吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂稳定性的研究

将连续生产并已申报人体接种反应观察的三批吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂,分别于４～８℃、１８～２２℃、３７℃贮存半年、１年、１年半和３０天,然后以小鼠法或豚鼠法对该制剂进行安全稳定性、效力稳定性以及毒性逆转等测试。其毒力安全稳定性试验表明,三批混合制剂中的精制百日咳菌苗在４～８℃贮半年、１年、１年半后、它们的ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;白喉及破伤风类毒素在４～８℃贮存半年,１年、１年半以及１８～２２℃贮存半年和３７℃贮存３０天后,三批测试组的豚鼠均健存且体重增加。在效力稳定性试验中,４～８℃贮存１年和１年半后精制百日咳菌苗的效力与贮存前（分别为２６．７３ＩＵ／ｍｌ、２１．０２ＩＵ／ｍｌ、１９．１７ＩＵ／ｍｌ）无显著性差异（ｔ＝０．１１４;Ｐ＞０．０５）;白喉及破伤风类毒素４～８℃贮存长达１年半后,效力仍在２～３．２ＩＵ／ｍｌ,动物保护率仍可达８０～１００％。三批混合制剂在３７℃贮存３０天后,通过Ｓｃｈｉｃｋ毒性试验及测定ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ各指标显示,精制百日咳菌苗、白喉和破伤风类毒素无毒性逆转。说明该吸附精制百、白、破混合     

吸附精制百日咳菌苗质量控制的研究

本文就吸附精制百日咳菌苗制检过程中使用的菌株、有效组分ＬＰＦ和ＦＨＡ提纯工艺以及毒性,效力等检定方法阳相应的质量控制指标等进行了研究。结果表明,中国Ｃ、Ｓ菌株产毒优于日本Ｔｏｈａｍａ株。ＬＰＦ和ＦＨＡ─ＥＬＩＳＡ用作菌苗工艺各步骤中质控有效组分的产量,是一种快速、敏感和特异的方法。根据５年中菌苗批量生产每ｍｌ培养基ＬＰＦ和ＦＨＡ产量逐年上升趋势,说明生产工艺不断改进完善和操作技术的熟练是提高菌苗产量和质量的关键。制检规程中用作毒性和效力试验的方法,是菌苗安全有效质控的有效实用方法。     

关于吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂配方的实验报告

本文对吸附精制百白破混合制剂的不同配方进行了实验,结果表明,新一代吸附精制百白破混合制剂最佳配方为：精制百日咳菌苗１８μｇＰＮ／ｍｌ、精制白喉类毒素为３０Ｌｆ／ｍｌ、精制破伤风类毒素为１０Ｌｆ／ｍｌ。由该配方组成的吸附精制百白破混合制剂,其中百日咳菌苗的毒性试验ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ三种指标均符合制检规程要求。其效力单位（ＩＵ／ｍｌ）超过规程要求一倍以上,精制白喉和破伤风类毒素的安全试验均符合规程要求,白类效力试验≥８０－１００％,破类效力试验≥０．５－４．５ＩＵ／ｍｌ。上述结果说明本文提出的配方作为新一代精制百白破混合制剂的配方是适宜和实用的。     

无细胞百日咳菌苗的效力试验

<正>近十年来,已研究开发了若干种无细胞百日咳菌苗,并有望取代当今使用中的全细胞菌苗。百日咳菌苗有多种抗原,如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、菌毛混合物(Fim2+3)及69KDa外膜蛋白是无细胞菌苗之所需组分。最近在美国开展了旨在比较全细胞和13种无细胞菌苗免疫原性和反应原生力2期临床试验。这些无细胞菌苗或只含有PT,或由PT与上述的1种或1种以上的抗原组合而成,并已通过化学处理或对其菌体作遗传学修饰消除了毒注。进入2期临床试验的无细胞菌苗,不     

一种全细胞百日咳菌苗效力试验替代方法的建立

<正>全细胞百日咳菌苗的效力通过小鼠保护试验(AMPT)来判定。此法是用不同稀释度的百日咳国际参考苗(ZSPV)和待检菌苗免疫小鼠,14天后脑腔攻击Bordetella百日咳菌18323(100-1000LD50)。 从1951年到1959年,由医学研究委员会进行的现场研究表明,能使小鼠抵抗脑腔攻击的百日咳菌苗也可保护儿童。尽管在AMPT的结果和接种的个体产生的保护力之间有高度的相关性,此试验仍有许多操作上的困难:(i)需要大量可对百日咳菌苗的免疫产生应答的小鼠。这些动物须在适宜的环境中喂养一个月,费用很高;(ii)脑腔注射需要毒株;(iii)实验室间和实验室内的结果有很大的     

关于吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂的现况

本文介绍了现行吸附百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂的现况和新一代吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂人体接种反应和血清学效果观察的结果。     

无细胞百日咳菌苗质量控制指标的探讨

本文介绍了美国、日本关于无细胞菌苗质量控制的检定项目,并就两国不同的质量控制体系进行分析和比较。特别对无细胞百日咳菌苗的效力测定和毒性试验存在的问题提出看法。同时对国内如何加强对无细胞菌苗的质量控制提出建议,以进一步开展研究工作,从而制定出中国国内无细胞百日咳菌苗质量控制的合适指标。     

