水稻叶片中过氧化氢与核酮糖—1,5—二磷酸羧化酶／加氧酶降解 …

甲基紫精（ＭＶ）处理水稻植株能快速诱导核酮糖－１,５－二磷酸羧化酶／加氧酶（Ｒｒｂｉｓｃｏ,ＥＣ４．１．１．３９）及其它可溶性蛋白的降解。ＭＶ浓度越高,降解速率越高。ＭＶ能诱发叶片内源Ｈ２Ｏ２迅速积累。光合电子传递抑制剂ＤＣＭＵ（１５０μｍｏｌ／Ｌ）能显著抑制ＭＶ（１００μｍｏｌ／Ｌ）诱导的Ｒｕｂｉｓｃｏ及其它可溶性蛋白的降解;活性氧清除剂抗坏血酸（５ｍｍｏｌ／Ｌ）、甘露醇（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）、苯     

肝癌细胞-胞外基质粘附性与粘附识别序列的相关性

以微管吸吮技术研究了人肝癌细胞在ＩＶ型胶原／层粘连蛋白（ＬＮ）／纤维连结蛋白（ＦＮ）裱衬表面的粘附性。进一步,用四种人工合成肽精－甘－天冬－丝（ＲＧＤＳ）、甘－精－甘－天冬－苏－脯ＧＲＧＤＴＰ）、酪－异亮－甘－丝－精（ＹＩＧＳＲ０和半胱－天冬－脯－甘－酪－异亮－甘－丝－精（ＣＤＰＧＹＩＧＳＲ）研究了肝癌细胞粘附性对两种粘附识别序列ＲＧＤ和ＹＩＧＳＲ的依赖性。为了归纳和整理实验结果,根据竞争性抑制的     

利用荧光原位杂交技术检测导入普通小麦的大赖草染色质

利用以大赖草基因组ＤＮＡ为探针的荧光原位杂交技术对导入普通小麦的大赖草染色质进行检测。结果：９１）根尖体中花粉母细胞时期均可用于检测大赖草染色质。间期核中杂交信号点数与所含大赖草染色体数目之间的对应关系依染色体显强Ｃ－带末端数不同而不同;（２）利用荧光原位杂交,从普通小麦－大赖草单体异附加系的减数分裂前植株＾６０Ｃｏ－γ射线辐射后代中检测到一批大赖草端着丝粒染色体和小麦－大赖草染色体易位等结构变异     

文摘

基因工程９８０１３４人工纤维状蛋白：一篇综述［英］／ＨｅｓｌｏｔＨ．／／Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ．－１９９８，８０（１）．－１９～３１［译自ＤＢＡ，１９９８，１７（１９），９８－０８２７８］从以下方面综述了人工纤维状蛋白（ＡＦＰｓ）：家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏ...     

EoRab43参与游仆虫细胞内大核周围的物质运输

Rab家族蛋白是真核细胞内膜泡运输途径中重要的调节因子。EoRab43是八肋游仆虫中一种编码非典型Rab蛋白的基因。本研究依据已获得的EoRab43基因序列设计引物．从八肋游仆虫大核DNA中扩增了EoRab43基因的3’端153bp片段,即EoRab43 153bp（对应于EoRab43蛋白的C末端50个氨基酸,EoRab43C）,构建重组表达质粒pGEX—EoRab43,53bp转化大肠杆菌BL21（DE3）进行表达．纯化后的融合蛋白GST—EoRab43C免疫BALB／c小鼠制备多克隆抗体。经检测,制备的抗体具有较高的效价及良好的特异性。利用制备的抗体对EoRab43在游仆虫细胞内进行免疫荧光定位．结果显示该蛋白主要定位于该生物细胞内大核染色体的周围。     

视黄酸诱导细胞分化分子机制的研究进展

本文从视黄酸（ＲＡ）对早期即刻反应基因表达,多种蛋白激酶活性变化及核转录因子ＡＰ－１和Ｑｃｔ－３／４基因转录产物功能、白血病细胞对ＲＡ出现抗生的可能原因以及ＰＲ蛋白在ＲＡ诱导造血干／祖细胞,白血病细胞分化成熟中的调节作用,ＰＲＢ与其它核转空蛋白的相互关系等方面分析,综述了近年来有关ＲＡ诱导细胞分化可能的分子机制。     

