响应面法优化多杀菌素发酵培养基的研究

采用响应面分析方法,对刺糖多孢茵（Saccharopolyspora spinosa）H-2产多杀菌素的发酵培养基进行优化研究。运用单因子试验筛选出葡萄糖和棉籽粉为最适碳源和氮源,通过Plack—ett—Burman设计试验,对影响发酵培养基的8个相关因子进行评估并筛选出具有显著效应的4个因子：葡萄糖、棉籽粉、黄豆饼粉及玉米浆。通过最陡爬坡实验逼近以上4个因子的最大响应区域后,采用Box-Behnken响应面分析法,确定发酵产多杀菌素最佳培养基为葡萄糖64．5g,麦芽糖20g,玉米浆2g,大豆油40g,棉籽粉25g,黄豆饼粉2．4g,蛋白胨25g,CaCO35g,定容至1L,pH7．0。培养基优化后多杀菌素产量由278．1mg／L提高到508．7mg／L,比初始多杀茵素产量提高了1．83倍。     

纤维素酶液体发酵最佳培养基的确定

用响应面法对里氏木霉WX—112液体发酵产纤维素酶的培养基进行了优化。首先用快速登高路径逼近最大产酶区域,然后根据快速登高法的实验结果进行响应面实验。运用逐步回归分析法,获得滤纸酶活与豆饼粉、麸皮、KH2PO4、微晶纤维素粉（Avicel）的最优回归方程,且分析了各因子间的交互效应。最后,通过岭脊分析确定了滤纸酶活达最大值10．53IU／mL时的最佳组合条件：豆饼粉3．18％、麸皮2．95％、KH2PO4 0．25％、Avicel 3．79％。     

少动鞘脂单胞菌产结冷胶发酵培养基的响应面法优化

通过单因素试验分析不同碳源、氮源、无机盐对（Sphingomonas paucimobilisFJAT-5627）产胶量的影响,确定最适碳源、氮源、无机盐,并在单因素筛选试验的基础上,利用Box-Benhnken设计和响应面分析法对碳源、氮源和无机盐进行优化,得到少动鞘脂单胞菌产生结冷肢发酵培养基最佳优化组合.实验结果表明,少动鞘脂单胞菌产胶量发酵最适碳源、氮源和无机盐分别为淀粉、豆饼粉和KH₂PO₄.响应面法得到产胶量（Y）与碳源淀粉（x₁）、氮源豆饼粉（x₂）和无机盐KH₂PO₄（x₃）的回归方程为:Y=13.87+0.54x₁+0.22x₂-0.42x₃-3.26x₁²-1.85x₂²-1.51x₃²+0.053x₁x₂+0.067x₁x₃+0.4x₂x₃.优化培养基组合为:淀粉浓度为30g/L,豆饼粉浓度为5 g/L,KH₂PO₄的浓度为0.7g/L,且此组合下少动鞘脂假单胞发酵得到结冷胶可达23.87g/L.     

几种农艺因素影响小麦籽粒蛋白质含量的数学模型研究

用二次回归旋转组合设计研究了基本亩数（X_1）、基苗氮肥（X_2）、孕穗期氮肥（X_3)、过磷酸钙（X_4）和氯化钾（X_5）用量对小麦籽粒蛋白质含量的影响．结果表明,X_4、X_1和X_2对蛋白质含量有显著作用,因素之间存在着复杂的互作效应．利用计算机模拟选优,获得了本试验条件下蛋白质含量大于13％的5个农艺因素组合方案,X_1=172.35～186.75万／ha;x_2=116.6～123.6kg／ha;x_3=33.75～39.15kg／ha;x_4=333.9～448.8kg／ha;x_5=190.65～233.10kg／ha．     

基于偏最小二乘回归的中国青春期男性肺活量参考值与地理因素的关系

目的：为制定中国青春期男性肺活量参考值的统一标准提供科学依据.方法：搜集了中国用肺量计法测定72个单位的213881例健康青春期男性肺活量参考值.运用相关分析的方法研究了其与海拔高度（X_1）,年日照时数（X_2）,年平均相对湿度（X_3）,年平均气温（X_4）,年降水量（X_5）,气温年较差（X_6）,年平均风速（X_7）的关系.结果：发现青春期男性肺活量参考值与地理因素之间有显著的相关关系.用偏最小二乘回归分析的方法建立了青春期男性肺活量参考值与地理因素的回归模型：Y=3024.77-0.131640X_1＋0.022388X_2＋2.381548X_3-1.344117X_4-0.030850X_5＋7.881706X_6＋39.820870X_7±557.93,并用Arcgis软件中的空间差值内插出中国青春期男性肺活量参考值的空间趋势分布图.结论：知道中国某地的地理因素,就可用此模型估算该地区青春期男性肺活量参考值,同时也可用空间趋势图直观的得到中国任何地方的青春期男性肺活量参考值.     

