脂多糖对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及其机制

目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用LPS作用于多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226后,通过MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot检测NF-κB信号通路中相关蛋白p65和IκB-α的表达情况。结果:随着LPS作用浓度(0-8μg/mL)的增加,RPMI 8226细胞增殖活力呈先上升后下降的趋势,在2μg/m L LPS作用下,RPMI8226细胞的增殖活力最显著(P0.05)。相同浓度的LPS诱导RPMI8226细胞不同时间,其细胞增殖呈时间依赖性。流式细胞术检测结果显示:不同浓度LPS(0.5、1、2μg/mL)作用RPMI 8226细胞后,G0/G1期细胞的比例明显低于对照组(P0.05),S期和G2/M期细胞比例明显增加(P0.05);Western blot检测结果显示:2μg/mL的LPS处理的RPMI8226细胞p65和IΚB-α蛋白的表达明显高于对照(P0.05)。结论:低浓度LPS能够诱导多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226的增殖,其作用机制可能与上调信号通路NF-κB中相关蛋白p65和IκB-α有关。     

细胞衰老信号通路中NF-κB作用的研究进展CSCD

生物体衰老是一个非常复杂的过程。研究发现核转录因子(NF-κB)在细胞衰老中具有重要作用,对于细胞衰老的研究具有重要意义。本文综述了近几年来NF-κB与细胞衰老的相关研究,包括NF-κB作用机制、衰老相关信号通路与NF-κB的串流(crosstalk),深入探讨NF-κB与衰老的关系可为阐明衰老的分子机制及延缓衰老提供新的思路。     

细胞衰老信号通路中NF-κB作用的研究进展

生物体衰老是一个非常复杂的过程。研究发现核转录因子(NF-κB)在细胞衰老中具有重要作用,对于细胞衰老的研究具有重要意义。本文综述了近几年来NF-κB与细胞衰老的相关研究,包括NF-κB作用机制、衰老相关信号通路与NF-κB的串流(crosstalk),深入探讨NF-κB与衰老的关系可为阐明衰老的分子机制及延缓衰老提供新的思路。     

NF-κB与肿瘤发生及药物筛选

NF-κB是一类能特异性地识别结合DNA的Rel类蛋白质二聚体转录因子。在静息细胞中 ,NF-κB与抑制性蛋白IκBs结合形成复合物 ,并被滞留于细胞质中而处于非活化状态 ;当细胞受到各种胞内外刺激时 ,IκBs被迅速地降解 ,NF-κB得以释放并进入细胞核 ,从而发挥其转录调节功能。NF-κB通过调控众多靶基因的转录表达而在免疫、炎症反应、细胞增殖与凋亡及肿瘤发生等许多生理学过程中发挥重要作用。介绍了NF-κB活化的调控机制 ,并对NF-κB信号通路在肿瘤发生等相关过程及其在药物筛选中的作用进行了探讨。     

LRP16影响电离辐射诱导的NF-κB活性

目的:研究LRP16在电离辐射激活核转录因子NF-κB信号转导通路中的作用。方法:在HeLa细胞中,分别运用双萤光素酶分析和Western印迹检测LRP16对κB-Luc报告基因及NF-κB下游靶基因表达的影响。结果:双萤光素酶实验证实LRP16过表达促进电离辐射诱导的κB-Luc活性,而抑制LRP16则降低电离辐射诱导的κB-Luc活性;Western印迹结果显示,LRP16过表达促进电离辐射诱导NF-κB的下游抗凋亡基因XIAP的表达,与之相对应的是,抑制LRP16降低电离辐射诱导NF-κB下游抗凋亡基因XIAP的表达。结论:LRP16可以调节电离辐射诱导NF-κB的转录活性,并且调控NF-κB下游抗凋亡基因XIAP的表达,为进一步阐明电离辐射激活NF-κB转录活性的分子机制奠定了基础。     

核因子-κB与恶性肿瘤

核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种重要的转录因子,它广泛存在于各类细胞,参与多种生理、病理过程的基因调控。NF-κB系统由NF-κB家族及其抑制物核因子-κB抑制子(nuclear factor-κB inhibitor,IκB)家族共同组成。NF-κB的抗凋亡机制可诱发肾肿瘤、前列腺癌、胃癌、大肠癌、胰腺癌和乳腺癌的发生。通过抑制IκB的降解来抑制NF-κB的激活可以导致肿瘤细胞的大量凋亡。因此通过基因治疗来抑制NF-κB的活性,再辅以常规的化疗将有望成为一种有效的肿瘤治疗方法。本文就国内外最新研究成果,对NF-κB在恶性肿瘤中的作用进行了综合评述,并对其未来研究方向进行了展望。     

