植物超微结构中核酸的细胞化学方法比较研究

随着电子显微镜技术的广泛应用,植物超微结构的研究日益与生理功能密切地结合起来。为了在超微结构水平上对某种特殊的化学成分(如核酸、蛋白质、酶或多糖等)鉴定或定位,发展了诸如酶的细胞化学、核酸的细胞化学等各种细胞化学方法。电镜的细胞化学尚处于初期阶段,对植物组织尤其如此,已用于动物组织方面的许多化学反应不能用于植物材料。核酸的细胞化学方法已有许多报导,但都是以动物组织为材料发     

其它药剂

新型抗体或抗原蛋白质或多肤激素酶共扼物利用青霉素作酶,能够用一种双官能i式剂来制备,用于检测和测定,以及用于疾病诊断或医疗检查,如怀孕的诊断。     

原蛋白转变酶的生物化学结构与功能

肽或者蛋白质以前体形式合成后,需要原蛋白转变酶,和/或羧基肽酶,酰胺化酶等加工酶的协同作用才能获得完全的生物活性。原蛋白转变酶是这个过程中最重要的功能酶,它们由9种Ca2+依赖性的蛋白内切酶组成,许多重要的生理过程需要它们的直接参与,如肽与蛋白质激素、膜受体和病毒外壳蛋白的成熟等。它们的功能与许多疾病相关,如癌症、脑卒中、糖尿病、脂代谢紊乱等疾病,该文对原蛋白转变酶的生化结构和功能作一简述。     

SIS聚合物在生物技术中的应用

ＳＩＳ聚合物可随环境参数的变化发生可逆转化,因此可被用于酶与蛋白质的亲和沉淀或可逆固定化,这对于简化蛋白质的分离纯化程序、提高分离纯化的效率和提高固定化酶的利用率有重要的意义。本文就近十年来在这一领域的研究作一综述报道。     

蛋白质的化学改性及其应用

蛋白质是生命活动的重要物质之一。蛋白质种类繁多,各具有自己的特殊的生物功能,如催化、传递系统,调节代谢过程和参与结构成分等等。蛋白质功能的多样性是与其化学结构以及由化学结构所决定的空间结构的多样性分不开的。从分子水平上来说,许多蛋白质作用的对象是小分子,如酶与底物或抑制剂间的作用,抗体与抗原尤其是半抗原间的作用。这些底物或     

经过改造的酶可以提高油和脂的质量

美国Genencor公司的蛋白质工程专家最近改进了一种酶,这种改进了的酶可以把廉价的植物油转变为优质产品。例如,某种稳定有效的酶可以把便宜的棕榈油转变成贵重的可可脂。通过改变组成甘油三酯的脂肪酸的比例类型而制造的产品可以取代其它许多高价的植物油和动物脂。 Genencor的研究人员正在研究的是枯草杆菌蛋白酶,这是人们所熟悉的一种用于洗涤剂中清除蛋白污渍的酶。早些时候,Genencor曾通过置换该酶分子链上一或两个关键位置的一个氨基酸而改进了它的功能。此外,枯草杆菌蛋白酶属于丝氨酸水解酶,这类酶中有一     

蛋白激酶对细胞的正常生长分化及恶性转化的调控

蛋白质转录后的磷酸化/去磷酸化可逆修饰,是调节控制蛋白质的酶学活性或生物学功能的重要途径。使蛋白质磷酸化的酶称为磷酸基转移酶或蛋白激酶。首先发现的是糖元磷酸化酶。目前已知用磷酸化/去磷酸化方式调节酶活性的酶类达三十多个。蛋白激酶还能催化许多非酶蛋白的磷酸化。多数蛋白激酶的活性是通过与相应特异的调节因子相互作用控制的。这些特异的调节因子常是细胞外信号的接续信使。据此可将蛋白激酶分为如下几类: 1.依赖cAMP的;2.依赖cGMP的;3.     

