“一测多评”法测定卷叶贝母中生物碱类成分含量

采用HPLC-ELSD建立卷叶贝母的"一测多评"法,同时测定其中贝母乙素和贝母甲素。以贝母乙素(Peimi-nine)作为内标物建立贝母甲素(Peimine)的相对校正因子,采用校正因子计算卷叶贝母中贝母甲素的含量;同时采用外标法测定贝母乙素和贝母甲素,以验证"一测多评"法的准确性和适用性。结果表明卷叶贝母中"一测多评"法的计算结果与外标法的实测值之间没有显著性差异,实验所得的校正因子可信。因此,在对照品缺乏时,"一测多评"的质量评价模式在卷叶贝母的多指标质量评价中得到验证,可以用于贝母类药材的含量测定。     

基于HPLC-ELSD指纹图谱和多成分定量的浙贝母与湖北贝母质量差异研究CSCD

建立浙贝母、湖北贝母HPLC-ELSD指纹图谱,结合多成分定量分析,比较两种贝母属药材的差异。采用Waters ACQUITY HSS T3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%三乙胺溶液为流动相,流速为1.1 mL/min,梯度洗脱;柱温为38℃;蒸发光散射检测;建立浙贝母和湖北贝母HPLC-ELSD指纹图谱,通过化学计量学方法和5种生物碱类成分的含量测定比较浙贝母和湖北贝母的差异。结果显示,浙贝母指纹图谱标定7个共有峰,而湖北贝母有8个;指认出其中6个峰,分别为伊贝辛、贝母辛、贝母素甲、贝母素乙、异贝母甲素、湖贝甲素,其中湖贝甲素为湖北贝母的专属性成分;HCA和PCA均能很好地区分浙贝母和湖北贝母,OPLS-DA共找到4个差异性标志物,含测结果显示,浙贝母中贝母素甲的含量明显高于湖北贝母,而贝母辛、贝母素乙和异贝母甲素的含量则明显低于湖北贝母。该方法可以有效鉴别浙贝母和湖北贝母质量的差异性,为其质量控制提供参考。     

中药贝母的基原植物和药用亲缘学的研究

贝母是一种常用中药,有十分悠久的药用历史。百合科Liliaceae中的贝母属Fritillaria是中药贝母的主要来源,此属全世界约有130种,我国由于近年来发表了大量的新种和新变种,使国产贝母属的种名达到80个,变种名称52个,变型名称6个。大量新分类名称的出现对中药贝母的质量控制和应用方面造成一定困难。通过对中药贝母的历史沿革、植物分类、地理分布、化学成分、现今生产及应用等的综合研究整理,将中药贝母划分为6个类型:浙贝母、川贝母、伊贝母、湖北贝母、平贝母和安徽贝母。这样的划分除安徽贝母尚未收载于药典外,其他均与现行版的中华人民共和国药典(2005版)一部所收载的内容一致。通过此项研究,作者建议,凡是主要经济植物的新名称的出现必须更加慎重,而且从实际应用的观点出发,分类群的划分不宜过细。     

不同产地五味子果实中甲素和乙素的差异性

研究五味子果实中的甲素和乙素含量是否存在产地闻差异,分析其影响因素,为中草药生产、加工企业选择五味子果实药效显著、品质优良的产地提供依据。收集了16个产地的五味子果实,采用高效液相色谱仪分别测定五味子甲素、乙素含量。结果表明,五味子甲素、乙素含量在产地间差异显著,二者含量最高的产地分别是最低产地的2．14倍和3．3倍。将各产地的五味子甲素、乙素含量与原产地的地理气候因子进行相关分析表明,甲素含量与主要气候因子中的温度、湿度呈显著正相关关系;乙素与温湿度相关不显著。根据主要药效成分含量,初步选择黑龙江省的苇河、吉林省的柳河为五味子品质优良产地。     

