共查询到19条相似文献,搜索用时 46 毫秒
1.
2.
中温碱性脂肪酶的研究:Ⅰ.高产菌株—扩展青霉PF868的选育 总被引:10,自引:1,他引:10
以扩展青霉(Penicillium expansum)uN-503作为出发菌株,经UV,DES和NTG多代诱变,选育成功产酶水平高达1200u/ml的优良变株——扩展青霉PF868,其酶活力较出发菌株提高了111%;连续传代10次PF868变株的产酶性能并没有衰退,是一个稳定的变株;PF868变株产酶的最适碳氮源和pH与出发菌株有显著的差异;其酶学特性与出发菌株相比也得到显著改善,最适作用温度由42℃降至32℃,更加适合于洗涤剂和工业脱脂用酶的要求. 相似文献
3.
碱性脂肪酶产生菌扩展青霉W—1382的诱变育种 总被引:2,自引:0,他引:2
以扩展青毒(Penicilumexpansum)S-14作为出发菌株,分别比较UV、Co60-γ射线、NTG单因子的诱变效应和以NTG、Co60-γ射线、UV+NTG作为诱变剂及自然分离在内四代的诱变育种。单因子诱变剂最适剂量分别为UV150s,Co60-γ射线48000rad,NTG300μg/ml80min,比较诱变效果表明:NTG最佳,Co60-γ射线次之,UV较差;连续三代诱变各代诱变剂及剂量分别为NTG300μg/ml100min,Co60-γ射线20000rad,UV30s+NTG150μg/ml,40min。复合处理比单因子处理效果好。实验中选育成功高产酶变株W-1382,结合自然分离和诱变育种,其酶活力较出发菌株提高了53.6%。 相似文献
4.
5.
本文报导扩展青霉PF868产生的碱脂肪醇在动物皮革及皮毛脱脂工艺上的应用。试验结果表明:碱性脂肪酶20 ̄30u/mL的浓度在pH9.0和温度30 ̄35℃条件下对猪皮、绵羊皮、兔皮及旱獭、狐狸和水貂皮毛具有良好的脱脂效果,脱脂率在80%以上,高于传统碱法(Na2CO3)和表皮活性剂法(JFC)。碱性脂肪酶不仅可脱尽皮板深层油脂,而且可以软化皮板。酶法脱脂的成革其抗张强度、伸长率、撕裂强度以及崩裂高度 相似文献
6.
中温碱性脂肪酶的研究——Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其酶学性质 总被引:1,自引:0,他引:1
扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉.该酶分子量为23442Dal.酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在7.0—10.0之间.Ca~(2+)Mg~(2+)对酶有激活作用.Fe~(2+)、Cu~(2+)和Mn~(2+)对酶活力有抑制作用. 相似文献
7.
中温碱性脂肪酶的研究Ⅱ.扩展青霉PF868变株产酶条件 总被引:4,自引:0,他引:4
本文报道中温碱性脂肪酶高产变株扩展青霉(Penicillium expansum)PF868的产酶条件。研究结果表明PF868最适产酶条件为:碳源玉米粉,氮源黄豆饼粉,起始pH7.5,产酶培养温度26℃,移种量10%;亚适量的豆油有利于产酶;700ppm的泡敌不抑制菌丝生长且有利于产酶;适量的非离子表面活性剂Tween和Span类有利于菌丝生长和脂肪酶的释放。 相似文献
8.
D92P点突变对扩展青霉碱性脂肪酶最适作用温度的改善 总被引:2,自引:0,他引:2
利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3.5K—lip-D92P。将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达。与野生型表达产物PEL-GS相比较,突变体表达产物PELD92P—GS最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性与野生型相当;突变体在40℃下的表达量为109U/mL,约为野生型的29%。结果分析表明,Pro替代Asp^92后,可能是由于Pro一级结构的特点,使酶结构更加稳定,在高温下更适于与底物结合。 相似文献
9.
10.
