广东肇庆地区药材金线莲种质资源调查与生态生物学特性研究

为了解粤中药材金线莲[Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.]种质资源的分布情况,对肇庆地区金线莲的生态生物学特性进行了研究。结果表明,肇庆地区金线莲属植物有金线莲和银线兰两近缘种,均处于濒危状态,通常以红叶株型金线莲入药。金线莲为典型的浅根性和中阴性地生兰,种群的适生坡度45°,郁闭度为60%~80%,常见于西南方位常绿阔叶林下,适生温度为12℃~26℃,空气湿度、群落植被结构和土壤腐殖质成分等共同影响自然种群的生长。同时对药材金线莲的濒危原因进行了分析,并提出保护对策。     

刺梨低海拔引种栽培研究初报

1993年2月从保靖县梅花乡海拔300m高的山地引进了一批大果形的刺梨枝条,在低海拔（45.5m）扦插繁殖,经过4个的栽培试验初步弄清了其物候期、结果习性及果实生长动态,为选育适应低海拔栽培的刺梨优良品种提供了科学依据。     

林下栽培西洋参的试验研究

林下栽培西洋参的试验研究袁崇文（贵州省植物园,贵阳５５０００４）ＳＴＵＤＹＯＮＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＯＦＡＭＥＲＩＣＡＮＧＩＮＳＥＮＧＣＵＬＴＵＲＥＵＮＤＥＲＴＨＥＦＯＲＥＳＴＬＡＮＤ￥ＹＵＡＮＣｈｏｎｇ一Ｗｅｎ（ＧｕｉｚｈｏｕＢｏｔａｎｉｃＧａｒｄｅ...     

刺梨低海拔引种栽培研究初报

1993年2月从保靖县梅花乡海拔300 m高的山地引进了一批大果形的刺梨枝条,在低海拔（45.5m）扦插繁殖,经过４年的栽培试验初步弄清了其物候期、结果习性及果实生长动态,为选育适应低海拔栽培的刺梨优良品种提供了科学依据。     

野生皱果赤瓟低海拔地区引种栽培研究

在资源调查的基础上,通过低海拔地区栽培试验,研究了野生珍稀食用植物皱果赤瓟的资源特性和栽培技术.结果表明:不需要采取特殊保护措施,能正常生长发育;能以常规可行和繁殖方式进行生产;能提高产量和品质.为资源开发利用提供了科学依据.     

金线莲组培苗不同栽培期生长量和干物质含量比较

对金线莲Anoectochilus roxburghii组培苗不同栽培期的鲜重、干重与折干率进行比较。结果表明,随着栽培天数的增加,生长量及干物质含量都在不断上升,鲜重增长呈现慢-快-慢的上升趋势,90～150 d栽培期内植株鲜重迅速增加;0～150 d栽培期内植株干重呈不断上升的趋势;30～120 d栽培期内折干率增长明显。根据生长量及干物质含量增长的规律,推荐最佳的金线莲组培苗栽培采收期在120～150 d范围内。     

金线莲HPLC指纹图谱研究

以14批不同来源金线莲药材为原料,采用高效液相色谱法(HPLC),乙腈-甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,建立栽培及野生金线莲(Anoectochilus roxburgii)的指纹图谱,结合相似度分析,探讨金线莲与银线莲(Goodyera hachijoensis)的差异。结果表明,金线莲HPLC指纹图谱标定了24个共有峰,并指认了金线莲苷和葫芦巴碱、鼠李素-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素、Batatasin-Ⅲ等6个共有峰。除3批药材外,其余11批相似度均高于0.910,相似度总体较好。银线莲图谱相似度仅达0.529、0.721、0.698,均低于14批金线莲样品间的相似度。根据相似度评价,认为金线莲与银线莲存在差异,该结果可为分析评价金线莲与银线莲差异提供参考。     

