羊输卵管液中发情相关糖蛋白的性质研究

哺乳动物输卵管液为受精和早期受精卵的发育提供了一个理想的生理生化环境。人们对输卵管液的成分已进行了初步研究,其中发情相关糖蛋白（ＥＧＰ）是被研究的成分之一。ＥＧＰ仅存在在排卵核受精前后的输卵管液中。当受精卵进入子宫区,输卵管液中的ＥＧＰ就消失了。显然,ＥＧＰ是与哺乳动物的早期发育过程密切相关的。尽管人们对ＥＧＰ的确切生理功能尚不清楚,但作为第一步,首先弄清ＥＧＰ的理化性质是十分重要的。本文目的在于研究羊输卵管液中ＥＧＰ的理化性质。本文采用单向（１Ｄ）、双向（２Ｄ）ＳＤＳ－聚丙烯胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和等电聚胶电泳（ＩＥＦ）,结合Ｗｃｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术对ＥＧＰ的性质进行了研究。由于单克隆抗体及花生凝集素（ＰｅａｎｕｔＡｇｇｌｕｔｉｎｉｎ）和ＥＧＰ相结合的专一性很高,所以不必事先对ＥＧＰ进行纯化就可直接进行分析,我们的结果证明羊ＥＧＰ包括两种蛋白质,一种是酸性蛋白,它的等电点为数４．５;另一种是碱性蛋白,其等电点是８．０;这两种蛋白亚基的分子量相同,都是１０ＫＤ。从不同物种间ＥＧＰ这些理化数据上比较,羊和狒狒的非常接近,但和其他动物的有很多不同。我们认为来自不同动物的ＥＧＰ可能是一类性质相同的蛋白质,具有相     

山茱萸糖蛋白的纯化及部分理化性质研究

α-淀粉酶抑制剂广泛存在于高等植物中,能抑制糖类在消化道内的吸收,是一种潜在的治疗糖尿病、肥胖和高血脂的药物。本文采用D101大孔吸附树脂,从山茱萸干果中提取得到粗提物,再经SP Sepharose和Sephacryl S-300柱层析,得到一种具有抑制α-淀粉酶活性的糖蛋白(CoGP)。Sephacryl S-300柱层析,PAGE电泳均证明该糖蛋白为单一组分;在还原条件下的SDS-PAGE电泳中呈现两条蛋白带,其分子量分别是62．O kD和56．8kD,利用Sephaeryl S-300柱层析测定表观分子量为158,9kD,表明CoGP由两个亚基组成;利用苯酚-硫酸法测得其糖含量约为51％;在α-淀粉酶的抑制实验中,山茱萸糖蛋白表现出反竞争的抑制特性。     

FSH促进牦牛输卵管上皮细胞分泌输卵管特异性糖蛋白的研究

为在胚胎共培养过程中添加相关激素提高哺乳动物胚胎发育的研究提供理论依据,本研究探讨了促卵泡生成素(FSH)对牦牛输卵管上皮细胞分泌特异性糖蛋白的影响。体外分离培养牦牛输卵管上皮细胞,并在细胞中添加不同浓度的FSH,作用6 h后运用荧光定量PCR分析输卵管特异性糖蛋白mRNA的表达水平,并用细胞免疫标记对其分泌输卵管蛋白的部位进行分析。结果显示,FSH的浓度为0.5-5.0μg/m L时,输卵管蛋白的表达量随着FSH浓度的上升而增加,在5.0μg/m L的FSH作用后,输卵管蛋白的mRNA表达量最高;浓度超过10.0μg/m L时,输卵管蛋白基因的表达量降低。结果表明,FSH具有促进输卵管上皮细胞分泌输卵管特异性糖蛋白的作用,且具有剂量依赖性,其最佳作用浓度为5.0μg/m L,输卵管蛋白主要由细胞质分泌。     

鸡输卵管胞液中雌激素受体的性质研究

以乙酚(DES)刺激未成年的雌鸡,输卵管增长到0.6到1.0克,胞液中含有的雌激素受体为0.082微微克分子/毫克蛋白,此种受体表现有以下的特性。 1.专一地结合雌性激素。以雌二醇作配基时平衡解离常数是0.25×10~(-9)M~(-1);在输卵管胞液中该受体的结合位点是1356/细胞。 2.硫酸铵沉淀胞液中的雌激素受体已转变成为团聚状态,如在硫酸铵沉淀的过程中有钼酸钠存在则能明显地减少团聚,因此钼酸钠有防止胞液中受体团聚的作用。 3.胞液中雌激素受体进行DEAE—葡聚糖凝胶柱层析,不论有或无钼酸钠存在,均表现为一个单一的峰。     

