幽门螺杆菌对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响

通过实验和临床观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对胃上皮细胞间隙连接超微结构的影响,从细胞间隙连接角度探讨H. pylori致癌机制．将不同H. pylori菌株与BGC-823细胞共培养24 h或 48 h,用原位固定与原位包埋法透射电镜观察细胞间隙连接超微结构变化．对70例胃癌患者,用快速尿素酶试验、碱性品红染色和¹⁴C尿素呼气实验检测H. pylori,PCR法检测H. pylori CagA基因,及透射电镜观察胃上皮细胞间隙连接超微结构变化．结果显示,未加H. pylori组BGC-823细胞可见较多细胞连接及连接复合体,加H. pylori各组细胞的连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于未加H. pylori组,而细胞间隙最小宽度大于未加H. pylori组(P < 0.001或P < 0.005),且CagA⁺ 的NCTC J99组、临床株GC 01组和NCTC 11639组细胞连接数、单位周长连接数均小于CagA^- 的NCTC 12908组(P < 0.001或P < 0.05),NCTC J99组与临床株GC 01组细胞单位周长连接长度短于NCTC 12908组(P < 0.001)．胃癌患者H. pylori感染组细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于无H. pylori感染组,细胞间隙最小宽度大于无H. pylori感染组(P < 0.001),且CagA⁺ H. pylori感染者细胞连接数、单位周长连接数与单位周长连接长度均小于CagA^- H. pylori感染者,细胞间隙最小宽度大于CagA^- H. pylori感染者．上述结果表明,胃上皮细胞间隙连接改变与H. pylori感染,特别是CagA⁺ H. pylori感染有关．     

不同类型幽门螺杆菌对GES-1细胞Cx32、Cx43表达的影响

目的观察不同类型幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞间隙连接蛋白（Connexin,Cx）32和43表达的影响,探讨与Cx32、Cx43表达异常有关的H.pylori菌株类型。方法将临床培养分离的不同H.pylori菌株类型包括东亚型CagA＋H.pylori、西方型CagA＋H.pylori及CagA-H.pylori与GES-1细胞共培养24 h及48 h,对照组不加H.pylori培养24 h及48 h。采用间接免疫荧光方法（IIF）及计算机图像分析技术检测GES-1细胞Cx32、Cx43表达。结果对照组24 h和48 h及加H.pylori各组24 h GES-1细胞Cx32、Cx43表达阳性率均为100%,东亚型CagA＋H.pylori组48 h Cx32、Cx43表达阳性率均低于对照组、CagA-H.pylori组和西方型CagA＋H.pylori组（P〈0.05）;对照组24 h和48 h Cx32、Cx43绿色荧光位于细胞膜,西方型CagA＋H.pylori组和东亚型CagA＋H.pylori组24 h和48 h Cx32绿色荧光大部分位于细胞膜,少部分位于细胞浆,Cx43绿色荧光大部分位于细胞浆,少部分位于细胞膜;东亚型CagA＋H.pylori组和西方型CagA＋H.pylori组24 h及48 hCx32、Cx43表达强度低于对照组和CagA-H.pylori组（P〈0.05）,且东亚型CagA＋H.pylori组较西方型CagA＋H.py-lori组减弱更明显（P〈0.05）。结论 H.pylori下调GES-1细胞Cx32、Cx43表达,以CagA＋H.pylori菌株特别是东亚型CagA＋H.pylori菌株作用更明显。     

