静脉输注免疫球蛋白中病毒(HIV,HBV,VSV和SV)的消除

<正> 人免疫球蛋白是被人们接受的一种最安全的生物制品。最近,美国疾病控制中心和食品药物管理局报告,用乙醇分离法所得的免疫球蛋白制品没有传播AIDS(HIV)的危险,因为提制过程中病毒不稳定。然而,免疫球蛋白制品,特别是静脉注射免疫球蛋白(IVIG)制品,传播非甲非乙(NANB)型肝炎已被注意到。 蛋白酶降解(胃蛋白酶,溶纤酶),化学改制(还原和烷化,磺化),离子交换处理,聚乙二醇(PEG)分离和与温和胃蛋白酶消化结合的pH4处理等法已被应用于制取IVIG制品。这些制备方法中,PEG分离     

静注免疫球蛋白分离提纯中病毒的灭活和消除

<正>静脉输注免疫球蛋白(IVIG)适应于治疗原发性血小板减少性紫癜、川畸病、骨髓移植和获得性免疫缺陷综合症(AIDS)。这些患者的抵抗力大多很弱,需用相对大剂量的IGIV。在Cohn氏乙醇分离过程中人免疫缺陷病毒(HIV)。被灭活。聚乙二醇(PEG)分层法可去除IgG聚合体和免疫复合物得到单体IgG。但作者注意到制品有传播非甲非乙肝炎的危险。为保障制品的安全性,作者发明了一种液体加温处理方法以灭活病毒并不使IgG变性。本文阐述了一种IVIG60℃加温10小时的方法。对加热的IVIG和相对应的非加热对照制品的理化和生物学特性试验结果作了比较。     

在分离静脉注射免疫球蛋白时病毒的灭活和消除:湿热处理和PEG分离

<正>静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗无丙种球蛋白血症的效果和安全性,使治疗原发性血小板减少性紫癜、kawasaki病、骨髓移植和获得性免疫缺陷综合征都成为适应症。这些病人的防御能力可能很弱,需要给相对大剂量的IVIG。人类免疫缺陷病毒(HIV)在Cohn氏乙醇分离纯化IgG的过程中已被     

人静注免疫球蛋白和白蛋白紫外线处理过程中对病毒的灭活

<正>静注免疫球蛋白制品(IVIG)作为安全产品已赢得了良好声誉,IVIG中HIV和乙型肝炎的传染已被排除,对非甲非乙型肝炎的安全性提出了疑问并作了报导,但仍需作进一步的研究。 对IVIG制品使用最频繁的病毒灭活方法有低pH贮存、pH4/胃蛋白酶处理和β-丙内酯处理。在IVIG制品中,对干热处理法和有机溶剂与表而活性剂结合法作为病毒灭活步骤也作了研究。 所有这些病毒死活方法的主要适用处即主要的血液传播病毒群是脂包、酸性不稳定型和热歌感型。这样就遗留了大量的非脂包、非酸性不稳定病毒,对灭活这些病毒的其它方法也应继续进行研究。 最近才确定特性的含有一条单链RNA的丙型肝炎病毒,表现出类似于鼠疫病毒和黄热病病毒的顺     

一种新的静脉输注用免疫球蛋白

<正>在治疗耐抗菌素感染中,以及无疑在降低免疫缺乏病人的细菌感染中,人免疫球蛋白(IgG)是有价值的。然而,用低温乙醇法从人血浆制备的IgG只能限于肌肉常规注射,因为在静脉输注时和输注后能发生严重的类过敏性反应。这些副作用已被归因于在分离过程形成的聚合IgG所引起的非特异性补体激活和某些杂质,诸如PKA。聚合物     

不同来源血浆对静注人免疫球蛋白中抗-HBs、白喉抗体效价的影响

调查分析不同来源原料血浆对静注免疫球蛋白(IVIG)制品内的抗-HBs、白喉抗体效价的影响。选择6个单采血浆站,对其提供的血浆为原料制备的IVIG所含的抗-HBs抗体、白喉抗体效价进行了测定。检测结果显示,用A、B、C、D、E、F编号的6个相应血浆站采集的血浆为原料制备成IVIG其抗-HBs抗体(IU/g)效价分别为33.77、103.95、70.94、132.45、78.84、58.28;白喉抗体平均效价分别为5.17、7.36、4.26、7.67、10.14、9.24。6个单采血浆站间的IVIG制品中白喉抗体效价无明显差异,但抗-HBs效价却存有显著差异。     

低温乙醇法纯化抗人T细胞猪免疫球蛋白的研究

用健康人T淋巴细胞免疫猪,检测指标合格后采集猪血浆,经热吸收去除相应的杂抗体后,用改进的低温乙醇法分离纯化得到抗人T细胞猪免疫球蛋白。试生产5批,其主要质量指标均符合《中国药典》的要求,表明改良的低温乙醇法可用于纯化抗人T细胞猪免疫球蛋白。     

