免疫金银染色鉴定斑点热群立克次体方法的建立

本文将免疫金银染色技术应用于斑点热群立克次体的鉴定,建立了方法,对4株斑点热立克次体和1株Q热立克次体的鉴定获得了初步结果,并与免疫酶标染色法进行了比较。结果表明,免疫金银染色法的特异性同免疫酶标染色法,可将不同种斑点热立克次体区分开;而前者的效价一般高于后者2—8倍。文中还讨论了洗涤、显色、衬染等条件对结果的影响。     

斑点热群立克次体的PCR／SSCP分型技术研究

本文应用PCR／SSCP技术对斑点热群立克次体国际标准株、国内各参考株及黑龙江立克农作54株、36株进行了分型鉴定。结果显示各株之间SSCP图谱差异明显,国内各参考株的SSCP,图谱与西伯利亚立克次体的图谱完全一致,黑龙江立克次作的图谱与国内各株显著不同。分析表明,我国存在2种斑点热群立克次体,即西伯利亚立克农作种和斑点热群立克次体新种－黑龙江立克次体。同时证明应用PCP／SSCP技术分析斑点热群立克农作型别,具有方法简单、经济省时、结果准确等优点。该分型技术应用于立克次体分型国内外未见报道。     

感染小鼠组织中Q热立克次体的分子病理学检测

腹腔注射Q热立克次体悬液感染BALB／c小鼠,发病后解剖,取主要组织脏器,应用免疫组化和原位杂交检测感染小鼠体内Q热立克次体的抗原分布和DNA在靶细胞中的表达,探讨Q热病变规律及致病机理。结果显示阳性信号多位于单核-巨噬细胞系统细胞胞浆内。结果提示免疫组化和原位杂交技术可以作为Q热特异性的诊断方法,并为致病机理的研究提供线索。     

Q热立克次体在几种单层细胞培养中的比较研究

本文研究了Q热立克次体Grita株在鸡胚细胞等5种原代细胞及FL细胞等3种传代细胞中的繁殖特征。对其在某些细胞中的生长、繁殖性状作了比较研究和讨论。并提示了把这一方法应用于实际工作中的可能性。     

免疫电镜对实验感染小鼠体内Q热立克次体的检出

近年来用免疫电镜技术发现和鉴定病毒的报道日益增多。免疫电镜技术的特点是,利用电镜高度的放大率和分辨能力,能直接看到抗原抗体之间的特异性反应和免疫复合物的形态学特征,故具有高度的敏感性和特异性。这对于发现和鉴定病毒与立克次体是十分有用的。为寻求Q热的快速和敏感的实验诊断方法,我们作了免疫电镜技术检出实验动物中Q热立克次体的初步研究,现将结果报告如下。     

Q热临床类型与其病原学特征相关性的研究进展

Q热表现为发热、自限性的急性或以心内膜炎为代表的慢性疾病,除与机体的状态和抵抗力密切相关外,其病原体Q热立克次体的差异不容忽视.本文从脂多糖(LPS)、质粒DNA和基因组DNA 3个水平,阐述了Q热临床类型与其病原学特征的相关性.     

气相色谱-质谱法对斑点热群立克次体

本文报告应用气相色谱-质谱法分析了13株斑点热群立克欢体(7株中国分离株和6株国际标准株）泛影葡胺密度梯度离心纯化物的全细胞脂肪酸成分。结果表明,各被检测的立克次体株所含主要脂肪酸成分百分含量有区别,所得色谱图经多兀聚类法处埋的7株中国分离株与国际标准株中的西伯利亚立克次体相近,而与其它国际标准株则有明显区别。     

黑龙江立克次体的血清学及分子生物学研究

本文应用血清学方法和分子生物学技术,从不同角度探讨与比较ＳＦＧ立克次体种间的差异,为黑龙江立克次体的分类鉴定提供依据。ｍｉｃｒｏ—ＩＦ、ＩＥ及ｍｉｃｒｏ－ＢＡＰＳ试验表明,黑龙江立克次体的血清反应模式和国际参考株及国内分离株不同,具有独特的抗原结构。进一步应用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和免疫印迹分析,该立克次体结构多肽的数量与分子量和其它立克次体有明显差别,并具有两种特有的主要抗原多肽（２１５ＫＤ与６６ＫＤ）,提示在抗原结构上的差异性。ＤＮＡ限制片段分析证明该立克次体的酶切图谱有明显的特征性,易与己知斑点热毒株相鉴别。研究结果表明,黑龙江立克次体可能是ＳＦＧ立克次体一新的血清型式种。对人的致病力需进一步研究。     