幽门螺杆菌东、西方株CagA的序列差异及其对胃癌细胞生长与凋亡的影响

【背景】幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是胃癌的主要致病因素,其分泌的细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A,CagA)是目前已知唯一能被H.pylori注入胃上皮细胞并模拟细胞内蛋白发挥作用的癌蛋白,参与胃癌的发生发展。【目的】比较H.pylori东亚株和西方株CagA结构差异,初步探讨H.pylori-CagA对胃癌细胞增殖与凋亡的影响。【方法】对H.pylori东亚株和西方株CagA的核酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,构建含东亚株和西方株cagA基因的真核表达载体,转染胃癌细胞AGS,用Western blot法检测CagA蛋白的表达,用CCK8法测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】生物信息学分析发现H.pylori东亚、西方菌株CagA的核酸序列和氨基酸序列均存在特征性差异。构建了含东亚、西方菌株cagA基因的表达载体[命名为GZ7/cagA(东亚株)和26695/cagA(西方株)]。与空载体组比较,GZ7/cagA和26695/cagA转染组均表达CagA蛋白,两组比较表达量无显著性差异,GZ7/cagA转染组细胞生长显著增加,而26695/cagA转染组细胞生长显著降低(P0.05)。GZ7/cagA转染组、26695/cagA转染组细胞的凋亡率分别为7.23±0.96及9.17±1.40,均高于空载体组(5.03±0.63),差异有统计学意义(P0.05)。【结论】东亚株与西方株CagA之间有结构和功能的差异,东亚株CagA能促进细胞增殖,而西方株CagA却抑制细胞增殖,但两者均能促进细胞凋亡。     

不同部位、分化和起源胃癌中H.pylori、CagA基因的探讨

目的通过检测不同部位和不同组织类型中胃癌组织中幽门螺杆菌(H.pylori)和细胞毒素相关基因(CagA基因),探讨H.pylori、CagA基因与胃癌的关系,以及H.pylori、CagA基因导致胃癌的可能机制。方法应用快速尿素酶试验和组织切片革兰染色及血清H.pylori CagA抗体检测胃癌患者H.pylori,应用PCR检测胃癌组织中H.pylori CagA基因。结果胃癌组织中随活检部位不同,H.pylori检出率也不同,以胃窦部检出率最高为76.9%,与胃体大弯侧、胃角和贲门相比差异均有非常显著性(P0.005),胃体大弯侧、胃角与贲门相比差异均有非常显著性(P0.005),胃底与贲门相比差异无显著性(P0.05)。胃窦部癌的CagA检出率(85.6%)最高,与其他部位相比差异均有非常显著性(P0.005),胃角胃癌CagA检出率显著高于胃体大弯侧和贲门胃癌(P0.005)。高分化胃癌H.pylori检出率为73.1%,低分化胃癌H.pylori检出率为44.1%,二者相比差异均有非常显著性(P0.01)。肠型胃癌H.pylori检出率为76.7%,弥漫型胃癌H.pylori检出率为33.3%,二者相比差异有显著性(P0.05),高分化胃癌CagA检出率为26.3%,低分化胃癌CagA检出率为80.0%,二者相比差异均有非常显著性(P0.01)。肠型胃癌CagA检出率为80.4%,弥漫型胃癌CagA检出率为57.1%,二者相比差异无显著性(P0.05)。结论不同部位和不同组织类型中胃癌组织中H.pylori和CagA基因的表达存在一定差异性,对探讨胃癌的发生及胃癌的防治有一定的指导意义。     

布拉酵母菌辅助治疗对老年CagA和VacA阳性幽门螺杆菌感染患者IL-6和IL-8及肠道菌群的影响

目的 评价布拉酵母菌（S. boulardii）对老年细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated gene A protein,CagA)和空泡毒素（vacuolating cytotoxin A, VacA）阳性幽门螺杆菌（H. pylori）感染患者炎症因子及肠道菌群的影响,以探讨S. boulardii治疗H. pylori I型高毒力株感染的机制。方法 选择我院200例CagA和VacA阳性的老年H. pylori感染者,采用随机数字表分成四联组和S. boulardii组。四联组患者采用铋剂四联疗法,S. boulardii组在铋剂四联疗法基础上加用S. boulardii。比较两组患者H. pylori根除率、胃黏膜组织学评分、临床疗效评分、不良反应、血清白细胞介素（IL）-6及IL-8水平、肠道菌群分布。结果 （1）S. boulardii组H. pylori根除率按方案（PP）分析和按意向性（ITT）分析均高于四联组（85.1%vs 72.8%;80.0%vs 67.0%）,差异均有统计学意义（均P<0.05）。（2）S. boulardii组患...     

