组培霍山石斛、野生霍山石斛及河南石斛多糖及乙醇溶出物动态积累规律研究

为了揭示不同种源的霍山石斛及其近缘种河南石斛多糖和醇溶性浸出物含量的动态变化规律,为霍山石斛和河南石斛规范化种植及品种鉴定提供依据,采用蒽酮-浓硫酸比色法和醇溶性浸出物热浸法对1~4年株龄的野生霍山石斛、组培霍山石斛和河南石斛的多糖和浸出物含量进行测定。结果表明,不同株龄的组培霍山石斛、野生霍山石斛和河南石斛的多糖、浸出物含量均存在极显著差异。以多糖含量为标准,三者均以生长2年采收为宜,以醇溶物为标准,以栽培三年采收最好。以多糖和醇溶出物总量计,组培霍山石斛以2年采收为宜,野生霍山石斛及河南石斛以3年株龄品质最佳。     

不同产地铁皮石斛主要成分及甲醇提取物HPLC指纹图谱研究

本文采用紫外分光光度法、高效液相色谱法(HPLC)测定铁皮石斛中总黄酮、多糖、柚皮素、石斛酚的含量,同时运用HPLC法建立霍山铁皮石斛及其他产地铁皮石斛甲醇提取物HPLC指纹图谱并聚类分析。实验结果显示不同产地铁皮石斛的主要化学成分含量存在差异,5批霍山铁皮石斛的总黄酮、柚皮素、石斛酚含量较高,多糖含量较低。建立了霍山铁皮石斛的共有指纹图谱模式,5批霍山铁皮石斛具有极高的相似度,在92.6%~94.8%之间,浙江临安、浙江乐清、江苏盐城、云南昆明所产的铁皮石斛相似度在17.5%~41.5%之间。5批来自安徽霍山的铁皮石斛共有峰总面积较高,为9 827.40~14 102.28。其他产地铁皮石斛的共有峰面积在730.27~4 206.20之间,明显低于霍山铁皮石斛。聚类分析结果可分为两大类,安徽霍山为一类,其他产地为一类。霍山铁皮石斛与其他产地铁皮石斛存在一定差异,且小分子成分含量较高。上述结果为进一步研究霍山铁皮石斛化学成分提供参考,为铁皮石斛品质鉴别、质量控制及资源的综合利用提供实验依据。     

霍山石斛多糖吸湿保湿性能及皮肤刺激性研究北大核心CSCD

为探讨霍山石斛多糖吸湿保湿性能及皮肤刺激性,应用干燥器控制湿度对霍山石斛多糖进行体外吸湿(43%、81%)和保湿性能研究,应用皮肤水分测定仪对霍山石斛多糖进行人体皮肤保湿性能研究,应用家兔正常皮肤和破损皮肤进行霍山石斛多糖皮肤刺激性研究。结果显示:霍山石斛多糖体外吸湿率随环境湿度的升高而升高,相对湿度43%、81%的吸湿率强弱为丙三醇>霍山石斛多糖>壳聚糖>海藻酸钠;体外的保湿强弱为壳聚糖>霍山石斛多糖>海藻酸钠>丙三醇,霍山石斛多糖在涂抹后6、8、12 h的人体皮肤保湿率显著高于丙三醇保湿率,12 h显著高于海藻酸钠保湿率,与壳聚糖保湿率无显著性差异;家兔正常皮肤及破损皮肤刺激值小于0. 5。表明霍山石斛多糖具有一定的吸湿保湿性能,且无皮肤刺激性,具有开发为天然保湿剂的潜能。     

霍山石斛多糖吸湿保湿性能及皮肤刺激性研究

为探讨霍山石斛多糖吸湿保湿性能及皮肤刺激性,应用干燥器控制湿度对霍山石斛多糖进行体外吸湿(43%、81%)和保湿性能研究,应用皮肤水分测定仪对霍山石斛多糖进行人体皮肤保湿性能研究,应用家兔正常皮肤和破损皮肤进行霍山石斛多糖皮肤刺激性研究。结果显示:霍山石斛多糖体外吸湿率随环境湿度的升高而升高,相对湿度43%、81%的吸湿率强弱为丙三醇霍山石斛多糖壳聚糖海藻酸钠;体外的保湿强弱为壳聚糖霍山石斛多糖海藻酸钠丙三醇,霍山石斛多糖在涂抹后6、8、12 h的人体皮肤保湿率显著高于丙三醇保湿率,12 h显著高于海藻酸钠保湿率,与壳聚糖保湿率无显著性差异;家兔正常皮肤及破损皮肤刺激值小于0. 5。表明霍山石斛多糖具有一定的吸湿保湿性能,且无皮肤刺激性,具有开发为天然保湿剂的潜能。     