Q热的诊断治疗及免疫予防(续完)

<正> 五、免疫予防 对于生物战最适宜的予防措施是在人群中进行免疫接种,Q热疫苗能够产生极其有效的保护力,然而,现代的要求是需制备不仅具有保护力,而反应小的疫苗。Q热疫苗最严重的不良反应是发生高比率的局部及全身反应,如红斑、硬化、发热、头痛、恶心呕吐和无菌性脓肿。目前通用的接种方法是每隔一周注射一次疫苗,共注射三次。据估计27％可产生局部损害,0.8％可引起注射部位脓肿。在以往接触过立克次体毒株或注射过疫苗的人中局部反应发生率较一般人群高。目前常用以下三种疫苗进行免疫:①灭活立克次体颗粒疫苗,②可溶性抗原,③活疫苗。     

斑点热群立克次体中国分离株rOmpA基因片段的克隆和序列分析

用Rr190.70p-602n引物扩增了斑点热群立克次体（spottedfevergrouprickettsiae,SFGR）中国分离株（BJ－90株、Ha－91株和HLJ－054株）及SFGR国际标准株西伯利亚立克次体（Rickettsiasibiricu）246株和派克立克次体（R.parkeri）的rOmpA基因片段,将PCR产物克隆入pGEM－T载体中,用双脱氧法进行序列测定,并与SFGR的rOmpA基因已知序列进行了比较。结果表明,SFGR国际标准株间rOmpA基因片段的核苷酸同源性为90.06%～96.62%,推定氨基酸的同源性为83.05％～94.35％,中国分离株与国际标准株及参考株rOmpA基因片段比较的结果发现：BJ－90株及Ha－91株与西伯利亚立克次体标准株的核苷酸同源性分别为99．06％和98．31％,推定氨基酸的同源性则为98.87％和96.61％,HL－93株和HLJ-054株与日本立克次体（R.japonica）核苷酸同源性较高,分别为96.62％和95.68％,推定氨基酸的同源性为92．09％和89．27％。在中国分离株内,BJ-90株和Ha－91株的核昔酸同源性高达99．2…     

Q热的诊断、治疗及免疫予防

<正> DerricR首先报导了在澳大利亚的布里斯班和昆布兰屠宰场工人中连续暴发流行Q热。当时由于对病原学和病因缺乏认识,定名为Q热,“Q”表示疑问号“?”的意思。后来该病原鉴定为立克次体,即贝纳氏科克斯氏体( coxilla burnetii)。 Kapl-an和Betagna通过调查发现,它广泛存在于五大洲的51个国家之中。最初作为动物性疾病,但在第二次世界大战期间欧洲有数千士兵发生Q热,从而得出了Q热这种疾病具有军事意义的概念。例如,1943至1944年流行的所谓“巴尔干流感”更影响了德军在意大利、乌克兰,克里米亚半岛、保加利亚和希     

黑龙江立克次体与黑龙江蜱传斑点热研究概况

黑龙江立克次体是近年发现的斑点热群立克次体新种,由其引起的疾病为黑龙江蜱传斑点热。综述了黑龙江立克次体的发现、分离鉴定、病原学和分子生物学特征,介绍了黑龙江蜱传斑点热的流行病学、临床表现及治疗与预防。     

恙虫病立克次体组织培养 Ⅱ.应用兔睾丸单层细胞培养恙虫病立克次体

近年来,组织培养技术进展很快,自Dulbecco,Youngner等氏(1952,1954)以胰酶消化组织获得单层细胞,培养脊髓灰质炎病毒获得成功以来,许多学者都证实多种病毒能于各种单层细胞培养中繁殖,并引起细胞病变,便于观察病毒的繁殖。故目前单层细胞培养技术不但广泛应用于病毒分离培养及鉴定,同时也是研究病毒与宿主细胞间关系及病毒变异等问题的重要工具之一。立克次体一般繁殖较慢,除Q热立克次体外。     

应用PCR技术检测病人血液标本中斑点热群立克次体DNA

本文以聚合酶链反应（PCR）,采用二次扩增法直接检测蜱传斑点热病人血液标本中斑点热群立克次体DNA,结果从7份标本中检出阳性1份,进一步的限制性片段多态性分析证明和斑点热群黑龙江立克次体基因型相同。实验证明：黑龙江立克次体对人具有致病性,同时也证明PCR技术快速、简单、敏感,用于斑点热群立克次体的早期诊断是可行的,并可作出分型鉴定。     