短葶飞蓬总咖啡酸酯和灯盏乙素含量的空间变化

依据嵌套分层设计原理制定野外调查取样方案,以药用资源植物短葶飞蓬不同产地93个自然种群310份植株样品的灯盏乙素和咖啡酸酯含量的嵌套方差分析,探讨次生代谢有效成分含量在产区间的空间变化。结果表明:短葶飞蓬有效成分含量存在空间差异,最低含量产区的总咖啡酸酯和灯盏乙素含量分别只是最高含量产区的52.1%和41.8%,但不与产地间的空间距离远近完全一致;同一产地短葶飞蓬总咖啡酸酯和灯盏乙素含量有一定的年际差异,但高含量产地与低含量产地是相对稳定的;作为优质药材的基本产地单元,自然地理区划单元比行政区划单元更科学;短葶飞蓬总咖啡酸酯和灯盏乙素含量与植株含N量呈极显著负相关,符合"碳/氮营养平衡假说"的预测,但植株含N量的变化只能解释短葶飞蓬总咖啡酸酯和灯盏乙素含量不同产区间约30%的变异。植物药材有效成分含量的空间变化是药用植物地区间遗传变异和生长地环境生态因子变化共同作用的结果,用自然地理区划单元为产地单元更客观。确定药材的"优质产地"可作为保障药材有效性的科学管理途径之一。     

土壤有效元素含量与延胡索(Corydalis yanhusuo)品质的相关性研究

延胡索乙素是相关延胡索(Corydalis yanhusuo)品质的重要化学成分,在中国药典中作为延胡索质量控制指标,分析不同产地延胡索中延胡索乙素含量与根际土壤有效性元素含量的相关性,对指导延胡索合理化种植栽培有重要科学意义.采用土壤农化法对不同产地延胡索根际土壤中10种元素(大量元素N、P、K、Ca、Mg;微量元素...     

不同产地栽培天麻的质量研究

目的：对主产区栽培天麻的主要指标成分进行测定,对天麻在食、药研究和开发方面提供参考。方法：运用2020年版药典规定的方法测定天麻的总灰分、浸出物含量、天麻素和对羟基苯甲醇含量,并利用变异系数、相似度系数和化学模式分析,对天麻质量差异进行评价。结果：不同产地栽培种植天麻的灰分、浸出物和指标成分含量均能达到药典要求,但含量差异较大。其中对羟基苯甲醇含量的变异系数最大,为45.123%,总灰分含量的变异系数最小,为13.913%。相似度系数和化学模式分析将不同产地栽培天麻分为两大类,天麻素和对羟基苯甲醇为质量差异的主要特征峰。结论：不同产地栽培天麻质量有一定差异性,建立的变异系数、相似度系数和化学模式多方法结合的分析模式能有效评价天麻质量,为天麻品质评价提供参考。     

不同产地浙贝母生物碱含量及其合成相关基因表达研究

为了探究浙贝母(Fritillaria thunbergii)药效成分积累量与生物碱合成相关基因表达水平之间的关系,该研究采用UPLC-MS、qPCR技术分别测定不同产地11个样品中总生物碱(贝母素甲和贝母素乙之和)含量和3个参与生物碱合成途径相关基因(HMGR、FPS和DXR)的表达量,同时运用生物统计学方法分析成熟期鳞茎生物碱含量与各基因表达量之间的相关性。结果表明:不同产地浙贝母成熟期鳞茎总生物碱含量存在显著差异(P<0.05),为0.2105% ～ 0.4612%; HMGR和FPS基因在盛花期组织表达、盛花期至成熟期鳞茎表达变化趋势同生物碱含量变化趋势基本一致; DXR基因在成熟期鳞茎中表达量最高,盛花期组织表达、盛花期至成熟期鳞茎表达变化趋势同生物碱含量变化趋势大体不一致; HMGR、FPS基因表达量分别与贝母素甲、贝母素乙和总生物碱含量呈显著或极显著正相关性(P<0.05或P<0.01),以FPS基因表达量与生物碱含量相关系数为最高,相关系数分别为0.672,0.631,0.664,DXR基因与生物碱含量呈低度相关性。由此可以推断,生物碱的积累受MVA途径中HMGR、FPS基因协同调控或者修饰作用明显,受MEP途径中DXR基因调控作用不明显。     

