贵州桐梓何首乌rDNA ITS序列分析

以改进的CTAB法对何首乌总基因组DNA进行提取,采用通用引物对不同来源的何首乌rDNA ITS序列进行PCR扩增、测序和序列分析.结果表明,何首乌rDNA完全序列片段长度共约652 bp,其中ITS1的长度为202 bp,5.8S的长度为161 bp,ITS2长度为232 bp,与其近缘种ITS序列间存在明显差异.其rDNA ITS序列在分子水平上为鉴别何首乌提供了参考依据.     

山茱萸不同栽培品种的 rDNA ITS 序列分析

为测定山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et.Zucc.）核糖体DNA的ITS序列,对山茱萸不同栽培品种进行了ITS序列分析。通过实验筛选出一对引物,进行PCR扩增,对扩增产物提取纯化,双脱氧链终止法DNA测序。然后,利用DNAssist Version 2.0软件加手工校正确定ITS1-5.8S-ITS2序列,并进行ITS序列分析。获得了山茱萸的ITS1-5.8S-ITS2完全序列,ITS1为253bp,5.8S为156bp,ITS2为273bp,总共682bp。7种果型的山茱萸其5.8S基因序列显示高度的一致性,圆柱形果型、长梨形果型、椭圆形果型和纺锤形果型的ITS区序列完全一致,短圆柱形果型在ITS1区3′端及ITS2区5′端各有1个变异位点;短梨形果型在ITS1区5′端有3个变异位点;长圆柱形果型在ITS1区有5个变异位点。结果表明,ITS序列在山茱萸种内比较保守,有的栽培品种之间有较小的差异,此研究为中药山茱萸分子鉴定提供了科学依据。     

药用真菌金耳的rDNA ITS序列分析与鉴别

研究了两个居群的金耳Tremella aurantialba以及近似品的rDNAITS区碱基全序列的特征及其差异,首次报道了金耳的ITS和5.8SrDNA完整序列,序列总长度为467~468,长度变异较少。聚类分析表明两个居群金耳亲缘关系非常密切,金耳药材和近似品金黄银耳形成一个稳定的独立分支,近似品黄金银耳形成另一个分支。ITS序列的差异为金耳的鉴别提供了可靠的分子标记,为金耳菌类药材基原入药建立了遗传基础。     

米尔顿姬小蜂rDNA ITS1和ITS2的序列分析及其分子鉴定

本研究测定了米尔顿姬小蜂Anselmella miltoni Girault的rDNA ITS1和ITS2序列,以探讨其分子鉴定方法。米尔顿姬小蜂的ITS1和ITS2侧翼区（18S和5.8S）序列相对稳定,ITS1和ITS2序列存在种间差异。根据18S rDNA部分序列,利用DNAMAN的Maximum Likelihood方法构建了与膜翅目其它科的系统发育树。根据米尔顿姬小蜂ITS1和ITS2序列设计了特异性引物,应用特异性引物对样品进行了PCR扩增,扩增效果理想,采用上述特异性引物可从单头米尔顿姬小蜂稳定地扩增出明显的目的DNA条带。因此,可以采用ITS1和ITS2区的特异性对米尔顿姬小蜂进行快速的分子鉴定。     

栝楼属基于核糖体ITS序列的系统发育分析

栝楼属（Trichosanthes）是葫芦科(Cucurbitaceae)中一个种类较多、药用价值较大的属。本文基于ITS序列分析了栝楼属16个种的系统发育关系。聚类分析表明：在组的划分上,具有分类争议的截叶组(sect. Truncata)与大苞组(sect. Involucraria)形成一大支,处于一亚分枝位置,不支持独立成组。在属内分类地位上,在核酸水平不支持贵州栝楼(T.guizhouensis)为一独立种,结合形态特征建议并入双边栝楼(T.rosthornii)。大方油栝楼(T.dafangensis)与小苞组(sect. Trichosanthes)成为姊妹群,处于一个向叶苞组(sect. Foliobracteola)过渡位置,结合其形态特征,建议作为小苞组(sect. Trichosanthes)成员。     

