小鼠白血病实验模型

动物白血病模型包括自发性白血病、由物理、化学及生物致癌因子诱发的白血病以及在纯系动物中传代的细胞移植性白血病.它们在研究人类白血病和其它恶性肿瘤的病因学、发病学、实验治疗和新抗癌药物的筛选中都发挥了重要作用.早在1908年,有学者用鸡白血病组织的     

KCL22/NOD-SCID小鼠慢性粒细胞白血病移植瘤模型的建立及其鉴定

目的研究人慢性粒细胞白血病细胞株KCL22在NOD-SCID小鼠体内致白血病的能力,为慢性粒细胞白血病血液移植瘤模型鼠的建立奠定基础。方法取对数生长期的KCL22细胞2×107个,经尾静脉注射入NOD-SCID小鼠,对照组小鼠注射无菌PBS。观察小鼠一般情况,瑞氏染色监测血象和骨髓象变化,PCR检测骨髓细胞BCR-ABL基因转录水平,HE染色观察肝、脾组织肿瘤细胞浸润情况。结果实验组小鼠于注射细胞后约4周开始出现反应力下降、精神萎靡、股骨肌肿大、后肢骨节出血点等体征,外周血白细胞从第5周逐渐增多,计数较对照组显著升高(P0.05),血涂片可见幼稚粒细胞,肝、脾、骨髓组织切片可见白血病细胞浸润,骨髓细胞高表达BCR-ABL融合基因,未经治疗存活约70天,较对照组显著缩短(P0.05)。结论 KCL22细胞可成功构建NODSCID小鼠慢性粒细胞白血病移植瘤模型。     

白血病小鼠模型的建立与应用进展

白血病又被称为"血癌",其发病的根本特征是白血病细胞在骨髓及其他造血组织中呈恶性、无限制地增生,浸润全身各组织和脏器,产生不同症状,使患者易发生严重的感染或继发性的败血症、引起出血、肠功能衰竭、高尿酸血症等,严重威胁到患者的生命。因此白血病治疗的研究至关重要。利用实验动物进行各种疾病、药物疗效实验的研究,是医药领域发展的一个重要方面。对于白血病的研究,小鼠在生物学、遗传学、造血系统等方面与人类相似,因此是较为理想的动物白血病模型。本文对近五年来国内外研究常用的小鼠白血病模型进行综述。     

54例慢性淋巴细胞白血病的临床回顾性分析

目的：本研究旨在探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）的实验室检查特点及特征性临床表现。方法：利用血细胞分析仪、流式细胞术、骨髓形态分析及R显带技术等对我院2002年4月．2012年4月收治的54例慢性淋巴细胞白血病患者的相关临床资料如血细胞计数、骨髓形态、染色体及免疫表型等进行检测并对结果进行回顾性分析。结果：CLL多发于老年患者,男性多见,中位年龄65岁（45．82岁）。大部分患者初诊时可出现典型的临床表现,37例（68％）患者初诊时淋巴结大,49例（91％）初诊时白细胞≥10×109、L,淋巴细胞绝对值≥5×109／L。13例（24％）初诊时肝脾或者脾大,17例（31％）初诊时乏力、消瘦。34（63％）例患者可见典型的CLL免疫表型,CD5、CDl9．CD23、CD20的阳性率分别为90％、87％、72％、67％。32例患者染色体检测结果表明：13q-2例,17p．2例,11q-1例,＋12有1例,6q-1例,t（14,16）1例。2例患者发生了自身免疫性溶血性贫血（AIHA）。1例患者发生了Richter转化,肿大淋巴结活检显示部分区域为弥漫性大B细胞淋巴瘤,其高表达CD20、CDl9、CD22。结论：慢性淋巴细胞白血病具有其典型的临床表现、免疫表型及遗传学改变,并且对诊断及治疗有重要意义。     