牡蛎中糖蛋白成分的分离纯化及其性质研究

本文以青岛产牡蛎为原料,通过低温水提取工艺得到牡蛎糖蛋白粗提物,然后用凝胶柱层析(Sephacryls-100 HR)进行纯化,最后用高效液相色谱制备得到纯度较高的物质F22.由SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实F22是纯度较高的单一组分;分子量为34.2 kDa;等电聚焦的结果显示等电点为5.5;红外色谱呈现出典型的糖的特征吸收峰;气相色谱分析结果显示F22的中性单糖是由葡萄糖这一种单糖组成的同多糖;β-消去反应表明F22的糖肽键应为N-型糖苷键.     

沙眼衣原体感染后大鼠输卵管糖蛋白的变化

目的：研究沙眼衣原体（chlamydial trachomatis,CT）感染后,输卵管粘膜的结构及糖蛋白的变化。方法：60只成年Wistar雌性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组单侧卵巢囊接种沙眼衣原体E型株,对照组接种2SP代替沙眼衣原体,分别于接种后第0.5、7、14天取材,在光镜下观察输卵管的结构变化,并采用PAS-Alcian blue染色显示输卵管内糖蛋白组分的变化。结果：对照组输卵管粘膜结构和糖蛋白组分无明显变化;实验组输卵管受损部位主要局限于粘膜层,PAS-Alcian blue染色显示沙眼衣原体感染可导致中性糖蛋白分泌减少。结论：沙眼衣原体的感染可使输卵管糖蛋白组分发生改变,这可能与反复感染的宫外孕、输卵管性不孕的发生有关。     

哺乳动物卵子受精过程中糖蛋白的作用

哺乳动物卵子受精过程中糖蛋白的作用邹记兴（中国科学院南海海洋研究所广州５１０３０ｌ）闻仁龙（湖北省武汉市第三师范学校武汉４３０２００）本世纪５０年代以来,由于哺乳动物卵子体外培养系统的建立和不断完善,科学家们可以直接用哺乳动物的精卵为材料,对受精过程...     

早期妊娠兔子宫液WGA和PNA结合糖蛋白的变化

本文利用凝集素为探针,以蛋白质免疫印渍分析法(Western Blot)研究了早期妊娠(D_1至D_(12),交配日定为D_0)兔子宫液中,WGA和PNA两种凝集素结合糖蛋白的动态变化规律,并用凝胶扫描仪对定性结果进行了定量分析。结果表明,着床前后(D_6、D_7和D_9)子宫液中出现分子量分别为42kd和28kd的两种特异WGA结合糖蛋白,妊娠后出现大量分子量为75kd的PNA结合糖蛋白,于着床前(D_6)达高峰,着床后逐渐减少,至D_(12)消失。可见这三种子宫液糖蛋白均为阶段特异性糖蛋白,与着床关系密切。     

兔输卵管液和血清中维生素A,D,E含量的比较

输卵管液是由输卵管粘膜上皮细胞分泌和输卵管血管渗出的混合液。人和浦乳动物的输卵管液除维持输卵管内渗透压和调节pH值外,还对生殖细胞的进一步成熟、受精、受精卵的卵裂和运输有极其重要的作用。输卵管液内含有水、无机盐、糖、蛋白质和各种氨基酸。有些内含物质还和动物的性周期有关。但有多种生理功能和生殖功能的维生素A、D、E在输卵管液中的含量未见报道。我们采用荧光分析法对不同性周期兔输卵管液中和血清中维生素A、D、E的含量进行了测定与比较。     

虫花菌胞外糖蛋白的分离,纯化及其性质研究

虫花菌发酵液经超滤浓缩、乙醇沉淀、弱酸性阳离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂去杂蛋白后,又经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０纯化得到ＰＧ。ＰＧ经醋酸纤维膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ柱层析,证明是单一均匀的糖蛋白。ＰＧ的分子量为１１．１万。ＰＧ的糖含量为９２．３５％,蛋白含量为７．６１％。ＰＧ用气相色谱、红外光谱分析表明含有Ｄ－甘露糖、Ｄ－半乳糖,其摩尔比是５．９３：１。推测ＰＧ     