儿童幽门螺杆菌及CagA阳性感染的临床研究

目的探讨非侵入性检查方法对儿童幽门螺杆菌(H.pylori)的诊断及治疗价值。方法对2004年10月至2005年12月在梅县人民医院门诊及住院154例慢性反复腹痛患儿进行粪便幽门螺杆菌抗原(HPSA)血清(H.pylori)抗体(HP-Ab)及产细胞毒素相关蛋白(CagA)、H.pylori检查测验,并对CagA阳性患者于短程三联抗H.pylori干预治疗。结果154例患儿中H.pylori阳性33.8%(52/154),CagA阳性61.5%(32/52)。H.pylori阳性及CagA阳性者以上腹疼痛,恶心呕吐多于H.pylori阴性患者,但它们之间差异无显著性,P>0.05;H.pylori阳性及CagA阳性与H.pylori阴性者病程上差异无显著性,P>0.05。对CagA阳性干预治疗后4周临床症状消失达90.6%(29/32),HPSA转阴率为87.5(28/32),结论H.pylori阳性及CagA阳性与否不能以临床表现作为判断标准,H.pylori及CagA的检测可作为对儿童特别是幼儿诊断H.pylori感染及治疗后复查,简便,患儿易接受,特别适用基层的一种非侵入性检测方法。     

幽门螺杆菌感染细胞模型的建立及感染相关microRNAs的筛选鉴定

目的：建立稳定的幽门螺杆菌（H.pylori）感染人胃上皮细胞模型;筛选并鉴定H.pylori感染相关microRNAs（miRNAs）的表达,为深入研究感染相关miRNAs的调控作用机制奠定基础。方法：将H.pylori标准株按MOI=100：1感染人胃上皮细胞,通过检测炎性细胞因子及炎症反应关键酶的表达综合评价感染模型;采用博奥公司miRNAs V3.0芯片分析细胞感染前后miRNAs表达谱变化,运用实时定量PCR技术和Northern杂交对表达显著差异的miRNAs进行分析鉴定。结果：H.pylori感染细胞24 h后,细胞分泌促炎细胞因子IL-8显著升高（P〈0.01）;启动炎症反应的关键酶COX-2的表达明显增加。芯片数据显示：H.pylori感染引起超过2倍显著差异表达的miRNAs包括：表达上调的PREDICTED-MIR191、miR-155、miR-92b、miR-30b、miR-146a、miR-16等,和表达降低的miR-181b、miR-324。实时定量PCR和Northern杂交结果显示感染相关miR-155和miR-146a在H.pylori感染细胞模型中表达均显著增加（P〈0.01）。结论：miR-155和miR-146a在感染细胞模型中的表达增加提示二者可能参与H.pylori感染的免疫调控过程。     

幽门螺杆菌急性感染对胃上皮细胞凋亡的影响

目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)急性感染对GES-1细胞凋亡的影响,揭示H.pylori引起GES-1细胞凋亡变化的分子机制。方法将H.pylori临床分离株SBK与胃上皮细胞GES-1按不同比例(感染复数MOI分别为50∶1和100∶1)共培养24 h,建立H.pylori急性感染模型。采用流式细胞仪分析GES-1的凋亡,通过Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bcl-2、Bax、Caspase-3和NF-κB p65的表达。经H.pylori感染的GES-1细胞为处理组细胞,未经H.pylori感染的GES-1细胞即为对照细胞。使用SPSS 21.0软件对结果进行统计学分析。结果 GES-1细胞经H.pylori处理24 h后,与对照细胞相比,MOI为50∶1(t=11.040,P0.001)和100∶1(t=6.936,P=0.002)的细胞凋亡率均明显增加;MOI为100∶1时GES-1细胞的凋亡率明显高于MOI为50∶1(t=4.875,P=0.008)。与对照组相比,处理组细胞的Bax、Caspase-3表达明显增高,NF-κB p65表达无明显变化,Bcl-xL和Bcl-2在MOI为50∶1时表达升高,而在100∶1时表达下调。结论 H.pylori急性感染通过改变线粒体途径中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Bcl-xL的表达促进GES-1细胞凋亡,且GES-1细胞的凋亡程度与H.pylori的感染复数有关。     