54 例慢性淋巴细胞白血病的临床回顾性分析*

摘要目的：本研究旨在探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)的实验室检查特点及特征性临床表现。方法：利用血细胞分析仪、流式细 胞术、骨髓形态分析及R显带技术等对我院2002 年4 月-2012 年4 月收治的54 例慢性淋巴细胞白血病患者的相关临床资料如 血细胞计数、骨髓形态、染色体及免疫表型等进行检测并对结果进行回顾性分析。结果：CLL多发于老年患者,男性多见,中位年 龄65 岁（45-82 岁）。大部分患者初诊时可出现典型的临床表现,37 例（68%）患者初诊时淋巴结大,49 例（91%）初诊时白细胞≥ 10× 109/L,淋巴细胞绝对值≥ 5× 109/L。13 例（24%）初诊时肝脾或者脾大,17 例（31%）初诊时乏力、消瘦。34（63%）例患者可见典 型的CLL免疫表型,CD5、CD19. CD23、CD20 的阳性率分别为90%、87%、72%、67%。32 例患者染色体检测结果表明：13q-2 例, 17p-2 例,11q-1 例,+12 有1 例,6q-1 例,t(14,16)1 例。2 例患者发生了自身免疫性溶血性贫血（AIHA）。1例患者发生了Richter转 化,肿大淋巴结活检显示部分区域为弥漫性大B细胞淋巴瘤,其高表达CD20、CD19、CD22。结论：慢性淋巴细胞白血病具有其典 型的临床表现、免疫表型及遗传学改变,并且对诊断及治疗有重要意义。     

荧光原位杂交技术在慢性淋巴细胞白血病遗传学异常检测中的应用

目的:分析在荧光原位杂交技术慢性淋巴细胞白血病遗传学异常检测中的应用,并分析相关指标在评价患者预后中的应用。方法:对我院收治的45例初诊CLL患者采用荧光原位杂交技术进行特异性探针D13S25(13q14.3)、RB1(13q14)、p53(17p13)、ATM(11q22.3)、以及CSP12(12号染色体3体)染色体标本检测,分析CLL患者遗传学异常的发生率。采用实时定量PCR检测miR-15a和miR-16-1与CLL患者遗传学异常的相关性。结果:45例CLL初诊患者中,荧光原位检测发现CLL遗传学异常37例,CLL遗传学异常率82.22%。其中d(13q14.3)遗传异常13例,d(13q14)遗传异常7例,d(11q22-23)遗传异常6例,d(17p13)遗传异常5例,12号染色体三体异常6例,遗传学异常多呈异质性。实时定量PCR检测发现miR-15a和miR-16-1与d(13q14)遗传异常显著相关。结论:荧光原位杂交技术是一种检测CLL遗传学异常的快速、灵敏方法,可以提高CLL遗传异常检出率。miR-15a和miR-16-1可以预测d(13q14)遗传异常CLL患者预后。     

CD11c在慢性淋巴细胞白血病诊断中的意义

目的:探讨CD11c抗原在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)中的表达及在临床诊断中的价值,以及CD11c抗原表达与患者的遗传学异常及预后参数的相关性。方法:采用多参数流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测200例CLL患者、49例套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)患者CD11c的表达率和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI);并比较CLL患者CD11c的表达与预后参数ZAP-70和CD38表达的关系;同时采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测CLL患者的P53缺失、13q14缺失、ATM缺失、6q23缺失、+12以及IGH重排,比较CD11c~+CLL患者与CD11c~-CLL患者遗传学特点。结果:CLL患者中CD11c阳性率为49.5%(99/200),MFI中位值为2.06(1.00～7.34);而MCL患者中CD11c阳性率为6.12%(3/49),MFI中位值为2.00(1.97～2.54)。CD11c在CLL中的表达率明显高于MCL,(x~2=30.62,P0.05)。CD11c~+CLL患者的ZAP-70和CD38阳性率均明显高于CD11c~-CLL患者(x~2=15.472,P0.05;x~2=11.556,P0.05),差异有统计学意义。而CLL患者的CD11c表达率与P53缺失、13q14缺失、ATM缺失、6q23缺失、+12、IGH重排的结果均无统计学差异。结论:CD11c对于辅助诊断CLL有重要价值,尤其有助于CLL和MCL的诊断和鉴别诊断。     

miR-34家族在慢性淋巴细胞白血病中的作用

近年来的研究表明microRNAs表达异常直接或间接导致了多种亚型慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia,CLL）的发生。miR-34家族（包括miR-34a、miR-34b与miR-34c）是一个与细胞增殖、分化和癌变高度相关的microRNA家族。近年来,人们发现miR-34家族在p53调控网络和CLL发生中起着重要作用,并具有显著的临床应用价值。将对miR-34家族在慢性淋巴细胞白血病发生中的作用和机制做一综述。     