稀土元素对霍山石斛试管苗生长的影响

目的：研究稀土元素镧（La）、钐（Sm）、铱（Ye）对霍山石斛试管苗生长的影响。方法：运用植物组织培养技术在基本培养基中添加不同种类、不同浓度的稀土元素,60d后统计其对霍山石斛试管苗各项生长指标。结果：1／2MS＋10％香蕉培养基中添加l0mg／L Sm、l0mg／L Ye对其试管苗有矮化作用和促使密集的分蘖和生根;添加l0mg／L La促进植株增高、鲜重增加、叶绿素含量提高、芽分化加快、根数目增多、;而添加l00mg/L La对其试管苗生长起明显抑制作用。结论：稀土元素对霍山石斛试管苗的生长有显著的影响。     

安徽省野生石斛属药用植物资源

目的:研究安徽省野生石斛属药用植物资源。方法:野外调查、标本采集、文献查阅。结果:安徽省野生石斛属药用植物共有3种,全部药用,其中仅分布于大别山区的霍山石斛Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng种群数量最少。结论:加强霍山石斛D.huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng的野生资源保护和仿野生栽培,为今后合理利用安徽省野生石斛属药用植物资源提供科学依据。     

霍山三种石斛的内源GA、ABA含量对茎高生长的影响

本文研究了霍山三种石斛生长期的内源激素GA、ABA的变化与茎高生长的相互关系。结果表明：霍山三种石斛茎高生长与内源GA含量呈显著正相关,与内源ABA含量呈显著负相关。合适的GA／ABA比值是影响石斛茎高生长的重要因素。霍山三种石斛中的矮生品种米斛的内源GA含量尽管也较高,但其内源ABA含量一直维持较高水平,尤其生长后期迅速上升,GA/ABA含描比值低可能是其茎高生长缓慢的原因之一。     

霍山石斛和铁皮石斛干花成分含量和抗氧化性的比较

探究同一生长条件下2种石斛干花所含主要成分的种类和含量,并评价成分的抗氧化作用。用国标法检测两种石斛干花的主要成分,用清除DPPH和铁氰化钾还原法研究成分的抗氧化性。霍山石斛干花粗蛋白、维生素C、单宁、总酸、多酚、黄酮含量与铁皮石斛干花的差异显著(P0.05),粗多糖、粗脂肪含量与铁皮石斛干花差异不显著(P0.05),两种石斛干花均含有17种常见氨基酸,其中霍山石斛干花必需氨基酸含量显著高于铁皮石斛干花,两种石斛干花提取液都具有一定的抗氧化性,以霍山石斛干花提取液的抗氧化性表现较强。霍山石斛干花有很高的营养价值和抗氧化性,更具备新食品研究开发和应用价值。     

群体表型性状研究揭示环境与遗传因素对霍山石斛表型及物种分类的影响

石斛属(Dendrobium)种类繁多, 属内物种具有丰富的表型多样性。霍山石斛(D. huoshanense)为我国特有物种, 其与河南石斛(D. henanense)和细茎石斛(D. moniliforme)以及铁皮石斛(D. catenatum)等近缘种表型相似, 在分类处理中存在争议。这种争议很大程度上与植物普遍存在的表型可塑性和代际共存有关。为探究环境和代际间遗传因素对霍山石斛表型性状的影响以及霍山石斛与近缘种的物种边界问题, 本研究观测了安徽省霍山县霍山石斛(野生、林间和温室F₁代、林间和温室F₂代)、野生河南石斛、细茎石斛和铁皮石斛, 共计16个群体2,279株植株的假鳞茎茎长等12个表型性状; 在种内层面, 首次借鉴生态学同质园实验和遗传学代际间性状比较的方法, 对霍山石斛群体表型性状进行差异显著性检验和95%置信区间比较以及主成分和变异系数等统计学分析。在种间层面, 对霍山石斛与河南石斛和铁皮石斛等近缘种群体表型性状进行比较和分析。结果表明, 环境因素对霍山石斛假鳞茎茎长和假鳞茎直径等具有显著的影响, 代际间遗传因素对霍山石斛假鳞茎直径具有显著的影响。霍山石斛与铁皮石斛和细茎石斛等近缘种群体在假鳞茎茎长、假鳞茎直径、花瓣长和花瓣宽等表型性状方面均存在显著性差异和间隔, 但与河南石斛仅在假鳞茎表型性状方面有显著性差异。我们的研究明确了环境和代际间遗传因素对霍山石斛表型性状的影响程度, 为霍山石斛与近缘种等争议物种的分类和鉴定提供了表型证据。     