广东鹤山丘陵人工林林下鸟群落研究

2003年5月到2004年4月,在鹤山人工林中张网6353网小时,捕到林下鸟28种110只,平均网捕率为1.73只/100网h。其中冬候鸟的种类和数量分别占整个网捕鸟种类和数量的42.86%和33.64%。优势种是大山雀(P arusm ajor)、白头鹎(Py cnonotus sinensis)和红胁蓝尾鸲(T arsig er cyanurus)。鹤山20a林龄的人工林林下鸟群落具有:种类和数量贫乏、网捕率低、画眉科的鸟少等特点。林下鸟群落的种类、数量、组成和网捕率与植被有关,相思林种类最丰富、网捕率最高;针叶林种类最少、网捕率最低;4种植被类型中林下鸟种类和网捕率大小排序是:相思林>荷木林>桉树林>针叶林。相思林与荷木林有最大的种的相似性(0.43)、而相思林与针叶林种的相似性最小(0.20)。林下鸟丰度和网捕率均存在季节变化,冬季种类最丰富、春季次之、而夏季和秋季种类最少。在针叶林(F3,44=4.514,p<0.01)和荷木林中(F3,44=4.449,p<0.01),林下鸟的网捕率有极显著的季节变化,冬季的网捕率最高、夏季的网捕率最低;而在相思林(F3,44=1.893,p>0.05)和桉树林中(F3,44=1.212,p>0.05),林下鸟的网捕率季节差异不显著。     

不同海拔两种天麻仿野生栽培下产量和品质变化

为促进黔西北天麻的稳产高产以及山区经济的发展,本研究采用完全试验设计的方法,对天麻（Gastrodiaelata Blume）进行仿野生有性繁殖试验,探讨不同海拔下2个天麻品种在产量和品质上的变化,以及栽培天麻的经济效益分析。结果表明,在产量上,海拔1400～1800 m范围内,红、绿天麻以1800 m处的产量最高,其中红天麻的箭麻产量（2836.80 g/m2）、麻种产量（3799.90 g/m2）和箭麻数（38.33个/m2）均显著高于绿天麻;在品质上,红、绿天麻以1800 m处品质最优,其中红天麻在折干率（16.33%）上显著低于绿天麻（19.25%）,而在天麻素（4.43‰）和天麻多糖含量（36.63%）上则高于绿天麻（4.26‰,31.10%）。通过对不同海拔下2种天麻的经济效益分析可知,对黔西北地区来说,在海拔1800 m处栽培红天麻能获得较高的经济效益。     

海拔对新疆野苹果种群遗传特征的影响

新疆野苹果(Malus sieversii)是残遗于亚洲中部山地阔叶野果林的重要建群树种,常分布于海拔1000～1700 m的山麓地带。为了探究其种群遗传特征对海拔变化的响应,本研究选取面积较大、海拔落差大且分布连续的额敏种群作为对象,利用微卫星标记手段对采自6个海拔的123个植株样品的基因型进行分型。通过分析不同海拔样品间的遗传多样性差异与遗传谱系关系,并对样品等位基因的地理分布进行遗传景观分析,来探究海拔对新疆野苹果种群遗传特征的影响。结果表明:不同海拔间存在显著的遗传多样性差异,且呈现了低-高-低的单峰分布格局;低、中、高海拔地带之间的植株样品出现了显著的遗传分化。这表明,海拔对新疆野苹果种群遗传多样性和遗传结构产生了重要的影响。在未来的种质保育工作中,应当充分考虑不同海拔的种质资源。     

金线莲花药发育中多糖和脂滴的分布特征

该研究采用细胞化学方法研究了金线莲花药发育中多糖和脂滴的分布特征,以探索其花药发育中的物质代谢规律。结果显示：(1)在幼小花药中,花药壁的表皮和药室内壁以及造孢细胞中积累少量的淀粉粒。当小孢子母细胞形成胼胝质壁时,药壁细胞和小孢子母细胞中的淀粉粒减少并且出现一些脂滴,这一现象持续到二胞花粉;在二胞花粉中,糖类代谢显著增强;开花时,成熟花粉中积累了较多的淀粉粒和较少的脂滴。(2)金线莲花粉以花粉块形式发育,其特征为;①在造孢细胞时期一些特殊细胞壁就已确定了花粉块的界限;②在小孢子母细胞时期,胼胝质壁覆盖在整个花粉块表面,但内部花粉没有胼胝质壁结构;③二胞花粉后期,孢粉素花粉外壁覆盖在整个花粉块表面,但内部花粉没有外壁。金线莲花粉块发育的这些结构特征对植物花粉发育规律提出了多项疑问。     