HBZ在人类T淋巴细胞白血病1型病毒HTLV-1致癌中的功能

人类T淋巴细胞白血病1型病毒(Human T-cell leukemia virus type 1,HTLV-1)是与人类疾病发生密切相关的逆转录病毒,HTLV-1的感染可引起成人T细胞白血病(Adult T-cell leukemia,ATL)。HBZ(HTLV-1bZIP factor)是由HTLV-1前病毒反义链编码的病毒蛋白。在HTVL-1所编码的病毒基因中,HBZ是唯一一个在所有ATL病人样品中持续、稳定表达的病毒基因。而且,HBZ在HTLV-1诱发肿瘤的过程中发挥着极其重要的作用。近十年来对HBZ结构及其功能的研究成为白血病研究领域的热点。因此,本文就HBZ在HTLV-1致癌机制方面的相关研究成果作一综述。     

慢性粒细胞白血病小鼠动物模型建立的研究进展*

慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)恶性克隆性增殖引起的一种血液系统疾病。动物模型是研究CML发病机制及药物靶向治疗的重要载体和工具。研究表明,CML小鼠模型可以通过逆转录病毒介导、转基因和白血病细胞移植的方法建立。三种方法建立的CML小鼠模型均可用于CML发病机制及药物疗效评估研究。实验动物模型进一步通过血常规、血涂片和骨髓涂片、免疫学、分子生物学及病理学等检测手段,判断模型是否建立成功。本文就近年来CML小鼠模型的建立、鉴定及研究应用进展进行综述。     

聚焦慢性淋巴细胞白血病治疗药物

过去的10 年，慢性淋巴细胞白血病（CLL）的治疗策略已发生变化，其疗法已有长足进展，即从仅可治标性缓解病痛发展到能致病情完全缓解、最大限度根除疾患和提高存活率。Rituxan（rituximab）的开发及其在免疫化疗中的应用使抗CLL 疗法发生了改变，该药已成为目前用于小于65 岁患者的黄金标准治疗药物。然而，基于Rituxan 的免疫化疗仍仅局限用于两类常见CLL 病例——老年患者和具并发症及高危患者的治疗。再者，在为期两年的一线和二线治疗中，约有25% 和50% 的CLL 患者会复发，且已有数年缓解的患者对后续治疗的疗效较差。因此，对于CLL 的治疗，仍远不能满足需求。早期研究发现，B 细胞受体（BCR）信号通路与CLL 的发生和发展以及治疗后的高反应率与病情持续缓解有关联。鉴于此，靶向BCR信号通路的小分子药物得以快速发展。Imbruvic（ibrutinib）是首个口服Bruton 酪氨酸激酶（BTK）抑制剂，近期经快速审批上市，用于治疗复发/ 顽固性恶性淋巴瘤，但其长期生存率数据目前尚不成熟。眼下，新疗法面临着多个挑战：其需提供更高的反应率，特别是对老年患者和具并发症及高危患者，且需克服当前疗法造成的耐药性。目前，唯一的CLL 根治疗法是同种异体造血干细胞移植（HSCT），但其并不适用于大多数CLL 患者。而目前CLL 的标准治疗方案是化学免疫疗法，适用于小于65 岁的患者，但老龄或高危患者的治疗选择是有限的。因此，最终的问题是针对CLL 的小分子疗法是否能达到根治目的，期望随着在鉴定与CLL 发病机制和预后相关的细胞遗传学及分子变化方面取得进展，能促进下一代靶向疗法的快速发展。新型靶向性小分子抑制剂，如Imbruvica 和idelablisib，已展现出对CLL 的显著治疗作用。综述CLL 治疗领域重大行业投资和研发的主要市场博弈者和交易亮点。     

用小鼠血液淋巴细胞构建核移植重构胚的研究

本实验用小鼠血液淋巴细胞为核供体进行了核移植研究。用淋巴细胞分离液(比重1.088)分离出小鼠血液中的淋巴细胞,直接用作核移植供体细胞,采用胞质内注射法成功构建的重构胚经常规培养2h后,SrCl_2激活处理6h,然后添加mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞饲养层共培养。把发育至早期囊胚阶段的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,添加ES细胞培养液继续培养。对孵化出的内细胞团进行消化,然后接种培养。结果显示,小鼠血液淋巴细胞可以支持体细胞核移植重构胚的发育,核移植重构胚2-细胞率41.03%(128/312),桑葚胚和囊胚发育率分别为9.29%(29/312),1.92%(6/312)。重构囊胚在小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上分离出2个内细胞团,分离率为0.64%(2/312)。实验证实利用小鼠血液淋巴细胞进行体细胞核移植是可行的,可用于深入研究。     

