环氧化物水解酶1基因(EPHXl)多态性与新生儿出生体重间关系分析

为研究母亲环氧化物水解酶1基因(EPHXl)多态性与新生儿出生体重间关系.收集了某纺织厂342名女工的资料,用PCR-限制性片段长度多态性法分析母亲EPHXl基因型,采用多元线性逐步回归模型分析母亲EPHXl多态性与新生儿出生体重关系.结果发现调整主要混杂因素后EPHXl的His139Arg/AG139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关(β±SE＝-149g±56,P＝0.0083).经被动吸烟分层分析,结果显示仅在有被动吸烟史人群中EPHXl的Hus139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关,(β±SE=-234g±88,P＝0.0088);而根据工作紧张程度分层分析后发现,仅在有工作紧张史人群中发现EPHXI的His139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关(β±SE＝-157g±59,P＝0.0079).我们的结果显示母亲EPHXl多态性与新生儿出生体重有显著性相关,并存在基因-环境的交互作用.     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA在P.pastoris酵母菌中的表达和鉴定

将编码３７９个氨基酸残基的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入到含ＡＯＸ１启动子和ＰＨＯ１分泌信号肽序列的甲醇营养型酵母载体中,构建成表达质粒ｐＹＩＳ－１．表达质粒转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ甲醇营养型酵母细胞,筛选Ｈｉｓ＋Ｍｕｔ－表型的转化子,经低密度摇瓶培养,１％甲醇诱导表达７ｄ后,培液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,ＰＡＩ－１生物活性测定和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实表达出分子量为４３～５１ｋＤ的４条ＰＡＩ－１条带．表达的ＰＡＩ－１能有效地分泌到培液中,占培液总蛋白的２６％左右,达４ｍｇ／Ｌ培液;其比活性为１．１６×１０４ＡＵ／ｍｇ．不同分子量ＰＡＩ－１可能与其糖基化程度不同有关     

人血管内皮细胞生长因子受体Flt—1胞外区cDNA在毕赤酵母中的？…

将编码血管内皮细胞生长因子受体ＦＩｔ－１胞外区１－３ｌｏｏｐ３１６个氨基酸残基的ｃＤＮＡ插入到含ＡＯＸ１启动子和α分泌信号肽序列的Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母载体中,构建了重组表达质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／ＦＩｔ＝１（１－３）,转化酵母景菌ＧＳ１１５,筛选Ｈｉｓ＾＋Ｍｕｔ＾ｓ表型转化子,经插瓶培养,１％甲醇诱导表达４ｄ后,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果显示,培养上清中ＦＩｔ－１（１－３）表达这总蛋白的３０－％     

血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌肌浆网Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase基因转录调节的影响

观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对心肌肌浆网Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ基因（ＳＥＲＣＡ２ａ）转录调节的影响,评价ＤＭＰ８１１对此效应的干预作用．６周龄雄性ＳＤ大鼠随机分为３组,每组６只．组１：生理盐水输注;组２：ＡｎｇⅡ输注＋ＤＭＰ８１１管饲（３ｍｇ·ｄ－１·ｋｇ－１）;组３：ＡｎｇⅡ输注（２００ｎｇ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１．１周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总ＲＮＡ后采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ的方法检测ＳＥＲ－ＣＡ２ａ的转录水平,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡｎｇⅡ１型受体（ＡＴ１）ｍＲＮＡ水平．实验后,组３心重（ＣＷ）、心重／体重（Ｃ／Ｂ）、ＡＴ１受体转录水平均高于组１（分别增加４．７±０．４％,４．９±０．９％和２４．７±３．５％;Ｐ＜０．０１）,而ＳＥＲＣＡ２ａ基因转录水平显著低于组１（降低２０．１±３．０％,Ｐ＜０．０１）,并且ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ水平与ＡＴ１受体ｍＲＮＡ水平呈负相关（ｒ＝－０．７４,Ｐ＜０．０１）．ＡｎｇⅡ导致的上述改变能被ＤＭＰ８１１完全阻断．ＡｎｇⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了ＳＥＲＣＡ２ａ的转录下调     