不同减毒方法对无细胞百日咳菌苗减毒效果的比较研究

采用５种不同的化学减毒方法对无细胞百日咳菌苗的ＰＴ组分减毒效果进行了比较研究,选择出对菌苗的抗原性破坏小、减毒效果确切、减毒时不产生变性蛋白凝块的改进的甲醛减毒方法。     

百日咳、白喉、破伤风、乙型肝炎联合疫苗的实验研究

对制备无细胞百日咳菌苗、白喉、破伤风、乙型肝炎联合疫苗的实验室条件进行了初步探索,实验结果表明,联合疫苗的配方以每毫升无细胞百日咳组分１５－１８μｇ．ＰＮ、白喉类毒素３０ｌｆ、破伤风类毒素７－１０ｌｆ和基因工程乙肝表面抗原２０μｇ为宜,稀释缓冲液选用０．８５％ＮａＣｌ溶液吸附效果较好,动物实验证明联合疫苗中各组分均安全有效。     

Evaluation of Fourth International Standard for Whole Cell Pertussis Vaccine

Whole cell pertussis vaccine is still widely used in many countries. An International Standard is needed for its potency control. The Third International Standard for Pertussis Vaccine was prepared about 40 years ago and its replacement was recommended by the Expert Committee for Biological Standardisation (ECBS) of the WHO. Material in ampoules coded 94/532 was prepared as a candidate replacement and has been evaluated in international collaborative studies which consisted of two parts. The first part, to assess the suitability of the candidate standard by comparing it with the Second International Standard for Pertussis Vaccine (IS2) involved 14 laboratories in 11 countries. The second part to compare the candidate standard with the Third International Standard for Pertussis Vaccine (IS3) involved 16 laboratories in 14 countries. Since 1995 various other studies have included the international standards and the results of these are also considered in assessing likely continuity of the IU for potency of whole cell pertussis vaccine. The preparation in ampoules coded 94/532 was adopted by the WHO ECBS in October 2006 as the 4th International Standard for whole cell pertussis vaccine and assigned an activity of 40 IU per ampoule on the basis of the studies reported here.     

百日咳杆菌69KDa外膜蛋白的分离纯化及生物学特性研究

本文发展了一种从百日咳杆菌Ⅰ相菌株中纯化６９ＫＤａ外膜蛋白的简易方法,将细菌体经加热浸提、乙醇沉淀蛋白、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０柱层析精制而成。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹、光密度仪扫描分析,证明纯化制剂为均一的、特异性的６９ＫＤａ外膜蛋白,其收率为５４．２％,纯度达９９．２％,每微克６９ＫＤａ蛋白制剂中的内毒素含量低于０．８５ＥＵ;ＰＴ残留量小于０．１０５ｎｇ。抗６９ＫＤａ蛋白抗血清能     

无细胞百日咳工艺中PO4^3—影响DTaP免疫效力分析

用0.02mol/L磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产无细胞百日咳（aP）,按《2000年版生物制品规程》制备和检定氢氧化铝吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗（DTaP）。发现用磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产aP组成DTaP免疫效力差异非常显著,后者100％（10／10）合格,前者合格率只有27％（3／11）,用钼兰法测定DTaP中PO4^3-离子浓度。结果表明后者的PO4^3-浓度只是前者的1／10,PO4^3-依次影响白喉、破伤风、百日咳免疫效价。     

用CaG株毒种制备精制狂犬病疫苗的研究

通过对狂犬病毒aG株在金黄地鼠肾细胞上传代培养,获得一种新型狂犬病毒毒株,即地鼠肾细胞适应株(CaG株)[1].由于该毒种具有生产方法简单,成本低廉,且外源因子污染机率小等优点,因此试用该毒种生产精制狂犬病疫苗.在相同条件下,分别用豚鼠脑毒种和细胞毒种各生产3批病毒原液,经相同纯化工艺制备成精制狂犬病疫苗.经初步检定用细胞毒种制备的疫苗安全性良好,疫苗免疫效价与豚鼠脑毒种疫苗无明显差异.     

百日咳菌苗免疫力水平测定两种统计方法的比较

利用生物统计软件对兰州生研所１２年间生产的１４７批百日咳菌苗原液的免疫力进行质反应平行线测定分析（平行线法）,并与《中国生物制品规程》９５版中Ｗｉｌｓｏｎ Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ法（Ｗ－Ｗ）比较,结果表明,质反应平行线测定法的各剂量反应百分率落在经验区间内;ＥＤ５０可信限区间为０．０１６～０．０１４;相对效价９５％可信限区间为０７７５～０．６５５。按合格、不合格、复试三个水平对１４７批百日咳菌苗的免疫力进行了分析与评价。并以中国百日咳菌苗免疫力试验用参考品为对照,对待检菌苗的稳定性及实验一致性进行了质量检测,计得总体回归系数分别为１．５８７９（ｘ２＝６０．９０）和１．３８４９（ｘ２＝１６３．２４）;总体ＥＤ５０分别为０．０１４和０．０１５;待检菌苗总体相对效价０７１４,两法的ＥＤ５０值间及相对效价值间存在很好的相关性（ｒ＝０．８３７６及ｒ＝０．９９４０）。