白背飞虱种群动态关联分析及预测模型的研究

根据灰色系统关联分析的基本原理,提出了白背飞虱种群动态的加权关联度预测法。衢县早稻后期白背飞虱发生量与历年6月25～30日平均百丛虫量X_1（t）、同期若虫比例X_2（t）、迟熟品种比例X_3（t）、6月下旬水分积分指数X_4（t）和平均气温X_5（t）等因素的关联序为：X_2（t）＞X_1（t）＞X_3（t）＞X_5（t）＞X_4（t）。据此建立的加权关联度预测模型,经12年资料回测和试报验证,结果令人满意。     

碱性果胶酶高产菌株产酶条件的优化

目的:对碱性果胶酶高产菌株的产酶条件进行优化.方法:通过筛选得到一株产碱性果胶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)TCCC11286,利用单因素实验对其发酵条件进行优化.采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对产酶有重要影响的3个因素(豆饼粉、MgSO4以及FeSO4的添加量),并采用响应面试验设计(RSM)对重要闪素进行优化.结果:最适的产酶条件为:玉米粉4%,豆饼粉3.55%,MgSO40.034%,(NH4)2SO4 0.4%,磷酸盐0.05mol/L,FeSO40.013%.结论:优化后其产酶能力得到了明显的提高,酶活提高到14.82U/ml.     

手性拆分环氧氯丙烷菌株的筛选、鉴定及产酶条件研究

从土壤中筛选到5株环氧化物水解酶生产菌,并通过ITS序列鉴定了其中的C375菌,结果为黑曲霉（Aspergillus nigerZJB-09103）。考察了培养基不同碳源、氮源、金属离子和pH等对产酶的影响,得到了较佳的培养基条件：淀粉16g／L,豆饼粉3g／L,蛋白胨3g／L,KH2PO4 0．4g／L,K2HPO4 0．8g／L,MgSO4 0．2g／L,ZnSO4 0．03g／L,pH6．5。采用优化后的培养基条件,酶活力达到156．1U／L,比优化前初始发酵培养条件下的酶活提高了252％,当环氧化物水解酶催化时间为10h时,（s）-环氧氯丙烷的对映体过量值（e．e．）可达99．0％。产率为18．6％。     

日粮添加海藻粉和抗菌肽对海兰褐蛋鸡产蛋性能的影响

采用4×2（海藻粉×抗菌肽）完全随机试验设计,研究日粮添加不同水平的海藻粉（0．0％、1．0％、3．0％、5．0％）和抗菌肽（300 mg/kg、600 mg/kg）对蛋鸡不同产蛋期（24～27周龄和28～31周龄）产蛋性能的影响。结果表明：（1）日粮海藻粉的添加水平显著提高了产蛋率和料蛋比（P＜0．05）。（2）抗菌肽添加水平在28～31周龄显著提高了产蛋率（P＜0．05）。（3）海藻粉和抗菌肽互作效应显著提高了产蛋率和料蛋比（P＜0．05）。结果提示,海藻粉和抗菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响存在互作效应,以海藻粉5％、抗菌肽300 mg/kg水平组合最为理想。     

应用正交旋转组合设计构建测定条件对木聚糖酶活力影响的数学模型

通过正交旋转试验,探讨了反应温度（X1）、pH值（X2）、反应时间（X3）、底物浓度（X4）、DNS用量（X5）5个测定条件对木聚糖酶活力（Y）测定结果的影响,并构建了测定条件对木聚糖酶活力影响的数学模型：Y=10．2950＋1．6563X1-0．0704X2＋0．3179X3＋1．7004X4-1．3413X5＋0．0669X1X2＋0．2094X1X3＋0．7631X1X4＋0．3301X1X5＋0．1256X2X3-0．0881X2X4＋0．1544X2X5＋0．2596X3X4＋0．1469X3X5-0．2594X4X5-0．4121X1^2-0．1258X2^2-0．2233X3^2-0．8358X1^2＋0．5217X3^2．实验结果表明：反应温度、底物浓度和DNS用量对木聚糖酶活力测定结果有极显著影响．     

营养因子对苏云金芽胞杆菌4.0718 产杀虫蛋白Cry1和Cry2的影响

为了提高杀虫蛋白Cry1和Cry2产量,首先采用Plackett-Burman设计筛选出发酵培养基中影响苏云金芽胞杆菌4.0718表达毒蛋白Cry1的显著性因子为黄豆饼粉和MnSO4·H2O,Cry2的产量在该配方中无显著性影响因子.然后利用最速上升实验逼近Cry1最大产出区域,找到后续试验中心点.最后通过响应面优化得到黄豆饼粉和MnSO4·H2O的最佳浓度为11.5 g/L和0.02 g/L,使Cry1和Cry2产量分别达到0.32 mg/mL和0.11 mg/mL,比原优选配方产量提高了两倍多.该优化配方发酵液对棉铃虫的半致死浓度(LC50)为1.09 μL/mL,杀虫活性比原优化配方显著提高.     

