吸胀番茄种子中β－微管蛋白的合成与DNA的复制

用免疫检测技术分析了吸胀的番茄种子胚根尖细胞中的β－微管蛋白,并用流体细胞分析仪分析了其细胞核ＤＮＡ的表现形式,发现种子在吸水８～１６ｈ时,即可测得β－微管蛋白的标记,吸水４８ｈ标记密度达到高峰。而细胞周期中Ｇ２期细胞的数目在吸水２４ｈ后才有增加。双向电泳检测,证明种子萌发过程中至少存在３个不同的β－微管蛋白的异构体。用ＰＥＧ渗调引发处理的种子,β－微管蛋白的合成和ＤＮＡ复制速度高,反之,老化种子在这两个过程的速度则低。     

EGF及IGF－Ⅰ对UMR106细胞增殖及β微管蛋白表达的影响

应用３Ｈ－ＴｄＲ参入,流式细胞技术和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ等方法,观察了ＥＧＦ和ＩＧＦ－Ⅰ对ＵＭＲ１０６细胞增殖及β微管蛋白表达的影响。结果显示,两种生长因子分别处理ＵＭＲ１０６细胞１２ｈ,在促进细胞ＤＮＡ合成的同时,β微管蛋白ｍＲＮＡ的表达量明显提高。运用间接免疫荧光技术及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ方法,研究发现两种生长因子可使微管聚合及微管蛋白的表达有所增加。提示β微管蛋白的合成及聚合与细胞增殖间可能存在着一定的相互联系．     

水稻恶苗病菌对苯并咪唑类杀菌剂抗药性分子机理研究初探

用真菌β－微管蛋白基因的丰余寡聚核苷酸引物Ｂ１和Ｂ３,扩增了一段８７１ｂｐ的水稻恶苗病菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ的β－微管蛋白基因片段,进行了克隆和ＤＮＡ序列测定,并根据该序设计了Ｆ．ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ β－微管蛋白基因的特异性测序引物。经过对恶苗病菌对多菌灵具有不同抗性水平菌株的β－微管蛋白基因核苷酸序的比较研究,表明Ｆ．ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ的β－微管蛋白的１６５,１９８。     

濒危植物银杉种子特征的研究

同一株银杉的不同珠果的出种量没有明显差异,说明就同一植株而言,其有性生殖是同步,球果的发育程度比较接近。银杉种子的平均重量０．００１９７ｇ,仅为乔木树种种子平均重量的６％。种子中空粒比例达１６．２４％,反映出较高的种子败育率,饱满的种子中有生活力者仅占５３．５％,银杉种子的吸水过程有３个明显的阶段,０－１ｈ是急剧吸水阶段,１－９ｈ吸水基本停滞９ｈ到１４ｄ吸水果又呈递增趋势。在同样贮藏条件下,播种环     

调节因子IGFⅡ、TNFα、VRF促细胞增殖与β微管蛋白表达的相关性

细胞增殖必伴有染色体的一分为二及细胞质的增生,β微管蛋白则参与细胞的增殖过程．正性和负性调节因子对β微管蛋白的表达及细胞增殖间的相关性研究显示,不同生理剂量的正性调节因子ＩＧＦⅡ、Ｔ３／Ｔ４处理ＵＭＲ１０６细胞１２ｈ,Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ实验发现它们在促进细胞ＤＮＡ合成的同时,可使β微管蛋白ｍＲＮＡ表达增加,呈剂量依赖关系．而负性调节因子ＴＮＦα则相反地在抑制细胞ＤＮＡ合成的同时,使β微管蛋白ｍＲＮＡ表达降低,也呈剂量依赖关系．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验进一步表明,ＩＧＦⅡ可使β微管蛋白表达增加,而ＴＮＦα使β微管蛋白表达降低．由此可见,β微管蛋白的合成与细胞增殖间存在着一定的相互联系．     

紫杉醇诱导的细胞凋亡信号转导

紫杉醇为新型抗微管药物,对许多肿瘤都有明显疗效,尤其是晚期卵巢癌和乳腺癌［１］。它的作用目标是细胞骨架的微管系统,其结合位点在β－微管蛋白Ｎ－端第３１位氨基酸和第２１７～２３１位氨基酸位点上,结合后促进微管蛋白聚合并稳定微管结构,抑制其解聚,进而影响...     