幽门螺杆菌对胃癌前期阶段 胃上皮DNA同源重组修复关键蛋白的影响

目的通过检测胃癌前期阶段幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)阳性和阴性患者胃黏膜组织中DNA损伤标志物γH2AX及同源重组(homologous recombination,HR)修复关键蛋白MRE11、Rad51、CtIP表达水平,评价H.pylori感染在胃癌前期阶段对HR精确修复的影响。方法选择2017年3月至9月行胃镜及病理检测的165例H.pylori阳性和阴性患者,取胃黏膜上皮组织,石蜡包埋切片,行HE染色,根据世界卫生组织标准和更新的悉尼标准,划分病理类型。然后应用免疫组织化学染色方法检测H.pylori和DNA损伤标记蛋白及HR修复关键蛋白表达水平,并行统计学分析。结果胃黏膜上皮细胞中γH2AX的表达,在CSG、CAG和IM阶段,H.pylori阳性组表达高于阴性组(Mann-Whitney U=1116.5,P=0.001;Mann-Whitney U=185.0,P=0.018;Mann-Whitney U=214.5,P=0.041),在Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=35.5,P=0.964);MRE11的表达,在CSG、CAG阶段,H.pylori阳性组表达高于阴性组(MannWhitney U=1117.0,P=0.001;Mann-Whitney U=201.0,P=0.002),在IM、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=171.0,P=0.568;Mann-Whitney U=41.5,P=0.616);Rad51的表达,在CSG、IM阶段,H.pylori阳性组表达低于阴性组(Mann-Whitney U=490.0,P=0.002;Mann-Whitney U=73.0,P=0.007),在CAG、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=101.0,P=0.404;Mann-Whitney U=24.0,P=0.291);CtIP的表达,在CSG、IM阶段,H.pylori阳性组表达低于阴性组(Mann-Whitney U=593.0,P=0.044;Mann-Whitney U=58.5,P=0.001),在CAG、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=84.0,P=0.136;Mann-Whitney U=18.5,P=0.102)。结论在胃癌前期发展阶段,H.pylori感染导致人体胃上皮细胞DNA损伤,却抑制部分HR修复通道关键蛋白表达,从而可能抑制精确的HR修复,增加细胞恶变几率。     

幽门螺杆菌相关蛋白在脑梗死患者血清中的表达

目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)在动脉粥样硬化性脑梗死患者血清中的表达。方法对脑梗死组65例患者的中性粒细胞、血纤维蛋白原、hsCRP及CagA-Hp-IgG抗体进行测定,采用超声检测颈部血管,所有检测结果与健康对照组进行比较。结果研究组与对照组血清CagA-Hp抗体阳性率分别为60%和32%;H.pylori抗体阳性组较阴性组相比,血hs-CRP和纤维蛋白原升高明显(t=4.872,P0.05;t=1.982,P0.05);H.pylori抗体阳性者狭窄及颈动脉斑块发生率分别为53.8%和89.7%,与对照组的26.9%和53.8%相比差异具有统计学意义(χ2=5.826和6.297,P均0.05)。结论动脉粥样硬化性脑梗死患者的H.pylori感染率高于健康人,H.pylori感染可能与脑梗死的发生有关。     

幽门螺杆菌相关胃癌发生不同阶段 miRNAs表达与临床研究

目的观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染的慢性非萎缩性胃炎(no-atrophic gastritis,NAG)→萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)→肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)→非典型增生(dysplasia,DYS)→胃癌(gastric cancer,GC)五个不同阶段miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p表达变化规律及其与临床的关系。方法收集胃镜及病理证实的上述胃癌发生五个不同阶段且H.pylori感染的患者(依次为44、47、43、50、45例),胃癌无H.pylori感染者46例,胃黏膜正常(normal gastric mucose,NGM)63例的血清标本,采用Real-time PCR法检测无H.pylori感染者miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p表达。结果 H.pylori感染NAG→GC不同阶段,miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p表达逐渐升高(P0.05),GC阶段最高,miR-1、miR-20a CAG→GC阶段均高于NGM (P0.05),与NGM比较差异有统计学意义(P0.05);其表达程度与GC发生阶段呈正相关(P0.001);GC组H.pylori感染者较无H.pylori感染者miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p表达升高(P0.05)。结论 H.pylori感染CAG→GC阶段miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p表达升高,向胃癌演进中呈逐渐升高趋势,miR-1、miR-20a、miR-34a、miR-423-5p高表达可能是H.pylori感染后导致胃癌发生发展的重要机制,miR-1、miR-20a、miR-34a可作为诊断早期胃癌的标记物。     