核因子-κB 分子生物学特性及其在口腔疾病中的作用

核转录因子-κB(NF-κB)是一种广泛存在于体内多种细胞的核转录因子。静息状态下,NF-κB二聚体与其抑制蛋白IκB结合而存在于胞质中。当细胞受到外界刺激时,IκB磷酸化,使NF-κB活化进入细胞核,调节相应靶细胞的表达。本文对NF-κB家族、分子生物学特性及其在口腔疾病中发生和治疗中分子机制进行探讨,为口腔疾病致病机理以及探寻其"干预治疗"的关键靶点提供理论依据和新思路。     

核因子-κB分子生物学特性及其在口腔疾病中的作用

核转录因子-κB（NF-κB）是一种广泛存在于体内多种细胞的核转录因子。静息状态下,NF-κB二聚体与其抑制蛋白IκB结合而存在于胞质中。当细胞受到外界刺激时,IκB磷酸化,使NF-κB活化进入细胞核,调节相应靶细胞的表达。本文对NF-κB家族、分子生物学特性及其在口腔疾病中发生和治疗中分子机制进行探讨,为口腔疾病致病机理以及探寻其＂干预治疗＂的关键靶点提供理论依据和新思路。     

IκBL：IκB家族的成员之一？

IκB家族是一组能够与转录因子NF-κB直接结合并调节NF-κB活力的蛋白.IκB蛋白结构上的普遍特点是拥有负责与NF-κB结合的多个锚蛋白(ankyrin)重复序列.IκBL包含ankyrin的重复序列并且能够抑制LPS诱导的NF-κB激活.然而,IκBL与NF-κB能否直接结合仍不确定.本文综述了IκB家族成员结构和功能上的特点,并分析了IκBL是否应被视为IκB家族成员之一.     

B3型柯萨奇病毒上调NF-κB引起胰岛β细胞凋亡的作用及机制研究

B3型柯萨奇病毒（Coxsackie virus B3,CVB3）与1型糖尿病发病、胰岛功能破坏有关,但CVB3对胰岛β细胞凋亡的影响及机制尚不清楚。本研究的目的是观察CVB3上调NF-κB p-p65引起胰岛β细胞凋亡的作用及机制,进而初步探究CVB3感染引起胰岛β细胞损伤的分子机制。本研究培养了人胰岛β细胞株,分为对照组、CVB3组、阴性对照（NC）质粒组、NF-κB p65质粒组、si-NC组、si-NC+CVB3组、si-NF-κB p65+CVB3组,检测细胞活力A490水平、细胞凋亡率及细胞中cleaved caspase-3、NF-κB p-p65、IκB α的表达水平。结果显示与对照组比较,CVB3组的A490水平及细胞中IκB α的表达水平降低,细胞凋亡率及细胞中cleaved caspase-3、NF-κB p-p65的表达水平增加（P<0.05）;与NC质粒组比较,NF-κB p65质粒组的A490水平降低,细胞凋亡率及细胞中cleaved caspase-3、NF-κB p-p65的表达水平增加（P<0.05）;与si-NC+CVB3组比较,si-N...     

NF-κB在胰腺炎症及纤维化中的作用机制研究进展

胰腺纤维化是慢性胰腺炎病理过程的核心事件和防治靶标,但是其发病机制仍然不清楚。近来的研究提示NF-κB与胰腺炎症的进展密切相关,胰腺微环境中腺泡细胞、巨噬细胞和星状细胞中的NF-κB在炎症和纤维化进展中发挥不同的作用,深入研究NF-κB在胰腺纤维化中的作用及调控机制将为慢性胰腺炎的治疗提供新的思路。     

乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)增强肝癌细胞NF-κB转录活性的实验研究

前期研究结果表明,乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)具有促进细胞增殖的作用.为了进一步阐明其分子机制,观察了HBXIP对核因子κB(NF-κB)转录活性的影响.实验中通过基因共转染将NF-κB报告基因质粒pNF-κB-Luc和HBXIP真核表达载体pcDNA3-hbxip导入人肝癌H7402细胞系中,进行荧光素酶活性分析.结果显示:H7402细胞过表达HBXIP后NF-κB的转录活性明显增强;此外,基因转染后经免疫印迹检测显示,与NF-κB二聚体结合的抑制亚基IκBα的磷酸化水平明显增加;同时,提取H7402细胞的核蛋白,然后应用免疫印迹检测细胞核中p65/NF-κB的水平.结果显示,H7402细胞中HBXIP过表达后细胞核中p65/NF-κB的水平明显增加.当应用RNA干扰技术抑制了细胞内源性的HBXIP基因表达后,则出现与上述结果相反的效果.上述结果提示,HBXIP可增加核内p65/NF-κB蛋白水平,进而发挥NF-κB促转录调控的作用.因此,HBXIP可通过调控NF-κB信号途径而促进细胞增殖.     

NF-κB信号通路与骨骼肌萎缩

骨骼肌萎缩发生于多种生理和疾病状态下,如废用、衰老和慢性病。核因子-κB(NFκB)信号通路包括NF-κB、抑制蛋白-κB(IκB)和IκB激酶(IKK),它们在肌萎缩中起着重要作用,能够引起肌肉蛋白质降解、诱导炎症、阻断损伤/萎缩后肌纤维的再生。NF-κB转录靶包括MuRF-1、YY1和MMP-9,还可通过转录后机制调节MyoD。而且,应用遗传操作小鼠模型已证明NF-κB还是防止骨骼肌萎缩的重要分子靶标。该文将综述NF-κB在骨骼肌萎缩中的作用,为开发新的方法治疗肌萎缩提供参考。     

布地奈德对A549细胞胸腺基质淋巴细胞生成素表达作用的研究

目的:观察细胞因子刺激气道上皮细胞胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达是否涉及核因子κB(NF-κB),并探讨糖皮质激素布地奈德对气道上皮细胞TSLP表达和NF-κB核转位的影响.方法:A549细胞与细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素4(IL-4)和布地奈德共同孵育,以不加任何细胞因子或布地奈德培养的A549细胞为对照组,采用RT-PCR方法测定TSLP mRNA表达,细胞免疫荧光方法检测TSLP和NF-κB的表达情况.结果:与对照组比较,IL-1β(10 ng/ml)及IL-4(10 ng/ml)显著刺激A549细胞TSLP mRNA表达,且NF-κB(p65)核转住增加(均P＜0.05).布地奈德干预后TSLP mRNA的表达和NF-κB(p65)的核转位显著减少(P＜0.05).结论:细胞因子促进气道上皮细胞诱导性表达TSLP与NF-κB激活有关,抑制TSLP表达和NF-κB激活可能是布地奈德治疗哮喘的重要机制.     

NF-κB荧光素酶报告基因系统的构建及验证

为了定量检测NF-κB的活化效果及筛选与NF-κB活化调控相关的药物,通过去除逆转录病毒载体pQCXIP原有的CMV启动子,并分别插入NF-κB增强子序列及荧光素酶NanoLuc报告基因序列,构建了一种新的含有NF-κB增强子序列和NanoLuc(NLuc)报告基因序列的表达载体,并进一步建立受NF-κB调控的稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系。酶切鉴定及测序结果表明成功构建了重组质粒pQCXIP-NF-κB-NLuc;NF-κB信号通路的刺激物肿瘤坏死因子TNF-α作用于构建的稳定表达NLuc的细胞系后出现特异性的荧光素酶反应,且该酶反应与TNF-α的刺激呈良好的时间、剂量依赖性,该结果表明受NF-κB调控的稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系构建成功。实例验证中,NF-κB抑制剂雷公藤甲素对此细胞系NLuc荧光素酶表达的抑制呈剂量效应。综上,本实验构建的受NF-κB调控的稳定表达NLuc荧光素酶的报告基因系统可用于NF-κB的活化效果的定量检测及筛选与NF-κB活化调控相关的药物,具有研究和应用价值。     