电鳐β—蝮蛇毒素结合蛋白的抽提及其与毒素结合性质的研究

以加州电鳐电器官为材料,探索了用去垢剂ＴｒｉｔｏｎＸ－１００增溶抽提β－蝮蛇毒素结合蛋白 合适条件,建立了此结合蛋白活性的检测方法,并分析了该结合蛋白与同位素＾１２５Ｉ标记β－ＡｇＴＸ的结合性质。     

体眠期和营养期包裹游仆虫的纤毛器骨架及其微管蛋白

应用光镜和透射电镜术,显示了包囊游仆虫休眠细胞中纤毛器骨架的形态,并对该纤毛虫休眠细胞和营养细胞的纤毛器及其α,β－微管蛋白进行了免疫荧光定位的比较研究。由免疫荧光显微术显示,包囊游仆虫形成休眠包囊后,背部毛基体完整地按原有模式保存下来;纤毛杆解聚后微管蛋白多集中在细胞皮层,小部分均匀散布在细胞质中,据所得结果认为,包囊游仆虫形成包囊后,微管蛋白主要有3个去向,即：91）处于自噬泡内被逐步消失;（2）以“微管蛋白库”的形式分布于细胞皮层及细胞质中;（3）保留在残留的基体中,此外,以往研究中发现的棘毛基部网络未被标记上,提示这些纤维体系可能不属于微管系统。     

千里光β-微管蛋白基因结构与功能的生物信息学分析

β-微管蛋白是影响细胞新陈代谢和行使功能的重要结构物质,研究β-微管蛋白基因的序列信息对揭示其蛋白结构与功能具有重要指导意义。从千里光全长cDNA文库中分离得到β-微管蛋白基因,并采用生物信息学软件进行序列分析。结果显示,该基因长度为1750 bp,编码的蛋白质长度为448个氨基酸,与柚子β-微管蛋白的同源性最高,达96%;其蛋白质分子量为50.01 kD,理论等电点为4.83。β-微管蛋白二级结构主要组成为无规则卷曲结构和α螺旋结构;结构域分析发现该蛋白具有两个保守结构域;三级结构预测为相对稳固的类球形结构;信号肽分析将该蛋白主要定位于细胞质、过氧化物酶体、线粒体基质等亚细胞器位置。将该基因序列上传至GenBank所获得的登录号为KF887495。本实验结果为千里光β-微管蛋白的作用机制揭示和应用研究提供了基础数据,也为植物β-微管蛋白基因的分子研究提供了理论依据及基础资料。     

哈茨木霉β微管蛋白基因的克隆与序列分析

根据哈茨木霉T88菌丝体cDNA文库中的β微管蛋白基因EST序列,采用反向PCR方法以哈茨木霉T88的基因组DNA为模板,扩增得到了1.74kb的β微管蛋白基因编码区、1.5kb的5′非编码区和1.0kb的3′非编码区。哈茨木霉β微管蛋白基因编码446个氨基酸,与其它真菌β微管蛋白基因具有较高的序列同源性。对哈茨木霉β微管蛋白的三维结构进行了同源建模,模建的结果为研究哈茨木霉β微管蛋白自身特性及其与抗微管类杀菌剂的作用机制提供了分子基础。     

