玉米中哺乳动物细胞凋亡相关基因rb同源序列的检出及其荧光原位杂交

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是当今发育生物学研究的热点之一。成视网膜细胞瘤 (ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ ,ｒｂ)基因是动物中第一个被克隆的肿瘤抑制基因 ,当细胞中缺失ｒｂ产物时 ,导致细胞凋亡。本研究采用Ｓｏｕｔｈ ｅｒｎ杂交技术 ,进一步证明玉米和水稻基因组中具有ｒｂ基因的同源序列 ,并利用染色体原位杂交技术 ,首次确定了这一序列在玉米染色体上的位置。1　材料和方法1 1　实验材料供试玉米 (ＺｅａｍａｙｓＬ .)品种为“黄早四”和“大红袍” ,供试水稻 (ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ .)品种为“鄂早 6号”。人ｒｂ基因的…     

原癌基因ras在玉米中同源序列的检出及其荧光原位杂交定位

原癌基因ｒａｓ是动物中抑制细胞凋亡的重要基因之一。以人的ｒａｓ基因为探针,通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术,确证玉米和水稻中均含有ｒａｓ基因的同源序列;同时,运用荧光原位杂交技术,首次对ｒａｓ基因在玉米中的同源序列进行了定位。结果表明：ｒａｓ探针在第２号和第７号染色体上均检出了杂交信号,信号检出率分别为１０．８５％和１４．１５％,杂交信号与着丝粒的百分距离分别为 ５４．９２± １．９０和 ９４．６２± ２．７７。上述研究结果为植物细胞凋亡的进一步研究提供了线索和帮助。     

玉米(Zea mays L.)中凋亡相关基因c-myc同源序列的检出及其染色体原位杂交定位

原癌基因c-myc是普遍存在于动物组织中的一个高度保守的细胞凋亡相关基因,决定着多种动物细胞的凋亡。我们首次以人c-myc的基因组DNA为探针,用生物素标记的原位杂交和酶联级联放大检测系统在玉米中检出了c-myc基因的同源序列,并对其进行了染色体物理定位。在第5染色体长臂近末端、第4染色体长臂近着丝粒及第1染色体短臂近着丝粒处检测到杂交信号,信号与着丝粒的百分距离分别为96.21±4.46、24.11±0.47和10.02±1.04,本结果为寻找和研究植物细胞凋亡基因提供了重要线索。     

哺乳动物凋亡相关基因p53同源序列在玉米(Zea mays L.)中的检出及其染色体原位杂交定位(英文)

p53基因普遍存在于动物组织中,是一个高度保守的肿瘤抑制基因,对细胞的生长、增殖和分化等多种发育程序进行调控。p53基因也是一个重要的细胞凋亡相关基因,决定着多种动物细胞的凋亡。有报导：用人P53抗体和p53基因的cDNA探针在玉米（ZeamaysL．）中检出了P53的同源蛋白及相应的mRNA,并初步确定其在功能上与动物中的P53蛋白非常相似。本实验首先用人p53基因的cDNA为探针,经SouthernBlotting初步确定其同源序列的存在（Fig．1）,然后进一步用生物素标记的原位杂交（DAB－ISH）和荧光原位杂交（FISH）对这些同源序列进行了染色体定位。DAB－ISH（Plate1）和FISH（Plate2）得到了一致的结果,在5S（第5染色体短臂）次末端、IL（第1染色体长臂）近末端、8L中部、3L中部近着丝粒以及9L近中部均镜检到p53基因探针的杂交信号,信号与着丝粒的百分距离分别为70．0±3．2、89．1±1．3、50．5±1.1、37．0±0．3和66．7±2．0（Tab．1,Fig．2）。利用异源探针是寻找植物凋亡相关基因的一种重要手段,也是目前国外的研究热点之一。本研究首次从DNA水平上证明了p53基因在玉米中的存在。为寻找和研究植物细胞凋亡基因提供了重要线索。     