幽门螺杆菌感染诱导microRNA-146a表达的机制研究

目的：探讨幽门螺杆菌（H.pylori）感染引起人胃上皮细胞microRNA-146a（miR-146a）上调的分子机制。方法：分别用H.pylori重组蛋白、全菌蛋白、培养上清、感染相关炎性因子（IL-8、TNF-α、IL-1β）以及TLR配体刺激人胃上皮细胞,检测细胞miR-146a的表达;通过生物信息学软件预测和荧光素酶实验鉴定miR-146a启动子,分析诱导表达的相关信号通路。结果：除H.pylori感染相关炎性因子IL-8、TNF-α、IL-1β能够明显诱导miR-146a表达上调（P〈0.01）外,其他刺激因素均不能诱导miR-146a的显著表达;当采用RNAi技术将IL-8、TNF-α、IL-1β分别沉默,检测H.pylori诱导miR-146a表达时,各沉默组与对照组均无显著差异。软件预测显示miR-146a启动子序列中含有多个NF-κB结合位点;H.pylori能够显著增加miR-146a启动子荧光素酶报告载体的相对荧光素酶值;当启动子序列中的NF-κB结合位点发生突变,其相对荧光素酶比值显著降低（P〈0.05）。结论：H.pylori感染相关炎性因子IL-8、TNF-α、IL-1β能够诱导miR-146a表达明显上调;NF-κB信号通路在H.pylori感染诱导miR-146a的表达中发挥关键作用。     

幽门螺杆菌感染对不同细胞自噬影响的研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一种广泛定植于人胃黏膜的革兰阴性菌,与多种胃部疾病密切相关。近年来H.pylori感染与细胞自噬的关系受到广泛关注,人们发现H.pylori感染影响胃上皮细胞和巨噬细胞的自噬过程,其中H.pylori的毒力因子和宿主自噬相关蛋白发挥关键作用。而且,细胞自噬在决定H.pylori的胞内存活状态中扮演重要角色。本文就H.pylori感染对不同细胞自噬的影响进行综述。     

LHPP在人胃腺癌组织中的表达及意义

目的通过检测LHPP(phospholysine phosphohistidine inorganic pyrophosphate phosphatase)在人胃腺癌组织和胃腺癌细胞系,以及幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染正常胃上皮细胞系后的表达水平,评估LHPP表达及LHPP与胃腺癌的关系。方法 (1)使用TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库和GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中的胃腺癌基因表达数据,分析LHPP在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异。(2)选取2017年3月至2018年5月行胃部分切除术或全胃切除术的41例胃腺癌患者,取胃癌组织及匹配的正常胃黏膜上皮组织,应用免疫组化检测LHPP在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异。(3)取常规传代培养的第三代正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和胃腺癌细胞系AGS,qRT-PCR检测两组LHPP基因表达差异。(4)应用H.pylori P12标准菌株以感染复数(multiplicity of infection,MOI)50感染GES-1细胞系6、12、18和24 h后,Western blot检测各个时间点LHPP和H.pylori毒力蛋白CagA表达量。结果 TCGA数据库中的LHPP表达数据表明LHPP在胃腺癌中表达下调(t=7.064,P0.0001),来自GEO数据库中GSE65801表达数据的芯片测序结果得到相同的结论(P=0.001)。免疫组化证实LHPP在低分化胃腺癌中低表达,且表达与分化程度相关(χ~2=5.559,P=0.018),而与性别(χ~2=2.304,P=0.129)、年龄(χ~2=0.001,P=0.986)、浸润深度(χ~2=1.007,P=0.316)、淋巴结转移(χ~2=0.693,P=0.405)及肿瘤分期(χ~2=0.003,P=0.953)不相关。LHPP在胃腺癌细胞系AGS中表达低于正常胃上皮细胞系GES-1(t=10.38,P=0.005)。H.pylori感染GES-1细胞后LHPP表达随着感染时间延长总体有升高趋势。结论 LHPP在胃腺癌中低表达并与腺癌分化程度相关,有望成为胃腺癌诊断治疗的新靶点。     