等位基因和“多态现象”

生物体合成什么样的酶和蛋白质是由染色体上的基因决定的。当有两个以上常见等位基因控制酶和蛋白质的合成时,便会导致酶和蛋白质的多态现象。在一个或几个主要的人类群体里,有两个或更多的常见等位基因,它们各自对某一酶或蛋白质的合成产生一种独特的影     

蛋白质泛素化系统

泛素化是单个或多个泛素在泛素激活酶,泛素结合酶及泛素蛋白质连接酶的作用下共价修饰底物蛋白质的过程,近年来的研究发现,许多含环指的蛋白质本身是蛋白质泛素连接酶,或是多亚基连接酶中的重要成分。由于细胞内可表达200以上的环指蛋白,并且多亚基连接酶可利用同一环指蛋白但不同的底物识别蛋白。这些研究极大地丰富了对泛素化系统酶的认识,也使进一步调节和干预连接酶与底物的相互作用成为可能,新近的研究还发现,泛素化不仅可导致蛋白质的降解,还可直接影响蛋白质的活性和细胞内定位,是调节细胞内蛋白质功能和水平的主要机制之一。     

蛋白质谷氨酰胺酶成熟肽基因mpg原核表达及其多克隆抗体的制备

蛋白质谷氨酰胺酶(Protein-glutaminase,简称PG)是一种新型蛋白质脱酰胺酶,在蛋白质改性领域具有广阔的应用前景。但是,目前关于蛋白质谷氨酰胺酶的测定方法主要是通过苯酚-次氯酸盐反应测定铵离子含量指示蛋白质谷氨酰胺酶的酶活,该方法精确度和灵敏度有限。因此,利用原核表达系统表达解朊金黄杆菌(Chryseobacterium proteolyticum)分泌的蛋白质谷氨酰胺酶成熟肽基因mpg,纯化后制备其多克隆抗体用于检测解朊金黄杆菌分泌的蛋白质谷氨酰胺酶的含量。首先以解朊金黄杆菌基因组为模板扩增出成熟肽基因mpg,将其与pET32a载体连接构建重组质粒pET32a-mpg,转化至大肠杆菌BL21(DE3)。在25℃条件下,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导6 h,目的蛋白表达量最高、呈可溶性蛋白。通过Ni-NTA柱纯化的重组蛋白mPG-His_6,将其作为抗原,免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。间接酶联免疫法检测其效价,所得抗体效价为1∶5 000。蛋白质免疫印迹实验结果说明,该多克隆抗体特异性良好。最后使用该多克隆抗体对解朊金黄杆菌的发酵上清液进行蛋白质免疫印迹反应,检测天然蛋白质谷氨酰胺酶,结果表明该抗体特异性良好,可用于检测解朊金黄杆菌分泌的蛋白质谷氨酰胺酶,为深入研究蛋白质谷氨酰胺酶的生物学功能、建立蛋白质谷氨酰胺酶高产菌株的高通量筛选方法奠定了基础。     

用两相系统回收蛋白质

简要评价了细胞内酶和其他生物活性蛋白质的抽提回收技术及其经济方面。可以看到,此法有很大的潜力,现在用于工业生产。 人们对细胞内酶和微生物的其他生物活性蛋白质的兴趣日益增长。     

蛇毒纤维蛋白原水解酶

蛇毒纤维蛋白原水解酶毛建平孙志贤（军事医学科学院放射医学研究所北京１００８５０）关键词蛇毒纤维蛋白质凝血酶样酶纤溶酶许多蛇毒中含有降解纤维蛋白原或纤维蛋白的酶类,它们作用于高等动物血液循环系统,防止中毒动物血液凝固以利于其它毒素迅速扩散和生效。人类于...     

质量肽谱在蛋白质结构研究中的应用

蛋白质的一级结构始终是生物学家关心的一个焦点,他们通常使用肽谱分析的方法测定蛋白质的一级结构。肽谱是一种技术,它使用特异性的酶或化学的方法,将蛋白质降解成小肽,然后进行分离和分析[1]。肽谱在蛋白质研究中起着重要的作用,它可以确证蛋白质的序列,用于蛋白质鉴定;鉴定翻译后的修饰及体外的化学修饰;检测单个氨基酸的变异(即突变);鉴定不同的蛋白构型;也可用于产生核苷酸探针检测ＤＮＡ文库;合成多肽诱导...     