持续皮下输注赖脯胰岛素治疗老年非初诊2型糖尿病患者临床观察

目的：观察比较持续皮下输注赖脯胰岛素与常规注射预混赖脯胰岛素对老年非初诊2型糖尿病患者的疗效与安全性。方法：将58例老年2型糖尿病患者随机分为观察组（29例）与对照组（29例）,观察组用赖脯胰岛素经胰岛素泵持续皮下输注（CSI-I）,对照组用精蛋白锌重组赖脯胰岛素25注射液,2次／d,常规皮下注射。两组患者均给予糖尿病教育、饮食控制及适量运动,共治疗2周。比较治疗前后两组患者的血糖、胰岛素用量、血糖达标时间以及低血糖发生率。结果：治疗后两组患者空腹血糖、餐后血糖均较治疗前下降（P〈0．05）,观察组血糖达标时间、胰岛素用量均明显低于对照组（P〈0．05）。两组低血糖发生率无明显差异。结论：持续皮下输注赖脯胰岛素具有较好的疗效与安全性,是控制老年非初诊2型糖尿病患者较佳的方法。     

朱顶红精细胞超微结构观察

精细胞是双受精作用的直接参与者,是生殖生物学中的重点研究对象之一。以往的研究表明,应用连续超薄切片和计算机辅助三维重组技术,结合免疫荧光定位,发现两个精细胞在体积和细胞器含量上存着差异,即精子的二型性,而且与营养细胞核三者构成紧密功能单位却雄性生殖单位（MGU）。微管对精细胞的性状的确定、运动和维持MGU的动态结构稳定具有重要的作用。本文应用透射电镜。详细观察了朱顶红花粉管中细胞的超微结构,并着重微管结构及其分布的观察。朱顶红成熟花粉为两细胞型。成熟花粉于26℃、黑暗条件下,在液体培养基（含10％蔗糖和100ppm硼酸）中培养13－18小时,然后收集花粉管,固定,供电观察并照相。朱顶红成熟花粉培养13小时后,生殖细胞在花粉管中完成核分裂和胞质分裂等两个过程。形成两个精细胞。形成的两个精细胞前后排列,营养核前导并靠近花粉管顶端。领头的精细胞的细胞质以很大的表面与营养核相互融合（图版1－1,2）,有时营养核与两个精细胞彼此穿插、缠绕（图版1－3）。两精细胞之间的壁上具有多胞质通道和含均质电子密度中等的基质（图版II－4）。精细胞质在核与共同壁之间的区域染色较深,经高倍放大,观察到此处含丰富的微管, 自由分布,但以纵向或斜向为主（图版II－5,6）。所有的微管构成松散的桶状网络存在于两精核之间,除此之外,其他区域无微管分布（图版II－7）。培养18小时之后,两精细胞的共同呈网状（图版II－8）,此时微管均成纵向排列,平行于细胞长轴,构成筐状结构包围状精核,但不构成紧密的束状,证明了前人的免疫荧光观察结果。从以上观察结果我们可以得出如下的结论,朱顶红花粉为两细胞型,因此在花粉管中形成的两个精细胞一般前后排列,跟在营养细胞后面,这种线状排列方式在其他植物中也观察到,可能有利于三者作为一个结构功能单位在花粉管中移动和对花粉管狭窄空间的进化适应。MGU形成得较晚,在生殖细胞和营养核进入花粉管后才形成,并一直维持到精核形成,与其他报道不同。精细胞发育过程中,微管的分布方式变化显著。精细胞中微管的分布仅限于共同的细胞壁和靠近茎核之间的区域,总体构成一个松散的桶状结构。精细胞发育后期,微管均成纵向排列,包围着精核,极似生殖细胞筐状的微管结构形式。     

人胰岛素原类似物(BKRA)基因的合成与表达

为了利用基因工程生产胰岛素,按照已知的人胰岛素Ａ、Ｂ链氨基酸序列和大肠杆菌偏爱的氨基酸密码子设计并合成了人胰岛素原类似物（ＢＫＲＡ）基因,其中以赖（Ｋ）－精（Ｒ）二肽编码区取代人胰岛素原Ｃ肽编码区．为了避免其编码蛋白在大肠杆菌中表达时被降解,通过人工接头将２个ＢＫＲＡ基因串联起来,接头部分氨基酸序列为Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ．将串联的ＢＫＲＡ基因克隆到表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋）,实现了在大肠杆菌中的融合表达,表达产物以包含体形式存在,约占细菌总蛋白２４％．表达产物氨基末端具有六组氨酸肽段,以ＨｉＴｒａｐ凝胶进行亲和层析,一步纯化可达纯度９５％以上．放射免疫测定表明,纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性．表明已构建成人胰岛素原类似物的高效表达菌株     