H.pylori-L型感染及OPN表达与胃癌浸润转移的相关性研究

目的通过检测胃癌中幽门螺杆菌L型（Helicobacter pylori L-form,H.pylori-L型）感染以及骨桥蛋白（osteopontin,OPN）的表达情况,探讨H.pylori-L型在胃癌侵袭、转移中的作用。方法将胃癌BGC-823细胞与H.pylori-L型按不同比例共培养,细胞爬片进行免疫组化（SP法）检测BGC-823细胞OPN的表达情况。革兰染色及免疫组化检测120例胃癌组织中H.pylori-L型的感染情况。免疫组化检测胃癌组织中的OPN的表达。结果 （1）随着细菌比例增大,细胞爬片OPN阳性的胃癌BGC-823细胞数逐渐增加,各组之间差异有统计学意义（F=137.5,P〈0.01）。（2）胃癌组织H.pylori-L型阳性组的OPN表达阳性率为70.73%,显著高于H.pylori-L型阴性组OPN表达阳性率42.1%（P〈0.005）。胃癌中H.pylori-L型阳性率与肿瘤的大小、癌细胞的血管侵袭、浸润深度及淋巴结转移具有相关性（P〈0.001～P〈0.05）。（3）胃癌组织中H.pylori-L型阳性率与OPN的阳性表达呈正相关性（r=0.27,P〈0.001）。结论 H.pylori-L型感染增强了胃癌细胞的侵袭和转移能力,其机制可能与胃癌细胞的OPN表达量增加有关。     

H.pylori抗体鸡蛋制品对H.pylori感染BALB/c小鼠的实验研究

目的通过幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)标准株的接种,建立BALB/c小鼠感染H.pylori胃炎动物模型,评价H.pylori抗体鸡蛋制品对小鼠感染性胃炎的预防效果。方法将灭活的H.pylori国际标准菌株(NCTC 11637)作为抗原,对产蛋鸡进行免疫。免疫后收集鸡蛋,对达到效价的鸡蛋,无菌采集卵黄。BALB/c小鼠60只,适应性喂养1周后,随机分为5组,Ⅰ组为胃炎模型组,Ⅱ组为生理盐水组,Ⅲ、IV、V组分别为低剂量、中剂量和高剂量卵黄抗体组,每组12只。Ⅰ组予H.pylori菌液灌胃造模,Ⅱ组先予生理盐水灌胃后再予H.pylori菌液灌胃对照,Ⅲ、IV、V组分别用不同剂量抗H.pylori卵黄抗体灌胃后再予H.pylori菌液灌胃造模。小鼠均于距最后一次灌胃后8周全部处死,用微需氧细菌培养检测H.pylori定植;HE染色观察小鼠胃黏膜病理组织学改变。结果在接种H.pylori后第8周,Ⅰ组和Ⅱ组小鼠胃内均有大量H.pylori定植,感染率为91.7%,Ⅲ组的感染率是58.3%,IV和V组的感染率均小于30%。结论 H.pylori抗体鸡蛋制品可以抑制BALB/c小鼠感染H.pylori,抗体的保护作用与抗体的剂量呈正相关。     

DEC205在幽门螺杆菌感染胃上皮细胞中的表达

目的:探讨幽门螺杆菌及其热休克蛋白60(H.pylori-HSP60)感染与胃上皮细胞表面DEC205受体的关系。方法:分别用H.pylori、H.pylori-HSP60及E.coli LPS刺激胃上皮细胞KATOⅢ,利用免疫荧光染色技术观察KATOⅢ细胞表面DEC205蛋白的表达变化,再利用RT-PCR技术,观察细胞中DEC205mRNA对上述抗原刺激后的变化。结果:H.pylori、H.pylori-HSP60及E.coli LPS的刺激明显引起细胞表面DEC205蛋白的表达以及细胞内DEC205 mRNA的产生。结论:H.pylori感染与胃上皮细胞表面的胞吞受体DEC205有着密切的关系。     

肝癌中幽门螺杆菌CagA+亚型菌株的感染

目的:探讨肝癌与H.pylori感染的相关性.方法:采用金标免疫斑点法和酶免疫检测法(EIA)分别检测33例肝癌患者及169例普通成人Hp-Ab和CagA-Hp-IgG抗体.结果:肝癌组Hp-Ab和CagA -Hp-IgG检出率分别为78.8%和45.5%,而普通成人组分别为55.0%和27.2%,经x2检验,P＜0.05,差异均有显著性.结论:肝癌患者由于整体免疫力低下,易受H.pylori感染.     