有网脉和无网脉金线莲杂交及分子鉴定

对源自福建武夷山道地金线莲种质资源‘武夷1号’有网脉和无网脉植株进行性状观察和药用成分分析,并以二者为亲本进行人工杂交,研究杂交亲和性及杂交后代性状分离规律,利用ISSR和CDDP分子标记对亲本和杂交后代进行鉴定,为福建道地金线莲种质资源进行品种改良提供依据。结果显示:(1)金线莲有网脉植株类黄酮和总多糖含量显著较高,分别为无网脉植株的1.2和1.3倍,但无网脉植株金线莲苷含量略高于有网脉植株。(2)杂交结果显示,金线莲父母本为相同网脉性状组合的杂交亲和性要高于网脉性状不同的组合;杂交后代有网脉、无网脉性状分离比例约为3∶1;推断有网脉为纯合基因型,无网脉为杂合基因型。(3)ISSR和CDDP分子标记联合应用能有效区分金线莲无网脉植株和有网脉植株,也可以用于鉴定杂交后代;聚类分析结果表明,有网脉与无网脉金线莲的遗传距离为0.04。研究结果表明福建道地金线莲不同品系间的药用成分含量差异较大,并支持有网脉金线莲与无网脉金线莲为不同品种(系)的观点。     

台湾金线莲与浙江金线莲多糖含量及抗氧化活性比较研究

台湾金线莲和浙江金线莲均为兰科开唇兰属植物,是民间常用珍稀草药金线莲的主要基原植物,体内富含多糖。该研究采用超声提取法Ⅰ、Ⅱ及溶剂提取法提取台湾金线莲和浙江金线莲的多糖,对比多糖含量差异;利用比色法比较两种金线莲多糖对羟自由基清除能力的差异,并以秀丽隐杆线虫为模式生物,探讨两种金线莲多糖对于过氧化氢氧化压力下线虫寿命的影响,综合评价台湾金线莲和浙江金线莲多糖的抗氧化活性,为选择和培育优质基原的金线莲提供理论依据。结果显示:(1)溶剂提取法对金线莲多糖的提取最为有效,浙江金线莲的多糖含量显著高于台湾金线莲;(2)随着浓度的增加,多糖对羟自由基的清除率有升高的趋势,浙江金线莲多糖的羟自由基清除率显著高于台湾金线莲多糖;(3)两种金线莲多糖均可延长线虫寿命,但两者对线虫寿命的影响无显著差异。研究表明,两种金线莲均富含多糖且具有抗氧化活性,但多糖含量及抗氧化活性在两种金线莲间均存在差异。     

植物激素和接种方式对广西金线莲壮苗生根的影响

该文以广西野生金线莲无菌播种离体茎段为材料,采用单因素对比试验,研究了植物激素(NAA、IBA、6-BA、GA_3、KT、ZT、TDZ、2-IP)以及接种方式(竖直接种和水平接种)对壮苗生根培养的影响。结果表明:与对照相比,生长素有利于壮苗生根,NAA的效果优于IBA;细胞分裂素对壮苗生根的效果依次为6-BATDZKT=ZT 2-IPCK,其中6-BA诱导平均株高8.4 cm,3.6条根,茎粗为2.84 mm,植株生长健壮,诱导效果最好;赤霉素GA_3诱导出的植株高且直,但植株细弱,且抑制根系生长,不利于壮苗生根培养;在激素组合6-BA 0.5 mg·L~(-1)、NAA1.0 mg·L~(-1)处理中,组培苗生长健壮且根数量较多,效果最佳;水平接种能诱导出更多的根系,且便于接种操作,可以节省接种时间。因此,确定广西金线莲最适宜的壮苗生根培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)+香蕉汁100 g·L~(-1)+AC(活性炭) 1.0 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1),最佳接种方式为水平接种。     

广东天井山林区发现角原矛头蝮

2009年4～7月,在广东天井山林区采集到3条角原矛头蝮(Protobothrops cornutus),这是该蛇在我国野外第二次被发现,天井山是新发现的一个分布点。本次野外新发现进一步证实了角原矛头蝮在我国的自然分布,为深入了解该蛇的形态特征及地理分布格局提供了重要基础资料。     