嗜碱芽孢杆菌XE22—4—1碱性弹性蛋白酶发酵条件的研究

从西藏天然碱湖中筛选到一株产碱性弹性蛋白酶（alkaline elastase)菌株,最适生长pH为10．0,经鉴定为Bacillus sp.,编号XE22－4－1.该菌产酶最适碳源为2％葡萄糖,氮源为0．25％酵母粉,豆饼粉对发酵产酶有促进作用。2L发酵罐实验表明,溶解氧是影响该菌株产酶的重要因素。通过提高通气量和改变搅拌速度,该菌株可在发酵48h内达到产酶高峰,酶活力最高达266u/mL。     

阿勒泰东部山区森林生态系统树生地衣群落特征的初步研究

根据多年的研究资料并采用聚类分析方法对分布在阿勒泰东部山区森林生态系统的树生地衣群落结构进行定量研究。结果表明,分布在该地区的树生地衣种类形成了4种群落,（1）冷杉粉衣Calicium abietinum Pets＋黑盘灰衣Tephromela atra（Hundson）;（2）土星猫耳衣Leptogium saturninum（Dicks．）＋脱落网衣Lecidea elabens Fr．;（3）槽梅衣Parmelia sulcata Tayl. apud Mack＋粉树花Ramalina farnacea（L．）Ach;（4）黄红橙衣Caloplaca flavorubescens＋黑蜈蚣衣Phaeophyscia nigricans（Flk．）群落。同时对地衣群落多样性、相似性和均匀度指数进行了系统地研究。     

一株海洋微藻的鉴定及其原生质体制备条件优化

从烟台海滨水域分离出一株海洋单细胞微藻。通过形态学鉴定和18S r DNA基因序列分析确定该株真核微藻属于四爿藻属(Tetraselmis sp.),命名为138号藻种。利用Central Composite法的Box-Behnken实验设计优化了此藻株的原生质体备条件。获得了以原生质体制备率为目标函数的三元二次回归方程:Y_1=88. 30-0. 19X_1+2. 44X_2+2. 28X_3-0. 95X_1X_2-3. 13X_1X_3+3. 78X_2X_3-9. 85X_1~2-7. 95X_2~2-7. 22X_3~2。得到最优制备条件:混合酶比例纤维素酶∶果胶酶为5∶2;混合酶浓度为4. 5%(纤维素酶浓度为2. 7%,果胶酶浓度为1. 8%);缓冲液pH为6. 4,最高理论制备率81. 5%。经过3次平行试验,实际得到的原生质体制备率为80. 5%,与模型预测值的误差为1. 24%。绿色荧光蛋白报告基因瞬时表达检测了所制备原生质体的转化能力。     

中温碱性脂肪酶的研究Ⅱ.扩展青霉PF868变株产酶条件

本文报道中温碱性脂肪酶高产变株扩展青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｅｘｐａｎｓｕｍ）ＰＦ８６８的产酶条件。研究结果表明ＰＦ８６８最适产酶条件为：碳源玉米粉,氮源黄豆饼粉,起始ｐＨ７．５,产酶培养温度２６℃,移种量１０％;亚适量的豆油有利于产酶;７００ｐｐｍ的泡敌不抑制菌丝生长且有利于产酶;适量的非离子表面活性剂Ｔｗｅｅｎ和Ｓｐａｎ类有利于菌丝生长和脂肪酶的释放。     

CN—92植酸酶产生菌的诱变选育及产酶条件的研究

以无花果曲霉IFFI2227为出发菌株,通过NTGT和Co60复合诱变处理,获得5株产植酸酶活力比出发菌株高2．1～2．5倍的高产菌株。其中1株CN－92菌产酶性能稳定,研究了该菌株的最适产酶条件：培养温度30℃,培养基起始pH6．0培养时间72h。适宜于该菌株产植酸酶的优良固体培养基组成为：麸皮、豆饼粉、硫酸铵及少量无机磷,培养基含水率51％。葡萄糖、乳糖和MH4Cl、NH4NO3等不同程度地抑制植酸酶的合成,微量元素如Mn,Zn,Cu等对产酶无促进作用。     