普通小麦基因组最可能的4个供体的ITS1和ITS2序列及其亲缘关系

对普通小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）基因组（ＡＡＢＢＤＤ）最可能的供体－Ｔ．ｕｒａｔｒｔｕＴｈｕｍ．（ＡＡ）、Ｔ．ｍｏｎｏｃｃｕｍｖａｒ．ｂｏｅｏｔｉｃｕｍ（Ｂｏｉｓｓ．）ＭＫ（ＡＡ）、ＡｅｇｉｌｏｐｓｓｐｅｌｔｏｉｄｅｓＴａｕｓｃｈ．和Ａｅ．ｔａｕｓｃｈｉｉ（Ｃｏｓｓ．（ＤＤ）的核糖体ＲＮＡ基因ＩＴＳ区进行了ＰＣＲ扩增和克隆,并测定了ＩＴＳ１和ＩＴＳ２的ＤＮＡ序列,讨论和纠正了前人     

福建青梅rDNA ITS区克隆与序列分析

利用PCR法对青梅ITS1、5.8S、ITS2序列扩增后克隆测序,用软件DNAMAN和MEGA3.1分析测序结果,研究18个福建青梅样品的核糖体ITS碱基序列差异。获得青梅18个样品rDNA中的ITS和5.8S完全序列,ITS1、5.8S和ITS2序列长度分别为223~224bp、164bp和241~246bp,5.8S较为保守。根据测序结果,以UPGMA法建立系统发生树,从分子水平说明18个样品间的变异程度,并将福建青梅差异较大的14条rDNA ITS序列登录GenBank,获得登录号:EF523482-EF523493、EF529435和EF529436。     

新疆石竹属野生种核糖体DNA的ITS序列与亲缘关系

新疆是我国石竹属植物分布和分化中心,种质资源丰富。通过采用PCR直接测序法,对新疆石竹属（Dianthus)植物野生种共8个种及外类群（Lychnis coronata Thunb)rDNA的ITS区（包括ITS－1,5.8S,rDNA和ITS－2）进行序列测定。研究结果说明,新疆石生属植物的ITS序列总长度为617－621bp,长度变异较小,仅相差4bp,种间序列同源性很高,达97．6％－99．8％,外类群的序列同源性为80％左右。ITS区序列在石竹属内是相当保守的,石竹属物种间序列变异位点基本上是转移多于颠换,且转移率较高,转换／颠换率为1．0－3．0。系统地位和亲缘关系分析表明分布于中国的石竹属植物3个组即齿瓣组（sect.Barbulatum Williams)和石竹组（sect.Dianthus),遂瓣组（sect.Fimbriatum Williams)的亲缘关系较远,而sect.Dianthus与sect.Fimbriatum Williams的亲缘关系较近。ITS系统发育树揭示了石竹组起源早于遂瓣组和齿瓣组,其结果与传统形态学论述存在很大差异。     

核糖体rDNA ITS序列在真菌学研究中的应用

rDNA序列的同源性和变化性使其用于真菌各级水平的系统学研究,其中ITS区进化速率较快、长度适中,广泛用于属内种间或种内群体的系统学研究。该文就rDNA序列结构特点、ITS序列在真菌分子系统学及病原学中的应用等方面进行综述。     

中药乌头及其近缘种的rDNA—ITS序列分析

运用PCR扩增产物直接测序的方法对云南、安徽的乌头及其近缘种植物的ITS区碱基序列测定。表明核糖体DNA中ITS区的完整序列（包括ITS1,ITS2和5．8s）,4种乌头属植物的ITS1序列长度为249bp,云南鸟头和安徽乌头及黄山鸟头ITS2序列长度为189bp,赣皖乌头ITS2序列长度为217bp。运用Mega2软件进行系统分析得到系统进化树。ITS序列特征是乌头鉴别的有效分子标记。     

牡丹籽的化学成分研究

从毛茛科芍药属牡丹Paeonia suffruticosa Andr．种子甲醇提取物中分离得到13个化合物,通过理化性质及波谱分析鉴定为齐墩果酸（oleanolic acid,1）、12,13-dehydromicromeficacid（2）、常春藤皂甙元（hederagenin,3）、山奈酚（kacmpferol,4）、木犀草素（luteolin,5）、芹菜素（apigenin,6）、柯伊利素（chrysoeriol,7）、反式葡根素（trans-ε-viniferin,8）、顺式葡根素（cis-β-viniferln,9）、反式白藜芦醇（trans-resveratrol,10）、β-谷甾醇（β—sitosterol,11）、豆甾醇（stigmasterol,12）和β-胡萝卜苷（β-daucosterol,13）。所有化合物均首次从该植物的种子部位中得到。     