加热灭活病毒的静脉注射免疫球蛋白的研究

<正>静脉注射免疫球蛋白(IVIG)的研究已有30多年的历史,能够大量供临床应用还是近十几年的事情。自1987年以来,我国的IVIG研究发展很快,已有较大规模生产条件问世,并已在加紧研究灭活病毒的新工艺。IVIG的出现,为需要大剂量注射免疫球蛋白的病人带来了许多好处和方便。但随之也不断出现因输注IVIG而发生非甲非乙肝炎的报导。近年来,日本学者致力于灭活病毒的IVIG-IH生产研究,并取得了成功。我有幸在1991年春赴日学习该技术,在导师指导下进行了VIG的提取及质量分析研究,现将结果介绍如下:     

用旋光度法测定静脉注射用人免疫球蛋白中麦芽糖含量

用旋光度测定法测定静脉注射用人免疫球蛋白 (IVIG)中麦芽糖含量 ,简便、快速 ,准确 ,重复性好 ,麦芽糖浓度与旋光度成正比 ,用该方法制备标准曲线具有很好的相关性 ,相关系数r(n =10 ) ±s为 0 .99996± 0 .0 0 0 0 3。测定两批IVIG ,分别重复测定 9次 ,麦芽糖含量分别为 9.85± 0 .0 82和 9.5 5± 0 .0 85变异系数分别为 0 .6 0 % ,0 .6 9% ,该法的内标回收率 % (n =9) ±s分别为 10 0 .4%± 0 .82和 98.8%± 0 .85 ,此法可作为IVIG中麦芽糖含量检测的常规方法     

静注人免疫球蛋白IgG含量测定中的影响因素

为了进一步分析静注人免疫球蛋白(IVIG)IgG含量测定中的影响因素,分别以不同的稀释缓冲液、不同的稀释度、不同的稳定剂对IVIG的IgG含量进行测定。结果表明以不同的稀释缓冲液、不同的稳定剂测定的同批IgG含量无显著性差异;而用不同的稀释度测定的同批IgG含量有差异。因此可见,IVIG制品中采用的不同稳定剂对IgG含量测定影响不大;可以用不同的稀释度测定的均值作为该批IVIG制品的IgG含量。     

降低静脉注射用人免疫球蛋白抗补体活性的试验观察

采用CH50试验法测定静脉注射用人免疫球蛋白(IVIG)抗补体活性(ACA),在中性pH条件下,比较了不同的Na^ 含量及不同种类的糖对ACA测定结果的影响。结果表明,NaCl含量由0．2％上升至1．0％时,ACA呈逐渐下降趋势;用5％葡萄糖作稳定剂时ACA最低。IVIG在37℃条件下放置一月后,ACA有明显下降趋势。在半成品配制过程中,pH及各种成份的加入顺序对ACA也有一定影响。     

静注人免疫球蛋白细菌内毒素检查方法的建立

目的 :建立用于静脉注射用人免疫球蛋白 (IVIG)的细菌内毒素检查方法。方法 :通过干扰评价实验证明IVIG对细菌内毒素检查法有强烈的抑制作用 ,单纯用简单稀释和调整pH值法无法消除干扰 ,如果用稀释剂 (Ⅰ )对IVIG作 1∶4以上的稀释 ,即可消除样品对该检查法的干扰 ,利用灵敏度为 0 1 2 5EU ml的鲎试剂 ,将样品用稀释剂 (Ⅰ )稀释 4倍 ,按中国药典 ( 2 0 0 0版 )进行细菌内毒素的检查 ,结果与家兔热原质试验进行比较。结论 :IVIG用稀释剂 (Ⅰ )进行适当稀释后 ,可以用细菌内毒素检查法替代家兔热原试验 ,应用于生产过程及半成品的质量控制。     

一种分离免疫血清球蛋白的简单方法

<正> 自从低温乙醇法发展将血浆分离成为五种主要成分以来,Cohn第6和第9法独特地在美国和世界许多地区用作分离供临床用白蛋白和免疫血清球蛋白(ISG)。虽然原始的分离流程已被修改,但随后的这些改良方法均遵循原Cohn法的相同步骤,按其溶解度的增加用一系列沉淀步骤沉淀各种蛋白质。即使白蛋白是唯一所要提取的产品,它总是最后从血浆乙醇混合物中被提取。结果白蛋白的产量低,由于涉及很多沉淀步骤,不可避免地发生载留或共沉。     

由pH4处理的免疫球蛋白传播的非甲非乙肝炎

<正>威廉等报告了4例推定的,由苏格兰国家输血中心制造的静脉注射免疫球蛋白制品(IVIG)所传播的非甲非乙肝炎(NANBH)。象作者们指出的那样,这并不是第一次由IVIG所传播的NANBH;他们从有关文献上已查到4次流行,共5个病例。威廉的报告中所列的表1是非常有用的,因为它证实了在这些病例的大多数已发表的资料是多么马虎。     