五味子属植物木脂素类资源的研究

本文调查了15个省区71个样品的15种五味子属植物。应用高效液相色谱法,对8种木脂素有效成分在五味子属植物中的含量进行了分析,这8种木脂素提五味子醇甲(schizandrol A)、醇乙(schizandrol B)、酯甲、酯乙(gomisinC,B)、五味子酚(schizanhenol)、甲素(deoxyschizandrin)、乙素(γ-schizandrin)及丙素(schizandrin C),同时对12种五味子的醇提物进行了主要药理作用的比较。根据研究结果,对各种五味子的质量作出评价以及可供开发利用的意见。     

规范化种植延胡索药材的质量评价

通过对江西红壤丘陵坡地规范化种植的延胡索（Corydalis yanhusuo W.T.Wang）中延胡索乙素、重金属和农残连续4年跟踪检测分析,对延胡索的药效成分和安全性进行质量评价。延胡索乙素含量采用高效液相法测定,重金属含量采用原子吸收分光光度法测定,农药残留采用气相色谱法测定。结果表明：电视延胡索乙素含量为0.066%~0.088%,重金属铅0.76mg/kg、镉0.22mg/kg、砷0.0025mg/kg、汞0.007mg/kg、铜5.26mg/kg、有机氯农药六六六0.033mg/kg,滴滴涕和五氯硝基苯为痕迹量。延胡索新种植区---江西红壤丘陵坡地规范化种植的延胡索符合《中华人民共和国药典》2010年版一部及《药用植物及制剂外经贸委绿色行业标准》WM/T2-2004的规定。     

不同产地槐米的质量综合评价研究

为了进一步完善槐米的质量评价方法,并对不同产地槐米进行质量评价,本研究按照2015版《中华人民共和国药典》方法测定水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物和总黄酮;采用HPLC法测定槐米中芦丁、水仙苷、槲皮素、异鼠李素4种成分的含量,并通过SPSS 20. 0软件进行聚类分析和主成分分析。54批槐米样品的水分、总灰分和酸不溶性灰分均符合药典标准;南方产槐米的浸出物及黄酮类成分含量均普遍高于北方产槐米。聚类分析和主成分分析将54批槐米聚为3类,分类结果与地域有较大关系。本研究较全面地评价了全国54个产地槐米的质量,为槐米的产品开发提供了实验依据。     

藏药鼠麴草的质量评价研究

目的：评价鼠麴草（Gnaphalium affine D. Don）的质量。方法：采用TLC法进行定性鉴别,按2020年版《中华人民共和国药典》四部通则方法测定水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物含有量,通过HPLC法测定木犀草素和芹菜素的含有量。采用SPSS 20.0软件对23批鼠麴草进行聚类分析和主成分分析。结果：TLC斑点清晰,分离度好。23批样品水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物含有量分别为7.83%～10.70%、5.95%～17.11%、0.83%～9.40%和8.87%～27.43%。木犀草素和芹菜素分别在0.7～374.5μg/mL(r=0.999 9)和0.4～195.5μg/mL(r=0.999 4)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.95%(RSD=1.94%)和97.18%(RSD=3.46%)。西藏地区的样品被聚为一类,其他地区样品分布离散,分类结果与地域有关。结论：该方法稳定可靠,可用于鼠麴草的质量评价。     

川牛膝不同产地药材质量综合评价研究

为了建立更全面的川牛膝药材质量评价方法,按照2015版《中华人民共和国药典》方法测定水分、总灰分、水冷浸物和乙醇冷浸物;新建HPLC法测定川牛膝中杯苋甾酮、前杯苋甾酮和齐墩果酸3种成分的含量,并通过SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析。本研究较全面地评价了全国54个产地川牛膝药材的质量,54批川牛膝样品的水分、总灰分、浸出物、含量均符合药典标准,为川牛膝药材的进一步开发提供了依据。     