绿豆根尖细胞微管骨架有丝分裂时相发育变化的研究

提纯猪脑微管蛋白,制备兔抗微管蛋白抗血清,以此抗体与羊抗兔ｌｇＧ－ＦＩＴＣ因清,对绿豆根尖细胞进行间接免疫荧光标记和荧光显微镜检,得到了绿豆根尖细胞有丝分裂微管骨架周期发育变化的时相,如：早前期带,纺棰体微管,成膜体微管等,结果证明了双子叶植物具有与单子叶植物相似的细胞分裂微管周期时相,表明了微管架周期时相变化在高等植物中具有普遍性和共同变化的规律,讨论了微管骨架时相发育变化与染色有丝分裂行为的关     

柳树β微管蛋白基因家族的克隆和序列分析

该研究克隆鉴定了旱柳和龙爪柳β微管蛋白基因,并对其进行了序列相似性、系统发育、染色体定位以及表达模式的分析。结果显示,2种柳树β微管蛋白基因家族各有20个成员,家族内部成员间核酸和氨基酸序列相似性分别在74.0%和86.6%以上,种间同源蛋白氨基酸序列相似性在85.8%以上,柳树与其它植物β微管蛋白间的氨基酸序列相似性在81.5%以上。系统发育分析显示,柳树β微管蛋白家族被分为4个亚组,结合杨树β微管蛋白基因染色体定位,推测柳树β微管蛋白基因家族经历了杨柳科全基因组重复事件和串联重复事件,而柳树TUB11和TUB12可能来源于区段重复或者转座。基因表达模式分析发现,该家族成员的表达具有一定的组织特异性,并且部分重复基因对在所检测组织中表达差异较大。柳树β微管蛋白基因家族成员序列的高度相似性、成员数量的进化扩张、以及表达模式的多样性可能赋予了细胞分裂与生长更高的灵活性,这对多年生木本植物的生长发育习性意义重大。     

八肋游仆虫γ—微管蛋白及其基因的研究

γ－微管蛋白是一种新发现的与微管形成有关的蛋白质。利用ＰＣＲ技术从一种下毛类纤毛虫－八肋游仆虫大核ＤＮＡ中扩增出γ－微管蛋白基因并对其核苷酸序列进行了分析。另外,在有些分裂间期及有丝分裂期的小核内以及部分大核内也发现有γ－微管蛋白存在。     

绿豆芽中微管蛋白异型的研究

采用 DEAE-Sephadex-A50离子交换层析和 PGGE 电泳对绿豆(Phaseolus radiatus L.)芽中的微管蛋白进行分离。Western blot 和免疫点印迹分析发现了两种聚合度不同的微管蛋白异型。单体微管蛋白亚基的分子量为56kD 和56.5kD;四聚体微管蛋白亚基的分子量为54kD 和54.5kD。实验结果表明微管蛋白α、β亚基组装过程是一个相互选择的过程,这种现象可能与微管蛋白基因表达有关。     

二化螟β1微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析

微管是真核生物体内分布最为广泛的一类蛋白,是由a-和β-两种不同的微管蛋白组成的异源二聚体.微管参与许多细胞功能,如细胞形态发生、细胞生长和分裂等.以二化螟3龄幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),扩增得到该虫的β微管蛋白基因的cDNA序列一条.cDNA序列含1 862个碱基,开放读码框1 344个碱基,编码氨基酸447个,分子量约为50.2kD,等电点4.82.氨基酸序列中1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号,是微管蛋白特异片段;氨基酸序列的140～146GGGTGSG位存在一个微管蛋白标志信号片段.序列比对表明,克隆的β微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的,与家蚕Bombyx moriβ1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.1%,与烟草天蛾β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98.7%,与果蝇Drosophila melanogasterβ1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到96.9%.该基因cDNA序列已经登录Genbank并获得登录号为EU429675.     