稷山矮牡丹腋芽的组织培养

1植物名称稷山矮牡丹(Paeonia suffruacosa Andr.var.spontanea Rehd.). 2材料类别腋芽. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)丛生芽诱导与增殖培养基:MS 6.BA 2.0 mg·L-1(单位下同) NAA 0.1-0.2;(2)壮苗培养基:MS;(3)生根培养基:MS IAA 0.2-0.3.上述培养基蔗糖用量30 g·L-1、5.0 g·L-1琼脂,pH 5.8.培养温度(25±1)℃,光照强度40～60 μmol·m-2·s-1,光照时间15 h·d-1.     

丛枝菌根真菌Glomus mosseae对盐胁迫下牡丹渗透调节的影响

以采自菏泽牡丹园的牡丹‘凤丹’为材料,采用盆栽方法研究了不同浓度人工海水（0%、8%、16%和24%）胁迫下,接种丛枝菌根（arbuscular mycorrhizal,AM）真菌Glomus mosseae对牡丹渗透调节物质含量的影响,以不接种为对照。结果表明,盐胁迫下接种AM真菌能提高牡丹叶片可溶性糖和可溶性蛋白的含量,增大K＋/Na＋比值,减少叶片脯氨酸含量。结论认为,AM真菌能改善牡丹叶片的渗透调节,增强牡丹耐盐能力,促进了盐胁迫下牡丹幼苗的生长。     

濒危植物矮牡丹无性系分株种群的结构

矮牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.var.spontanea Rehd.)无性系分株种群结构的研究结果表明：7个样地矮牡丹的年龄结构可划分为4类：强增长型、平缓增长型、稳定适应型和波动型,前3类种群的数量动态符合负指数方程y=e^a-bx。表现结构为单株高度不超过120cm,基径不超过2cm。适宜生境为地带性顶极群落辽东栎林。     

Relations between auxin and cytokinin contents and in vitro rooting of tree Peony (Paeonia suffruticosa Andr.)

In this work, a combined HPLC-ELISA technique was used to associate in vitro rooting capacity of tree peony micro-cuttings with contents of cytokinin and auxin; the cytokinin mainly detected corresponded to the N⁶-benzyladenine which had been added to the multiplication medium. Rooting capacity of explants was favoured by a preliminary accumulation of endogenous IAA only when levels of the BA absorbed from the multiplication medium had decreased. Main shoots coming from a 5-weeks subculture fulfilled these hormonal conditions and were the best microcuttings for rooting (87% rooting). Main shoots coming from shorter cycles or axillary shoots coming from a 5-weeks cycle always contained high benzyladenine levels and had a low rooting capacity (25–55% rooting). Root induction was associated with an early peak of indole-3-acetic acid followed by a 10-fold lower peak of endogenous ribofuranosyl-isopentenyladenine. Only a low and transitory accumulation of isopentenyladenine occurred during root development, and this could explain the lack of shoot development. Root development was efficient, especially in a medium containing activated charcoal, which led to an almost 3-fold decrease of IAA contents in roots.Abbreviations AC activated charcoal - BA N⁶-benzyladenine - ELISA enzyme linked immunosorbent assay - HPLC high performance liquid chromatography - IAA indole-3-acetic acid - IBA indole-3-butyric acid - iP N⁶-(²-isopentenyl)adenine - RDM root development medium - RIM root induction medium - 9RIP 9--d-ribofuranosyl-iP - 9RZ 9--d ribofuranosyl-zeatin - Z zeatin     