11个产地纽荷尔脐橙果实风味物质含量差异

2011年、2012年从11个脐橙产地收集到22份纽荷尔脐橙果实样品,采用气相色谱法对果实汁胞中的可溶性糖和有机酸进行检测,并采用高效液相色谱法检测2012年果实中的主要苦味物质。结果表明:(1)果实中的可溶性糖主要为果糖、葡萄糖和蔗糖,其中蔗糖含量最高(占可溶性总糖含量的51.01%~60.19%),肌醇含量最低;丹江口、桂林和衢州等不同产地的果实中可溶性糖含量在不同年份间有显著差异;(2)果实中的有机酸主要是苹果酸、柠檬酸和奎宁酸,其中柠檬酸含量最高(占总酸含量的73.74%~90.04%),奎宁酸含量最低;丹江口等产地的果实中有机酸含量在不同年份间有显著差异;(3)果实中的主要苦味物质为柠檬苦素和诺米林,吉首和雅安果实中的柠檬苦素含量(分别为670.0±293.2μg/g和652.1±217.0μg/g)显著高于其他产地;衢州果实中的诺米林含量最高(789.7±38.9μg/g),并显著高于其他产地。对11个产地纽荷尔脐橙果实中的糖、酸与苦味物质进行偏相关分析,结果表明果实中各风味物质具有一定的相关性,其中果糖和葡萄糖、苹果酸和奎宁酸、诺米林和肌醇各含量之间均呈显著正相关,蔗糖与奎宁酸含量呈显著负相关。纽荷尔脐橙果实风味物质在不同产地间有一定差异,气候因素可能是造成成熟果实酸和苦味物质含量差异的主要原因。     

不同年限太白贝母多糖含量及抗氧化活性比较

目的：从筛选太白贝母多糖的不同提取方法入手，比较不同生长年限的太白贝母多糖含量变化，并评价不同提取方法所得多糖的抗氧化活性。方法：采用苯酚-硫酸法，以葡萄糖为对照，比较热浸法、超声法、回流法三种提取方法得到的多糖含量，并在此基础上比较2～5年生太白贝母多糖含量；利用DPPH和ABTS自由基对不同提取方法的太白贝母多糖抗氧化活性进行比较。结果：在同等提取条件下，超声法得到太白贝母多糖含量最多（4.377%），热浸法次之（3.253%），煎煮法最少（2.893%）；太白贝母在2～4年生长期内多糖含量随生长年限延长显著增加，4年生达最高（4.334%）；超声法提取的多糖的抗氧化活性最强，且与VC无明显差异，各提取方法下多糖的抗氧化性与浓度（0.2～1.2 mg/mL）呈正相关。结论：超声法提取的4年生太白贝母多糖的含量高且具有显著抗氧化活性。     

白芷有效成分提取工艺的优化及其中药材质量研究

目的：优化白芷中药材有效成分的提取工艺;全面系统地考察与研究市场上白芷中药材的质量。方法：以白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量为指标,采用高效液相色谱法测定,利用正交试验,对渗漉法提取白芷有效成分的工艺条件进行优选;按照《中国药典》2005年版一部白芷项下[含量测定]方法检验了62批次市场上销售的白芷药材中香豆素类物质的含量。结果：乙醇渗漉提取法：药材浸泡24h,加80%乙醇8倍量渗漉,欧前胡素和异欧前胡素的平均提取率为78%;市场上销售的白芷药材中香豆素类物质的含量符合药典的要求。结论：应用渗漉法工艺提取白芷中药材有效成分效率高,稳定性好,适合工业化生产;目前市场上流通的白芷中药材的质量可靠。     