朱顶红精细胞超微结构观察

精细胞是双受精作用的直接参与者,是生殖生物学中的重点研究对象之一。以往的研究表明,应用连续超薄切片和计算机辅助三维重组技术,结合免疫荧光定位,发现两个精细胞在体积和细胞器含量上存在着差异,即精子的二型性,而且与营养细胞核三者构成紧密功能单位即雄性生殖单位（ＭＧＵ）,微管对精细胞的性状的确定、运动和维持ＭＧＵ的动态结构稳定具有重要的作用。本文应用透射电镜,详细观察了朱顶红花粉管中精细胞的超微结构,并着重微管结构及其分布的观察。朱顶红成熟花粉为两细胞型。成熟花粉于２６℃、黑暗条件下,在液体培养基（含１０％蔗糖和１００ｐｐｍ硼酸）中培养１３－１８小时,然后收集花粉管,固定,供电镜观察并照相。朱顶红成熟花粉培养１３小时后,生殖细胞在花粉管中完成核分裂和胞质分裂等两个过程。形成两个精细胞。初形成的两个精细胞前后排列,营养核前导并靠近花粉管顶端。领头的精细胞的细胞质以很大的表面与营养核相互贴合（图版Ⅰ－１,２）,有时营养核与两个精细胞彼此穿插、缠绕（图版Ⅰ－３）。两精细胞之间的共同壁上具有很多胞质通道和含均质电子密度中等的基质（图版Ⅱ－４）。精细胞质在核与共同壁之间的区域染色较深,经高倍放大,观察到此处含丰富的微管,基     

增溶抽提β－银环蛇毒素结合蛋白及某些突触前毒素对其结合的抑制作用

β－银环蛇神经毒素阻遏神经肌肉接头递质释放的作用机理，可能与它结合于一种突触前的电压依赖的Ｋ~＋通道有关。本文报告了从大鼠膈肌膜组分中用去垢剂ＴｒｉｔｏｎＸ－１００增溶抽提β－银环蛇毒素结合蛋白的结果。这种结合蛋白抽提液的比结合活性为２００－４００ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，比膜制备物的比结合活力提高约一倍。抽提得率为５０％－７０％。抽提液与~（１２５）Ｉ标记的β－银环蛇毒素的结合可被曼巴蛇神经毒素（ｄｅｎｄｒｏｔｏｘｉｎ）完全抑制，其ＩＣ_（５０）约８×１０~（－８）ｍｏｌ／Ｌ。但另一种β型神经毒素，β－蝮蛇神经毒素（β－ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｔｏｋｉｎ）却完全不能抑制这种结合。这提示，β－蝮蛇毒素与β－银环蛇毒素具有不同的作用位点。     

人红细胞膜上阴离子交换蛋白和葡萄糖运输蛋白的相互影响

用细胞松弛素Ｂ抑制红细胞膜上葡萄糖运输蛋白（ＧｌｕＴ－１）对葡萄糖的运输,观察到对阴离子运输有促进作用。当ＧｌｕＴ－１结合其底物分子－葡萄糖后同样加快了阴离子运输速率．另一方面,实验办给出了葡萄糖跨膜运输特性和Ｃｌ－离子浓度的关系,表明随着Ｃｌ－离子浓度的加大能使葡萄糖运输过程中Ｋｍ减小、Ｖ（ｍａｘ）增大。这些结果表明了在完整红细胞膜上阴离子交换蛋白Ｂａｎｄ３和ＧｌｕＴ－１之间存在着双向联系,即一种膜蛋白的构象改变能影响另一种膜蛋白的功能。     

精-甘-天冬-丝氨酸四肽对二磷酸腺苷诱导大鼠血小板活化的信号转导的影响

本工作在二磷酸腺苷（ＡＤＰ）活化的大鼠血小板上,观察精－甘－天冬－丝上肽（ＲＧＤＳ肽）对血小板聚集、蛋白磷酸化、蛋白激酶Ｃ和丝裂素活化蛋白激酶活性的影响。结果发现,５０μｍｏｌ／ＬＡＤＰ引起血小板聚集时,蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ０及丝裂经蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性增加,并引起９５和６６ｋＤ蛋白磷酸化。应用５０,１００和２００μｍｏｌ／ＬＲＧＤＳ肽与基共同孵育,呈浓度依赖地抑制ＡＤＰ引起的血小板聚集和对ＰＫ     

大鼠精核蛋白的纯化

用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核,用盐酸胍法提取总碱性蛋白（Ｔｏｔａｌ　ｂａｓｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ,ＴＢＰ）。通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１００分子筛层析,其第三峰用５％ＴＣＡ沉淀,得到纯大鼠精核蛋白（Ｒａｔ　ｐｒｏｔａｍｉｎｅ,ＲＰ）。ＲＰ也可用ＴＢＰ通过ＨＰＬＣ反相柱得到纯化,ＲＰ位于２６％－２８％乙腈梯度。     

