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用新月弯孢霉11β——羟基化16α——甲基化合物Rs—21醋酸酯 总被引:8,自引:0,他引:8
The conversion of 16 alpha-methyl-Reichstein's compound S 21-acetate (I) to 16 alpha-methyl-hydrocortisone (II) by the mycelium Curvularia lunata AS3.4381 was studied. Maximal 11 beta-hydroxylating activity of the mycelium was found during cultivation of the microorganism by 24h. Inhibition of the ethanol to the 11 beta-hydroxylating activity was obvious. The yield of 55.4% (II) (W/W) could be achieved during conversion of 0.15% substrate at 72 h. 相似文献
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新月弯孢霉原生质体的形成与11β—羟基化反应 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了新月弯孢霉原生质体形成的条件以及 1 1 β-羟基化反应。将培养 1 6~ 1 8h的菌体 ,以0 .6mol/LKCl作为渗透压稳定剂 ,3 0℃下 ,经过 1 %溶壁酶和 1 %纤维素酶混合酶液 ( pH5.6)酶解 4~ 5h ,原生质体释放量达 6.1 1× 1 0 6/ml,再生率为 1 3 .1 %。原生质体细胞具有 1 1 β -羟基化反应的能力 ,氢化可的松转化率为 4 4.4 4%。 相似文献
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甾体C11β—羟基生物转化菌株新月弯孢霉的筛选和鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
文章对甾体C11β-羟某化生物转化菌株-新月弯孢霉的生长和生物转化特征进行了研究。经过反复筛选,最终选出了一株氧化可的松转化率达30%的最优菌株。文中描述了新月弯孢霉菌体生长过程中,菌体干重与PH的变化情况,并通过正交实验确定了该菌株生长的最适培养基配方。经过研究,对新月弯孢霉菌株的生长和生物转化特性及其进行甾体C11β-羟基化生物转化过程有了初步的了解。 相似文献
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甾体化合物RSA的11β-羟基化反应 总被引:2,自引:0,他引:2
原生质体在甾体中的应用起始于Dlugonski在 1984年采用Cunninghamellaelegans转化可的松龙 ( 17α ,2 1 二羟基孕甾 4 烯 3 ,2 0 二酮 )和Hyphodermaroseum转化 6α 氟 可的松龙 16,17 醋酸酯 ( 6α Flu 17α ,2 1 二羟基孕甾 4 烯 3 ,2 0 二酮 16,17 醋酸酯 ) ,发现原生质体具有甾体转化能力[1 ,2 ] 。Sedlaczek进一步采用等重的原生质体和菌丝体进行比较 ,原生质体的羟基化能力较后者提高了 3倍 ,表现出很高的转化能力[3] ,从而引起人们的关注。随后展开了有关原生质… 相似文献
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新月弯孢霉AS 3.4381对新型甾体底物C11β-羟基化 总被引:1,自引:0,他引:1
应用本实验室保藏的新月弯孢霉Curvularia lunataAS 3.4381对新型甾体化合物(Ⅰ)(16α,17β-二甲基-17-丙酰基雄甾-1,4-二烯-3-酮)作为底物进行生物转化C11β-羟基化反应的研究。实验研究结果表明,采用Ⅱ级发酵的工艺,收获新月弯孢霉菌丝体作为生物催化剂,在磷酸缓冲液介质体系中,对化合物Ⅰ的C11位实现β羟基化,生成皮质激素药物。测试数据TLC,MS,IR及1H NMR证明了该产物的化学结构,表明生物转化产物为C11β-羟基-16α,17β-二甲基-17-丙酰基雄甾-1,4-二烯-3-酮。 相似文献
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静息细胞连续两批次生物催化生产氢化可的松 总被引:1,自引:4,他引:1
