥和番茄幼苗生长的促生特性。【结果】从番茄植株不同部位共分离出72株内生细菌和31株内生真菌,通过平板对峙法筛选出1株对多种病原菌具有较好抑菌活性的内生细菌FQ-G3,分子鉴定为Bacillus velezensis。FQ-G3对灰葡萄孢抑菌率达80.93%,并显著抑制灰葡萄孢在番茄果实上的扩展。该菌株能够分泌生长素、蛋白酶和嗜铁素,且对拟南芥、番茄幼苗具有明显的促生效果。【结论】本研究表明分离自番茄植株的内生菌FQ-G3具...     

大观霉素产生菌1043菌株的分类鉴定

在筛选新抗菌素的过程中,从我国杭州土壤中分离到一株链霉菌,编号1043.它可产生两种抗菌素.一种是碱性水溶性抗菌素——大观霉素(曾译为壮观霉素)actinospectacin.另一种是酸性酯溶性抗菌素,与曲张霉素streptovaricin相似.有关该菌株及其产生的抗菌素已作过简要报道.大观霉霉,是一广谱抗菌素,可用于治疗淋球菌.现正在进行试制研究,即将投入生产应用于临床.为此,对1043菌株的分类鉴定进行补充,现将其结果报告如下.