莱茵衣藻和斜生栅藻蛋白核的染色方法优化

蛋白核（pyrenoid）作为真核藻类重要的、相对独立的固碳结构,在CO2高效浓缩和固定过程中发挥中重要作用,可为开发高效生物固碳技术提供理论支持。染色法是快速观察蛋白核的最佳方法之一,有助于深入研究蛋白核的结构和功能,但目前对染色法仍缺乏系统研究。本文以较易染色的莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）和较难染色的斜生栅藻（Scenedesmus obliquus）为材料,探讨了碘染和溴酚蓝（BPB）染色观察蛋白核的方法。结果表明,碘染法最适用于蛋白核外周淀粉观察,最适染色液浓度和时间分别是0．1％～0．2％（w／v）和5min。热激预处理和溴酚蓝染色相结合的蛋白核染色效果更好,优化条件为：70℃水浴热激40s,0．05％（w／v）BPB染色15min。本方法为研究微藻蛋白核提供了一种快速有效的直接观察方法。     

基质蛋白:治疗HIV-1感染的新靶点

HIV—1基质蛋（matrix protein,MA）在HIV-1生命周期中的侵入融合、核运输及组装等环节中起着十分重要的调节作用。其结构中的N末端的核定位信号N（nuclear localization signal,NLS）是介导整合前复合体（preintegration complex,PIC）的核运输所必需的。MA在HIV—1复制中所起的关键作用以及核定位信号区的高度保守性,使它成为寻找新的作用机制和不易产生耐药性的抗艾滋病药物的新靶点。目前已报道了多种靶向MA核定位信号区的抑制剂。该文介绍HIV-1MA的结构、主要功能及靶向该蛋白质的抑制剂研究。     

急性低氧下β-内啡肽参与对大鼠体液免疫的抑制性调节

正常大鼠脑室注射β－内啡肽（β－ＥＰ）（１ｎｇ／ｒａｔ）使溶血素生成和鸡卵白蛋白的ＩｇＧ抗体产生受到明显抑制,脾脏单个核细胞ＤＮＡ含量也下降,７ｋｍ４８ｈ低氧同样使溶血素的产生明显下降,大鼠脑室注射阿片受体阻断剂钠屈酮（ｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ）可使低氧造成的ＩｇＧ和溶血素生成抑制翻转,低氧抑制的脾脏单个核细胞ＤＮＡ合成得到部分阻断,脑室注射β－ＥＰ与７ｋｍ低氧１２ｈ一样使脾脏中儿茶酚胺含量增加,因而     

穿梭蛋白—细胞核与细胞浆之间物质信息传递的载体

穿梭蛋白是一类可以在细胞核与细胞浆中穿梭往返的蛋白质。目前发现的穿梭蛋白都为多功能蛋白,它们进行核／浆穿梭的主要生物学功能是在胞核及胞浆之间充当运输载体及进行信号传递。穿梭蛋白的跨核膜转运均通过核孔复合体进行,然而不同蛋白质的出入核机制却各不相同。对这类蛋白的研究将使我们加深对蛋白擀完全生物学功能的理解,使我们进一步意识到核孔复合体结构和功能的复杂性及精密性,同时也为我国寻找将靶蛋白在细胞内定位的     

玉米离体活性精细胞质膜的凝集素荧光标记(英)

采集纯系玉米708新鲜花粉,经含35％蔗糖的BKS培养液温育、2mmol／L的Mes缓冲液（Sue0．44mol／L,0．1％BSA,pH6．7）胀破后,以10／15／30％Percoll不连续密度梯度离心,获得活性精细胞。选用了6种FITC-凝集素（RCAI、ConA、WGA、SBA、PHA－L和UEAI）标记离体活性精细胞质膜。经荧光显微镜观察发现,10％～35％的精细胞可由FITC－ConA、FITC－WAG、FICT－RCAI所标记。在相应的单糖抑制实验中,未观察到被标记的精细胞。亦未观察到被FITC－SBA、FITC－PHA－L和FITC－UEAI所标记的精细胞。结果表明,玉米精细胞质膜分布有甘露糖、葡萄糖、半乳糖及乙酰氨基葡萄糖等残基。     

视黄酸促进NIH3T3细胞与纤连蛋白粘附的机制研究

视黄酸（Ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ,ＲＡ）是细胞的分化诱导剂。近年来发现ＲＡ能广泛作用于细胞,引起一系列生理功能改变,并能使多种肿瘤细胞向正常细胞分化。ＲＡ对细胞基本生物学行为－细胞粘附的影响了解甚少。我们发现３２μｍｏｌ／Ｌ ＲＡ能使ＮＩＨ３Ｔ３细胞与纤维蛋白（ＦＺｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ,Ｆｎ）的粘附能力增加２０％。但并不促进细胞与多聚赖氨到的粘附。采用抗整合蛋白α５亚基单抗和抗整合蛋白β１亚基单