牡丹二氢黄酮醇4-还原酶基因PsDFR1的克隆及表达分析

二氢黄酮醇4-还原酶（DFR）是花色素苷合成途径中的关键酶,在植物花色的形成过程中起重要作用。本研究以牡丹品种‘彩绘’为试材,采用RT-PCR和RACE方法从花瓣中获得了一个牡丹DFR基因cDNA全长,命名为PsDFR1,GenBank登录号为HQ283448。序列分析结果表明,PsDFR1全长1242bp,包含一个长为1095bp的开放阅读框,编码364个氨基酸。生物信息学分析显示该基因编码的蛋白具有典型的DFR蛋白功能结构域,包括多个保守的短链脱氢/还原酶家族的特征位点,属于NADB_Rossmann超家族。氨基酸序列比对和系统进化树分析表明,PsDFR1与葡萄、棉花、毛果杨、梨等植物的DFR相似性都在75%以上。实时荧光定量PCR分析表明,PsDFR1在花色素大量积累的花瓣中表达量最高,其次是萼片和雄蕊,再次是叶片,在心皮中表达量最低。     

Antidiabetic triterpenoids from the leaves of Paeonia suffruticosa and Paeonia delavayi

Three new nor-oleanane triterpenoids, paeonenoides I-K (1-3), together with 13 known triterpenoids including nor-oleanane, oleanane, ursane, and cycloartane types, were isolated from the leaves of Paeonia suffruticosa and P. delavayi. The structures of the new compounds were elucidated with the aid of HRESIMS, 1D and 2D NMR, IR, and [α]_D spectroscopic methods. Nine compounds (5-6, 8-11, 13-14 and 16) showed inhibition against PTP1B with IC₅₀ values ranging from 36.5 to 192.6 μM, six compounds (5-6, 8-10 and 14) exhibited inhibitory activity against GPa with IC₅₀ values ranging from 39.8 to 108.0 μM, and five compounds (1, 6, 10, 15 and 16) could significantly stimulate GLP-1 secretion by 100.2–313.4% (20 μM). Docking study demonstrated that compounds 5 and 6 strongly bonded with Gpa and PTP1B by salt bridges, hydrogen bonds and hydrophobic interactions, verifying the importance of carboxyl and hydroxyl groups. Especially, compounds 5 and 14 could simultaneously inhibit PTP1B and GPa with IC₅₀ values of 57.8, 47.9 μM and 39.8, 45.2 μM, and compounds 6 and 10 could stimulate GLP-1 secretion by 293.6% and 313.4% at 20 μM.     

牡丹腔孢叶斑病及其病原物的共无性型

牡丹腔孢叶斑病于2007-2008年在山东省菏泽、济南、泰安、肥城等地牡丹上普遍发生,除危害牡丹叶片外,也发生于枝干上,在病枝上形成边缘褐色、中部灰白色的病斑,病斑绕茎可致枝条干枯,于病部形成稀疏的黑色扁平状子实体;叶片上病斑黄褐色,圆形至长圆形,直径10-35mm,具褐色至黄褐色相间的同心轮纹,于其上形成橘黄色至橘红色子实体。叶斑上的病原物载孢体盘状、有柄,为Hainesia lythri;病枝上的病原物载孢体为封闭的半球形结构,显示Pilidium concavum的典型特征。两种载孢体中形成的产孢细胞及分生孢子形态一致。分别从多份牡丹病枝、叶上分离获得的7株和21株分离物,在培养性状、生物学特性和致病性等方面基本相似。依据上述特性及部分分离物的rDNA-ITS序列分析结果,将山东牡丹叶斑上的病原物鉴定为Hainesia lythri,病枝干上为Pilidium concavum。二者是同一病原真菌的共无性型。     

Constituents of flowers of Paeoniaceae plants,Paeonia suffruticosa and Paeonia lactiflora

A new monoterpene glycoside, floralalbiflorin I (1), and a new flavonol glycoside, lactifloraoside I (2), were isolated from the flowers of Paeonia suffruticosa and Paeonia lactiflora (Paeoniaceae) together with 28 known compounds. The chemical structures of the isolated compounds were elucidated on the basis of chemical and physicochemical evidence. Among the major constituents of P. suffruticosa and P. lactiflora flowers, 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-β-d-glucopyranoside (10) [inhibition: 42.4% at 1 μM] and flavonoids having the catechol moiety showed significant inhibitory effect on Cu²⁺-induced low-density lipoprotein (LDL) oxidation.