人肠道梭菌和甲烷马赛球菌协同代谢甜菜碱和胆碱产甲烷研究

【目的】根据人肠道富含胆碱和甜菜碱,同时肠道微生物组中具有裂解胆碱和还原甜菜碱产三甲胺的细菌,以及利用三甲胺产甲烷的古菌,本研究探讨肠道细菌与古菌协同代谢甜菜碱和胆碱产甲烷的可能性。【方法】调查不同年龄段人群粪便中的16S rRNA基因多样性,分析肠道中古菌的菌群组成;利用定量PCR(quantitativePCR,qPCR)定量甲烷马赛球菌(Methanomassiliicoccus)特异的甲醇甲基转移酶基因mtaB和甲烷八叠球菌(Methanosarcina)及细菌的16SrRNA基因拷贝数,分析肠道中甲基营养型产甲烷古菌及总细菌的含量;宏基因组组装基因组(metagenome-assembled genomes, MAGs)分析携带甜菜碱还原酶基因grdH和胆碱裂解酶基因cutC的细菌组成。从粪便中分离代谢甜菜碱及胆碱产生三甲胺的细菌,并与分离自人肠道的甲烷马赛球菌构建共培养物,测定其协同转化甜菜碱和胆碱产甲烷的能力。【结果】年轻人粪便中含有甲烷杆菌科(Methanobacteriaceae,82.16%)的甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter,49.18%)和甲烷...     

新疆维、哈两民族粪样中韦荣球菌属和梭菌属水平与2型糖尿病的相关性研究

目的探讨目标差异肠道菌群与新疆维吾尔族、哈萨克族2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法采用16S r DNA实时荧光定量PCR对新疆维吾尔族、哈萨克族正常糖耐量及2型糖尿病患者粪样中韦荣球菌属和梭菌属水平进行检测。两组间均数比较采用t检验,运用Pearson分析方法对差异肠道菌群与新疆维、哈两民族正常糖耐量及2型糖尿病人群的体检及生化指标进行相关性分析。结果 (1)16S r DNA实时定量PCR结果显示,韦荣球菌属及梭菌属水平在哈萨克族2型糖尿病组粪样中显著高于该民族正常糖耐量组(P=0.035,P=0.028)。(2)新疆维吾尔族、哈萨克族正常糖耐量人群和2型糖尿病人群粪样中韦荣球菌属水平与体重及体重指数(BMI)显著正相关(r=0.469,P=0.009;r=0.623,P=0.002),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著负相关(r=-0.466,P=0.025);梭菌属水平与体重、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)水平显著正相关(r=0.375,P=0.049;r=0.398,P=0.033;r=0.375,P=0.041)。结论肠道中Veillonella spp和C.coccoides subgroup水平的变化可能与新疆哈萨克族、维吾尔族2型糖尿病的发病有关,需进一步深入探讨。     

酪酸梭菌活菌片联合多烯磷脂酰胆碱对酒精性肝病患者肠道菌群及炎症因子的影响

目的 探讨酪酸梭菌活菌片联合多烯磷脂酰胆碱对酒精性肝病（ALD）患者肠道菌群及炎症因子的影响。方法 选取2015年1月至2018年1月进行治疗的ALD患者80例,随机分为观察组和对照组。两组患者均予以严格戒酒、高蛋白高热量低脂饮食、维生素及门冬氨酸钾镁等常规治疗。观察组患者在此基础上加用酪酸梭菌活菌片（0.7 g/次,3次/d,口服）和多烯磷脂酰胆碱胶囊（456 mg/次,3次/d,口服）联合治疗8周。对照组患者在常规治疗基础上单纯加用多烯磷脂酰胆碱片治疗,其剂量、用法及疗程与观察组相同。观察并比较治疗前后患者肝功能指标、肠道菌群数量及炎症因子的变化。结果 治疗8周后,两组患者血清ALT、AST和TBiL水平均较治疗前显著下降（P<0.05）,且观察组下降幅度较对照组更大（P<0.05）。两组患者肠道双歧杆菌和乳杆菌数量较治疗前明显上升,大肠埃希菌数量较治疗前明显下降（P<0.05）,且观察组变化幅度较对照组更大（P<0.05）。两组患者血清IL-6和TNF-α水平较治疗前明显下降（P<0.05）,且观察组下降幅度较对照组更大（P<0.05）。结论 酪酸梭菌活菌片联合多烯磷脂酰胆碱能有效改善ALD患者肝功能指标,促进肝功能恢复,其作用机制可能与其能纠正肠道菌群失调,促进有益菌的繁殖,同时下调血清炎症因子水平,抑制肝内炎症反应密切相关。     

引起院内感染的肠球菌和肠道中的肠球菌耐药性差异的研究

目的　研究临床分离的院内感染的肠球菌对常用抗生素的耐药性及与健康人肠道中的肠球菌的耐药性比较。方法　应用琼脂稀释法检测从临床分离的５２ 株肠球菌和健康人肠道中分离的肠球菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ） 。结果　肠球菌对临床常用的１１ 种抗生素的耐药性以万古霉素最低,ＭＩＣ５０ 为２ ,ＭＩＣ９０ 为４ 。屎肠球菌和粪肠球菌的耐药性对万古霉素有明显差异。院内感染分离的肠球菌和健康人肠道中的肠球菌的耐药性亦有显著的差异。结论　肠球菌对抗生素的敏感性以万古霉素最敏感,肠球菌应鉴定到种的水平以便更好地监控抗生素的耐药性。     