ZFX基因同源序列在黄鳝基因组中的检出及其染色体定位

以大熊猫锌指蛋白基因Zfx为探针 ,在黄鳝基因组DNA中检测到一条长约 9 5kb的杂交带。依据哺乳类和爬行类动物锌指蛋白基因 (ZFX/Zfc)编码第 7～ 13个锌指结构的DNA序列保守性设计引物 ,在黄鳝基因组DNA中仅扩增到一条 5 12bp的DNA片段。将此片段克隆至载体 pBS中 ,从雌性、雄性个体中分别挑选 4个含有插入片段的白色克隆进行测序。测序结果表明 ,这些克隆中插入片段的核苷酸序列一致。该DNA片段在核苷酸水平上与人类ZFX和ZFY分别具有 88%和 87%同源性 ,但其与美洲鳄鱼Zfc的同源性可达 90 % ,而在氨基酸水平上则分别存在 95 9%、95 9%和 93 5 %的同源性 (170个氨基酸 )。该基因命名为黄鳝锌指蛋白基因Zfa ,并运用FISH将其定位于黄鳝 1号染色体 ,距离着丝粒的相对位置为 6 0 1± 0 38。通过进一步研究证明 ,黄鳝 1号染色体上存在有真兽类哺乳动物X染色质同源的保守片段 ,该保守片段有可能就是哺乳动物X染色体起源和进化的原始物质基础之一。应用哺乳动物X染色体连锁的其他基因在鱼类开展染色体比较定位研究 ,将有望促进脊椎动物性染色体进化的深入研究     

核酸原位杂交及其应用于哺乳动物基因定位的进展

核酸原位杂交应用于基因定位的研究是在七十年代发展起来的。这一技术的基本原理是利用核酸分子的碱基顺序配对的互补性(A:T,G:C),将已知的有同位素标记的外源核酸与细胞标本的染色体上经过变性解聚后的单链 DNA,通过二者特定碱基顺序的互补,结合成专一性的核酸杂交分子,经放射自显影方法     

玉米中抗病基因myb1和NDR1同源序列的荧光原位杂交物理定位

以烟草和拟南芥中的单拷贝抗病基因ｍｙｂ１和ＮＤＲ１作探针,利用荧光原位杂交的方法分别对这两个基因在玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）和烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）、玉米和拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ（Ｌ．）Ｈｅｙｎｈ．）中的同源性做了研究。杂交结果表明ｍｙｂ１和ＮＤＲ１的同源序列分别位于玉米第８、５染色体,单个信号位置表明０这两个基因的同源序列在玉米基因组中只有     

细胞凋亡相关基因研究进展

细胞凋亡研究已成为当今国内外研究的新热点,本就近年来有关与细胞凋亡相关的基因或因子研究的进展做一综述,着重阐述了ｂｃ１－２、ｍｙｃ、ｐ５３和ＡＰＯ－１／ＦａｓＴＧＦβ１等对细胞凋亡的影响和作用,以期有助于进一步提示细胞凋亡的分子机理。     

生精细胞凋亡相关基因

细胞凋亡(apoptosis)是一种基因控制的细胞生理性自杀行为,用以维持细胞数量的相对恒定,可由某种刺激或抑制剂的移除而激活。在哺乳动物精子发生过程中,各级生精细胞都会发生相应的凋亡,通过严格调控以确保成熟精子生成的数量和质量。生精细胞的凋亡是一个许多基因参与的复杂的不可逆过程,其中Bcl-2/Bax基因族、p53基因、Fas-Fasl基因、C-myc基因、CREM基因、HSP基因族、c-Kit/SCF基因、Insl3基因、iNOS基因、BMP8B基因、TR基因和存活蛋白(survivin)基因等发挥了重要作用。研究哺乳动物睾丸生精细胞凋亡相关基因,有利于了解生精细胞凋亡机制,为进一步阐明精子发生的调控机制,预防和治疗精子发生相关疾病提供重要的理论依据。     