本文报道在已获得的碱性淀粉酶生产菌L-49的基础上,通过硫酸二乙酯再诱变,经过利福和氨苄青霉素抗性筛选,获得相应的抗性菌株。初始PD10条件下,发酵同期48h,碱性a-淀粉酶活力比出发株提高20%以上。 相似文献
11.
耐碱性脂肪酶产生菌的选育及酶学性质的研究 总被引:9,自引:1,他引:9
从山东省济南市植物油厂的含油土壤中分离筛选到一株耐碱性脂肪酶产生菌,经初步鉴定为丝孢酵母属(Trichosporon)对该菌株脂肪酶合成受制霉菌素及琥珀酸的影响的情况进行了研究,经诱变筛选抗药性突变株,使酶活力提高了155%,还对该突变株的产酶条件及酶学性质进行了研究,并对有关机理进行了讨论。 相似文献
12.
P197E与ep8叠加突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为提高脂肪酶的热稳定性,作者利用重叠延伸PCR对扩展青霉脂肪酶(PEL)基因进行了体外定点突变,构建了P197E(即将第197位的脯氨酸突变为谷氨酸)与随机突变体ep8叠加突变的重组质粒pPIC3.5K-ep8-P197E。将该质粒电转化至毕赤酵母Pichiapastoris GS115中,进行异源表达。与野生型酶和单点突变酶PEL-ep8的酶学性质比较,结果表明:叠加突变体PEL-ep8-P197E在40°C温育处理30min后,残余酶活分别比野生型PEL和随机突变体PEL-ep8提高了42.13%和37.3%。叠加突变体PEL-ep8-P197E的Tm值为41.51°C,比野生型酶PEL提高了2.81°C,比随机突变体脂肪酶PEL-ep8提高了2.25°C。通过对脂肪酶PEL的叠加突变,提高了该酶的热稳定性,并为结构与功能的进一步研究提供了材料。 相似文献
13.
从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出6株产热稳定碱性脂肪酶菌株。其中菌株1-7产脂肪酶能力较强,其最高酶活为8.67U/mL。根据其16S rDNA序列分析和Biolog生理生化分析,初步鉴定为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)。初步酶学性质研究表明该菌所产脂肪酶具有较好的热稳定性,最适作用pH为9.0。摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为(g/L):玉米粉10,黄豆饼粉20,K_2HPO_4 1,NaNO_3 5,橄榄油10。最适产酶条件为:初始pH 8.0,培养温度37℃,培养时间29 h。接种量为2%,250 mL摇瓶装液量为30 mL。 相似文献
14.
E83V对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体。含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在Pichia pastoris GS115中表达。对突变体表达产物PEL-E83V-GS与野生型表达产物PEL-GS作了比较:前者最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性基本不变;突变体在37℃下的表达量为188U/mL,约为野生型的80%。最适作用温度的提高可能是由于83位亲水性的Glu用疏水性的Val取代,增加了脂肪酶表面的疏水作用,使其在高温下更适于与底物的结合。 相似文献
15.
嗜硫色谱分离纯化碱性脂肪酶及其氨基酸序列测定 总被引:1,自引:0,他引:1
扩展青霉(Penicillium expansum)FS1884所产生的碱性脂肪酶经硫酸铵沉淀、Sephacryl S-200柱层析后,再经嗜硫色谱(Thiophilic Chromatography)柱层析,被纯化了173.8倍,最终比活为5694.9U/mg。纯化后的脂肪酶达到了SDS-PAGE电泳纯、PAGE电泳纯以及毛细管液相色谱(Capillary Liquid Chromatography)纯。该脂肪酶N-端氨基酸序列测定的结果是:A T A D A A A F P D L H R A A K L S S A,与来自青霉属其它真菌脂肪酶一级结构作了比较。 相似文献
16.
17.
18.
A rapid and effective method for direct detection, selection and testing of microorganisms able to produce both cell-bound
and extracellular true lipases is described. The method is based on formation of clearance zones on turbid solid media with
emulsified olive oil around or under the colonies, cell fractions or culture supernatant of lipase-producing organisms. The
method was successfully applied for the screening and isolation of microorganisms producing alkaline lipases.
The article is published in the original. 相似文献