枸杞子糖蛋白的分离纯化,物化性质及糖肽键特征

从宁夏枸杞子提取得到的粗多糖,经ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析,得到均一的枸杞子糖蛋白ＬｂＧＰ。分子量由ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定为８８ｋｄ,糖含量为７０％,糖组成为Ａｒａ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ＝２．５：１．０：１．０,并含有其他１８种天然氨基酸。初步分析表明ＬｂＧＰ是Ｏ－连接的糖蛋白。     

维生素A缺乏胎鼠作为先天性心脏病动物模型的实验研究

目的　探讨将维生素Ａ缺乏（ＶＡＤ）胎鼠作为先天性心脏病动物模型的可行性。方法取１１－１９ｄ不同胎龄正常及ＶＡＤ胎鼠心脏经石蜡包埋、切片及 ＨＥ染色观察其发育情况。结果 １．实验组饲料含维生素Ａ（ＶＡ）７μｇ／１００ｇ,经ＶＡＤ饮食喂养后实验组大鼠血清ＶＡ水平明显低于对照组［（０．１６８±０．０５９）μｍｏｌ／Ｌ Ｖｓ（２．１８±０．２３）μｍｏｌ／Ｌ,ｔ＝３２．８８, Ｐ＜０．００１］。 ２．大鼠死亡百分比：饲养于屏障系统的ＶＡＤ大鼠死亡百分比较饲养于开放系统中的要低４．６倍（１０％ Ｖｓ ４５．８３％．ｘ ２＝１６．６４, Ｐ＜０．００１）,对照组为０。 ３．实验组大鼠受孕百分比及每只孕鼠产仔数均低于对照组［５８．３３％ Ｖｓ ８１．５％, ｘ ２＝４．３７,Ｐ＜０．０５：（６．９７±２．７９） Ｖｓ（１３ ±１．０５）,ｔ＝７．１６, Ｐ＜０．００１］。 ４．经切片观察１１～１５ ｄ胎龄胎鼠实验组心脏出现明显发育延迟的占３６．６７％, １６～１９ ｄ胎龄胎鼠实验组心脏畸形占４１．４３％,血管异常占１８．５７％。结论ＶＡＤ胎鼠可用来作为先天性心脏病动物模型,但需改进饲养环境以减少异常死亡。     

正常足月儿畸变产物耳声发射(DPOAEs)特性分析

研究提出正常足月儿畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥｓ） 特性分析如下：１ ． ＤＰＯＡＥｓ 反应强度曲线,ＤＰ 图显示两个反应峰（ｆ２ ＝ １ ．６ 和５ ．０ ｋＨｚ） 和一个反应谷（ｆ２ ＝ ３ ．１ ～４ ．０ ｋＨｚ） ;２． ＤＰＯＡＥ 本底噪声及其特性,ｆ２ ＝ １．０ ｋＨｚ 其测试频率点（２ｆ１ －ｆ２） 本底噪声最高（Ｐ＜ ０ ．０５） ,ｆ２ ＝ ３ ．１ ,４．０ 和５ ．０ｋＨｚ ,测试频率点（２ｆ１ －ｆ２） 本底噪声较低（Ｐ＜ ０．０５） ;除ｆ２ ＝ ４．０ ｋＨｚ 外,ＤＰＯＡＥ 本底噪声与其反应强度均未呈现直线相关特性;３ ． ＤＰＯＡＥ ＳＮＲ 特性,ｆ２ ＝ １．０ ｋＨｚ 其ＳＮＲ 最小（Ｐ＝ ０．０００） ,ｆ２ ＝２ ．０ ｋＨｚ 其ＳＮＲ 最大（Ｐ０ ．００３） ;４． ＤＰＯＡＥ ＳＮＲ 和ＴＥＯＡＥ ＳＮＲ 相关特性,除１．０ ｋＨｚ 频段外,其余频段其二者间均有着非常显著的直线相关特性。     