动物细胞凋亡相关基因在植物中的同源笥研究进展

细胞凋亡是由基因调节的主动过程。对动物细胞凋亡相关基因在植物中的同源性的研究发现,dad—1基因的结构和功能在动物和植物中均具有保守性。动物中的其他细胞凋亡相关基因,如ras、myc、Rb、p53、bcl-2 等基因,在植物中均有其同源序列,有的在植物中找到了功能相似的基因。细胞凋亡的调控机制在生物进化过程中,不但具有一定程度的保守性,而且在调控机制上具有多样性。     

哺乳动物精子发生过程中的细胞凋亡及其影响因素

睾丸生殖细胞凋亡是维持精子发生动态平衡,限制生精上皮生殖细胞数量的一个重要生理机制,受多种因素调控。本简要叙述精子发生过程中细胞凋亡的激素调节、基因调控及其他理化等因素的影响及其作用机制。     

细胞凋亡相关基因与人类肿瘤

介绍细胞凋亡相关的基因,以及这些基因的改变在恶性肿瘤的发生、发展及治疗中的怍用。     

TF-1细胞凋亡相关基因的研究

利用近年来发展起来的代表差异分析（cDNA representational differences analysis, cDNA-RDA）技术研究了在人红白血病细胞株TF-1细胞撤除细胞因子后进入凋亡时诱导表达的基因.发现了6个新基因片段.其中有三个经与GenBank nr和dbEST查询均没有发现同源性,已经向GenBank进行登记,登记号分别为U83208,U83279,U83397.此外还发现一批已知基因的表达与凋亡相关,其中包括Hou和人硫氧还原蛋白等, 提示它们在凋亡中可能起作用.这项工作为进一步研究凋亡相关基因打下了良好基础.通过RDA的研究结果,有可能发现人白血病细胞凋亡的特异标记蛋白或发挥作用的重要蛋白,以期为白血病治疗提供理论基础.     

家蚕细胞凋亡相关基因BmICAD的克隆、序列和功能分析及其在精巢中特异表达的初步研究

DREP-1基因在果蝇的细胞凋亡过程中对DNA的降解有重要调控作用。本研究将该基因序 列在家蚕EST数据库中进行同源性检索,把检索到的EST序列进行电子延伸和克隆重叠群拼接,根据拼接结果设计引物进行PCR扩增并克隆测序验证,首次成功克隆了家蚕第一个ICAD基因BmICAD的cDNA： 该cDNA全长844 bp,ORF长522 bp, 编码含有174个氨基酸的蛋白;预测分子量为19.6kD,等电点为4.23,所编码蛋白与果蝇DREP-1的一致性(identity)为36%;虽然Northern印记杂交未检测到信号,但是RT-PCR结果显示,该基因在精巢中特异表达。     

家蚕细胞凋亡相关基因BmICAD的克隆、序列和功能分析及其在精巢中特异表达的初步研究

DREP-1基因在果蝇的细胞凋亡过程中对DNA的降解有重要调控作用.本研究将该基因序列在家蚕EST数据库中进行同源性检索,把检索到的EST序列进行电子延伸和克隆重叠群拼接,根据拼接结果设计引物进行PCR扩增并克隆测序验证,首次成功克隆了家蚕第一个ICAD基因BmICAD的cDNA:该cDNA全长844 bp,ORF长522 bp,编码含有174个氨基酸的蛋白;预测分子量为19 6 kDa,等电点为4.23,所编码蛋白与果蝇DREP-1的一致性(identity)为36%;虽然Northern印记杂交未检测到信号,但是RT-PCR结果显示,该基因在精巢中特异表达.     

哺乳动物性早熟相关基因的研究进展

人类的性早熟是一种病理状态, 而在动物上, 性早熟可能是一个在生产上具有价值的数量性状。一些物种在进化过程中形成了性早熟的特性并能在群体中稳定遗传。性早熟在很大程度上与遗传密切相关, 是一个由多基因决定的复杂性状。文章主要介绍了KiSS-1基因、GPR54基因、LHR基因、FSHR基因、CYP基因家族、ER基因、TGFa基因、IGF-Ⅰ基因、GNAS1基因、HSD3B2基因、SHBG基因、VDR基因等与哺乳动物性早熟的关系。