石蜡包埋组织中DNA的提取

从石蜡包埋组织中提取DNA,是进一步研究抑癌基因的基础,而石蜡包埋组织中提取到的DNA往往已被降解成小分子且量微,作者经多次摸索试验,改进了一些步骤,取得了较好的抽提效果。     

石蜡包时组织的DNA提取及其在免疫球蛋白基因重排…

基因重排分析在淋巴瘤诊断中具有重要意义。文章应用改良ＤＮＡ提取方法。从３０例淋巴生性病变石蜡包埋组织获得的ＤＮＡ虽有不同程度的降解,但适于ＰＣＲ扩增Ｉｇ重链箕因重排分析;约１／３病例提出高分子量ＤＮＡ,可用于ＤＮＡ印迹杂交。因此,石蜡包埋组织同样可为某些疾患,如淋巴瘤凝难和罕见病例的回顾性分子病理学研究提供基因诊断的ＤＮＡ来源。     

改良CTAB法用于多年生植物组织基因组DNA的大量提取*

根据多年生植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对现有的DNA提取方法进行了改进。通过增加提取缓冲液中b-巯基乙醇用量,简化氯仿/异戊醇抽提液步骤,改用经-20℃预冷异丙醇沉淀DNA等,对CTAB法加以改进。改进后方法具有以下优点：（1）获得的DNA质量良好,提取过程无明显的DNA降解,基本上排除了多酚物质的干扰;（2）用获得的DNA进行Southern杂交,可得到理想的杂交信号,可满足相关的分子研究要求;（3）操作简便。Abstract It is a difficult problem to isolate high quality DNA from plants containing a high contents of polyphenolics and polysaccharose, such as Actinidia plant. The protocol described in this paper is a modified CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide) method. High quality genomic DNA can be isolated from Actinidia plant using the improved method. The DNA is good enough for Southern blot and other uses in DNA research. The protocol is also efficient for quick and macro-DNA extraction.     

石蜡包埋组织的DNA提取及其在免疫球蛋白基因重排分析中的应用

基因重排分析在淋巴瘤诊断中具有重要意义.文章应用改良DNA提取方法,从30例淋巴增生性病变石蜡包埋组织获得的DNA虽有不同程度的降解,但适于PCR扩增Ig重链基因重排分析;约1/3病例提出高分子量DNA,可用于DNA印迹杂交.因此,石蜡包埋组织同样可为某些疾患,如淋巴瘤疑难和罕见病例的回顾性分子病理学研究提供基因诊断的DNA来源.     

线粒体DNA修复系统相关酶的研究进展

线粒体DNA（mtDNA）编码线粒体电子传递系统的亚单位以及构建翻译机器所需的各种rRAN和tRNA。mtDNA编码的每一个亚单位都是线粒体完成正常的氧化磷酸化过程所必需的,因此,线粒体DNA的完整性对于生物体的生存十分重要。长期以来,人们一直认为线粒体中不存在DNA的修复。近年来在线粒体提取物中却检测到了一定数量的修复因子,提示线粒体中存在DNA的修复。主要对线粒体修复系统中相关酶的研究进展进行综述。Abstract: Mitochondrial DNA（mtDNA） encodes subunits of the mitochondrial electron transport system and the rRNAs and tRNAs required for constructing the mitochondrial tranlational machinery.Each subunit encoded by mtDNA is essential for normal oxidative phosphorylation.Thus,integrity of the mtDNA is crucial for the survival of organisms.It has long been held that there is no DNA repair in mitochondria.But in recent years,a number of repair factors have been found in mitochondrial extracts,suggesting the presence of DNA repair in mitochondria.This review summarized recent progress of enzyme in mitochondrial DNA repair processes.     

陈旧皮张中DNA提取的新方法

对传统的馆藏陈旧皮张标本DNA提取方法进行了改进,所提DNA分子量可达1kb,而且具有样品用量少（约0.01g),消化时间短（约14h)和操作步骤简单等优点,利用所提DNA,对小熊猫等珍稀动物线粒体DNA的细胞色素b和控制区序列的部分片段进行了PCR扩增,序列测定和比较分析,证实所提DNA合格而无污染,完全可以用于珍稀动物保护遗传学研究。     