水稻恶苗病菌(Fusarium fujikuroi)β-微管蛋白基因克隆及与多菌灵抗药性关系

【目的】揭示水稻恶苗病菌(Fusarium fujikuroi)对多菌灵的抗药性与其β-微管蛋白基因的相关性。【方法】结合形态学和TEF-1α基因序列对分离菌株进行鉴定;根据近源种拟轮枝镰孢菌(Fusarium verticillioides)核基因组测序菌株7600的β-微管蛋白核苷酸序列设计引物,采用PCR方法克隆并比对分析了F.fujikuroi对多菌灵不同敏感性表型的5个菌株的β-微管蛋白基因全序列;利用实时定量技术(qRT-PCR)分析了β-微管蛋白基因在上述5个菌株中的表达特性。【结果】F.fujikuroi的β-微管蛋白基因核苷酸序列(GenBank登录号:JQ026022)全长1671 bp,包含4个内含子,编码447个氨基酸残基;2个敏感性菌株和3个抗药性菌株的β-微管蛋白基因核苷酸序列同源性100%;在无药剂处理下该基因在2个敏感性菌株中的表达水平显著高于3个抗药性菌株(p=0.05),且对同一菌株而言,药剂处理能够显著提高β-微管蛋白基因表达水平(p=0.05),但在相同药剂处理条件下,菌株间差异不显著。【结论】F.fujikuroi对多菌灵的抗药性机制与β-微管蛋白无关,有待进一步研究。     

微管蛋白亚型及其功能

微管是真核细胞构成细胞骨架的主要成分,由α/β微管蛋白组装而成。微管在细胞多种活动中发挥着重要的作用,其功能主要受微管结合蛋白、微管蛋白的翻译后修饰以及微管蛋白亚型的调控。已有研究发现,α/β微管蛋白存在多种亚型,微管蛋白亚型在不同组织以及发育过程中的表达模式差异较大。多种微管蛋白亚型基因的突变可以引起神经系统疾病。该文综述了微管蛋白亚型的研究进展,尤其在微管功能调控、神经系统发育及其相关疾病中的作用。     

八肋游仆虫微管蛋白基因家族的鉴定及进化分析

为了系统分析八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)微管蛋白基因家族, 从八肋游仆虫大核基因组中共鉴定得到20个微管蛋白基因, 基于同源比对及系统进化分析, 将其归入α、β、γ、δ、ε及η六个微管蛋白亚家族; 多序列比对及Western blot结果显示八肋游仆虫η微管蛋白基因在翻译过程中需发生一次+1位编程性核糖体移码, 其移码位点为AAA-TAA; 所有自由生纤毛虫都含有多个α和β微管蛋白基因亚型, 可能用于组成不同的微管结构。研究为后续深入探讨八肋游仆虫微管蛋白的生物学功能及微管多样性奠定了基础。     

非遗传性老年痴呆的动物模型及行为学,病理学改变

通过毁损Ｗｉｓｔａｒ大鼠迈内特基底核（ｎｂＭ）建立非遗传性老年痴呆（ＡＤ）动物模型。用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫、六胺银染色、ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ（ＡＣｈＥ）细胞化学、β淀粉蛋白（βＡＰ）和τ蛋白免疫细胞化学及超微结构观察等方法进行行为学及病理学变化研究。结果证明：毁损ｎｂＭ鼠学习、记忆能力下降,乙酰胆碱酯酶ＡＣｈＥ锐减,βＡＰ和τ蛋白样免疫神经元增加,细胞水胞、溶解,溶酶体、微管增加     

棉铃虫β-微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析

β-微管蛋白是构成细胞骨架的重要组成性蛋白,对昆虫的蜕皮、器官形成等生长发育阶段均能产生重要影响。本文以棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)3日龄成虫为材料,利用RACE末端扩增技术克隆得到棉铃虫的β-微管蛋白基因的cDNA序列。序列分析表明:棉铃虫β-微管蛋白基因的cDNA序列包含1775个碱基,包括一个1347个碱基的开放阅读框,编码448个氨基酸组成的多肽。GenBank登录号:JF767013。同源性分析表明,棉铃虫的微管蛋白基因与本研究所比对其它昆虫的β-微管蛋白基因具有高度的同源性,达到90%左右。本研究克隆得到棉铃虫的β-微管蛋白基因的cDNA序列,对进一步深入研究该基因功能有重要意义。