不同基因型幽门螺杆菌感染与消化性溃疡患者血清炎症因子及CD4+T细胞、PINP水平的关系

目的探讨不同基因型H.pylori感染与消化性溃疡(PU)患者血清炎症因子及CD4⁺T细胞、Ⅰ型原胶原N端前肽(PINP)水平的关系,为后续研究提供参考。方法选择2017年8月至2019年3月于我院消化科就诊的122例PU患者为研究对象,其中H.pylori阴性患者50例[HP(-)组],H.pyloriⅠ型感染患者38例[HP(Ⅰ)组],H.pyloriⅡ型感染患者34例[HP(Ⅱ)组],对比各组患者血清炎症因子IL-17、IL-10、TNF-α和PINP及CD4⁺T淋巴细胞水平。采用Logistic回归对不同菌型H.pylori感染患者血清炎症因子及CD4⁺T细胞、PINP水平的相关性进行评估,并结合ROC曲线对其相应诊断价值进行评估。结果HP(-)组患者IL-17、IL-10、TNF-α水平最低,HP(Ⅰ)组患者IL-17、IL-10、TNF-α水平最高,组间差异有统计学意义(均P<0.001)。HP(-)组患者CD4⁺T细胞及PINP水平最低,HP(Ⅰ)组CD4⁺T细胞及PINP水平最高,组间差异有统计学意义(均P<0.001)。多因素Logistic回归显示,血清炎症因子及CD4⁺T细胞、PINP水平与H.pyloriⅠ型、H.pyloriⅡ型感染均有显著正相关性(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,IL-17、IL-10、TNF-α、CD4⁺T细胞和PINP诊断H.pyloriⅠ型感染的AUC分别为0.863(95%CI:0.786~0.941)、0.844(95%CI:0.754~0.935)、0.907(95%CI:0.847~0.967)、0.921(95%CI:0.864~0.977)、0.742(95%CI:0.639~0.845),而诊断H.pyloriⅡ型感染的AUC分别为0.711(95%CI:0.599~0.823)、0.747(95%CI:0.641~0.854)、0.930(95%CI:0.874~0.986)、0.918(95%CI:0.861~0.974)、0.736(95%CI:0.631~0.840)。H.pylori阴性与CD4⁺T细胞和PINP水平无明显相关性(r=0.226,P=0.225),H.pyloriⅠ型、H.pyloriⅡ型感染与CD4⁺T细胞和PINP水平具有显著正相关性(r=0.428、0.367,P=0.007、0.033)。结论血清炎症因子及CD4⁺T细胞和PINP水平与PU患者H.pylori感染具有相关性,可作为临床辅助监测指标。     

幽门螺杆菌在慢性阻塞性肺疾病发生及 发展过程中的作用

目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发生及发展过程中的作用。方法对85例COPD患者(COPD组)和85例体检健康者(对照组)进行血清抗H.pylori抗体(抗Hp-IgG)检测,比较两组的抗Hp-IgG水平及H.pylori阳性率。全部COPD患者均行肺功能和免疫功能检查,分析抗Hp-IgG水平与COPD严重程度的相关性,比较合并H.pylori感染与无H.pylori感染COPD患者之间,以及合并H.pylori感染COPD患者根除H.pylori前后免疫功能的差异。结果 COPD组血清抗Hp-IgG水平和H.pylori阳性率均明显高于对照组(P0.05),FEV1%预计值与血清抗Hp-IgG水平呈负相关(P0.05)。与无H.pylori感染的COPD患者相比,合并H.pylori感染的COPD患者外周血CD_3~+和CD_4~+T细胞含量、CD_4~+/CD_8~+比值、血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平均明显较低(P0.05),经H.pylori根除治疗后各指标水平明显升高(P0.05)。结论 H.pylori感染可导致宿主免疫功能紊乱,可能因此促进了COPD的发生和发展。根除H.pylori可明显改善合并H.pylori感染COPD患者的免疫功能,有利于患者恢复。