基于主成分分析法分析壳聚糖/纳米二氧化钛协同蔗糖酯对香蕉低温贮藏品质影响

本文采用福建漳州巴西蕉为原料,采用2%壳聚糖/1%纳米二氧化钛、1.5%蔗糖酯对香蕉进行涂膜处理并低温冷库贮藏,并设立对照组(12.5°).通过跟踪测定香蕉贮藏期内失重率、呼吸强度、可溶性固形物、总酸、丙二醛、硬度及a~*值,探讨壳聚糖/纳米二氧化钛协同蔗糖酯涂膜处理对香蕉冷藏品质的影响,在此基础上进行主成分分析并拟定主成分线性回归函数.研究结果表明:香蕉失重率、可溶性固形物、丙二醛、a~*值与贮藏时间呈高度正相关,而其总酸与硬度与贮藏时间呈高度负相关,且有统计学意义(P0.01);与对照组比较,处理组A(蔗糖酯组)与处理组B(壳聚糖/纳米二氧化钛协同蔗糖酯组)能有效抑制香蕉失重率、可溶性固形物、丙二醛、a~*值的升高,并延緩其总酸与硬度下降(P 0.05),在贮藏后期,处理组B效果要优于处理组A;通过对7个指标进行主成分分析可知,失重率、可溶性固形物、丙二醛、a~*值指标呈现正相关性,上述指标均与总酸、硬度呈负相关,且有统计学意义(P0.01),7个检测指标可简化为2个主成分,其方差总贡献率为91.946%,能较好地反映原始信息.第1主成分主要反映营养成分及感官品质变化程度,其线性回归函数为:Y_1=-0.057X_1+0.165X_2+0.181X_3-0.170X_4+0.180X_5-0.170X6+0.178X7;第2主成分主要反映其呼吸作用程度,其线性回归函数为:第2主成分提取为:Y_2=0.918X_1+0.080X_2+0.095X_3-0.221X_4-0.170X_5-0.170X_6-0.076X_7,本研究为香蕉的复合涂膜处理及低温贮藏提供理论依据.     

七个气象因子对海南山蛭种群数量动态影响八年观测研究

在海南岛五指山腹地橡胶林中系统观测海南山蛭种群数量变动8年．对海南山蛭种群数量Y与气候因素X_(1-n)的关系建立逐步最优回归方程Y=b_0 b_1X_1 b_2X_2 …… b_nX_n计算分析采用国际标准化最新版本SAS(6.11)软件进行分析．逐步回归分析表明：1）每年海南山蛭种群数量变动不同,影响其数量变动主要因素是X_1,X_2和X_3.2）雨季（5～10月）种群数量明显大,其主要影响因素是X_1,X_2和X_5,旱季（11月～次年4月）种群数量小,其主要影响因素是X_1.3）8年19条回归方程,7个气象因素中影响种群数量变动的主要气象因素是X_1,X_2和X_5,X_7,与山蛭生物学特性一致,本研究结果为山蛭防治提供科依据．     

根霉植酸酶的研究──Ⅰ.菌株的分离筛选及发酵条件研究

从21个土样和15株产酶菌株中筛选到1株产酶能力较强的菌株——根霉（Rhizopussp.）MR020。其优化培养基组成（％）：大米粉2.0,干酪素0．05,（NH4）2SO41.0,MgSO4·7H2O0.05,FeSO4·7H2O0.01,pH5.0。其振荡培养条件：培养基装最25ml／250ml三角瓶,用培养8天、浓度为1×107个／ml的孢子悬液接种1ml,于30℃,150r／min振荡培养108h产酶量最高达4000u/ml。     

Aspergillus sp.脂肪酶发酵条件优化及酶学性质的研究

作者为了得到一种热稳定性较好的脂肪酶新酶种,通过研究分离白极端环境的Aspergillus sp．的最佳产酶条件及其所产脂肪酶的酶学性质,得出了该菌产酶的最佳发酵条件为：以1％黄豆饼粉为氮源、0．2％玉米淀粉为碳源,1．5％橄榄油为诱导物,起始pH6．0左右。装量10mL（250mL三角瓶。摇瓶转速180r／min）、发酵时间为96h。在最佳发酵条件下可得最大发酵酶活36U/mL。Aspergillus sp．所产的脂肪酶的酶学性质是：最适pH为9．0,在pH5．0—10．0于20℃下放置24h后,残余酶活仍保持在起始酶活的90％以上;该酶的最适温度为50℃,50℃保温60min后仍保留70％以上的酶活。Aspergillus sp．所产脂肪酶的热稳定性较好。