两种具有调节血管生成作用的氨基酰-tRNA合成酶

氨基酰-tRNA合成酶是生物体内蛋白质合成过程中的一类关键酶,它催化体内tRNA的氨基酰化反应.作为一类古老的蛋白质,氨基酰-tRNA合成酶在其漫长的进化过程中,通过其他结构域的插入或融合逐渐演化出许多新的功能.最近的研究结果表明,人酪氨酰-tRNA合成酶的片段具有促进血管生成的功能,而人色氨酰-tRNA合成酶的片段则具有抑制血管生长的功能.在哺乳动物细胞中,蛋白质的生物合成途径与细胞信号转导途径紧密相连.今后,随着对氨基酰-tRNA合成酶研究的不断深入,可以通过它们与细胞因子和信号转导相连的功能治疗人类的疾病.     

SIS聚合物在生物技术中的应用

ＳＩＳ聚合物可随环境参数的变化发生可逆转化，因此可被用于酶与蛋白质的亲和沉淀或逆固定化，这对于简化蛋白南的分离纯化程度、和提高固定化酶的利用率有重要的意义。本文就近十年来在这一领域的研究作一综述报道。     

酶工程:应用和希望

DNA重组技术比传统蛋白质化学更方便地提供生产天然的和修饰的蛋白质的方法。设计与重组DNA定向改变酶,或酶工程,为了解蛋白质结构对酶功能及活性的关系提供丰富信息。 酶的结构适应于体内特殊代谢需要而进化。     

黄曲酰化酶拆分酰化-DL-氨基酸及D型氨基酸的制备

<正> 酶是生物细胞合成的具有高效专一催化活力的一类特殊蛋白质。利用酶族中酰化酶拆分化学法合成或消旋的D L-氨基酸。可以得到纯的L型和D型的氨基酸。通常用于工业生产的酰化酶有猪肾酰化酶。淀粉酰化酶、黄曲酰化酶等。在拆分D L型甲硫氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、色氨酸、苄基丝氨酸等几十种氨基酸中,L型氨基酸产率为50～     

一种简单而灵敏的蛋白质肽图分析方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)已广泛用于多组分蛋白质体系的分离、纯化和分子量比较分析,而蛋白质肽图分析方法则能进一步在寡肽的水平上对蛋白质进行比较研究。部分揭示蛋白质氨基酸组成的异同。常规的肽图分析方法所需样品量较大(n mole或接近mg量),制备样品不仅步骤繁杂而且损耗量大,因而限制其广泛应用.1977年Elder等对PAGE分离得到的凝胶小片中的蛋白质,直接用放射性碘标记,然后进行酶解、电泳-层析、放射自显影     

乳酸菌蛋白质分泌表达研究进展

食品级乳酸菌不仅是食品或消化道中传递异源蛋白质的合适的候选菌,在工业发酵中还可用于生产蛋白质。在过去20多年中,人们设计了许多乳酸菌蛋白质表达和标记系统,这些系统已用在乳酸菌工程菌的细胞内或细胞外生产各种细菌、病毒和真核生物来源的蛋白质。在目的蛋白生产和发酵中,分泌表达由于可持续培养和简化纯化步骤并使目的蛋白与其靶位相互作用而优于细胞质表达。目前只有少数研究报道了目的蛋白在乳酸菌细胞内或分泌表达产量的比较,研究表明分泌表达比细胞质表达更优越。     

遗传信息传递的晶体学解密

生物大分子(如蛋白质等)在生物体内行使功能必须要保证其立体结构的正确性。作为研究大分子高级结构的主要手段,结晶技术结合X-射线衍射技术、核磁共振技术以及电镜技术被普遍应用于高级结构的数据分析。随着这些技术的进一步完善,目前已经能完成蛋白质与配体的共结晶。遗传信息从最原始的DNA或RNA传递到以蛋白质的形式呈现功能的过程是由众多酶或蛋白质复合体催化的多步骤进程,解析其中重要元件的空间结构推动了对这些酶反应机理的深入研究。主要阐述结晶技术在遗传信息传递过程中关键酶或蛋白质复合体的研究中的应用。