不同品种菊花和贵州产野菊花中木犀草素的含量比较

目的测定并比较不同品种菊花和贵州产野菊花中木犀草素的含量。方法用高效液相色谱法测定木犀草素的含量。色谱柱为ODS柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-水-冰醋酸（体积比45：55：0．4）,检测波长为254nm,流速1．0mL／min。结果7个菊花样品的木犀草素含量,以贵州野菊花的木犀草素含量最高（3．876mg／g）,杭菊的木犀草素含量最低（0．302mg／g）。结论贵州产野菊花中木犀草素的含量均高于其他品种菊花,具有较高的药用价值。     

不同产地罗汉果总皂苷、甜苷V和硒含量及指纹图谱研究

对不同产地同一品种收获期罗汉果总皂苷、甜苷V和硒的含量进行比较,了解罗汉果的品质特点与产地的相关性,科学指导种植区域的生产规划,明确不同区域罗汉果的品质特点和开发等直接关系到罗汉果深加工产业的质量与发展。采用香草醛-浓硫酸试剂分光光度比色法分别测量各罗汉果果实样品中总皂苷的含量,采用高效液相色谱法测量甜苷V的含量,采用氢化物原子荧光光谱法测量其中硒的含量,并对各指标进行方差分析和差异显著性的多重比较。结果表明,各样品总皂苷含量在2.42%~3.34%之间,甜苷V含量在0.68%~1.41%之间,硒含量在5.634~41.462μg/kg之间;来源于不同产地的罗汉果样品,其总皂苷含量差异并不显著,但甜苷V和硒含量分别表现出显著差异;广西、湖南和四川,罗汉果果实总皂苷和甜苷V含量均可达到药典指标要求。因此,罗汉果具有较广的种植区域,但不同产地甜苷V含量差异相对显著,暗示果实甜苷V的转化效率或成熟度具有一定差异,宜根据产地及年度气候条件适当调整收获期,以满足不同加工利用的需要。     

影响鸡血藤药材活性物质成分及其质量的贮藏方法

贮藏是中药材流通过程中的一个重要环节,不当的包装方法会对商品鸡血藤药材的质量产生影响。采用无包装、塑料编织袋、铝箔密封袋、铝箔真空袋四种包装方法对鸡血藤药材进行贮藏,在贮藏18个月、24个月、30个月和36个月时分别测定药材含水量、总灰分、总多糖、总黄酮、芒柄花素以及真菌毒素黄曲霉毒素和呕吐毒素的含量。研究结果表明,四种包装方法下鸡血藤药材含水量、总灰分无显著差异,检测结果均符合2020年版《中华人民共和国药典》。四种包装方法贮藏的鸡血藤药材总多糖和总黄酮含量差异不大,但芒柄花素和真菌毒素差异显著,其中使用塑料编织袋包装的鸡血藤药材中芒柄花素含量相对比较稳定,而其它三种包装方法鸡血藤药材中芒柄花素含量随贮藏时间波动较大。此外,铝箔密封袋和铝箔真空袋包装所产生的黄曲霉毒素含量要显著高于塑料编织袋,其中用铝箔密封袋包装贮藏36个月时,鸡血藤药材中黄曲霉毒素含量高达19.95 μg/kg,远高于2020年版《中华人民共和国药典》限量标准。因此,基于药材活性成分稳定性、药材安全性以及经济成本,目前塑料编织袋包装方法更适合鸡血藤药材的贮藏。     

重组双功能水蛭素质量标准研究

以生色底物法测定抗凝血酶活性,比浊法测定抗血小板聚集活性,还原型SDS-PAGE测定分子量,SDS-PAGE和反相高效液相色谱测定纯度,毛细管电泳法测定等电点,胰蛋白酶酶切后进行肽图分析,其余检测项目按《中国药典》2005版三部规定进行。结果显示,用建立的方法对原液和成品进行了检定,各项指标均符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和《中国药典》2005版三部的要求。建立的质控方法和质量标准具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,可用于重组双功能水蛭素产品的常规检定。