粪便pH和涂片检查肠道菌群失调的研究及意义

目的探讨粪便pH和涂片检查细菌球/杆在菌群失调诊断中的价值。方法对腹泻3 d以上或疾病中并发腹泻的194例患者为研究对象。采集新鲜粪便(10 min内),观察其性状、颜色、测pH、粪便常规,涂片革兰染色查细菌总数、形态特点、革兰球菌/杆菌及细菌培养。另选同期住院的非腹泻患者、职工家属和到保健科定期体检的小儿80例作为正常对照。结果经培养确诊为菌群失调的有118例,其中男76例,女42例,年龄最小45天,最大5岁。粪便pH失调组分布在6~8,≥7者占78.8%,对照组分布在5~6.5,多集中在≤5.5,占85%,相比差异有显著性(u=12.02,P<0.01)。涂片查球菌/杆菌失调组为3/7~8/2,球菌≥40%者106例(89.8%),对照组为3/7~1/9,球菌≥40%者无1例,两者比较差异有显著性(u=11.19,P<0.01)。两种快速诊断法的灵敏度分别为94.9%和100%,特异度均为95%,诊断界值pH为6.5,球/杆为3/7。结论粪便pH和涂片检查肠道菌群失调方法简便、快捷、经济实用,能在15 min内作出诊断,尤对急重症患者可赢得治疗时机,值得推广。     

一株人消化道中韦荣氏球菌的分离、鉴定及其代谢特性研究

【目的】分离与鉴定人肠道乳酸利用菌,研究其乳酸利用的代谢特性。【方法】利用Hungate滚管技术从人粪便中分离厌氧细菌,通过形态、生化和16S r RNA基因鉴定;通过体外发酵技术研究乳酸代谢,并且与乳酸产生菌共培养,研究二者之间交互饲喂。【结果】验证了乳酸可作为代谢中间产物被人肠道混合菌群利用;分离到一株乳酸利用菌,在24 h内消耗乳酸超过50 mmol/L,经鉴定为韦荣氏球菌,并将其形成乙酸和丙酸。当和肠球菌共培养时,可以有效地减缓乳酸的积累。【结论】本株乳酸利用菌可以作为潜在的益生菌,和乳酸菌一起调节人肠道的乳酸动态平衡。     

实时荧光定量PCR法研究结直肠癌患者肠道拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属量的变化

目的通过研究结、直肠癌患者肠道拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属量的变化,揭示肠道相关菌群改变在大肠癌发病中的作用及意义。方法收集术前结、直肠癌患者粪便标本40例及正常对照标本40例,根据细菌的靶基因序列设计特异性引物。提取待测粪便标本细菌DNA,应用SYBR Green I实时荧光定量PCR测定不同细菌的数量。结果正常对照组与实验组粪便中细菌数量分别为拟杆菌属(8.76±0.77;9.85±0.88)、梭杆菌属(7.94±1.25;10.0±1.65)、梭菌属(3.54±0.70;6.56±0.68),拟杆菌属中的脆弱拟杆菌为(2.12±0.48;4.07±1.77)、梭杆菌属中的坏死梭杆菌为(2.31±0.26;7.62±2.68)及梭菌属中的肉毒梭菌为(2.76±1.16;5.43±1.21),实验组数量均明显增多(P0.05)。结论结、直肠癌患者粪便中拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属的数量较正常对照明显增多,提示结、直肠癌的发生发展与肠道菌群有明显关系。     

人鼻病毒1B感染人扁桃体上皮细胞和人肺支气管上皮细胞的比较代谢组学研究

人鼻病毒(Human rhinovirus,HRV)是呼吸道感染的主要病原体之一,明确HRV的致病机制能为有效防控该病毒感染提供科学依据.为确定1B型HRV(human rhinovirus type 1B,HRV1B)感染致宿主细胞的代谢组改变及差异性,本文采用非靶向代谢组学技术研究HRV1B感染人扁桃体上皮细胞UT-SCC-60B和人肺支气管上皮细胞BEAS-2B后代谢组的改变情况.HRV1B感染UT-SCC-60B细胞6h和12h分别有21个差异显著代谢产物(differentially significant metabolites,DSMs)(上调13个、下调8个)和51个DSMs(上调42个、下调9个),HRV1B感染UT-SCC-60B和BEAS-2B细胞6h和12h后,比较分析发现分别有303个DSMs(上调69个,下调234个)和324个DSMs(上调88个,下调236个),未知DSMs占据比例较大.脂肪酸、脂质、氨基酸、核苷酸和糖类的比例随着感染时间的延长而增加,7-酮基脱氧胆酸、溶血磷脂酰胆碱、垂盆草甙、组氨酸-甘氨酸、腺苷酸等涉及到胆汁酸代谢、脂肪酸和脂质代谢、糖代谢、氨基酸代谢和核苷酸代谢.因此,细胞水平表明HRV1B感染改变了人上皮细胞的脂肪酸、脂质、氨基酸、核苷酸和糖类的代谢水平.     

正常和异常的人精浆中甘油-3-磷酸胆碱、总唾液酸及化学元素含量的比较研究

用酶法和过碘酸 -硫代巴比妥酸法对正常男性和异常男性患者精浆甘油 3 磷酸胆碱(GPC)、总唾液酸 (TSA)量进行了测定 .通过电感耦合等离子直读光谱仪 (ICP)测定精浆中多种化学元素的含量 .结果表明 :正常男性与异常男性患者精浆中GPC的含量有显著性差异 (P <0 0 5) ;正常男性与异常男性患者精浆中TSA的含量无显著性差异 ;正常男性与异常男性患者精浆中钙、镁、磷、硒和锌元素的含量具有显著差异 ,而正常男性与异常男性患者精浆中铝、钡、铁和铅元素的含量无显著差异 .这些结果提示精浆中GPC、钙、镁、磷、硒和锌元素的含量可能与男性不育有关 ,而精浆中TSA、铝、钡、铁和铅元素与男性不育关系还需进一步探讨 .