痘苗病毒载体在病毒疫苗研制中的应用

痘苗病毒载体在病毒疫苗研制中的应用孙劲（中国预防医学科学院病毒研究所,北京１０００５２）随着分子生物学技术的发展及日臻完善,病毒疫苗的制备出现了一些新的动向,继亚单位疫苗、多肽疫苗和抗独特型抗体疫苗之后,又出现了重组病毒活疫苗,即应用基因工程技术,以...     

痘病毒载体构建及其在病毒疫苗研制上的应用

概述了痘苗病毒载体和禽痘病毒载体的构建及其在动物病毒疫苗与医学病毒疫苗研制上应用的进展,进而分析了痘病毒载体疫苗尤其是禽痘病毒载体疫苗的发展趋势。     

天坛株痘苗病毒载体研究与应用概述

1982年,文献首次报道外源基因成功在痘苗病毒WR株（小鼠嗜神经毒株）中获得表达,引起了中国科学家的极大关注。1984年,中国医学科学院病毒学研究所在朱既明院士的组织下成立了痘苗病毒基因表达载体研究协作组,提出使用天坛痘苗病毒疫苗株开发可用于人体的痘苗病毒基因表达载体的新思路。该研究历时10余年,成功构建了痘苗病毒天坛株高效表达载体,并广泛用于外源基因表达、基因工程疫苗研究、单克隆抗体研制和诊断试剂开发。本文简单介绍了该载体的研究及应用,并对载体疫苗存在的问题及发展前景进行了讨论。     

以痘苗病毒天坛株为载体的表达单纯疱疹病毒I型糖蛋白D的重组活疫苗…

从我国分离到的一株单纯疱疹病毒Ｉ型病毒基因组中,分离出含有糖蛋白Ｄ基因的１．２ｋｂ片估,插入带有痘苗病毒天坛株ＴＫ区的持粒ｐＪＳＢ１１７５Ｐ７．５ｋ启动子下游,转染无白血病鸡胚原供细胞,获得带有ＨＳＶ－１－１６８ｇＤ基因的重组痘苗病毒。此株重组病毒在感染细胞膜上表达ＨＳＶ－１－１６８ｇＤ糖蛋白抗原,能与特异性单克隆抗体反应。     

适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体的构建

为构建适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体,利用标记瞬时稳定的原理,在痘苗病毒单选择标记载体psc65的基础上,构建成带有neo和LacZ双选择标记的痘苗病毒载体pVI75.为检验载体pVI75的有效性,将HIV-1合成基因syngpnef插入到载体pVI75上,构建成转移质粒pVI75-syngpnef,并与天坛株752-1痘苗病毒共转染CEF细胞.筛选得到的重组病毒经PCR和Dot blot检验表明,标记基因已被删除,而目的基因被整合到痘苗病毒基因组上.Westem blot检测结果表明,目的基因的表达正确.痘苗病毒载体pVI75的构建使得疫苗株筛选的工作量大为降低,时间大大缩短,为利用痘苗病毒载体构建重组病毒疫苗株的研究提供了参考.     

痘苗病毒载体的特点及应用

痘苗病毒具有宿主范围广,安全,高效表达,插入外源基因的容量大等诸钦优点,是继反转录病毒,腺病毒载体之后又一广泛应用的载体系统。本文对痘苗病毒载体的特点及其应用作了综述。     

痘苗病毒载体研究进展

制备高活性的真核蛋白,必须使用哺乳动物细胞,痘苗病毒为这一工作提供了简便、实用的工具．痘菌病毒宿主范围广,无致癌性,插入长达20多kb的外源基因后仍有感染性,能够高效表达外源蛋白,有效地加工表达产物．而且,痘菌病毒的表达产物可刺激机体免疫系统产生良好的体液免疫和细胞免疫．利用这些特点构建成的哺乳动物细胞高效表达系统将是基因工程药物和基因工程疫苗的有效工具.     

疫苗效果病例对照研究

本文介绍了在无法计算发病率的情况下,计算疫苗效果可采用相对危险度（ＲＲ）。当相对危险度不太大时,ＲＲ近似于比值比（ＯＲ）,在ＲＲ≌ＯＲ时,可用ＯＲ来计算疫苗效果。文内展示了病例对照配对与非配对两种统计方法,并举例加以演示实用计算疫苗效果及求９５％ＣＩ值的方法。     

人类腺病毒载体活疫苗的开发应用研究进展

人类腺病毒载体活疫苗的开发使用近年取得重大进展。文章指明了此类疫苗的研究动向,提出了进一步发展对策,论述了应用前景,从而阐明了腺病毒是重组疫苗的重要载体。     

Vero细胞狂犬疫苗研究和生产进展

自ＷＨＯ推荐Ｖｅｒｏ细胞用于疫苗生产后,国内外相继进行以Ｖｅｒｏ细胞为基质的人用狂犬疫苗的研究和应用,Ｖｅｒｏ细胞以繁殖快,质量可高效控制,不污染外源因子,对不同毒株有广泛的适应性,且可在细胞反应器中进行工业化生产,病毒滴度高、成本低、疫苗质量好,有较大的发展前景。     