峨眉金线兰的生药鉴别

金线兰属植物形态相似,峨眉金线兰（Anoectochilus emeiensis）为金线兰（Anoectochilus roxburghii）的近缘种。调查发现,市场上常将峨眉金线兰当作金线兰使用,为区分两者,本试验采用生药学鉴定方法观察峨眉金线兰的原植物形态、组织构造及粉末显微特征;采用HPLC-ELSD法测定峨眉金线兰中主要内酯苷的含量。峨眉金线兰叶片为卵形,具有金红色网纹;花不倒置,唇瓣白色,前部裂片长圆状倒披针形,中部两侧各具1枚宽大长圆形的褶片且其边缘具疏锯齿。显微结构中,根茎横切面中皮层宽广,根木质部导管2~5个成束,茎木质部导管1~8个成束;叶横截面叶肉细胞中有大量红色物质,上表皮呈乳突状突起,下表皮气孔较多,气孔以不定式为主;粉末中可见草酸钙针晶和导管。3批峨眉金线兰中金线莲苷和斑叶兰苷（goodyeroside A）的含量分别为32.66~35.21 mg/g和134.41~137.72 mg/g,分别在100~500 μg/mL和200~1 000 μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.51%（RSD=1.56%）和97.50%（RSD=1.54%）。以上特征可为峨眉金线兰的生药鉴别提供参考依据。     

刺梨自然发酵过程中非酿酒酵母多样性分析

【目的】分析刺梨果实自然发酵过程中非酿酒酵母菌群特征,为筛选优质刺梨非酿酒酵母提供参考。【方法】基于Illumina MiSeq高通量测序技术和WL营养琼脂鉴定培养基纯种分离技术,分析刺梨果实自然发酵1 d(F1)、3 d(F3)、5 d(F5)和15 d(F15)4个阶段及YPD培养基富集培养样本中非酿酒酵母种群组成和多样性。【结果】高通量测序分析结果共获得182个OTUs(operational taxonomic units,OTUs),归属于81个属107个种;物种多样性分析结果表明,刺梨果实自然发酵前期,优势非酿酒酵母为汉逊酵母(Hanseniasporasp.)和伯顿丝孢毕赤酵母(Hyphopichiaburtonii),二者在样本F1中分别占42.59%和26.85%;随着自然发酵的不断进行,二者的比例逐渐降低,在第15天(F15),Hanseniaspora sp.和H.burtonii比例降低至7.73%和0.52%。相反,Pichia sporocuriosa和未培养的酵母,随着自然发酵不断进行所占比例逐渐增大,分别由F1中的0.23%和0.33%增至F15中的37.26%和32.62%。此外,采用WL营养琼脂鉴定培养基纯种分离和鉴定技术,从刺梨上分离到Hanseniasporasp.、H.burtonii、克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)、P.sporocuriosa和异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)5种类型的可培养非酿酒酵母。【结论】刺梨果实上存在着丰富的非酿酒酵母菌资源,研究刺梨自然发酵过程中非酿酒酵母多样性,为酵母资源开发和利用奠定基础。     

气候变化背景下基于MaxEnt模型的刺梨潜在适生区分布预测

为阐明气候变化背景下刺梨(Rosa roxburghii)在中国的潜在适生区分布,该研究基于刺梨的自然分布数据及当代(1960～1990)、未来(21世纪50年代及70年代)气候因子数据,采用最大熵(MaxEnt)模型模拟了当前和未来气候情景下刺梨在中国的潜在适生区,并确定影响其地理分布的主要气候因子.结果表明:(1)...     

刺梨GL2同源基因的克隆、系谱树和表达分析

为了观察刺梨果实的果刺细胞学发育过程,该研究以刺梨‘贵农5号''的cDNA为模板,通过RACE克隆获得刺梨中与拟南芥表皮毛形成GL2的同源基因RrGL2,并对该基因进行生物信息学分析和表达分析。结果表明:(1)刺结构在花芽形成早期基部内的细胞首先不断分裂,向外继续发育,中部的细胞变细、变长形成“针”状结构,顶部的细胞逐渐木质化使刺变硬,形成果刺。(2)通过RACE扩增得到RrGL2的cDNA全长2 292 bp,编码763 aa氨基酸。(3)RrGL2具有Homeodomain同源结构域和StAR磷脂酰胆碱转移蛋白的结构域,RrGL2与其他物种编码的GL2氨基酸同源性高度相似,并且系谱树分析揭示刺梨RrGL2和野草莓的GL2密切相关。(4)qRT-PCR分析表明,RrGL2在茎和果实中的表达水平高于其他组织,在花后7周果刺中的表达最高,是3周和5周果刺中的7.87倍和2.10倍。综上结果发现RrGL2的功能与果刺的形成发育密切相关,该研究为刺梨中刺形成的分子机制和育种提供了理论基础。