向日葵种质资源的随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）研究

采用ＲＡＰＤ方法对我国２１个向日葵（Helianthus annuus L.)基因型和１１个国外引进向日葵因型进行分析,构建了它们的方图谱。从８０个随机引物中筛选出的２５个有效引物共产生１８８条ＤＮＡ片段,大小分布在０．２６－１．９８kb之间,其中１６４例带具有遗传多态性,约占总数的８７．２％,平均每个引物扩增的ＤＮＡ带数为７．５２条。３２个向日葵的遗传相似性分析表明,各基因型间的Ｎei氏相似性系数分布在０．３９８７．０８５３１之间,平均相似性系数为０．６２８１。１１个国外向日葵基因型的Ｎei氏相似性系数分布在０．７１３４－０．８５３１之间,平均相似性系数为０．７８２８,说明国外基因型之间的遗传基础比较狭窄。２１个国内向日葵基因型的Ｎei氏相似性系数分布在０．４７５０－０．８２０６,平均相似性系数为０．６４７８,说明国内向日葵基因型之间的遗传多态性较为丰富。通过非加权算术平均数聚类（ＵＰＧＭＡ）的方法,给制了３２个向日葵基因型之间的遗传关系树图。３２个向日葵基因明显地聚成Ａ、Ｂ两大类群。２１个国内向日葵基因型聚成了Ａ１、Ａ２两个亚类,Ａ１组包括：Ｘ１０、陕西向日葵、Ｄ－Ｓ１２、长岭向日葵６、黑２－Ｓ２－２、Ｔ－Ｃ０８、长岭葵花４、白葵３号、ＢＨ－１０、Ｊ－Ｓ－Ｂ１、张掖白子葵、Ｃ１０１－Ｓ４－３Ｓ４等１２个基因型;Ａ２组包括：ＬＫ３０５－Ｓ８、ＬＫ、ＣＳ－７、长岭葵花Ｓ２－Ｓ２、辉南７－Ｓ１－３、辉南、ＣＹ－ＸＸ１９－ＸＸ２、吉葵１１２、吉葵１１６等９个基因型。１１个国外向日葵基因型划分为Ｂ１、Ｂ２两个亚类,Ｂ１组包括ＬＧ１２０２８Ｑ、ＬＧ９０２３Ｒ、ＣＲＮ１４３、ＳＦ９９０３、ＳＦ９９０２、Ｓ－３３２２、ＳＨ３３２、ＳＨ４１、ＳＦＰ９００１、ＣＲＮ１４４５等１０个法国基因型;Ｂ２组织有来自美国的Ｇ１０１一个材料。     

家蚕滞育生物钟蛋白质Ease A4的纯化及其分子结构分析

ＥａｓｅＡ４是家蚕卵的一种滞育生物钟蛋白质．产下后２ｄ的家蚕Ｃ１０８品种滞育性卵,经过丙酮脱脂、８５℃热处理、硫酸铵沉淀和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤层析初步分离,进一步经过Ｓｅｐ－ＰａｋＣ１８脱盐浓缩,ＨＰＬＣ（柱为ＹＭＣ－ＰａｃｋＰｒｏｔｅｉｎ－ＲＰ）分离,通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＭＡＬＤＩＭＳ方法鉴定,纯化得到ＥａｓｅＡ４蛋白质．从１０ｇ蚕卵最终得到了１１．８μｇＥａｓｅＡ４．ＥａｓｅＡ４由从Ｈｉｓ到Ｔｙｒ的１５５个氨基酸残基构成,蛋白质部分的分子量为１６６０１．其２２位氨基酸残基Ａｓｎ处有一个Ａｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ糖基化场所,并有糖基结合在该部位,糖基的分子量约为７６０．ＥａｓｅＡ４的６１位和１５０位的两个Ｃｙｓ氨基酸残基之间存在二硫键．糖基和二硫键的存在不仅有利于酶蛋白的分离,还可能与酶活性有关     