乙肝血源疫苗效力试验结果质量分析

本文对６个厂家７年间生年的乙肝血源疫苗效力试验结果进行统计分析,结果表明各厂家的相对效价均值间有差异,各年度相对效价呈上升趋势,原因是试验条件不统一、试验误差大及参比苗效力的显著下降。结果提示应统一动物品系、试剂盒及严格操作并监测参比苗效力的下降趋势以便及时更换参比苗。     

增强乙型肝炎疫苗免疫效果的研究进展

乙肝疫苗对于控制乙型肝炎病毒感染十分重要.近年人们仍在根据免疫学理论和生物工程技术进展不断研发更加科学有效的新型乙肝疫苗.就新型乙肝疫苗设计的免疫机制和提高免疫效果的关键因素作出综述.     

乙肝疫苗快速阻断HBV母婴传播的研究

为获得更快速的免疫应答,用３０μｇ／ｍｌ乙肝血源疫苗以０、２、６周免疫程序对６８名ＨＢｓＡｇ阳性母亲婴儿作了阻断ＨＢＶ母婴传播免疫效果的观察,并和常规的０、１、６月接种方案的结果进行了比较。结果表明ＨＢＩＧ合并乙肝疫苗或单用疫苗组产生抗─ＨＢｓ（＞１０ｍＩＵ／ｍｌ）血清转换率于Ｔ６Ｍ、Ｔ１２Ｍ时分别为９１．８９％,和８３．８７％;８１．０８％和８３．８７％。短程和常规免疫方案婴儿所产生的保护性抗─ＨＢＳ动态比较,表明以０、２、６周免疫后的Ｔ６ｗ、Ｔ６ｍ时的抗─ＨＢｓ有效率分别为１９．３５％和８３．８７％,明显高于０、１、６月免疫者同期抗体水平（Ｐ＜０．０１）。至Ｔ１２Ｍ时两组的阳转率无显著性差异,说明０、２、６周免疫方案能早期诱导出保护性抗─ＨＢｓ免疫应答。     

乙型肝炎卡介苗联合疫苗稳定性的研究

研究乙型肝炎卡介苗联合疫苗中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)组分的稳定性。将连续3批联合疫苗,分别放置于37、25、4℃三种温度条件下,并于1、2、3、6、12、18、24个月时间取样检测,采用ELISA方法检测HBsAg含量,研究不同条件下联合疫苗中HBsAg的变化和HBsAg组分的免疫原性。37、25℃条件下6个月,4℃条件下2a,HBsAg组份含量无明显变化,均在合格范围内。37℃放置1、6个月,4℃条件下放置2a的联合疫苗免疫豚鼠,HBsAg组分的免疫原性无明显变化。乙型肝炎卡介苗联合疫苗中HBsAg组分的稳定性良好,4℃条件下放置2a效力无明显下降。     

乙型肝炎-卡介苗联合疫苗的研究进展

乙型肝炎疫苗和卡介苗均是我国常年生产和使用的生物制品,其安全性、有效性早已被证实。根据我国计划免疫规定,乙肝疫苗和卡介苗必须在新生儿出生后24h内接种。因诸多原因,不能简单地将现行2种疫苗混合使用,而须分2针接种。制备乙型肝炎-卡介苗联合疫苗,可以减少针次,降低副作用。动物试验显示,联合疫苗的免疫效果不低于2种单价疫苗。     

乙肝核心抗原作为免疫载体蛋白的研究进展

乙肝核心抗原由于其天然的颗粒组装能力和特异性激发针对外源表位的体液免疫和细胞免疫作用的特性,成为载体蛋白研究的热点.本简要综述乙肝核心抗原的结构特点、免疫学特性、作为免疫载体蛋白的研究进展及其应用研究.     

重组(CHO细胞)乙型肝炎疫苗细菌内毒素含量检测法的建立

采用鲎试剂法检测重组 (CHO细胞 )乙型肝炎疫苗中的细菌内毒素含量 ,研究了甲醛、硫柳汞、氢氧化铝等疫苗成分对鲎试剂试验的影响。结果表明 ,疫苗中各成分对检测未见影响 ,所以检测本疫苗中内毒素含量时 ,采用鲎试剂法是可行的。同时 ,用此试验方法对本室所生产的重组 (CHO细胞 )乙型肝炎疫苗进行了检测 ,疫苗中内毒素含量全部合格