利用变异链球菌特异性吸附筛选蕲蛇毒作用蛋白的初步探讨

首次利用变异链球菌与蕲蛇毒相互作用筛选作用蛋白．考察蛇毒的解吸和结合条件,包括作用缓冲体系、pH、离子强度和时间等因素,采用电泳(SDS-PAGE)和毛细管液相色谱(CLC)分析作用蛋白,并探讨了菌体多次与蛇毒相互作用的情况,确定了多个作用蛋白的分子质量．     

毛细管电泳的最新进展

毛细管电泳是近年发展最快的分离分析技术之一。它具有高灵敏度、高分辨率、高速度等优点,广泛应用于各个领域。随着毛细管电泳技术的不断发展,逐渐出现了非水毛细管电泳,毛细管阵列电泳,毛细管电泳免疫分析,毛细管电色谱手性拆分等分支。     

毛细管电泳测定蛋白激酶A活力的新方法

建立了以毛细管电泳为基础的蛋白激酶Ａ活力测定的新方法,对其他一些激酶的活力测定具有一定的通用性。此方法是基于蛋白激酶Ａ的检测底物及其磷酸化产物容易在毛细管电泳中分开,并且可以通过在线检测进行积分定量。同时发展了连续进样技术,使能在一个电泳过程中分析十个以上的样品,大大节省分析时间和费用。     

蛋白质组研究中分离新技术与新方法

对于蛋白质组的研究离不开分析技术的支撑。由于样品及其基质的复杂性,为了实现蛋白质的高通量、高灵敏度、快速分析鉴定,必须发展与之匹配的新技术与新方法。多维高效液相色谱/毛细管电泳技术,部分弥补了传统2D PAGE的不足,近年来,在蛋白质分离鉴定方面取得了最令人瞩目的成绩。本文分别从多维液相色谱分离技术、多维毛细管电泳蛋白质分离平台、微柱液相-毛细管电泳联用技术、极端pH蛋白质的分离分析和蛋白质的在线富集技术等方面对蛋白质组学研究中在新技术与新方法方面近期取得的成果加以系统阐述。     

基于智能控制的微管电泳检测技术

国内外毛细管电泳(CE)产品深受电泳焦耳热存在的影响,使得毛细管电泳试样的流通量非常少,严重影响到了CE发展与应用。本文对毛细管电泳技术存在的问题进行进一步的量化分析,利用智能控制技术来构造微管电泳检测系统,采用内制冷的方式,及时原地的带走电泳过程中产生的焦耳热,采用多通道高压电源作为整个电泳系统的驱动力,通过对运行缓冲液的合理调控,实现对待分离组分的高效分离。研究出高效微管电泳技术的全分析系统模型,以期能给生命科学、材料科学、环境科学提供又一强有力的研究手段。     

毛细管电泳质谱联用技术及其在代谢组学研究中的应用

毛细管电泳自20世纪80年代中后期迅速发展以来,是近几年分析化学领域中发展最为迅速的分离手段之一。毛细管电泳与质谱的联用使得分析范围更广,灵敏度更高,因此被广泛应用于生物样品的分析中。介绍了毛细管电泳质谱联用常用的接口技术,质量分析器及其在生物样品中的分离模式,综述了近年来毛细管电泳质谱联用技术在代谢组学中的应用。     

’93国际电泳学术会议在挪威召开

’93国际电泳学术会议(International Council ofElectrophoresis Societies,ICES-ELPHO 93)于1993年6月1日至4日在挪威美丽迷人的海滨小城 Sandefjord举行.我作为唯一的中国代表(由瑞典 Pharmacia LKB公司资助)参加了会议.参加会议的共有200多人.大多来自欧洲各国,其次是美国和日本.世界上著名的电泳权威都出席了会议.会议的第一天有四个专题学习班可任意选择参加.这四个专题是:“用固相 pH 梯度等电聚焦作为第一向的双向电泳”,“毛细管电泳”,“使用琼脂糖凝胶的滴定曲线技术和快速转移”,“电泳谱带的图像分析”.学习班介绍的内容都是当前电泳的前沿技术,在学习班上每个学员都可以进行操作练习.会议有八个专题报告:     