超薄层等电聚焦电泳对白血病小鼠胸腺和脾淋巴细胞脱氢酶同工酶的分析

用高分辨力的等电聚焦技术分析615和L615小鼠胸腺及脾淋巴细胞 LDH 同工酶,表明两种小鼠胸腺淋巴细胞同工酶酶谱相同,具有相同等电点的条带含量无显著性差异;而两种小鼠脾淋巴细胞同工酶酶谱不同,某些具有相同等电点的同工酶带含量有显著或极显著性差异。     

醋酸棉酚诱导人粘液表皮样癌MEC-1细胞DNA双链断裂

本文研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人粘液表皮样癌细胞MEC-1体外增殖的影响,并初步探讨其抑制肿瘤细胞增殖的机制.体外培养人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞,用MTT法检测GAA对MEC-1细胞增殖的影响;用中性彗星实验检测GAA对MEC-1细胞的DNA双链断裂;用免疫荧光染色法检测...     

小鼠生态条件对Friend小鼠白血病病毒感染的影响

本文探讨了Ｆ１小鼠生态条件（鼠龄和免疫状态）对Ｆｒｉｅｎｄ小鼠白血病病毒（Ｆｒ．ＭｕＬＶ）感染的影响。利用对Ｆｒ．ＭｕＬＶ抗性的Ｆｖ４小鼠（含Ｆｖ４抗性基因纯合子的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠）与对Ｆｒ．ＭｕＬＶ敏感的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠交配，获得含Ｆｖ４抗性基因杂合子的Ｆ１小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ×Ｆｖ４）。然后经小鼠腹腔接种Ｆｒ．ＭｕＬＶ病毒液进行攻击，并检查不同鼠龄和免疫状态下的Ｆ１小鼠对Ｆｒ．ＭｕＬＶ的敏感性，以阐明Ｆ１小鼠的鼠龄和免疫状态对Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染的影响。结果表明，新生Ｆ１小鼠可发生Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染，脾脏中有大量病毒增殖，并引起白血病；免疫抑制剂Ｆｋ５０６投与下的成年Ｆ１小鼠亦可发生Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染，脾脏中有病毒增殖，但不引起白血病；而新生或成年Ｆｖ４小鼠以及成年Ｆ１小鼠可抵抗Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染，脾脏中无病毒增殖，不发病。说明Ｆ１小鼠的鼠龄和免疫状态等生态条件可影响其对Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染的敏感性，并且可影响Ｆｖ４基因抗病毒作用。     

SND1转基因小鼠的构建

目的:构建 SND1 过表达的转基因小鼠模型。方法:利用对小鼠 SND1 基因转录本构建 SND1 过表达载体pInsulator-CAG-3×FLAG-SND1,利用受精卵原核注射技术,将外源线性pInsulator-CAG-3×FLAG-SND1转基因载体注射到受精卵细胞核内,将存活受精卵进行胚胎移植制备 SND1 转基因小鼠,用PCR、RT-PCR技术鉴定转基因小鼠是否构建成功。结果:成功构建过表达 SND1 基因的转基因小鼠模型,为进一步研究 SND1 基因在动物体内的生物学功能奠定基础。     

同种异体淋巴细胞致狼疮肾炎小鼠模型的研究

目的　制备狼疮肾炎小鼠模型。方法　采用昆明小鼠同种异体脾淋巴细胞经Lectin刺激后输入小鼠腹腔皮下的方法。结果　成功地制备了系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型 ,通过光镜、免疫荧光、电镜观察其病理形态、并检测了血清抗ds -DNA抗体、补体以及尿蛋白 ,证实了该模型的可靠性。结论　制备的系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型有实用价值     

用小鼠血液淋巴细胞构建核移植重构胚的研究

本实验用小鼠血液淋巴细胞为核供体进行了核移植研究。用淋巴细胞分离液(比重1．088)分离出小鼠血液中的淋巴细胞,直接用作核移植供体细胞,采用胞质内注射法成功构建的重构胚经常规培养2h后,SrCl2激活处理6h,然后添加mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞饲养层共培养。把发育至早期囊胚阶段的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,添加ES细胞培养液继续培养。对孵化出的内细胞团进行消化,然后接种培养。结果显示,小鼠血液淋巴细胞可以支持体细胞核移植重构胚的发育,核移植重构胚2-细胞率41．03％(128／312),桑葚胚和囊胚发育率分别为9．29％(29／312),1．92％(6／312)。重构囊胚在小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上分离出2个内细胞团,分离率为0．64％(2／312)。实验证实利用小鼠血液淋巴细胞进行体细胞核移植是可行的,可用于深入研究。