霍山石斛产业化发展的问题与对策

介绍了霍山石斛的概况,阐述了霍山石斛产业化发展的重要性和可行性。在分析了霍山石斛资源状况的基础上,着重剖析了霍山石斛产业化发展面临的主要问题,提出了相应的对策措施,旨在为霍山石斛的产业化开发与持续利用提供依据。     

霍山石斛超细粉体特性研究

比较不同粒径霍山石斛超细粉的物理性质。结果表明,霍山石斛超细粉体的流动性、润湿性、松密度、持水力、膨胀力及溶解性均显著提高;显微镜及电镜分析表明超细粉的细胞破碎程度更大,粒度更小,形状更不规则。霍山石斛超细粉可广泛应用于保健食品和药品行业,有利于提高体内利用率。     

道地药材霍山石斛及其相似种的分子鉴定

为检测霍山石斛与霍山产铜皮石斛、霍山产铁皮石斛及其它产地的几种药用石斛的差异,对霍山石斛及其相似种进行ISSR分子标记比较研究。结果表明,尽管霍山石斛及其相似种的外部形态差异较小,但在ISSR分子标记指纹图谱上却存在着显著而稳定的差异。因此,根据ISSR分子标记指纹图谱所显示的多态性位点差异,能准确鉴别霍山石斛及其相似种植物及药材。此方法简单、稳定性高、可重复性好,在霍山石斛的分子鉴定研究中有较大的应用价值。     

霍山3种石斛的生长节律及其与生态因子关系的研究

探讨了霍山3种石斛的生长节律及其与生态因子的关系。结果表明：3种石斛生长发育的物候期有明显的差别,米斛新茎的生长集中在3月下旬～8月份,新茎生长期150d左右;铁皮石斛生长集中在4月下旬～9月下旬,新茎生长期154d左右,而铜皮石斛生长则集中于4月初～9月初,新茎生长期160d左右。米斛生长只有一个生长高峰,而铁皮石斛和铜皮石斛生长有双峰现象。石斛虽然是一种生长在高山的阴生植物,但霍山3种石斛全年生长要求一定积温和温度。米斛年积温2070℃,铁皮石斛年积温2256℃,铜皮石斛年积温2248℃。米斛和铜皮石斛生长的最适温度20℃。而铁皮石斛生长的最适温度23℃。8月份温度渐低,当温度回落又可适宜生长时,铁皮石斛和铜皮石斛还有一次小的生长过程,但是米斛仅有一次生长高峰。湿度和光强与生长负相关。适宜的降水也是石斛生长的必要条件。     

霍山石斛内生真菌分离、培养及其促生作用的初步研究

从野生的霍山石斛(Dendrobium huoshanense)根中分离出1株内生真菌SH-01,纯化后以生物量为主要指标对培养条件进行优化,并将内生真菌SH-01与霍山石斛试管苗共生培养。结果表明:与对照相比,该菌株对石斛试管苗的鲜重、株高及分蘖都有一定的促进作用,对株高的增长有显著促进作用(P<0.05),但对鲜重和分蘖的促进作用不显著(P>0.05)。在离体条件下,选择适当的内生真菌与石斛共生培养可以促进石斛试管苗的生长。     