人巨细胞病毒免疫球蛋白的研制及其临床应用

制备人源性高效价人巨细胞病毒 (HCMV)特异免疫球蛋白 (IgG)。采用ELISA从检定合格的血浆中筛选出滴度≥ 1∶5 0 0 0的血浆 ,合并后按低温乙醇法制备HCMV IgG ,再次检定后应用于临床。结果显示 ,按人免疫球蛋白标准检定 ,所制备的HCMV IgG全部合格 ,HCMV IgG滴度为 1∶15 0 0 0 0。临床应用结果表明 ,2批高效价HCMV IgG均可明显降低先天性HCMV感染率。     

用于纯化抗原性物质的单克隆抗体亲和层析术(二)

(四)、蛋白水解的抑制在分离抗原的过程中、必须保持抗原分子的完整。而组织中存在的蛋白水解酶,却会在这方面招来许多麻烦,因此,应该注意下列几点: 1.所有溶液均须始终置于冰浴或4℃。 2.避免使用酸性蛋白酶活性最高的酸性pH溶液。 3.避免使用为某些蛋白酶活性所必需的     

胃蛋白酶C基因在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞内的表达(英文)

胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体 ,是脊椎动物中普遍存在的非特异性蛋白消化酶 ,胃蛋白酶的生物学特性及分子特性已得到了充分研究。虽然有许多关于胃蛋白酶产生细胞的研究报告 ,但胃蛋白酶原基因在这些细胞的表达却知之甚少。本研究采用地高辛标记的RNA探针 ,用原位杂交的方法研究了大鼠胃底腺中胃蛋白酶产生细胞的个体发育。研究发现 ,大鼠胃腺在胚胎 1 8.5天开始出现 ,但没有形态分化 ;胃蛋白酶的mRNA在出生后 3.5天首次被原位杂交法检出。胃蛋白酶产生细胞在出生后 8周发育成熟 ,胃蛋白酶的mRNA表达在主细胞和颈粘液细胞内 ,其发育可分为 4个阶段 :( 1 )胚胎 1 8.5天至出生后 0 .5天 ;( 2 )出生后 3.5天至 2周 ;( 3)出生后 3周至 4周 ;( 4 )出生后 8周。在胃底腺发育过程中 ,胃蛋白酶mRNA的表达只局限于某种特定的细胞 ,这些细胞的分布具有明确的阶段特异性。因此 ,我们认为胃蛋白酶C可作为胃上皮细胞分化的分子标志。     

盐酸米托蒽醌聚乙二醇化脂质体的制备及包封率考察

目的:制备盐酸米托蒽醌聚乙二醇化(PEG化)脂质体,建立包封率测定方法.方法:采用乙醇注入结合高压均质法制备空白PEG化脂质体;以铵根离子梯度法进行主动载药制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;采用G-25葡聚糖凝胶色谱分离脂质体和游离药物;使用紫外-可见分光光度法测定脂质体的包封率.结果:空白脂质体平均粒径为88.7nm,载药后粒径为95.3nm;在所建立色谱条件下,脂质体与游离米托蒽醌分离良好;盐酸米托蒽醌在0.5～10μg·ml-1范围内线性关系良好(R 2=0.9997),精密度高;脂质体的平均包封率大于96％.结论:乙醇注入-高压均质法结合铵根离子主动载药法适用于制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;所建立分析方法简单快捷、准确可靠,可用于盐酸米托蒽醌长循环脂质体包封率的测定.     

静脉注射用人免疫球蛋白细菌内毒素检测

探索静脉注射用人免疫球蛋白(IVIG)细菌内毒素含量的鲎试验检测方法。根据《中国药典》(2000版)细菌内毒素含量的检测方法进行,将待检品用NaOH调pH至中性,稀释至2.4倍可用标示灵敏度为0.25EU/m l的特异性鲎试剂进行细菌内毒素检测,结果与家兔法进行比较,并且在样品中加入定量内毒素0.6 EU/m l用两种方法进行对比试验。结果表明用细菌内毒素检测法(鲎试验法)检测静脉注射用人免疫球蛋白是可行的。     

抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体的鉴定及其应用（英文）

免疫球蛋白是机体固有免疫系统的组成部分,是机体防御的第一道防线。本研究对抗鹅免疫球蛋白轻链单克隆抗体进行了特征分析并将其应用到不同免疫试验中用以检测鹅免疫球蛋白。用此单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱用以分离血清中的鹅免疫球蛋白;偶联辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)后的单克隆抗体用作第二抗体来检测鹅特异性抗体。此外,该单克隆抗体可以识别和定位外周血淋巴细胞中的SIg+淋巴细胞。研究表明,该单克隆抗体可在多种条件下检测或分离鹅免疫球蛋白并作为研究鹅体液免疫的有力工具。