膜翅目昆虫干标本的基因组DNA提取

提出了膜翅目昆虫干标本基因组DNA的提取方法,通过对实验结果和所测得的基因片段（28S D2 rDNA)的分析,表明该方法可行。     

灰树花总DNA的制备及基因组文库的构建A

灰树花是一种珍贵的药用真菌,因为多糖含量较高,较难获得高质量的总DNA,本文提出了一种制备高质量灰树花总DNA及构建灰树花基因组文库的方法。该方法制备的灰树花总DNA,经Sau3AI酶切后,用于构建基因组文库,可得到2×105个转化子/50mg,平均插入片段为14kb。本研究为下一步克隆灰树花中的基因以及进行其他分子生物学研究奠定了基础。Abstract： Grifola frondosa, is a valuable medicinal fungus. High quality total genomic DNA is difficult to prepare due to its high polysaccharide content. A method for the preparation of Grifola frondosa total genomic DNA and construction of Grifola frondosa, genomic library is described. Genomic DNA prepared by this method is digested by Sau3A I restriction enzyme. Constructed genomic library give a titer of 2×105 transformants/50mg , with a average insert size of 14kb. This has paved way for the cloning of other Grifola frondosa genes and molecular biology studies.     

用DNA指纹图技术分析Wistar大鼠的遗传距离

采用JL-02多位点探针和Southern杂交对Wistar大鼠基因组进行了DNA指纹分析,并对国内最具有典型的6个地区9个Wistar大鼠群体内和群体间进行了DNA指纹分析比较。结果表明,DNA指纹图较好地反映了封闭群动物的遗传本质,具有良好的多态性。同一群体不同个体间Wistar大鼠遗传距离主要为0.2~0.6,将不同群体的Wistar大鼠DNA指纹图带进行分析表明,所有群体间的DNA指纹图的遗传距离在0.2~0.7。 Abstract:DNA fingerprinting of Wistar rat were studied with JL-02 Mulilocus probe and Southern hybridization,and comparing with different individuals of nine groups Wistar rat from six national classical area and different groups.It was indicated that DNA fingerprinting could reflect genetic material of outbred strain rat,and were more polymorphic.The genetic distances of Wistar rat were distributed for 0.2~0.6 among different individuals within same groups,and the genetic distances of Wistar rat were distributed for 0.2~0.7 among different groups．     

福尔马林对固定标本DNA提取和扩增的影响

福尔马林被广泛应用于生物标本的长期保存。由于福尔马林可能影响标本DNA的质量,因此需要对福尔马林固定标本DNA的提取和扩增过程进行改进。影响从福尔马林保存标本中提取的DNA质量的主要因素包括福尔马林导致的DNA与蛋白质之间、蛋白质与蛋白质之间、DNA与DNA之间的交联,福尔马林溶液的化学成分、pH值及浓度,标本保存的时间和温度,标本保存部位等。本文总结了目前常用的对标本DNA提取和扩增过程的改进措施及其优点。     

一种快速、无损大豆种子DNA提取方法的建立和应用

基因分型是进行植物基因功能的遗传分析和分子标记辅助育种的重要环节。该研究以大豆(Glycine max)成熟种子为材料, 建立了通过钻孔采集样品、快速提取DNA进行基因型鉴定的方法。用此方法, 一个熟练的工作人员可以在1个小时内完成120个样品的采集和DNA提取; 同时种子钻孔取样后, 不会对大豆种子的萌发造成影响。利用该方法获得的DNA可满足PCR扩增的要求。实验重复性好, 成功率在98%以上。这种快速且无损的大豆种子基因型鉴定方法可以用于鉴定杂交种子、品种纯度以及遗传分析等研究工作。     

杜鹃属基因组DNA提取及RAPD的检定

以杜鹃花属常绿杜鹃亚属井冈山杜鹃树叶为材料,分别采用修改的CTAB法、碱裂解法、SDS法提取基因组DNA。实验表明,三种方法所提的DNA纯度及产率有差别,从综合结果看,以CTAB法最好,其所提到的DNA大小与λDNA（21kb）相似,经检验该法适合杜鹃花属植物总基因组DNA的提取,所得DNA不需纯化就可直接用于RAPD分析。     

血液基因组DNA的快速提取方法

目的:研究血液中基因组DNA的简便快速提取方法。方法:取新鲜抗凝血,以红细胞裂解液除去红细胞,再破碎白细胞,除去杂蛋白,获得基因组DNA。结果:所得基因组DNA完整、无断裂,含量和纯度均较高。以所提基因组DNA作为模板能很好的扩增出p21因子启动子序列,因此该法所提取的DNA是完整可靠的。结论:该法能简便、快速、安全、廉价的提取血液中的基因组DNA,并适用于临床检测和分子生物学研究。     