动情周期中大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的表达

目的初步鉴定大鼠输卵管中存在与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白,并研究其在输卵管中的定位和不同动情周期中糖蛋白的表达变化.方法根据阴道涂片检查将大鼠分为:间情期(DE)组、动情前期(PE)组、动情期(E)组和动情后期(ME)组.用冰冻切片法、荧光组化技术和共聚焦显微镜技术观察大鼠输卵管中与BS-1结合糖蛋白的分布及表达变化.结果大鼠输卵管中存在与BS-1结合的糖蛋白,并呈节段性分布,即峡部＞壶腹部.动情周期中大鼠输卵管糖蛋白的表达:动情期＞动情前期＞动情后期＞间情期.结论大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白在动情期(E)峡部上皮表达最明显,具有雌激素依赖性.     

丹皮多糖PSM2b的纯化及其理化性质研究

从中药丹皮(MoutanCortex)蒸馏水浸提液得到粗多糖,经DEAE Cellulose 52柱层析分离得到降血糖组分PSM2b,Surperdex200柱层析进一步纯化得到PSM2b A和PSM2b B两个组分,快速层析纯化系统(FPLC)和电泳鉴定为均一的多糖蛋白复合物。FPLC法测定A和B两组分的分子量分别为1.16×105、1.30×104,苯酚 硫酸法测得其总糖含量分别为76.91%、32.00%,Folin 酚法测得其蛋白含量分别为9.90%、42.60%。气相色谱分析PSM2b A的单糖组成为:L 鼠李糖、L 岩藻糖、L 阿拉伯糖、D 木糖、D 甘露糖、D 葡萄糖、D 半乳糖,摩尔比依次为1.00∶0.18∶4.30∶0.50∶1.30∶2.41∶6.97,PSM2b B的单糖组成为:L 鼠李糖、L 岩藻糖、L 阿拉伯糖、D 葡萄糖、D 半乳糖,摩尔比依次为1.00∶1.17∶0.183∶2.34∶4.18。两者的红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β消去反应初步证明所提取的两种糖蛋白不存在O 型糖肽键。     

沙眼衣原体感染后大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化

目的研究沙眼衣原体感染后输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化.方法取25只成熟Wistar雌性大鼠随机分为实验组和对照组,每组5只.对照组接种2SP代替沙眼衣原体,其余每组大鼠均在卵巢囊接种沙眼衣原体D型株.分别于感染后3,5,7,14d处死动物,取输卵管,观察大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白在感染后不同天数发生的改变,其变化可通过荧光显微镜观察与植物凝集素BS-1结合后的荧光强度来检测,并采用HPIAS-1000图文分析系统进行定量分析和SPSS11.0统计软件作统计分析.结果输卵管受损部位主要在粘膜层,富含N-乙酰-D-半乳糖胺的糖蛋白随感染的天数不同,其变化有所不同,尤其以输卵管峡部变化明显.图像分析结果显示:感染第7d时其分泌量最低,感染后第14d其分泌量逐渐恢复,且各组间差异有显著性意义(P<0.05).结论输卵管是精子与卵子结合的地方,也是胚胎早期发育的场所.富含N-乙酰-D-半乳糖胺的糖蛋白可通过参与精卵结合、受精卵卵裂和早期胚胎发育等方式,对受精卵及早期胚胎发挥保护作用.     

山羊发情相关输卵管糖蛋白(gEGP)基因的克隆

哺乳动物的输卵管精心设计了一个独特的液体环境 ,使得雌、雄性生殖细胞的运输及最终成熟、受精和早期胚胎发育能够顺利进行 .其中有一种源于分泌细胞的蛋白—发情相关的输卵管糖蛋白 (ｅｓｔｒｕｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｏｖｉｄｕｃｔｕａｌｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ,ＥＧＰ) ,自从Ｓｕｔｔｏｎ等于 1984年首次在绵羊中发现的[1] ,在其他的物种中 ,如 ,狒狒、人、小鼠、猕猴、牛、羊、猪、仓鼠等 ,也都有发现[2 ,3 ,4] .虽然已有实验数据证明 ,当卵子经过输卵管时 ,它们可与卵子的透明带 (ｚｏｎａｐｅｌｌｕｃｉｄａ ,ＺＰ)和 或卵黄周…     