聚乙二醇修饰牛血清白蛋白的反应与分析

采用N,N′-羰基二咪唑活化法活化单甲氧基聚乙二醇5000分子一端的羟基,对活化后的单甲氧基聚乙二醇分子进行了元素分析。用该活化产物对牛血清白蛋白的赖氨酸侧链氨基进行化学修饰。应用毛细管电泳对聚乙二醇修饰后的产物进行了分析,并与高效液相色谱分析结果作了对照研究,表明毛细管电泳对修饰后的牛血清白蛋白有更好的分析效果。     

毛细管电泳在基因研究中的应用

讨论用于基因研究的各种方法,并指出毛细管电泳技术的优点。评述毛细管电泳(CE)用于基因分析的原理,详细介绍毛细管电泳在基因研究中的应用新进展。展望CE及其在基因研究的应用前景。     

天花粉蛋白胰酶肽图谱的毛细管区带电泳法分析

目的:以天花粉蛋白胰蛋白酶解肽段为测定对象,用毛细管区带电泳法(CZE)研究天花粉蛋白的肽图谱分离条件。方法:采用未涂层石英毛细管(长50cm,内径75μm,有效长度42cm),以50mmol/L磷酸盐和150mmol/L三氟乙酸溶液为运行缓冲液,在25℃、pH2.0和压力为3447.4Pa(×10s)的条件下进样,以12kV恒压电泳分离,检测波长214nm。结果:运用CZE也能较好地对天花粉蛋白进行肽图谱分离,在缓冲体系中加入离子对试剂三氟乙酸,可极大地改善多肽的峰形和分辨率;同时运用反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术,也很好地鉴定了部分肽段在CZE和RP-HPLC肽图谱中的对应关系。结论:与传统的RP-HPLC分析天然或重组蛋白肽图谱相比,CZE也不失为一种鉴定蛋白肽图谱的有效、快速和简单的方法。     

定量毛细管电泳法测定虫草类保健品中的核苷及碱基类物质

目的：定量毛细管电泳法因采用了定量阀进样的方式,其进样量为固定值,定量结果更加可靠,且重复性好。本文探讨了采用定量毛细管电泳方法测定市售虫草类保健品中虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、尿苷含量的可行性,优化了分析条件,并对其进行含量测定。方法：以浓度为40mM、pH9．5的硼砂为缓冲液,工作电压为-15kV,采用定量毛细管电泳的方测定了虫草类制品中的核苷及碱基类物质的含量。结果：五种核苷及碱基类物质在优化的定量毛细管电泳条件下得到了良好的分离和定量结果．峰面积RSD值小于1．4％,测定了其在虫草菌丝体粉末及虫草王胶囊中的含量。结论：首次利用定量毛细管电泳法对虫草类保健品中的虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、尿苷的含量进行了定量测定,不同形式虫草类保健品中核苷、碱基的种类和含量有差异。该方法快速、准确,对虫草类保健品的质量控制有重要意义。     

定量毛细管电泳法测定虫草类保健品中的核苷及碱基类物质

目的:定量毛细管电泳法因采用了定量阀进样的方式,其进样量为固定值,定量结果更加可靠,且重复性好。本文探讨了采用定量毛细管电泳方法测定市售虫草类保健品中虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、尿苷含量的可行性,优化了分析条件,并对其进行含量测定。方法:以浓度为40 mM、pH 9.5的硼砂为缓冲液,工作电压为-15 kv,采用定量毛细管电泳的方测定了虫草类制品中的核苷及碱基类物质的含量。结果:五种核苷及碱基类物质在优化的定量毛细管电泳条件下得到了良好的分离和定量结果,峰面积RSD值小于1.4%,测定了其在虫草菌丝体粉末及虫草王胶囊中的含量。结论:首次利用定量毛细管电泳法对虫草类保健品中的虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、尿苷的含量进行了定量测定,不同形式虫草类保健品中核苷、碱基的种类和含量有差异。该方法快速、准确,对虫草类保健品的质量控制有重要意义。     