川芎嗪抑制血管紧张素Ⅱ诱导的平滑肌细胞NF-κB激活和骨形成蛋白-2表达降低

本文旨在观察血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）对血管平滑肌细胞核转录因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）的活性及骨形成蛋白-2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）表达的影响,以探讨AngⅡ参与动脉粥样硬化的机制,并探讨川芎嗪是否能抑制AngⅡ的促动脉粥样硬化作用。采用Western blot、免疫组化和原位杂交等方法分别检测AngⅡ刺激和川芎嗪干预后NF-κB活性、BMP-2蛋白和mRNA表达的变化。结果显示：（1）AngⅡ刺激激活NF-κB。AngⅡ刺激15min即有NF-κB p65核转移,30min达高峰（P〈0．01）,1h后减退。川芎嗪抑制AngⅡ诱导的NF-κB激活,与AngⅡ组比较,川芎嗪＋AngⅡ组NF-κB活性显著降低（P〈0．01）。（2）AngⅡ刺激6h时BMP-2表达增强（P〈0．05）,12h时减弱（P〈0．01）,24h时更弱（P〈0．01）。川芎嗪＋AngⅡ组中,川芎嗪干预6h时BMP-2表达亦增强,12与24h时保持正常水平。（3）川芎嗪对正常细胞的NF-κB活性和BMP-2表达无影响。以上结果表明,AngⅡ刺激后激活NF-κB并最终使生长抑制因子BMP-2表达下降,这可能是其参与动脉粥样硬化发生的机制之一。BMP-2一过性增高可能不依赖NF-κB通路的激活。川芎嗪可抑制AngⅡ诱导的NF-κB激活与BMP-2表达降低,提示它在抗动脉粥样硬化形成中起重要作用。     

NF-κB的负性调控机制在肿瘤发展与治疗的研究进展

有观点认为肿瘤是一种慢性炎症性疾病。NF-κB作为自然免疫和炎症的重要调节因子及内源性促肿瘤因子,其激活与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关。本文通过对有关NF-κB与肿瘤的文献进行分析,综述了NF-κB信号通路及其负性调控因子对肿瘤的影响的研究进展,从而论证NF-κB与肿瘤的关系以及NF-κB抑制剂在临床治疗中的意义。     

MyD88抑制乙型肝炎病毒复制依赖活化NF-κB信号通路

目的 研究髓样细胞分化蛋白(MyD88)抗乙型肝炎病毒(HBV)效应的作用机制。方法 构建MyD88的截短突变体,获得核因子kappa B(NF-κB)超抑制剂IkBa-SR或者NF-κB信号通路激活剂IKKα/IKKβ的表达质粒,分别与HBV复制型质粒瞬时转染Huh7细胞,检测细胞上清液中HBeAg,HBsAg的表达以及胞质中HBV复制中间体DNA的含量,并以NF-κB依赖的荧光素酶报道系统检测它们活化NF-κB的程度。结果 MyD88全长蛋白和2个截短突变体M(1-151)、M(151-296)活化NF-κB的程度与其抑制HBV蛋白以及复制中间体DNA合成的能力相一致。与空载相比,表达NF-κB信号通路激活剂IKKα/IKKβ的质粒共同瞬转细胞后,转染MyD88和HBV表达质粒的细胞中NF-κB的通路明显活化,同时HBV core蛋白的合成显著降低;而NF-κB的超抑制剂IκBα-SR共同瞬转的细胞中core蛋白的表达量显著增加,检测细胞培养上清液中HBeAg和HBsAg及胞质中HBV复制中间体DNA的合成,得到相似结果。结论 NF-κB信号通路的活化在MyD88抑制HBV复制中发挥了关键作用     

NF-κB家族成员RelA的翻译后修饰及其生理病理作用的研究进展

真核细胞转录因子NF-κB通过调节多种靶基因表达,参与炎症、免疫反应、程序性细胞死亡、细胞增殖和分化的调控。RelA是NF-κB家族一个重要的成员,其翻译后修饰可精准调控NF-κB的转录活性,在调节炎症、肿瘤、代谢以及免疫应答等重要的生命活动及相关疾病的发生发展过程中起重要作用。现总结相关领域最新研究进展,综述RelA翻译后修饰的种类、调控机制,对NF-κB通路功能的影响,及其在NF-κB介导的炎症、癌症等多种疾病中的功能。     

国家自然科学基金项目简介

正项目名称:DDX1在猪传染性胃肠炎病毒非结构蛋白nsp14激活NF-κB信号通路中的作用机制项目经费:25万项目主要内容:TGEV是引起仔猪腹泻的主要病原,能显著激活炎症相关转录因子NF-κB,前期研究发现nsp14在其中起关键作用,且DDX1直接影响nsp14对NF-κB的激活。项目拟明确nsp14对NF-κB的激