霍山石斛托品酮还原酶基因的克隆及其表达分析

为了探究托品酮还原酶(tropinone reductase,TR)基因在石斛中的功能,该研究采用RT-PCR结合RACE技术,以霍山石斛原球茎为材料,克隆得到霍山石斛TR-I基因的cDNA序列,其在Gen Bank中的登录号为KY912085。TR-I基因的cDNA长1 043 bp,包含一个完整的共807 bp的ORF(open reading frame)(79-885),共编码268个氨基酸。生物信息学分析表明,该蛋白质可能是一种疏水性稳定蛋白质,无信号肽,不含卷曲螺旋结构,具有14个功能位点、47个潜在磷酸化位点,其二级结构由螺旋、折叠和卷曲结构组成。系统进化树分析表明,霍山石斛TR-I与铁皮石斛、金钗石斛的亲缘关系较近,处于同一分支。qPCR结果显示,TR-I基因在霍山石斛不同生长期的相对表达量均表现为茎叶根,且茎和叶中TR-I的表达量均随着生长期的延长呈现低–高–低的变化趋势;在不同品种中,金钗石斛的TR-I基因相对表达量最高,铁皮石斛中最低;不同浓度茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)处理比较,100μmol/L茉莉酸甲酯处理下TR-I基因表达量最高,推测该基因可能参与霍山石斛生物碱的合成途径。     

霍山石斛多糖的分离鉴定及药理活性研究进展

霍山石斛是我国传统医药中的一种名贵中药材,拥有中华九大仙草之首的美誉,明确收录于《本草纲目拾遗》,其干燥茎和鲜品均可入药,具有悠久的药用历史和良好的药用价值。近年来,国内外学者对霍山石斛多糖的结构分析和药理活性等方面进行了大量深入研究,为霍山石斛资源的开发利用提供了理论依据,通过相关文献查阅,本文主要就霍山石斛多糖的分离鉴定及药理活性相关研究进展进行概述,为霍山石斛多糖的进一步研究奠定基础。     

霍山石斛与河南石斛生药学特征比较研究

在植物分类学方法鉴定的基础上,对霍山石斛及其主要伪品河南石斛药材的性状特征,根、茎、叶横切面显微特征,粉末显微特征和粉末中细胞内含物进行了研究,明确了霍山石斛药用部位的性状特征及显微特征,为霍山石斛药材和饮片的真伪鉴别提供参考依据,为该药材的进一步研究、开发、利用及质量标准的构建提供理论依据。     

霍山石斛种子萌发及原球茎发育的解剖结构观察

正霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)根茎具有益精强阴、生津止渴和补虚羸等功效~([1]),被批准实施地理标志产品保护~([2])。为解决霍山石斛种子在自然条件下萌发困难和繁殖周期长等难题,已成功建立其离体快繁体系并工厂化生产~([3]),并对其植株营养器官的解剖结构~([4])及采用茎段诱导类原球茎的发育过程~([5])进行了研究。为进一步明确霍山石斛种子萌发和幼苗生长发育的原理,作者采用植物组织培养和石蜡切片技术,对霍山石斛种子萌发及原球茎发育过程中细胞和组织结构的变化进行了解剖观察,以期为     

霍山石斛与内生真菌共培养体系的建立

将霍山石斛试管苗与内生真菌(SH-01菌株)共生培养,测定其生长状态,筛选最佳共生培养基。研究该培养体系下内生真菌对石斛试管苗生长和移栽成活率的影响。结果表明,适合共生培养基为1/2 MS 10 g/L蔗糖 10 g/L琼脂,内生真菌在共生培养过程中对石斛试管苗的生长有显著的促进作用。     

霍山石斛DhGMDS基因克隆及低温胁迫下表达

基于霍山石斛转录组数据库,利用染色体步移技术,克隆霍山石斛GDP-甘露糖4,6-脱水酶基因(DhGMDS)及其启动子,采用实时荧光定量PCR方法检测该基因的组织表达模式及低温处理下的表达,为进一步解析霍山石斛抗寒机制和遗传改良提供理论依据。结果表明：(1)成功克隆获得DhGMDS基因(GenBank登录号MW855573),其cDNA序列为1 134 bp, gDNA序列为1 523 bp,无内含子。(2)序列一致性分析显示,DhGMDS蛋白与黄花石斛(Dendrobium catenatum)的GMDS蛋白序列相似性达到99.03%;系统进化树分析表明,霍山石斛DhGMDS基因与黄花石斛GMDS基因处于同一进化节点上,二者亲缘关系近。(3)启动子序列分析发现,在DhGMDS基因上游启动子区含有光、低温、干旱和ABA响应元件,且具有MYB等转录因子识别和结合位点。(4)实时荧光定量PCR分析显示,DhGMDS基因在霍山石斛的花中表达量最高,其次为茎、叶,根中表达量最低;经4℃低温处理72 h后,DhGMDS基因受低温胁迫诱导上调表达,且在低温处理24 h的相对表达量最高,表明DhGMD...