玉米幼苗萎蔫过程中某些理化性质变化的研究

玉米幼苗在暂时性萎蔫期间失水速率相对较慢,可溶性糖,脯氨酸等渗透调度物质的积累较多,ＳＯＤ活性增加,而在永久性萎缩期间失水速率较快,渗透调节物质减少,ＳＯＤ活性下降,在玉米幼苗萎蔫的全过程中,叶绿素,蛋白质含量及ＣＡＴ,ＰＯＤ活性等迅速下降,质膜透性增大,膜脂过氧化加剧。     

髓鞘相关糖蛋白与神经系统的髓鞘发育和轴突生长

髓鞘相关糖蛋白（myelin-associated glycoprotein,MAG）是免疫球蛋白超家族成员,它由中枢神经系统的少突胶质细胞和外周神经系统的施万细胞表达。MAG定位于直接和轴突相接触的髓鞘膜的最里层,它通过介导胶质细胞与轴突的相互作用参与髓鞘的形成及其完整性的维持。同时MAG也是髓鞘来源的神经生长抑制因子的主要成分。在神经系统发育的不同阶段,MAG显示不同的功能：即发育期促进轴突生长,成熟期抑制轴突生长。其抑制作用主要由髓鞘来源的抑制分子的共同受体NgR介导,在神经营养因子受体p75NTR以及小GTP酶Rho等信号分子的共同参与下完成。     

天然麝香抗炎蛋白质的研究Ⅰ.Mu-a-1的分离纯化及其部分性质的鉴定

天然麝香粉(Musk)经乙醚,乙醇脱脂后,再经4℃水冷渗,水提液低温旋转浓缩,冻干,得到的冻干粉先后经过Sephadex G-25,Sephadex G-50,和Sephadex G-100等柱层析,得到抗炎有效部分Mu-a,将此部分再通过DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-150等柱层析,得到一抗炎有效蛋白质,命名为Mu-a-1。经聚丙烯酰胺凝胶电泳及超薄等电聚焦电泳,以高碘酸-schiff试剂及Coomassie R250染色和分子筛层析,均显示一条区带和一均匀吸收峰。以蒽酮试剂法测定Mu-a-1含糖量在40％左右。经氨基酸自动分析仪测定Mu-a-1是由16种氨基酸组成,其中Glu,Asp等酸性氨基酸居多,等电点(PI=3-4),为酸性糖蛋白。最小蛋白质碎片含374个氨基酸残基。用凝胶过滤法估测其分子量在20万左右。药理实验表明Mu-a-1对巴豆油引起小鼠耳部炎症具有明显的抗炎作用,平均7.5mg/kg剂量下,对炎症抑制率为72.3％,P<0.001。     

淫羊藿根茎的生药学研究

对淫羊藿（EpimediumbrevicornumMaxim．）根茎的药材性状、显微特征和理化鉴定等方面作了系统的生药学研究,表明根茎的结构特征为皮层部位有纤维群。木质部导管沿切线方向排成三列,化学成分试验表明根茎中含有黄酮、生物碱、糖类等多种成分。     

降解性质粒DNA的裂解气液色谱分析

用GC-9A气相色谱仪和PYR-2A管式炉裂解器,对四种降解性质粒DNA进行了裂解气液色谱鉴别,通过对指纹图的分析,较好地区分了不同降解性质粒DNA问的差异。证明了裂解气液色谱法分析质粒的可行性。另外,对分析质粒IDNA的邑谱柱、进样量．裂解温度和时间等色谱条件也进行了试验。     

蚕蛹油的性质及氧化稳定性研究

蚕蛹的油脂含量约30％,主要是三甘油酯,磷脂质含量也颇高,约3％左右。在特性值方面其碘值为118,皂化值192,折射率(20℃)1.4759,酸值22—30。蚕蛹油经毛细管色谱分析脂肪酸组成为:油酸占29％,亚油酸6％,亚麻酸36％及饱和脂肪酸28％。因此高含量的亚麻酸和磷脂质是该油的特点。蚕蛹油的贮藏安定性试验在60℃±2℃的烘箱内进行,测定结果显示蚕蛹油的氧化稳定性较好,抗氧剂对蚕蛹毛油贮存安定性的作用不大,但比较而言抗氧剂Ⅰ和Ⅱ比Ⅲ对蚕蛹油的抗氧效果明显。