从感染TMV的番茄叶纯化胞外β—N—乙酰氨基已糖苷酶

番茄系统感染ＴＭＶ（ｔｏｂａｃｃｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ）诱导叶β－Ｎ－乙酰氨基已糖苷酶活性升高。番茄叶胞外提取液经冰冻干燥浓缩,－２０℃丙酮沉淀、ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｃＣ－２５离子交的层析,ＰＢＥ９４（ＰｏｌｙｂｕｆｆｅｒＥｘｃｈａｎｇｅｒ９４,Ｓｉｇｍａ）聚焦层析和ＳＥＰＨＡＤＥＸｇ－１５０凝胶层析纯化,获得纯化的β－Ｎ－乙酰氨基乙糖苷酶。凝胶层析测得该酶的分子量为１４５ｋＤ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

真菌类遗传学分析的知识结构教学

本文以认知结构理论为指导,讨论了真菌类遗传分析与高等动植物遗传分析的内在联系,认为利用这种内在联系进行教学可收到好的效果并说明了作者的具体教学过程。 Abstract:In the paper, the relationship between genetic analysis of Fungi and genetic analysis of high animal and plant was discussed.A good results were obtained when we adopted this method in the teaching.     

医疗机构合理用药评价模型的构建研究

目的 针对医疗机构的合理用药水平进行评价研究。方法 根据医疗机构合理用药的具体要求,构建医疗机构合理用药评价指标体系,采用基于模糊群决策的方法和多指标评价分析法构建医疗机构合理用药评价模型。结果 构建了基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型,并通过实例分析证明了评价模型的可行性。结论 建立的基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型能够对医疗机构的合理用药水平进行科学评价,为提高医疗机构合理用药水平奠定基础。     

Cause of Senescence of Nine Sorts of Flowers

The levels of endogenous phytohormones and respiratory rate in nine sorts of flowers such as Cymbidium faberi Rolfe, Nopalxochia ackermannii Kunth and others were investigated both at full bloom and senescence and meanwhile the effect of exogenous phytohormones on prolonging the blossoms and promoting ethylene production were tested. There is a high content of endogenous ethylene in all the long-lived flowere, about 3–16 folds higer than the short-lived ones. There is a high level of ABA at full blooming flowers of short-lived flowers, in which there is no or only some cytokinins in it, but the ratio of CTK (6BA+zeatin)/ABA is smaller(l.7). The endogenous ABA reached a much higher level at senescence in all nine sorts of flowers, so it is reasonable to consider that it is ABA which plays an important role of regulation in controlling flower's senescence. There is a much higher level of GA3 and zeatin in the long-lived flowers which is not demonstrated in the shortlived ones. The respiratory rate is one of the factors controtling the longevity of flowers, but it does not play a decided role. Application of 6BA and zeatin prolongs distinctly orchid’s longevity, however exogenous IAA through the promotive action on ethylene production, evidently extends the longevity of the flowers of the Nopalxochia ackermannii Kunth.     

棉铃虫钙粘蛋白N端多肽多克隆抗体制备及对Bt抗性的初步检测

用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定。通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,得到35ku的重组融和蛋白,融合表达的包涵体经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16000;利用最终获得的多克隆抗体对室内纯合Bt抗/感品系的棉铃虫中肠钙粘蛋白进行Western blot分析,结果显示敏感和抗性品系之间有明显差异,表明其能够应用对Bt抗性进行初步检测。     

龙胆科药用植物化学成分的研究现状

龙胆科植物在我国的分布范围很广,且多数为药用植物,其多数种属的药用植物,至今其化学成分尚未被系统研究。综述了目前龙胆科药用植物的化学成分的研究现状及一般提取方法,对近年来发现的环烯醚萜及裂环烯醚萜类化合物进行了总结,为本科药用植物的更深入研究提供了参考。     

青蒿素生物合成机理研究现状

本文总结了目前有关青蒿素生物合成机理方面的研究,主要包括青蒿素生物合成中生理因子的影响,青蒿素生物合成中间体及前体,青蒿素生物合成细胞定位等。指出了存在的一些问题及今后的研究发展前景。