毛细管电泳芯片及其应用

毛细管电泳芯片是近十年发展起来的一项新技术。与普通毛细管电泳相比,毛细管电泳芯片具有体积小、分离速度快、效果好、所用样品量少等优点。章介绍了毛细管电泳芯片的芯片结构及其应用等的研究进展。     

一种新的测定蛋白激酶活性的方法：毛细管电泳测定蛋…

建立了以毛细管电泳为基础的测定蛋白激酶Ａ活性的新方法,可作为激酶测活的通用方法。此法基于底物及其磷酸化产物很容易在毛细管电泳中分开,且酶活力可用积分值计算。同时又发发展了连续井样技术,能在一次电泳中同时进行１０个以上的酶活性测定。新方法操作简单,灵敏度和精确性均优于常规的同位素法。     

基于环糊精手性选择剂的扑尔敏对映体的毛细管电泳拆分

本文旨在通过对毛细管电泳在手性药物拆分方面的应用原理的探讨,对实验中关于手性选择剂的浓度、缓冲液pH值等对分离拆分效果的影响进行讨论和分析,以期对药物研究有所裨益并得到令人满意的结果。     

平板通道毛细管电泳

平板通道毛细管电泳又称微芯片毛细管电泳,是一门新兴的分析技术,具有小型化、自动化、快速、高效等优点。本文简要介绍了平板制作、进样、电泳分离、检测及其在生物方面的应用等。     

平板通道毛细管电泳

平板通道毛细管电泳又称微芯片毛细管电泳,是一门新兴的分析技术,具有小型化、自动化、快速、高效等优点。本文简要介绍了平板制作、进样、电泳分离、检测及其在生物方面的应用等。     

一种新的测定蛋白激酶活性的方法──毛细管电泳测定蛋白激酶A的活性

建立了以毛细管电泳为基础的测定蛋白激酶A活性的新方法,可作为激酶测活的通用方法．此法基于底物及其磷酸化产物很容易在毛细管电泳中分开,且酶活力可用积分值计算,同时又发展了连续进样技术,能在一次电泳中同时进行10个以上的酶活性测定,新方法操作简单,灵敏度和精确性均优于常规的同位素法．     

幽门螺杆菌重组HpaA蛋白包涵体的切胶纯化分析

目的 探讨切胶纯化的最佳条件及纯化重组HpaA蛋白包涵体的可行性.方法 克隆并表达pQE30-hpaA-DH5α工程菌,获得重组HpaA蛋白包涵体,使用切胶纯化法进行纯化,得到可溶性的重组HpaA蛋白.SDS-PAGE电泳后使用不同浓度、不同pH的醋酸钠溶液以及不同的染色时间染色电泳蛋白条带,分析切胶纯化的最佳条件.Western blot鉴定重组HpaA蛋白的抗原性.将重组蛋白免疫BALB/c小鼠,双向免疫扩散法检测血清抗HpaA抗体,鉴定重组蛋白的免疫原性.结果 4 mol/L醋酸钠溶液、pH 13.0、作用1 h为切胶纯化的最佳条件.经切胶纯化法获得的重组HpaA蛋白体积为6 ml,浓度为0.2942 mg/ml,蛋白量为1.7652 mg,得率为77.1%,Western blot显示该蛋白具有良好的抗原性.小鼠免疫血清能与重组HpaA蛋白反应,双扩效价大于等于1∶ 16,具有良好的免疫原性.结论 切胶能够纯化重组HpaA蛋白包涵体,获得高纯度的可溶性重组HpaA蛋白,该蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可用于进一步的科学研究.     

毛细管电泳技术在蛋白质翻译后修饰中的应用

蛋白质中翻译后修饰蛋白的鉴定是蛋白质组学研究的主要内容之一。毛细管电泳技术由于其高分辨能力、低样品上样量、易操作性和较少的分析时间等特点,迅速发展成为一种重要的分离技术。通过毛细管电泳与质谱连用,可以得到许多关于蛋白质鉴定、纯化和结构改变方面的十分有价值的信息。对毛细管电泳技术进行了简单介绍,并且就其在蛋白质磷酸化和蛋白质糖基化研究中的应用进行了综述。