精河株斑点热立克次体在非洲钝缘蜱体内的分布

本文报告用乙二醇甲基丙烯酸(GMA)包埋、切片和姬姆萨染色观察精河株斑点热立克次体在非洲钝缘蜱(Ornithodoros moubata)体内的分布情况。接种立克次体后2天,即可从蜱的血淋巴涂片中查见立克次体,但各器官和组织的切片6天后才开始出现阳性,尤以中肠最迟。叮咬感染的蜱的中肠感染较早也较严重。无论接种或叮咬感染,除睾丸和精子外,所查的器官和组织包括涎腺、基节器、中肠、直肠、卵巢以及雄蜱的附腺和贮精囊等切片中都查见立克次体。有的蜱感染很严重,立克次体充满了许多器官和组织的细胞。     

Q热的诊断治疗及免疫予防(续一)

<正> 二、临床症状感染贝纳氏立克次体可引起急性全身性疾病,表现为突发性不适、寒战、发热、肌肉酸痛和剧烈的头痛。甚至在退热后仍感虚弱和疲倦达数周或数月之久。Q热的临床诊断是困难的,因其症状与流感、急性布鲁氏菌病、伤寒或支原体性肺炎相类似。本病使人极感虚弱,在高加索人中死亡率估计低于1％。根据Derrick在Brisbane(澳大利亚)对237例诊断为Q热的病例的综述,将本病分为三个期。1.潜伏期:Q热的潜伏期约13～37天,平均19～20天。Tigertt对志愿者经呼吸道途径进行实验性感染,用10个ID_5o豚鼠感染剂量的志原感染者潜伏期为17天,使用15000～150000个ID_5o的感染者潜伏期为10     

江苏省东山地区五种恙螨的季节分布

恙螨不仅传布恙虫病,而且已从一些螨种体内分离出鼠型斑疹伤寒立克次体,Q热立克次体和弓浆虫,有些学者还提出某些螨种是流行性出血热的可疑媒介(1954),可见恙螨与疾病有密切关系。恙螨季节分布的研究将对疾病流行趋势提供理论根据,对疾病的防治具有一定的实践意义。江苏省东山是个丘陵地带,恙螨种群多而数量高,我们对当地五种优势种:条纹恙螨Leptotrombidium (leptotrombidium)striatum,田姬葛李恙螨 Gahrltepia(Gahrliepia)agrariusia,于氏恙螨Leptotrombidium(Leptoirombidium)yui,萨氏葛李恙螨Gahrliepia(Gahrliepia)saduski和居中恙螨Leptotrombidium(Lepioirombidium)intermedium的季节分布进行了研究。田姬葛李恙螨为首次报道。     

非洲钝缘蜱感染Q热立克次体敏感度的测定

Q热立克次体以10^-1—10^-12不同稀释度,用血腔注射法感染非洲钝缘蜱,感染35天,取蜱血淋巴液,分别用Gimenez染色法及免疫荧光技术检查,在10^-1—10^-5的稀释度,两种方法检出率基本相似。10^-6以下各组,免疫荧光尚可检出少数阳性标本,而Gimcnez法则无阳性,前者总阳性率为48.28%,后者为40.68%。感染的蜱悬液接种豚鼠,12组动物血清做Q热补体结合试验全部阳性。动物发病情况如潜伏期长短、发烧天数等似与蜱内立克次体的含量有关。     

胶体金渗滤法检测贝氏柯克斯体的研究

本文建立一种快速、敏感、适于基层应用的贝氏柯克斯体（俗称Ｑ热立克次体）的检测方法。将Ｑ热立克次体多克隆抗体点于硝酸膜上,用以捕获待检标本中的Ｑ热立克次体抗原,通过胶体金标记的鼠抗Ｑ热立克次体单克隆抗体直接显色,阳性者出现红色斑点。结果表明,用该法检测Ｑ热立克次休实验感染豚鼠血液,小鼠肝或脾,蜱血淋巴等标本取得了较满意的结果,整个过程仅需５－６分钟。与其他病原体无交叉反应,敏感度不低于５０ｎｇ立克次     

恙虫病立克次体补体结合抗原的研究

本文介绍应用兔睾丸单层细胞制备恙虫病立克次体补体结合抗原的方法,并初步探讨了影响鸡胚卵黄囊膜抗原效价的一些因紊。鸡胚卵黄囊膜抗原产量大、效价高、特异性较好。但有些恙虫病立克次体株在鸡胚中不易繁殖。而在组织培养中很易繁殖,第一代即能获得大量立克次体,有利于同时制备多株恙虫病立克次体抗原。本文同时介绍了制备豚鼠及家兔免疫血清的简便方法。