陈旧家禽血液基因组DNA的快速提取

目的:建立一种从陈旧家禽血液中快速提取基因组DNA的方法。方法:以传统蛋白酶K法为基础进行优化。以陈旧鸡血为实验材料,新鲜抗凝鸡血为对照,经过生理盐水预处理、高浓度SDS裂解液和蛋白酶K消化、酚氯仿抽提后,对产物进行凝胶电泳检测、紫外分光光度检测和PCR扩增。结果:提取时间缩短为5～6h,所得基因组DNA纯度高、产量大,可用于后续分子生物学实验。结论:快速从陈旧家禽血液中提取DNA的方法被成功建立。     

一种从人血凝块中提取基因组DNA的方法

介绍了一种新的从人血凝块中提取基因组DNA的方法,用该方法提取的DNA成功地应用于PCR和限制性酶切等后续实验中。基本过程为首先机械粉碎,然后高盐高EDTA溶液处理,含蛋白酶K和SDS的消化液变换温度消化,苯酚氯仿抽提。     

DNA提取对微生物多样性测序分析的影响

运用高通量测序技术分析复杂样品中微生物种群的变化情况,已经成为目前微生物研究领域的热点问题之一。而微生物的样品准备,如DNA提取和16S可变区的扩增等,对于测序完成后的数据分析以及微生物原始群落组成的影响是至关重要的。采用国产试剂盒(天根土壤微生物基因组提取试剂盒)和进口试剂盒(MOBIO土壤微生物基因组提取试剂盒)分别对土壤样品和羊瘤胃食糜样品进行DNA提取。然后选取总DNA起始量为25ng,对16S V3可变区进行PCR扩增和文库构建,最后通过数据分析比较不同试剂盒提取的DNA对微生物多样性变化的影响,包括OTU数目、稀释曲线、微生物数量及物种种类等。研究发现,在相同DNA模板量和PCR条件下,进口试剂盒提取的DNA能够获得更多的微生物种类。     

基于RAPD分析用百合DNA的提取

对百合DNA的提取过程进行改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法。结果表明,该方法提取的百合DNA在1％的琼脂糖胶电泳上为清晰的一条带,RNA去除干净,无降解现象,分子量大于23kb,OD200nm/OD280nm值为1．80-2．00。DNA的质量符合百合RAPD（随机扩增多态DNA）分析要求,在百合遗传多态性分析和品种分子鉴定中具有良好的应用前景．     

Noncryogenic Preservation of Mammalian Tissues for DNA Extraction: An Assessment of Storage Methods

Reliable field methods for the storage of tissues to be used for DNA extraction and amplification are critical to many studies employing molecular techniques. Protection from DNA degradation was compared among three commonly used methods of noncryogenic storage of tissues over a time scale of 2 years. All three methods prevented DNA degradation during storage for at least 6 months. DMSO (dimethyl sulfoxide)-salt solution provided the best protection from DNA degradation of tissues stored for up to 2 years. High molecular weight DNA was recovered from lysis buffer in which tissue was stored for 2 years, however, moderate amounts of degraded DNA was also present. High molecular weight DNA was recovered from tissues stored in ethanol for 2 years, however, the yield was relatively small compared to the other two noncryogenic storage techniques. Much of the DNA degradation in ethanol preserved tissues appeared to occur during the extraction procedure and can be reduced by soaking the tissue in lysis buffer for a few hours prior to beginning the extraction. The yield of PCR products was greatest from DNA extracted from DMSO-salt solution preserved tissues, whereas DNA from tissues stored in either lysis buffer or ethanol produced lower yields.     

古DNA提取技术新进展

古DNA是揭示古代生物生长状态以及生物千百万年来进化情况的最重要的信息载体,在治疗人类遗传性的疑难病症及牲畜饲养和粮食作物种植等方面都有重大的贡献。古DNA提取技术作为获得该重要的信息载体的最重要手段,长久以来受到了世界各地的考古学家以及医学研究学者们的高度重视。随着科学的发展,古DNA提取技术已经形成多种核心方法:Chelex-100法、酚-氯仿抽提法、二氧化硅(硅粒)法、NaOH法、硅离心柱法试剂盒、磁珠法试剂盒等方法。本文将根据最新的研究成果对以上提到的几种方法进行分析比较,以期能够为将来古DNA提取技术的发展创新提供新的思路与方向。