以新月弯孢霉(Curvularia lunata)的Ⅱ级培养18h的活菌丝作为C11β位羟基化生物催化剂,在选定的含有微粒结晶甾体底物(0.2%,质量分数)17α,21-二羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮的磷酸缓冲液(0.05mol/L,pH6.0)介质体系中,在经过连续两批次约55h的转化反应,底物转化率可维持在较高水平,产物氢化可的松净收率可达60%;从菌丝回收的底物RS可再利用。此工艺提高了生物催化剂的利用率,具有工业应用价值。 相似文献
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选育到一株对16β-甲基-17α,21-二羟基孕甾-1,4-二烯3,20-二酮(Ⅱa)11α-羟基化活性强的犁头霉A28菌株,并发现底物21乙酰化(Ⅱb)可明显提高11α-羟基化的能力。在适宜的转化条件下,Ⅱb投料浓度0.5%,产物16β-甲基-11α,17α,21-三羟基孕甾-1,4-二烯3,20-二酮(Ⅲ)收率为73%,结构经波谱分析确认。 相似文献
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通过对球形红杆菌(Rhodobacter sphaeroides)生长和积累聚卢-羟基链烷酸(PHA)条件的研究,确定采用两段培养法提高PHA的产量。第一阶段提供适合菌体生长的条件:以葡萄糖作碳源,尿素为氮源,光照微好氧培养。第二阶段则提供使菌体积累PHA的条件:补加乙酸钠厌氧光照培养。经两段培养后菌体PHA含量可占细胞干重的45%,PHA产量每升发酵液可达1.7g。 相似文献
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研究了木霉GXC产 β 葡聚糖酶的条件。结果表明 ,最适产酶碳源为麸皮 ,氮源为硫酸铵 ;产酶的最适条件为 :初始pH为 4 0~ 5 0 ,30℃培养 44h。粗酶液经硫酸铵沉淀、SephadexG 2 5、SephadexG 1 0 0和DEAE SephadexA 50柱层析得到纯β 葡聚糖酶 ,SDS PAGE凝胶电泳显示一条带 ,测得分子量为 35kD。该酶最适反应pH5 0 ,最适反应温度为 60℃ ,在 40℃以下、pH4 0~ 5 0酶活力相对稳定。 5 0mmol L以下的Ca2+、Zn2+和Fe2+,以及 1 0 0mmol L以下的Co2+对酶活力有激活作用 ;而Cu2+和Fe3+具有抑制作用。 相似文献
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梨头霉11α—羟基化制备16β—甲基—11α,17α21—三烃基孕甾—1, … 总被引:1,自引:2,他引:1
选育到一株对16β-甲基-17α,21-二羟基孕甾-1,4=-二烯-3,20-二酮(Ⅱa)11α-羟基化活性强的梨头霉A28菌株,并发现底物21-乙酰化(Ⅱb)可明显提高11α-羟工 能力。在适宜的转化条件下,11b投料浓度0.5%,产物16β-基11α,17α,21-三羟基孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮(Ⅲ)收率为73%,结构经波谱分析确认。 相似文献
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利用PCR技术,从扣囊复膜孢酵母的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因 (BGL1),长度为2596 bp,连接到pGEMT载体上,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,使之位于α-因子信号肽下游,且与之同框, 构建成重组质粒pSHL9K。 通过电转化将重组质粒pSHL9K插入到Pichia pastoris GS115菌株染色体中,获得高效表达BGL1基因的毕赤酵母重组工程菌株。重组酶的最适温度为50℃,最适pH为5.4。培养基中β-葡萄糖苷酶活性最高可达47U/mL。 相似文献
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节杆菌9-2菌株转化16a-甲基-3β,17a,21-三羟基-5a-△9(11)-孕甾烯-20-酮-3β,21-二醋酸酯 总被引:1,自引:0,他引:1
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根据多项物理性质,包括熔点、比旋值、分子旋光度、紫外光谱,红外光谱、核磁共振、质谱等的测定,确定节杆菌(Arthrobacter)9-2生物转化3β,17a,21-三羟基-5a-孕甾-3-酮(I)所生成的产物(Ⅱ)的分子结构为17a,20,21-三羟基-孕甾-1,4-二烯-3-酮,其中C20-羟基的构型是β-型。并讨论了该菌转化(I)的可能途径。 相似文献